变形链球菌Ⅰ型mutans和Ⅲ型sobrinus的产酸,耐酸性实验研究

对变形链球菌遗传型Ⅰ型 mutans JBP 和Ⅲ型 sobrinus6715的产酸性和耐酸性进行了实验研究。发现两种菌在4种糖的各个培养液中经24小时的终末 pH 均能达5.0,Ⅲ型6715产生的有机酸总量显著高于Ⅰ型 JBP(P<0.01)。在相差0.5 pH,从 pH 3.5到 pH 8.0的系列培养液中,经24小时的终末pH和细菌生长量表明,在酸性环境中.变链Ⅲ型6715继续降低 pH 的能力和生长总量都大于变链Ⅰ型 JBP(P<0.05)。以上结果提示,变链Ⅲ型 sobrinus 以其很强的产酸和耐酸性能,对龋病的活跃性可能有重要作用。     

美兰抑制变形链球菌产酸的实验研究

目的　研究美兰对变形链球菌在外源性糖培养条件下产酸的抑制作用 ,探讨美兰作为一种新型防龋制剂的可行性。方法　通过将美兰加入变形链球菌糖培养液的方法 ,以不加美兰者作对照 ,用气相色谱法检测不同培养条件下变形链球菌培养液中产生有机酸的种类和数量。结果　美兰组有机酸的总量为 14.6 6± 5 .42 mmol/L,与对照组比较相差显著 (P<0 .0 1) ;其中以乳酸的量为最高 ,且均未检出丙酸和丁酸。结论　美兰具有抑制变形链球菌产酸的作用 :美兰作为防龋制剂具有一定的应用价值     

LuxS基因突变对变形链球菌产酸代谢的影响

目的：研究LuxS基因突变对变形链球菌产酸代谢的影响,以探讨变形链球菌LuxS基因缺陷菌株致龋毒力的变化。方法：采用比浊法测定不同培养条件下变形链球菌LuxS基因缺陷菌株培养液的吸光度A值;同时测定不同培养条件下培养基上清液的pH值。结果：基因缺陷株细菌A值显著低于标准株（P〈0．05）;培养基初始pH〉5．0时,其产酸量小于亲代株,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：变形链球菌LuxS基因缺陷菌株的产酸代谢能力下降,其致龋力小于亲代菌株。     

白假丝酵母菌对变形链球菌产酸能力的影响

目的 初步探讨白假丝酵母菌对变形链球菌产酸能力的影响.方法 实验分A、B、C、D四组,依次为白假丝酵母菌单独培养、变形链球菌单独培养、两菌混合培养、空白对照组.在不同葡萄糖浓度(0.01 ～ 0.15 mol/L)或不同初始pH值(7.0～4.0)下,将两菌单独或混合培养48 h后,测定上清液pH值,采用析因设计资料的方差分析判断两菌的产酸能力间是否存在交互作用,并以变形链球菌单独培养(B组)为参照,评价两菌混合培养(C组)的产酸能力.结果 不同葡萄糖浓度下,白假丝酵母菌均可抑制变形链球菌的产酸力(P＜ 0.001).葡萄糖浓度小于或等于0.10 mol/L时,C组产酸量小于B组(P＜0.05);葡萄糖浓度达到0.15 mol/L时,B、C两组的产酸量差异无统计学意义(P＞0.05).pH为7.0～5.5时,白假丝酵母菌抑制变形链球菌的产酸力(P＜ 0.001);pH≤5时,白假丝酵母菌对变形链球菌的产酸力无影响(P＞0.05).初始pH为7.0时,C组产酸量小于B组(P＜0.05);初始pH降至6.5、6.0时,C组与B组差异无统计学意义(P＞0.05);初始pH降至5.5以下时,C组的产酸量大于B组(P＜0.05).本实验条件下,混合培养的总产酸量随培养基的葡萄糖浓度升高呈增多趋势,随初始pH降低呈减少趋势.结论 白假丝酵母菌对变形链球菌产酸能力的影响及两菌混合培养的产酸力均与培养基葡萄糖浓度和初始pH有关.     

