hTERC基因表达在宫颈病变中的临床意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测人类染色体端粒酶(hTERC)基因异常扩增在子宫颈病变中的临床意义。方法选择经过液基细胞学(TCT)检查的112例患者为研究对象,根据组织学结果分组,CIN73例、宫颈癌19例、正常20例,用FISH方法检测脱落细胞hTERC基因的表达情况,其中行HPV检查65人,阳性39例,阴性26例。结果在CIN1、CIN2/3和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.67%、51.16%和89.47%,CIN1、CIN2/3和宫颈癌与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有统计学意义(P0.001),其中,各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。在HPV感染的39例患者中,hTERC基因扩增比例58.97%(23/39),而26例HPV阴性的患者中,其扩增比例为23.08%(6/26),两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 hTERC基因的阳性率随宫颈病变级别增高而增加,对宫颈早期病变进展有预测意义。hTERC基因的扩增与HPV感染及宫颈病变程度相关,其扩增可能是HPV感染致端粒酶活性增加的早期事件。     

FISH检测宫颈脱落细胞hTERC基因的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)患者人类染色体末端酶(hTERC)基因的表达和临床意义。方法:收集2006年10月至2007年6月北京大学人民医院妇科122例宫颈脱落细胞标本,其中CIN患者66例、宫颈鳞癌(SCC)患者20例、正常细胞学妇女36例,用荧光原位杂交(FISH)方法检测脱落细胞hTERC基因。结果:在CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和SCC患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.13%、48.57%和90%,CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有显著统计学意义(P<0.001),其中,CINⅠ与CINⅡ/Ⅲ、CINⅠ与SCC比较,CINⅡ/Ⅲ与SCC比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着病变程度增加,hTERC基因表达率增加。hTERC基因检测CINⅡ/Ⅲ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是48.57%、92.53%、77.27%和77.5%。CIN和SCC组hTERC基因拷贝数明显增加,其中CIN患者平均拷贝数为2.8,SCC组平均拷贝数为3.2,hTERC基因的表达水平与宫颈病变的程度关系密切。结论:hTERC基因在CIN和SCC中表达异常,且随病变程度增加阳性表达率增加,可作为宫颈癌前病变进展的生物遗传学监测指标。     

荧光原位杂交技术检测宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中TERC基因的扩增及临床意义

目的:应用荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中TERC基因的扩增,探讨其在宫颈病变筛查中的意义.方法:筛选门诊就诊宫颈疾病患者宫颈脱落细胞标本120例,其中液基细胞学检查正常者20例,病理学检查CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌各25例.采用双色间期FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增,以正常标本的检测结果建立阈值.结果:①CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中每例的异常细胞百分率均大于阈值(P<0.05),异常细胞百分率随病理学分级病变严重程度增高而增高(P<0.01).②2:3、2:4、2:5和4:4以上类型在CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌所占百分率比较,差异有高度统计学意义(均P<0.01),其中宫颈癌与CIN Ⅰ比较,2:3类型所占比例明显下降(P<0.001),2:4、2:5和4:4以上类型所占比例明显升高(JP<0.001).③不同细胞学分级中,异常细胞百分率随其病变严重程度增高而增高(P<0.01),2:3、2:5和4:4以上类型在ASCUS、LSIL和HSIL中的百分率差异有高度统计学意义(均P<0.01),其中HSIL与ASCUS比较,2:3类型所占比例明显下降(P<0.01),2:5和4:4类型所占比例明显升高(P<0.01).④在低级别及高级别CIN中,细胞学LSIL及HSIL检出率分别为10例(40.00%,10/25)及31例(62.00%,31/50),FISH技术检测出低级别与高级别CIN的敏感度均明显高于细胞学检查(P<0.05).结论:CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌均有TERC基因扩增,其拷贝数随病理学及细胞学分级严重程度增加而增加.应用FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增对宫颈病变筛查及对病变进展预测具有一定价值.     

PHD2在宫颈病变中的表达及意义

目的:研究不同宫颈组织中脯氨酸羟化酶2(PHD2)的表达情况,初步探讨PHD2在宫颈病变中的作用和意义。方法:选取正常宫颈、CINⅠ和CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌标本各20例,应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、免疫组化法(SP法)检测PHD2 mRNA和蛋白水平的相对表达情况。结果:正常宫颈、CINⅠ和CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌组织中,PHD2蛋白和mRNA表达水平依次上调,两两比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论:PHD2可能参与宫颈病变的发生发展,作为肿瘤标记物用于早期诊断和预后判断。下调PHD2的高表达,可能成为治疗宫颈癌的新靶点。     

