卵黄免疫球蛋白提取和纯化方法

卵黄免疫球蛋白是一种产量高、成本低、易于生产、应用广泛的多克隆抗体。在生产中卵黄抗体的提纯方法不一,提取和纯化的工艺直接影响卵黄抗体的质量。本文对多种卵黄抗体提取和纯化方法进行综述,并比较了各方法的优缺点,为其在生产中的应用提供理论指导。     

卵黄抗体不同提取方法的比较

卵黄抗体(egg yolk antibodies,IgY)是指鸡、鸭、鹅等蛋禽卵黄中存在的抗体,也称卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulins,IgY)[1].从含高效价抗体的禽蛋黄中提取、制备的IgY在人类和动物疾病的防治中具有特效作用.IgY具有均一性好,对热、酸和碱稳定性好等优点.蛋黄含有丰富的营养物质,是细菌生长的良好培养基,易使蛋黄抗体腐败变质.因此,精制蛋黄抗体的大规模工业化生产必须解决提取纯化这一关键难题.试验比较了4种成本低和提取率高的提取方法,以期得到理想的IgY提取方法,为今后的生产实践提供科学的依据.     

不同方法提取卵黄抗体效果的比较

为了优化卵黄抗体提取工艺以及产业化生产提供技术参考,从众多方法中初步筛选了较为适宜的水稀释法、辛酸法、乙酸-乙酸钠法、酚沉淀法和海藻酸钠法,并比较了5种方法的提取工艺、生产成本、卵黄抗体提取量及其效价。试验结果表明,辛酸法的提取液体回收率最高,达到171％;辛酸法提取蛋白的浓度最高,为6．6mg／mL;辛酸法和海藻酸钠法提取卵黄抗体的凝集价最高,为1：128。综合各种因素考虑,辛酸法是提取卵黄抗体较为理想的方法。     

鸡卵黄抗体研究进展

当用某种抗原免疫产蛋母鸡时，可产生相应的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)储存于卵黄中：母鸡经免疫应答后．可从其不断产出的鸡卵黄中得到大量的、均一的、高效的IgY。IgY类似哺乳动物的IgG，但又有其独特的优点：本文对IgY的性质、免疫程序、分离提纯方法及其在检测诊断上和疾病防治方面的应用作了较详细的论述。可以预见，随着研究的进一步深入，IgY的应用将不断扩大。     

鸡新城疫卵黄抗体提取方法筛选研究

卵黄抗体(IgY)是指禽类(鸡、鸭、鹅)卵黄中存在的抗体,有凝集细菌、中和病毒等功能,均一性好,对热、酸和碱稳定性好,产量高,成本低等利于生产、产生有效免疫反应所需抗原量小、免疫检测时有较高的敏感性、无副作用、性质稳定等优点,因此在动物疾病诊断、防治上具有重要作用。目前文献报道的卵黄抗体提取方法有多种,提取效果各不相同。本文通过对三种方法的比较,发现它们各有公有优缺点。     

卵黄抗体研究进展

卵黄抗体(IgY)指母鸡所产蛋的蛋黄中含有的免疫球蛋白.自1893年Klemperer首次报道鸡蛋中存在抗体以来,卵黄抗体的研究不断深入,目前在卵黄抗体的形成、生物学特性等方面已研究的比较清楚,并且卵黄抗体作为诊断试剂和防治药物的研究愈来愈受到关注.     

兽用卵黄抗体的研究与应用

<正>卵黄抗体(Yolk antibody)是产蛋鸡受特定抗原免疫后产生的特异性抗体,并转移、贮存在卵黄中的免疫球蛋白,故又称卵黄免疫球蛋白(Immunoglobulin of yolk,IgY)。它是卵黄中唯一的免疫球蛋白,与哺乳动物来源的IgG比较,卵黄抗体具有取材方便、分离纯化方法简单、产量高,同时具有针对性强、特异性高和稳定性好等优点,可克     

利用苯酚从卵黄中提纯卵黄抗体的研究

用苯酚处理超免疫卵黄稀释液,离心去除其中的脂类物质获得了比较单纯的卵黄蛋白。经抗体活性检验和γ－球蛋白定量分析表明,用苯酚处理的黄稀释液对卵黄蛋白成分及含量的影响较聚乙二醇小,所建立的方法可用于卵黄抗体水平的检测或从超免疫卵黄液中提取免疫救亡蛋白     

两种卵黄抗体不同提取方法的比较试验

卵黄抗体(Ig Y)具有许多其他类型抗体所没有的优点,其分离纯化的方法有有机物抽提法、盐析法、水稀释法等。试验分别用聚乙二醇(PEG)6000和氯仿来提取卵黄抗体,对其收集的抗体量和抗体效价进行比较分析。结果表明:100 g的卵黄用PEG6000法比氯仿法多收集71 m L卵黄抗体溶液,且PEG6000法的成本远远低于氯仿法,有很好的经济效益,而PEG6000法提取的卵黄抗体效价比氯仿法略低一个滴度。     

