黑树莓花青素靶向调控miR-338-5p/SIRT1相关信号通路对结直肠癌的化学预防作用

目的研究miR-338-5p/SIRT1相关信号通路在黑树莓花青素化学预防结直肠癌中的作用。方法小鼠分为健康对照组,氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型组,AOM/DSS诱导联合黑树莓花青素处理组。利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNAs,选定miR-338-5p,采用RT-q PCR确认miR-338-5p在小鼠结肠组织及在人结直肠癌细胞株Caco-2、Lo Vo、HCT-116、HT29、SW480中的mRNA表达,生物信息学软件预测miR-338-5p和SIRT1靶向调节关系。Western blotting检测小鼠结肠组织中SIRT1蛋白及其下游mTOR等信号通路相关蛋白表达。结果miRNA基因芯片分析发现,与常规饮食的模型小鼠相比,喂食添加黑树莓花青素的模型小鼠结直肠肿瘤组织中miR-338-5p表达量显著减少,进一步研究几种结肠癌细胞系,确认了miR-338-5p表达趋势;黑树莓花青素处理结直肠癌细胞,miR-338-5p的表达能够显著降低。生物信息学预测miR-338-5p和SIRT1存在靶向调节关系。机制研究发现黑树莓花青素可以促进肠上皮细胞SIRT1蛋白的表达,并对其下游m TOR等相关信号通路分子蛋白水平具有调控作用。结论黑树莓花青素可能通过靶向调控miR-338-5p/SIRT1相关信号通路而发挥对结直肠癌的化学预防作用,进而为结直肠癌提供新的化学预防策略。     

紫花前胡素通过PI3K/Akt信号通路影响结直肠癌细胞增殖、凋亡及迁移

探讨紫花前胡素通过磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase, Akt)通路对结直肠癌HT29、HCT116细胞增殖、凋亡及迁移的影响。分别用紫花前胡素(10、30、60、90μmol·L^-1)对HT29和HCT116细胞进行干预处理,通过细胞增殖与活性检测-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测紫花前胡素对HT29和HCT116细胞增殖的抑制作用;通过克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;通过Ki67免疫荧光染色检测细胞增殖情况;通过流式细胞术分析细胞凋亡作用;通过划痕实验法检测细胞的划痕愈合面积;通过Transwell迁移法检测细胞的迁移情况;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2...     

熊果酸通过hedgehog信号通路调控结直肠癌细胞HCT116自噬的机制研究

研究旨在证明熊果酸通过抑制hedgehog信号通路激活结直肠癌HCT116细胞的自噬.采用MTT法测定熊果酸对HCT116细胞活力的影响;结晶紫染色和划痕试验分别检测熊果酸对HCT116细胞增殖和迁移的影响.针对自噬的研究,首先进行时间点的筛选,利用Cell MeterTM Autophagy Assay Kit检测熊...     

阳和汤加减治疗结直肠癌奥沙利铂化疗相关外周神经毒性的效果分析

目的 分析阳和汤加减方案治疗结直肠癌奥沙利铂化疗相关外周神经毒性的有效性。方法 遴选医院2017年1月—2019年6月行奥沙利铂化疗的结直肠癌患者(化疗结束后均因化疗而出现外周神经毒性)226例作为对象,遵照随机数字表法将其分为对照组、观察组;对照组应用甲钴胺,观察组在甲钴胺基础上应用阳和汤加减;比较两组临床疗效及治疗价值。结果 和对照组比较,观察组中医症候量表评分较低(P<0.05)。治疗后比较对照组、观察组血清神经生长因子水平差异显著(P<0.05)。观察外周神经毒性分级组低于对照组(P<0.05)。和对照组比较,观察组生活质量评分较高(P<0.05)。结论 于结直肠癌奥沙利铂化疗相关外周神经毒性临床治疗期间采取阳和汤加减治疗具有理想效果,对于改善患者临床症状及外周神经毒性具有积极意义,可借鉴推广。     