宫颈病变细胞中hTERC、c-myc基因的表达及临床意义

目的:检测各级别宫颈上皮内瘤变、宫颈癌患者端粒酶(hTERC)和c-myc基因的表达,探讨二者与宫颈癌发生发展的相关性。方法:采用FISH技术检测193例宫颈病变及52例宫颈癌患者中hTERC基因,c-myc基因的扩增情况,比较分析两种基因表达与CIN级别及宫颈癌临床病理特征的关系。结果:随宫颈病变级别加重,hTERC基因阳性扩增率呈逐渐增高趋势,组间有显著统计学差异(χ2=148.353,P=0.000)。c-myc基因随宫颈病变级别的加重,阳性率逐渐增高,组间有显著统计学差异(χ2=110.128,P=0.000)。c-myc基因阳性率随分化程度的加重而升高,G3阳性率明显高于G1/G2(χ2=6.054,P=0.014),hTERC基因则无显著差异。结论:hTERC基因,c-myc基因可作为鉴别宫颈低度癌前病变和高度癌前病变的重要辅助指标,c-myc基因可能是揭示宫颈癌进展,分化程度的重要指标。     

宫颈脱落细胞中HPV L1壳蛋白的表达及临床意义

目的探讨HPV L1壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达及临床意义。方法对2010年1月至2011年10月在南京医科大学第一附属医院就诊的患者的宫颈脱落细胞标本409例用免疫细胞化学法检测HPV L1壳蛋白的表达。结果 HPV L1壳蛋白在NILM、ASCUS、ASC-H、LSIL、HSIL和AGC中的阳性表达率分别为20.54%、49.24%、18.18%、43.90%、18.18%、0%,ASCUS/LSIL组和ASC-H/HSIL组之间差异有统计学意义(P<0.05);HPVL1壳蛋白在慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3、SCC和宫颈腺癌中的阳性表达率分别为36.11%、42.19%、30.23%、26.09%、0%、0%,CIN1组、CIN2/3组、SCC组之间差异有统计学意义(P<0.05);HPVL1壳蛋白在HR-HPV DNA负荷量0～9.9、10～99.9、100～999.9、1000～pg/ml中的阳性表达率分别为6.67%、17.24%、36.72%、51.77%,除0～9.9与10～99.9pg/ml组比较,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05);HPV L1壳蛋白阴性表达对高级别CIN(≥CIN2)预测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为75.62%、37.98%、54.09%、61.72%。结论 HPV L1壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达率随宫颈病变程度的加重呈下降趋势,随病毒负荷量的增加呈升高趋势。     

整合素连接激酶在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨整合素连接激酶(ILK)在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌组织中的表达及临床意义.方法 2000年1月至2007年12月在沧州中西医结合医院采用免疫组化技术(S-P法)检测ILK在99例宫颈CIN和宫颈癌中的表达.结果 ILK在正常宫颈黏膜上皮、CIN I～Ⅱ级、CINⅢ级、浸润癌表达的阳性率分别为26.7%、72.O%、80.0%、97.9%.各级CIN与浸润癌相比ILK的表达率差异有统计学意义(P<0.05).ILK表达率与临床分期及病理分级有关(P<0.05).结论 ILK可作为反映宫颈上皮增生病变程度及生物学行为的指标,对宫颈非浸润性病变与浸润性病变的诊断及鉴别有参考价值.     

hTERC基因表达在宫颈癌筛查中的意义

目的:探讨宫颈病变脱落细胞中人类染色体端粒酶基因(hTERC)的表达及hTERC基因检测在宫颈癌筛查中的临床意义。方法:收集宫颈病变患者的宫颈脱落细胞标本129例,依据组织病理学结果分为3组:宫颈上皮内瘤变低度病变组(CINⅠ)、高度病变组(CINⅡ/Ⅲ)、宫颈癌组(SCC);同时选择健康妇女的宫颈脱落细胞标本20例作为对照组建立实验室阈值;应用荧光原位杂交技术(FISH)检测两组标本hTERC基因的扩增情况,最终以病理学诊断为金标准,比较FISH检测结果。结果:研究各组中CINⅠ,CINⅡ/Ⅲ,SCC的hTERC基因阳性表达率分别为7.31%,56.25%,75.00%,hTERC基因扩增比例随病变进展而增加;研究组与对照组hTERC基因阳性表达率差异有统计学意义(P0.05);研究各组两两比较,hTERC基因阳性表达率低度病变组与高度病变组、宫颈癌组差异有统计学意义(P0.05),而高度病变组与宫颈癌组的差异无统计学意义(P0.05)。结论:FISH方法检测hTERC基因可用于筛查宫颈高度病变及宫颈癌,其阳性扩增信号多倍体型可能是宫颈病变进展的预测性指标。     

C-myc和bcl-2基因在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织的表达及临床意义

肿瘤发生、发展是一个多因素、多步骤的过程.细胞周期调控异常、细胞凋亡异常、生长因子或细胞因子信号转导异常都可能导致增殖调控异常而发生肿瘤.基因在肿瘤发生、发展过程中的作用是当今肿瘤发生机制研究的热点,其中癌基因异常激活与抑癌基因失活在肿瘤发生、发展中有重要意义.     