放射性龋患者唾液中变形链球菌的产酸性及耐酸性

目的 探讨放射龋患者与健康无龋者唾液中变形链球菌致龋性的差异.方法 从放射性龋患者(实验组)及健康无龋者(对照组)唾液中分离培养的变形链球菌各20株,将其接种至不同pH值(以0.5为间隔,pH.4.0～7.0)的PYG液体培养基中,37℃、厌氧(80% N2、10% H2、10% CO2)条件下培养48 h.pHS-25型精密酸度计测定培养物上清的终末pH值,比较产酸能力(△pH值);将菌沉淀用PBS液重悬,紫外分光光度计测定600 nm处吸光度A值,比较细菌的生长情况.结果 初始pH>5.5时,实验组组和对照组的△pH值及生长情况无统计学差异(P>0.05);pH=5.0时,实验组和△pH值及生长情况明显高于于对照组(P<0.05);pH<5时,所有的变形链球菌分离株均不能生长.结论 放射性龋者唾液中变形链球球菌临床分离菌株具有较强的产酸性和耐酸性.     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对变形链球菌产酸影响的实验研究

目的 研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体（casein phosphopeptide-amorphic calcium phosphate，CPP-ACP）对变形链球菌产酸的影响，探讨CPP-ACP作为一种生物防龋制剂的可行性。方法 将变形链球菌加入含不同浓度CPP-ACP的蔗糖培养基中，厌氧培养48h，用精密pH计检测培养基上清液的pH值，计算pH的变化值ApH（初始pH值-终末pH值）。结果 随CPP-ACP浓度的升高，培养基上清液的pH值升高，ApH降低，即变形链球菌的产酸量降低（P〈0．01）。结论 CPP-ACP对变形链球菌产酸具有抑制作用，且随CPP-ACP浓度的升高抑制作用增强。     

唾液抗PAc抗体对变形链球菌和茸链球粘附的抑制作用

作者采用同位素标记液闪技术研究唾液抗变形链球菌表面蛋白（ＡＰｃ）抗体对变形链球菌和茸毛链球菌在全唾液包被的羟基磷灰石（ＳＨＡ）上粘附的抑制作用。结果显示，含有高效价的特异性护ＰＡｃ抗体的兔唾液使变形链球菌Ｉｉｇｂｒｉｔｔ在ＳＨＡ土的粘附数明显减少，而对茸毛链球菌６７１５的粘附无影响。提示抗ＰＡｃ抗体能抑制变形链球球在唾液获得性膜上的粘附，这可能是特异性抗体龋作用的机制之一。     

不同龋敏感儿童变形链球菌临床分离株产酸、耐酸能力的实验研究

目的:比较不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌的临床分离株产酸和耐酸能力的差异.方法:以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变形链球菌为实验菌株,常规复苏、增菌,配制相同密度的菌悬液,加入含5%蔗糖、不同pH值(以0.5为间隔,pH 4.0～7.0)的BHI液体培养基中厌氧(80%N2、10%H,、10%CO2)培养48 h后,采用pHS-3C型精密酸度计,测定培养物上清的终末pH值,比较细菌的产酸能力(△pH);将相同菌液浓度的变形链球菌临床分离株菌悬液分别在不同pH(以0.5为间隔,pH 4.0～7.0)的BHI液体培养基中培养48 h后,用紫外分光光度计测定540 nm处吸光度,比较细菌的牛长情况.结果:儿童高、中龋患者口腔中分离出的变形链球菌临床分离株以及国际标准菌株的产酸和耐酸能力明显高于无龋者口腔中分离出的变形链球菌,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:高龋儿童口腔中变形链球菌临床分离株具有高致龋性.     