基于Akt/FoxO信号通路探讨熊果酸对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察熊果酸对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及具体的分子机制。方法：选用人源结直肠癌细胞RKO为研究对象,用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度的熊果酸（0、5、10、15、20、25、30μmol·L-1）处理RKO细胞的增殖抑制率,计算出24、48 h的半抑制浓度（IC50）。后续实验根据熊果酸处理RKO细胞24 h的IC50,选用2个浓度开展。集落形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测熊果酸处理RKO细胞后的凋亡率及细胞周期阻滞情况,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测熊果酸作用RKO细胞24 h,RKO细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白（Bax）、Raji细胞中Bcl-2、人T淋巴细胞白血病PMA反应基因（Noxa）凋亡蛋白表达情况,细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、周期蛋白依赖激酶抑制因子1B(p27)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)周期相关的蛋白表达情况,以及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、叉头框蛋白O3a(FoxO3a)、磷酸化FoxO3a(p-FoxO3a)通路蛋白表达情况。结果：与空白组比较,熊果...     

PI3K/Akt通路调控结直肠癌机制及中医药治疗研究进展

结直肠癌（CRC）作为世界上第三大常见癌症,起源于结肠和直肠的肠上皮细胞,随着全球经济的快速发展,其在发展中国家的发病率也逐年猛增。在过去几年中,尽管预防性的结肠镜筛查提高了CRC患者生存率,但仍有大多数病例是在症状出现后才被发现,且目前临床中CRC手术治疗风险高、易复发,放化疗治疗不良反应大、患者心理负担重,因而针对CRC尚无理想的诊疗方案。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)作为经典的致癌通路为多种恶性疾病的诊疗提供了可能,也为CRC的治疗提供了新的方向。近年来,中医凭借自身“治未病”和多成分、多靶点、多途径的优势在癌症治疗中成为一大焦点,其不良反应小的优势更是与西医在治疗上相互弥补。多项研究表明,中药单体和中药复方可通过干预PI3K/Akt信号通路,可抑制CRC细胞的增殖、侵袭、迁徙、血管新生,促进了癌细胞的凋亡、自噬,从而减缓CRC发展进程,达到治疗CRC的作用。近几年与此相关的研究成果更新迅速,过去的总结文献未能及时纳入最新研究成果,为众多学者的文献检索带来诸多不便,故而该文从PI3K/Akt通路、PI3K/Akt通路与CRC关联性及中医药干预治疗CRC进展等3...     

青蒿琥酯通过Akt/Snail信号通路逆转结直肠癌细胞上皮间充质转化

目的:探讨青蒿琥酯(ART)对结直肠癌HCT-8细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并探讨ART对结直肠癌细胞迁移,侵袭,EMT能力和蛋白激酶B(Akt)/Snail信号通路的影响.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同药物浓度的ART对HCT-8细胞增殖的影响,采用伤口愈合实验和transwell实验,检测ART...     

中药通过NF-κB信号通路干预结直肠癌的研究进展

结直肠癌（CRC）是全世界癌症患者死亡的主要原因之一,其发病率及死亡率呈逐年上升趋势。该病起病隐匿,发病初期缺少特异性症状,多数患者确诊时已处于晚期,现已成为消化系统肿瘤领域的热点研究问题。CRC的发病机制尚不明确,涉及遗传、基因突变、炎症反应、肿瘤相关信号通路的异常激活等因素。核转录因子-κB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与炎症反应、免疫反应、细胞增殖和细胞凋亡等多种生物学过程。有研究表明,作为连接炎症和癌症的分子中枢,NF-κB在CRC中高度表达,并通过调控细胞促炎因子、趋化因子、血管生成因子、转移因子及抗凋亡蛋白等靶基因的活性,促进CRC的发生发展。目前,CRC的常用治疗策略是手术、放疗和5-氟尿嘧啶等化疗药物,但存在不良反应较大、转移率高、易产生耐药性等局限性。因此,需要寻找高效、低不良反应的药物来替代或补充当前的治疗。近年来,中医药在防治CRC上取得了一定的成效,研究发现中医药能够通过调控NF-κB信号通路抑制CRC细胞的生长,从而在CRC的发病及病情的进展过程中发挥积极的作用。故而,基于CRC本虚标实、虚实夹杂的病机特点,该文总结和分析了中药靶向NF-κB信号通路干...     