FISH技术检测宫颈组织TERC基因扩增

目的应用荧光原位杂交技术（FISH）检测子宫颈病变组织中人端粒酶RNA（TERC）基因异常扩增的临床意义。方法应用双色荧光原位杂交技术（FISH）检测195例宫颈组织TERC基因的异常扩增。结果①195例各类宫颈病变中,慢性宫颈炎33例,ClN134例,CIN2/3（包括原位癌）37例,宫颈鳞状细胞癌30例,宫颈腺癌61例,用FISH检测TERC基因的阳性表达率分别是3.03%（1/33）、29.41%（10/34）、72.97%（27/37）、100%（30/30）、91.80%（56/61）,子宫颈鳞癌与腺癌TERC基因的表达较宫颈上皮内瘤变各组差异有统计学意义（P〈0.05）。TERC基因的扩增阳性率随着宫颈病变程度增加呈逐渐上升趋势,且TERC扩增在子宫颈鳞癌与腺癌患者中无明显差异性;②TERC基因异常扩增与高危型HPV感染呈正相关。结论应用FISH技术检测TERC基因的异常扩增可以作为组织学诊断困难的病变确诊、病变预测及治疗后风险评估的手段。     

miR-218下调与宫颈上皮内瘤变患者HPV病毒感染关系的研究

目的:探讨小分子RNA-218(miR-218)下调与宫颈上皮内瘤变(CIN)患者人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:选择78例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者,其中CINⅠ22例(28.2%),CINⅡ27例(34.6%),CINⅢ29例(37.2%),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-218的表达,GenoArray测试工具包检测组织标本中HPV的表达。结果:miR-218在高危型HPV感染患者中的含量低于低危型HPV感染者,CINⅡ、Ⅲ患者miR-218含量比CINⅠ患者低。结论:高危型HPV感染患者中miR-218表达降低,提示miR-218可能是宫颈癌发生的重要因素。     

子宫颈癌组织中抑癌基因DNA甲基化的检测

目的 通过分析宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌组织中p16、CDH1、RASSF1A和TIMP3基因DNA甲基化的变化情况,探讨其在宫颈癌发生中的意义。方法 用甲基化特异性聚合酶链反应技术（MSP）对CINI组（40份）、CINⅡ～Ⅲ（40份）、宫颈癌组（40份）病变组织中p16、CDH1、RASSF1A和TIMP3基因DNA甲基化程度进行检测。另取正常宫颈组织20份作为对照组。结果（1）对照组中p16、CDH1、RASSF1A和TIMP3基因的DNA甲基化阳性率均为0。（2）p16和CDH1基因的DNA甲基化阳性率,CIN11～m组（分别为22％、35％）明显高于CINI组（分别为2％、5％,P〈0．05）;RASSF1A和TIMP3基因的DNA甲基化阳性率,CINⅡ～Ⅲ组（分别为12％、15％）虽高于CINI组（均为2％）,但差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）宫颈癌组p16（40％）、CDH1（58％）、RASSF1A（20％）和TIMP3（35％）基因的DNA甲基化阳性率虽均高于CINⅡ-Ⅲ组,但差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）宫颈癌组p16、CDH1、RASSF1A和TIMP3基因的DNA甲基化阳性率均高于CINI组,差异有统计学意义（P〈0．05）。（5）上述基因的DNA甲基化的总阳性率（即任何一个基因出现甲基化即为阳性）,宫颈癌组（90％）明显高于CINⅡ～Ⅲ组（55％,P〈0．05）,且此两组均明显高于CINI组（8％,P〈0．05）。结论 随着从宫颈不典型增生向浸润癌的进展,p16、CDH1、RASSF1 A和,TIMP3基因的DNA甲基化阳性率明显升高,提示抑癌基因的DNA甲基化在宫颈癌发生、发展中起着一定作用,可能成为判断宫颈癌发生、发展的重要指标。     

子宫颈癌及其癌前病变组织端粒酶活性的研究

目的研究宫颈癌及其癌前病变组织中端粒酶激活的意义.方法应用端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)及电泳-银染法,对36例宫颈浸润癌及16例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织进行端粒酶活性测定,以吸光度(A)值判断端粒酶活性.同时测定11例正常宫颈、6例慢性宫颈炎症及8例癌旁组织端粒酶活性作为对照.结果CIN、宫颈癌及对照组端粒酶活性A值分别为0.398±0.293、1.580±0.819和0.050±0.012,3组比较,差异有极显著性(P＜0.01).端粒酶活性高低与肿瘤分化程度呈负相关,与淋巴结转移呈正相关;与组织学类型、分期、体积大小无关.结论端粒酶的激活发生在宫颈癌病变的早期,可能成为宫颈癌及癌前病变早期诊断和鉴别诊断的指标.     