老年人高龋患者牙菌斑变形链球菌临床分离株产酸能力的研究

目的：探讨老年人不同龋敏感者口腔中变形链球菌（血清C型）的临床分离株产酸能力的差异。方法：收集老年人高龋患者、无龋者牙菌斑变形链球菌临床分离株（血清C型），比较细菌产酸能力，并与国际参考菌株比较。结果：老年人高龋患者口腔中分离出的变形链球菌临床分离株产酸能力明显高于无龋者口腔中分离出的变形链球菌临床分离株，与国际参考菌株却无明显地统计学差异。同时我们研究也发现，在老年人高龋患者同一个体的口腔中变形链球菌的临床分离株产酸能力存在明显差异。结论：老年人高龋者口腔中变形链球菌（血清C型）临床分离株的高致龋性与其携带有产酸能力强的菌株有关。     

五倍子对变形链球菌及远缘链球菌产酸影响的体外研究

目的 研究五倍子及其主要成分鞣酸在体外对变链菌及远缘链球菌的产酸作用有何影响。方法 本实验采用气相色谱研究50％五倍子浸剂、37％鞣酸标准品、2％氟化钠液对变链菌及远缘链球菌产酸作用的影响。结果 50％五倍子浸剂有机酸含量最少,其次分别为2％氟化钠组、37％鞣酸标准品组,3组间无统计学的差异。结论 五倍子对变链菌及远缘链球菌产酸有较强的抑制作用,其作用与氟化钠相当。     

氟化微量元素制剂对变形链球菌产酸影响的实验研究

目的比较氟化微量元素制剂对变形链球菌产酸及乳酸脱氢酶活性的抑制作用。方法含相同氟浓度的5种氟化微量元素制剂(氟化锌、氟化镧、氟化亚锡、氟化锶、氟钼酸铵)和氟化钠分别加入到含变形链球菌菌悬液的BHI培养基中,采用二硝基苯肼法并利用720A型离子仪,观察变形链球菌乳酸脱氢酶活性及培养液pH的变化。结果氟化锌、氟化亚锡对变形链球菌乳酸脱氢酶活性的抑制作用强于氟化钠(P<0.01);氟化锌、氟化亚锡抑制变形链球菌产酸的作用亦强于氟化钠(P<0.05)。结论锡、锌等微量元素可提高氟化物的防龋生物活性。     

siRNA干扰对变形链球菌耐氟菌ffh基因产酸能力的影响

目的:探讨变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因 siRNA干扰后对产酸能力的影响。方法:电穿孔法将siRNA转入UA159-FR与ffh基因序列靶向位点结合,将干扰前后细菌分别加入BHI培养液,含5%糖类的葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉中培养,pH调至7.5,24 h后测终末pH。结果:转染结果成功;干扰前后不同糖培养基中变形链球菌耐氟菌ffh基因对产酸有显著差异(P<0.05);干扰前后在常规、葡萄糖、及乳糖中差异极显著(P<0.01);蔗糖中差异显著(P<0.05);淀粉中无显著差异。结论:变形链球菌耐氟菌中基因ffh对产酸能力影响显著。     

低浓度氟钼酸铵对变形链球菌产酸的作用

本研究的目的是为了观察低浓度氟钼酸铵对变形链球菌糖代谢产酸的作用。本研究采用厌氧菌的连续培养技术,以ΔpH表示培养液中有机酸总量的变化,以气相色谱法检测培养液中各种有机酸含量。结果显示:0.001％浓度的氟钼酸铵可使变形链球菌的产酸量和培养液的总酸量减少,且其作用随浓度升高而增强。结果提示低浓度氟钼酸铵通过抑制变形链球菌的糖代谢产酸来降低变形链球菌的致龋力。     

外源性C—di—GMP对变形链球菌产酸、耐酸能力的影响

目的：初步探讨外源性c—di—GMP对变形链球菌产酸、耐酸能力的影响。方法：外源性c—di—GMP与生理盐水分别加入至含变形链球菌UA159菌液的BHI培养基中,比较两组对变形链球菌产酸、耐酸能力的影响。结果：C—di—GMP处理组与生理盐水组相比,产酸、耐酸能力明显下降,差异有统计学意义,经t检验,P〈0．05。结论：c—di—GMP可以抑制变形链球菌的产酸、耐酸能力,可以单独也可以与其它的抗龋制剂联合应用控制龋病。     