通麻汤联合穴位注射治疗结直肠癌奥沙利铂化疗相关外周神经毒性疗效研究

目的:观察通麻汤联合穴位注射治疗结直肠癌奥沙利铂化疗相关外周神经毒性(OIPN)的临床观察,以期为临床治疗OIPN提供有效治法。方法:将113例OIPN患者分为治疗组57例和对照组56例,对照组给与甲钴胺分散片口服,治疗组在对照组基础上给予通麻汤联合穴位注射,治疗28 d,观察两组周围神经毒性分级、奥沙利铂levitll专用感觉神经毒性分级、中医症候量表评分、FACE-C生命质量、血清神经生长因子水平(NGF)等。结果:两组治疗后外周神经毒性反应分级治疗组0级13例,1级21例;对照组0级5例,1级16例;两组治疗后对比具有统计学意义(P<0.05)。奥沙利铂levitll专用感觉神经毒性分级,两组治疗后对比具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后NGF、FACE-C生命质量、中医证候量表评分对比具有统计学意义(P<0.05)。结论:通麻汤联合穴位注射治疗OIPN具有较好的效果。     

水蛭素通过PI3K/Akt信号通路抑制卵巢癌细胞增殖的机制研究

目的：探讨水蛭素抑制卵巢癌的潜在分子机制。方法：培养卵巢癌SKOV3细胞株,将其分为空白组、水蛭素组、顺铂组、水蛭素+顺铂组,通过CCK-8法确定水蛭素的最佳抑制浓度,免疫组化评估各组PI3K/Akt通路相关因子的表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,通过Western blot法检测水蛭素对癌细胞IL-1及PI3K-Akt信号通路中相关蛋白表达量的影响。结果：水蛭素能明显降低卵巢癌SKOV3细胞组织中IL-1水平,水蛭素组、顺铂组及水蛭素+顺铂组诱导人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡(P<0.05),下调了PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平(P<0.01),且水蛭素+顺铂组的p-PI3K、p-Akt蛋白表达下调最为明显。结论：水蛭素对卵巢癌有抑制作用,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。本研究为进一步深入阐释水蛭素抗卵巢癌机制提供了研究基础。     

乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响。方法将人结肠癌HT29细胞分为空白组、乙酰紫草素组(10μmol/L)、奥沙利铂组(1μmol/L)和联合给药组(10μmol/L乙酰紫草素+1μmol/L奥沙利铂),MTT法检测HT29细胞增殖抑制率,流式细胞术检测HT29细胞凋亡率、qRT-PCR法检测HT29细胞Ki-67、Bcl-2及Bax mRNA表达,Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-羟激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)蛋白表达。结果人结肠癌HT29细胞经乙酰紫草素、奥沙利铂和联合给药处理24、48、72 h后,细胞增殖抑制率均增加,其中联合给药组细胞增殖抑制率最高(P<0. 05)。药物处理HT29细胞48 h后,与空白组比较,乙酰紫草素组、奥沙利铂组和联合给药组凋亡率、Bax mRNA表达增加(P<0. 05),而Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0. 05);联合给药组的细胞凋亡率、Bax mRNA表达均高于乙酰紫草素组和奥沙利铂组,Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达低于乙酰紫草素组和奥沙利铂组。结论乙酰紫草素和奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞均具有抑制增殖及诱导凋亡作用,可能与调控PI3K/Akt信号通路有关,且两者联用时效果更好。     

白藜芦醇通过PI3K/Akt信号通路协同5-氟尿嘧啶对结肠癌细胞的抑制作用

[目的] 观察白藜芦醇（RES）对5-氟尿嘧啶（5-FU）化疗结肠癌敏感性及磷脂酰肌醇激酶（PI3K）/蛋白激酶（Akt）信号通路的影响。[方法] 体外培养SW620细胞,CCK8法检测细胞活力,倒置显微镜分析细胞克隆数,流式细胞术分析细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测凋亡蛋白Cle-caspase 9、Cle-caspase 7和Cle-PARP及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达水平。[结果] 与对照组比较,RES组、5-FU组和RES+5-FU组SW620细胞活力、克隆数及p-p85、p-110β、p-PDK1和p-Akt表达水平明显降低,而细胞凋亡率及Cle-caspase 9、Cle-caspase 7和Cle-PARP表达水平明显增高（P<0.05）;与RES组和5-FU组比较,RES+5-FU组SW620细胞活力、克隆数及p-p85、p-110β和p-PDK1和p-Akt表达水平明显降低,而细胞凋亡率及Cle-caspase 9、Cle-caspase 7和Cle-PARP表达水平明显增高（P<0.05）。PI3K抑制剂LY294002增强RES和5-FU联合处理对SW620细胞生长的抑制作用,而PI3K基因过表达则降低RES和5-FU联合处理对SW620细胞生长的抑制作用。[结论] RES与5-FU协同抑制PI3K/Akt信号通路诱导结肠癌的化疗效果。     