水通道蛋白1在宫颈病变中的表达及意义

目的:检测宫颈病变组织中水通道蛋白1的表达,探讨该蛋白在宫颈癌形成和演进进程中的意义。方法:用免疫组织化学SP法检测83例石蜡包埋宫颈组织中水通道蛋白1的表达,结合临床病理分型分析其表达的意义。结果:水通道蛋白1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌组织中的阳性率分别为4.0%,33.3%和74.2%,3组样本中水通道蛋白1阳性率的差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌病理学分级1+2级和3级相比,差异有统计学意义(P<0.01)。水通道蛋白1表达阳性率与CIN的分级,与宫颈癌临床分期、组织学分型和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:水通道蛋白1在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中表达升高,可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要作用。     

人乳头瘤病毒生物状态和人端粒酶RNA组分基因扩增与宫颈病变的关系

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)生物状态和人端粒酶RNA组分(hTERC)基因扩增与子宫颈病变之间的关系。方法:应用原位杂交(ISH)和荧光原位杂交(FISH)方法,分别检测114例宫颈石蜡包埋组织HPV生物状态及hTERC基因的异常扩增。结果:在非CIN、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌宫颈组织标本中hTERC基因表达率分别为2.78%、10.00%、50.00%、78.37%和86.67%,差异有统计学意义(χ2=55.56,P<0.001)。随着病变程度升高,HPV整合发生率逐渐升高(0.0%、10.00%、18.75%、72.97%、80.00%)。不同程度的宫颈病变HPV整合率有显著差异(χ2=52.49,P<0.001)。其中,非CIN组与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义,CINⅠ与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义,CINⅡ与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义。HPV DNA整合情况和hTERC基因扩增情况一致,用两种方法预测宫颈癌的效果一致。结论:HPV生物状态和TERC基因扩增与子宫颈病变的发生发展相关。HPV感染与HPV整合、端粒酶激活有时序性差异,但HPV整合和hTERC基因扩增的时序性和关联性有待进一步探讨。     

In situ hybridization analysis of HPV DNA in cervical precancer and cervical cancers from China

Summary A series of 103 cervical biopsies derived from 103 women during July 1958 to September 1963 from Beijing, China were investigated with in situ hybridization for the presence of HPV6, 11, 16, 18, 31 and 33 DNA. The mean age of the patients was 46.1 + 10.6 years with a range of 24–74 years. Morphological features of HPV infection were found in 80 (77.7%) biopsies. Invasive cervical cancer was diagnosed in 43 biopsies and cervical intraepithelial neoplasia CIN I, CIN II and CIN III in 9, 9, and 27 cases, respectively. A total of 63.1% (65/103) of the lesions had morphological features of HPV infections associated with CIN or invasive carcinomas. Altogether, 31.1% (32/103) of the biopsies were shown to contain HPV DNA. Of the cases showing HPV morphology, 43.1% were HPV DNA positive. HPV16 (30/32) was the most frequent type, followed by HPV11 and 18, whereas no lesions with HPV6, 31 or 33 were found. A total of 19/43 (44.2%) of the invasive carcinomas contained HPV DNA. HPV DNA positivity and the grade of CIN showed a statistically significant correlation (P=0.0011). Our study demonstrated the presence of HPV in cervical lesions among Chinese women in the late 1950's and early 1960's when a single sexual partner was the rule and also supports the concept that HPV has as an important etiological role in cervical cancer, the highest risk being associated with HPV type 16. The applicability of in situ hybridization in retrospective assessment is emphasized.     

宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中核糖体蛋白类似基因39L mRNA的表达

目的:了解核糖体蛋白类似基因39L(RPL39L)mRNA在宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌以及邻近相对正常组织中的表达,并探讨此基因与宫颈癌发生发展的关系。方法:应用半定量RT-PCR技术检测RPL39L mRNA在CIN组织、宫颈癌组织以及邻近相对正常组织中的表达。结果:RPL39L mRNA在宫颈癌组织中的表达水平较邻近相对正常组织高(P<0.05);RPL39L mRNA在CIN组织中和宫颈癌的表达无显著差异。结论:RPL39L mRNA的表达可能与宫颈肿瘤的发生发展有关。