唾液抗PAc抗体对变形链球菌和茸毛链球菌粘附的抑制作用

作者采用同位素标记液闪技术研究唾液抗变形链球菌表面蛋白 (PAc)抗体对变形链球菌和茸毛链球菌在全唾液包被的羟基磷灰石 (SHA)上粘附的抑制作用。结果显示 ,含有高效价的特异性抗 PAc抗体的兔唾液使变形链球菌 Ingbritt在 SHA土的粘附数明显减少 ,而对茸毛链球菌 6 715的粘附无影响。提示抗 PAc抗体能抑制变形链球菌在唾液获得性膜上的粘附 ,这可能是特异性抗体抗龋作用的机制之一。     

变形链球菌ComCDE密度感应参与不同菌种的竞争

目的 研究口腔变形链球菌( S.mutans )ComCDE密度感应系统参与血链球菌(S.sanguinis)的相互竞争作用.方法 采用LIVE\DEAD BacLightTM荧光染色结合激光共聚焦显微镜,观察变形链球菌(简称变链菌)在CSP信号肽诱导下群体细菌自身死亡变化;通过荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定细菌素以及细菌素免疫蛋白相关基因表达变化,分析变链菌ComCDE系统参与菌群生存竞争的调控机制.结果 在细菌竞争中,变形链球菌△comC、△comD 、△comE突变株失去不同菌种间的竞争力,无法抑制相邻Ssanguinis的正常生长;只有野生株保持竞争力,抑制相邻S.sanguinis生长,形成缺陷菌环.CSP信号肽诱导下,变链菌群体死菌/活菌率增高58.1％(P＜0.05);细菌素及免疫蛋白相关SMU.151、SMU.423、SMU.1913c基因分别升高23.3倍(P=0.00)、15.9倍(P＜0.05)、19.3倍(P＜0.05).结论 变形链球菌ComCDE密度感应系统调控变链菌的变链素及免疫蛋白产生、参与不同菌种间竞争生存.     

唾液获得性膜原位葡聚糖与变形链球菌和茸毛链球菌附着关系的实验研究

通过离体实验观察了实验性获得性膜原位葡聚糖在变形链球菌Ｓ．ｍｕｔａｎｓ和Ｓ．ｓｏｂｒｉｎｕｓ附着牙面过程中的作用。结果表明：两菌具有相似的产生ＧＴＦ和原位葡聚糖的能力，但两菌附着量和附着率的差别较大。在有蔗糖和ＧＴＦ存在时，Ｓ，ｓｏｂｒｉｎｕｓ的附着率明显高于Ｓ．ｍｕｔａｎｓ．提示原位葡聚糖在Ｓ．ｓｏｂｒｉｎｕｓ的附着中起重要作用，Ｓ、ｓｏｂｒｉｎｕｓ主要以蔗糖依赖性机制定居牙面，而Ｓ．ｍｕｔａｎｓ主要以蔗糖非依赖性机制定居牙面。     

美兰和超氧化物歧化酶对变形链球菌产酸作用的影响

目的：研究美兰（methylene blue）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）对变形链球菌产酸作用的影响,探讨美兰和超氧化物歧化酶用于龋病预防的可行性。方法：采用气相色谱法研究美兰及超氧化物歧化酶对变形链球菌产酸的影响作用。用乳酸脱氢酶试剂盒检测不同培养条件下变形链球菌乳酸脱氢酶活性。结果：美兰对变形链球菌产酸具有抑制作用;SOD对变形链球菌产酸没有影响;不同培养条件下变形链球菌乳酸脱氢酶活性变化不明显。结论：由于作用机理不同,美兰和超氧化物歧化酶对变形链球菌产酸的作用也不同,美兰可能成为有价值的防龋制剂。