Tanshinone IIA combined with cisplatin synergistically inhibits non‐small‐cell lung cancer in vitro and in vivo via down‐regulating the phosphatidylinositol 3‐kinase/Akt signalling pathway

Cisplatin represents one of the first‐line drugs used for non‐small‐cell lung cancer treatment. However, considerable side effects and the emergence of drug resistance are becoming critical limitations to its application. Combinatorial strategies may be able to extend the use of cisplatin. Both Tanshinone IIA and cisplatin inhibit non‐small‐cell lung cancer cell growth in a time‐ and dose‐dependent manner. When Tanshinone IIA was combined with cisplatin at a ratio of 20:1, they were observed to exert a synergistic inhibitory effect on non‐small‐cell lung cancer cells. The combination treatment was shown to impair cell migration and invasion, arrest the cell cycle in the S phases, and induce apoptosis in A549 and PC9 cells in a synergistic manner. KEGG pathway analysis and molecular docking indicated that Tanshinone IIA might mainly influence the phosphatidylinositol 3‐kinase‐Akt signalling pathway. In all treated groups, the expression levels of Bax and cleaved Caspase‐3 were up‐regulated, whereas the expression levels of Bcl‐2, Caspase‐3, p‐Akt, and p‐PI3K proteins were down‐regulated. Among these, the combination of Tan IIA and cisplatin exhibited the most significant difference. Tanshinone IIA may function as a novel option for combination therapy for non‐small‐cell lung cancer treatment.     

雷公藤红素通过影响Akt信号通路和整合素表达抑制肺癌细胞的转移

雷公藤红素是从传统中药雷公藤中提取分离得到的一种醌甲基三萜,具有抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等药理活性。该实验就雷公藤红素对肺癌细胞黏附、迁移及侵袭的影响进行了研究。用划痕实验测定不同浓度雷公藤红素对肺癌细胞迁移的影响;用Transwell实验测定不同浓度雷公藤红素对肺癌细胞侵袭的影响;用RT-PCR及Western blot实验检测不同浓度的雷公藤红素对肺癌细胞中整合素家族及Akt信号通路的影响。实验结果表明:雷公藤红素以剂量依赖的方式抑制肺癌细胞的黏附、迁移及侵袭,抑制整合素β3,β4,αv的表达,以及抑制Akt信号通路中磷酸化Akt,GSK-3β,c-Raf,PDK1的表达。因此,该研究暗示雷公藤红素能通过抑制Akt信号通路和整合素的表达来抑制肺癌细胞的转移。     

PI3K/Akt信号通路在抑郁症及抗抑郁中药作用机制研究中的进展

磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是调节机体内细胞存活、分化及凋亡的重要信号通路之一,在癌症、糖尿病、神经系统疾病等的发生及相关药物作用机制研究中具有重要作用。近年来,人们逐渐开始关注该通路在抑郁症以及抗抑郁中药作用机制研究中的作用。对PI3K/Akt信号通路关键靶标与抑郁症的关系、PI3K/Akt信号通路在抑郁症中的作用以及PI3K/Akt信号通路在抗抑郁中药作用机制研究中的进展进行综述,为抑郁症的治疗及抗抑郁药物研发提供参考依据。     

基于Hedgehog信号通路的熊果酸诱导结直肠癌SW480细胞凋亡的机制研究

目的 研究熊果酸通过经典Hedgehog信号通路影响人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法 通过显微镜观察熊果酸对SW480细胞形态的影响;采用MTT比色法检测熊果酸对细胞活力的影响;细胞划痕实验检测熊果酸对细胞迁移的影响;Hoechest/PI染色法观察熊果酸对细胞凋亡的影响;荧光探针法检测熊果酸对细...     