卵黄抗体提取方法及其在畜禽细菌性肠道疾病防治中的应用

细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病,易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题,严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗,但由于抗生素长期大量使用,特别是不合理使用,使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显。因此,发展安全可靠的抗生素替代品已然成为当今畜牧行业的研究热点。卵黄抗体（egg yolk immunoglobulins,IgY）是通过免疫接种产蛋鸡后,在蛋黄中表达的一种免疫球蛋白,可用于相应疾病的预防和治疗。IgY具有产量大、性质稳定、安全高效等诸多优点,目前IgY作为抗生素替代品已被广泛用于畜禽养殖过程中,并取得了显著的效果。文章介绍了IgY的分子结构、理化性质和作用机理,总结并比较了5种IgY提取方法的去脂率、抗体效价、总蛋白含量等指标,最后详细介绍了IgY在防治畜禽常见细菌性感染中的研究现状和应用前景,以期为IgY的高效生产及疾病防治提供研究依据和技术支持。     

卵黄抗体三种提取方法的比较研究

运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取,并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度,用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量,比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示,三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价,硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高,且其操作方法相对简便,是比较具有优势的提取方法。     

对鸡卵黄免疫球蛋白两种提取方法的比较

本文比较了水稀释-饱和硫酸铵沉淀法（法一）和水稀释-冰乙醇分级沉淀法（法二）分离提纯鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）的产率、纯度及抗体效价。结果表明：两种方法提取的IgY纯度均较高,法一纯化的IgY的产率及蛋白活性相对更好。     

牛乳铁蛋白卵黄抗体的制备及纯化方法的建立

通过自制并初步纯化牛乳铁蛋白的卵黄抗体,用肌肉和皮下注射结合的方法罗曼蛋鸡进行免疫来制备多克隆抗体。选用150日龄的罗曼蛋鸡4只进行不同浓度的多次皮下免疫注射,采集卵黄抗体并用硫酸铵沉淀法进行抗体的初步纯化,经四次免疫后的罗曼蛋鸡卵黄抗体的效价分别达到了1：32000和1：24000,并在较高水平的情况下维持两周以上,同时经初步纯化后抗体纯度得到了很大提高。试验结果显示肌肉和皮下注射结合的方法对罗曼蛋鸡进行免疫来制备多克隆抗体是可行的,同时通过硫酸铵沉淀法纯化抗体可以达到试验的需求。     

利用水稀释反复冻溶法、氯仿萃取法与冷乙醇沉淀法相结合进行鸡新城疫卵黄抗体提取的试验研究

本研究采用免疫学技术和物理化学方法,通过优化提取条件,改良提取工艺,建立了一种用水稀释反复冻溶法、氯仿萃取法与冷乙醇沉淀法相互结合提取鸡卵黄抗体的方法。结果显示：用5倍体积、pH5．0的稀释液稀释蛋黄,在-20℃经三次反复冻融、上清液再用同等剂量的氯仿萃取、40％的冷乙醇沉淀,提取的鸡新城疫卵黄抗体具有液体清亮,杂质含量少,抗体效价高的特点。     

采用改良的水稀释法提取卵黄抗体的试验

以鼠伤寒沙门氏菌免疫产蛋鸡后，收集卵黄液，用水稀释法提取卵黄抗体(IgY)。实验中所用的水稀释法，即将释释倍数和稀释时的pH值均重新调整，且采取关键性的滤纸过滤，再盐析和柱层析，最后得到IgY的纯度为90％以上，表明改良的水稀释法可以较好的提纯卵黄抗体，避免了常规方法中除脂不彻底的弊端。     

鸡传染性法氏囊高免卵黄IgY抗体不同提取方法的比较

本试验旨在提高鸡传染性法氏囊卵黄抗体防制鸡传染性法氏囊的效果,比较不同提纯方法对鸡传染性法氏囊高免卵黄抗体效价的影响。制备高免蛋并测定其效价,在实验室通过直接离心法、酸化水提取法、氯仿提取法、聚乙二醇法4种方法分别对高免卵黄抗体提取及抗体效价检测。试验结果表明,自制卵黄抗体效价为1:64;直接离心法的抗体效价为1:128,酸化水提取法的抗体效价为1:16,氯仿提取法抗体效价为1:256,聚乙二醇法的抗体效价是1:32。试验结果显示,使用氯仿提取法后检测的抗体效价最高,是临床提取抗体的常用方法。     

鸡卵黄抗体

<正>经特定抗原免疫后的母鸡可产生相应的特异性抗体,有研究证实,产蛋鸡的卵黄对抗体有浓集作用,使其不断储存于卵黄中,这种抗体     

不同免疫方法制备IBD卵黄抗体的效果比较

用6种不同的免疫方法接种健康产蛋母鸡所制备的卵黄抗体,用琼扩法测定免疫后不同时期的卵黄抗体效价,并将其作1：4稀释后用于临床治疗试验。结果表明,以第5组(首免肌注自制油乳剂灭活苗2mL／只,一周后同上法二免)效价最高,总有效率达98％以上,12h后症状即见明显好转。     

卵黄抗体IgY在猪生产中的应用

卵黄抗体(YolkImmunoglobulin,IgY)是蛋鸡受特定抗原刺激后体内会产生特异性并被转移和贮存在卵黄中的免疫球蛋白。用鸡卵黄大量生产和制备多克隆抗体是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。IgY可作为替代抗生素的新型绿色饲料添加剂。本文就免疫鸡卵黄抗体在猪生产中的应用作一综述。