金丝桃苷预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用与PI3K/Akt信号通路的关系

研究金丝桃苷(hyperoside,Hyp)预处理对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用及其与PI3K/Akt信号通路的关系。通过可逆性左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注模型,给予大鼠心肌缺血30 min,复灌120 min。健康雄性SD大鼠60只,随机分为5组:假手术组(Sham组)、缺血再灌组(MIRI组)、Hyp预处理组(Hyp组)、Hyp预处理联合PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002组(Hyp+LY组)及PI3K/Akt抑制剂组(LY组)。记录各组大鼠心脏血流动力学指标,测算心肌梗死面积和大鼠血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-6(IL-6)活性。Western blot法检测心肌p-Akt,Akt,Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果显示,与MIRI组比较,Hyp组大鼠心脏血流动力学指标明显改善,心肌梗死面积显著降低;血清中MDA含量和CK,CK-MB,TNF-α,IL-6活性降低,SOD,CAT和GSH-Px活性明显增强;p-Akt的蛋白表达和Akt磷酸化水平明显增强,且Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱(P<0.01)。而LY294002可显著取消Hyp的以上作用(P<0.01)。结果表明,Hyp对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制可能与其激活PI3K/Akt 信号通路,上调Bcl-2 蛋白表达,下调Bax 蛋白表达等作用有关。     

和厚朴酚通过PI3K/Akt信号通路对哮喘小鼠的作用及其对TLR2、TLR4表达的影响

目的探讨和厚朴酚通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体2(TLR2)、TLR4表达的影响。方法 50只ICR小鼠随机分为对照组、哮喘模型组、阳性对照组(地塞米松10 mg/kg)及和厚朴酚高、低剂量(50、10μg/kg)组。采用卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝致敏法诱导哮喘模型,随后ip相应的药物进行干预,连续给药7 d,于末次给药后24 h取肺泡灌洗液进行白细胞分类并计数;取左侧肺组织进行HE、PAS、Masson染色常规病理组织学检查;采用Western blotting法检测小鼠肺组织PI3K、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、TLR2、TLR4蛋白的表达水平;采用RT-PCR法检测小鼠肺组织中TLR2、TLR4 mRNA的表达水平。结果与模型组比较,和厚朴酚50μg/kg组小鼠肺泡灌洗液中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数均减少(P0.01);肺组织病理明显改善,炎症细胞浸润减少,气管壁及肺泡损伤明显缓解;肺组织PI3K、Akt、p-Akt、TLR2、TLR4蛋白及TLR2、TLR4 mRNA表达水平下调(P0.05)。结论和厚朴酚对OVA致哮喘小鼠的炎症反应具有较好的抑制作用,其机制可能与作用于TLR2、TLR4受体进而抑制PI3K/Akt信号通路有关。     

片仔癀对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其机制研究

目的研究片仔癀对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其机制。方法以人肺癌A549细胞作为体外实验对象,分别用不同质量浓度的片仔癀处理,MTT检测细胞增殖变化,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移变化,Western blotting检测细胞中侵袭、迁移蛋白MMP-9、MMP-2和上皮细胞-间充质转化(EMT)蛋白E-cadherin、vimentin及Akt信号通路蛋白Akt磷酸化水平。用Akt信号通路激活剂和片仔癀处理肺癌细胞,检测激活Akt信号通路对片仔癀抗肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用。结果 100μg/mL的片仔癀对肺癌细胞增殖能力没有影响(P0.05),200μg/m L的片仔癀处理可以明显降低肺癌细胞增殖能力(P0.05)。100、200μg/m L的片仔癀处理后的肺癌细胞侵袭和迁移能力均降低,细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平下降,E-cadherin蛋白水平升高,vimentin蛋白水平降低,同时细胞中Akt磷酸化水平也下降(P0.05)。Akt信号通路激活剂处理可以明显减弱片仔癀对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移的抑制作用(P0.05)。结论片仔癀具有降低肺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,作用机制与抑制Akt信号通路的激活有关。