Daxx蛋白在儿童急性白血病骨髓细胞中的表达意义

目的探究Daxx蛋白在儿童急性白血病骨髓细胞中的表达意义。方法2010年2月至2014年10月汕头大学医学院第一附属医院儿科收治住院的急性白血病患儿100例为观察组,又根据疾病类型分为3个亚组,即急性淋巴细胞白血病(ALL)组49例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组21例,急性髓细胞白血病(AML)组30例。对照组30例,为同年龄正常健康儿童。采用免疫组织化学方法检测Daxx蛋白的表达。结果对照组儿童骨髓细胞中Daxx蛋白的表达阳性率与ALL组比较差异无统计学意义(P0.008 3);对照组儿童骨髓细胞中Daxx蛋白的表达阳性率显著低于ANLL组和AML组,差异有统计学意义(P0.008 3)。对照组中Daxx蛋白在儿童急性白血病骨髓中的表达(6.01±1.13)μg/L,显著高于ALL组(3.55±2.32)μg/L、ANLL组(3.54±2.47)μg/L、AML组(3.12±1.56)μg/L,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Daxx蛋白在儿童急性白血病骨髓细胞中过度表达,可能对促进白血病细胞的增殖、生长过程起到重要作用。     

急性白血病患儿Notch1蛋白表达及其临床意义研究

摘要：目的　探讨儿童急性白血病（AL）骨髓细胞中Notch1蛋白表达及其与免疫分型、治疗效果的关系。方法　收集2007年1月至2009年1月华中科技大学同济医学院附属同济医院初诊49例AL患儿和20例非恶性血液病患儿骨髓涂片,采用免疫组织化学链霉素亲和素-生物素-过氧化酶复合物（SABC）方法检测骨髓细胞中Notch1蛋白表达情况;流式细胞仪确定白血病细胞免疫分型;标准化疗方案用于AL患儿的治疗。结果　Notch1在T淋巴细胞性白血病（T-ALL）患儿阳性表达率为77.8%,显著高于B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿（31.0%,P < 0.05）及对照组骨髓组织（15.0%,P < 0.05）。急性非淋巴细胞白血病（ANLL）Notch1蛋白阳性表达率为63.6%,显著高于对照组（15.0%,P < 0.05）。在T-ALL 和ANLL中,Notch1与治疗效果无明显相关性;但在随访半年以上的B-ALL中,治疗效果好组（完全缓解无复发）Notch1阳性表达率为21.4%,效果差组（死亡或复发）Notch1阳性表达率为80.0%,两者比较差异有统计学意义（P < 0.05）。结论　Notch1在儿童AL中的异常表达与免疫分型关系密切。Notch1蛋白在B-ALL中虽然表达率不高,但可能是预后不良的因素。     

儿童急性白血病SODD和P65蛋白的表达及临床意义

目的 探讨儿童急性白血病SODD和P65蛋白的表达及其临床意义。 方法 2004年3~11月采用免疫组化SABC法，检测华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科住院急性白血病(AL)患儿骨髓涂片中SODD、P65蛋白表达。 结果 33例AL中，SODD和P65表达阳性率分别为54.5%(18/33)和45.5%(15/33)，与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05)；25例急性淋巴细胞白血病(ALL)中，SODD和P65表达的阳性率分别为56.0%(14/25)和48.0%(12/25)，与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05)。ALL高危病例组中SODD阳性表达率为75.0%(12/16)，较标危病例组阳性率高，差异有显著性(P<0.05)。33例AL患儿中SODD和P65均为阳性12例，均阴性16例，表达一致符合率为84.8%(28/33)，两者的表达呈正相关(P<0.01,r=0.69)。 结论 SODD和P65均参与了AL的发生发展；SODD过表达与儿童ALL的发生、临床分型以及预后均有密切关系。     

儿童急性淋巴细胞白血病Bcl-2基因表达及其临床意义

目的探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)Bcl-2基因表达与临床的相关性。 方法青岛大学医学院附属医院儿科2000年10月至2001年10月利用细胞原位杂交技术，检测了30例ALL患儿不同时期Bcl-2mRNA阳性表达， 探讨其与ALL发生、治疗反应、疗效等的关系。 结果93.3%(28/30)ALL患儿有Bcl-2mRNA阳性表达，正常对照组均无表达；经1周泼尼松治疗后，细胞凋亡指数均升高，低表达组升高明显，外周血WBC下降明显；第19d骨髓检查，低表达组完全缓解率高，为90.5%(19/21)，而高表达组仅为33.3%(3/9)；动态观察10例ALL患儿，发现5例高危型患儿表达始终在较高水平，有3例在1年内出现中枢神经系统白血病，2例骨髓复发。 结论ALL患儿普遍存在Bcl-2mRNA表达，Bcl-2基因参与ALL发生；Bcl-2mRNA表达水平与泼尼松治疗反应关系密切，泼尼松治疗1周可作为化疗敏感试验；Bcl-2mRNA表达水平与第19d骨髓完全缓解率有明显相关性，高表达者完全缓解率低；动态检测Bcl-2mRNA表达水平可作为化疗敏感性的指标，指导临床采用个体化的化疗方案，同时可为临床判断预后提供可靠依据。     

Survivin在儿童急性白血病中的表达和P53的相关性及其临床意义

目的探讨Survivin在儿童急性白血病(AL)中的表达及其与抑癌基因P53的相关性，同时观察Survivin与急性淋巴细胞白血病(ALL)临床分型的关系。方法应用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)方法，检测华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科2004年1~7月收治的37例儿童AL骨髓细胞Survivin和P53的表达，对照组为10例非恶性血液病且骨髓正常患儿。结果在37例AL患儿中，Survivin蛋白表达阳性率为35.14%，P53表达阳性率为32.43%，显著高于正常骨髓组织(P均<0.05)，Survivin和P53表达呈强相关性(P<0.05)，Survivin在高危(HR)ALL患儿的表达为46.15%，在标危(SR)ALL患儿的表达为0，差异有显著性意义(P<0.05)。结论(1)Survivin在儿童AL中异常表达，且与ALL的临床分型有关，提示其在判定儿童ALL预后中有意义；(2)抑癌基因Ｐ53的失活与Survivin的表达可能在AL发生中起协同作用。 Abstract Objective To investigate the expression of Survivin in pediatric acute leukemia and its relationship with expression of P53 and clinical significance.Methods The expression of Survivin and P53 proteins were detected by immunohistochemical assay in 37 acute leukemia children.The control included 10 children with normal bone marrow.Results Survivin protein expression rate was 35.14% and P53 protein expression rate was 32.43% in 37 AL children.Both of them were significantly higher than that in control group (P<0.05).The expression of Survivin and P53 being strongly related (P<0.05).The expression rate of Survivin was 46.15% in HR ALL and 0% in SR ALL,the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion (1)Survivin protein expression rate is abnormal and is associated with the clinical typing of ALL.It may play an important role in the prognosis of ALL.(2)Expression of Survivin and de activation of anti oncogene P53 might play synergetic roles in the process of genesis of AL. Key words Survivin;P53;Children;Acute leukemia     

耐药相关基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 通过测定多药耐药基因（ＭＤＲ１,多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）,肺耐药相关蛋白（ＬＲＰ）和谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ－π）的卵巢癌组织中的表达,了解其在卵巢癌化学治疗耐药中的作用。方法 采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）测定了４１例卵巢癌,２５例良性卵巢肿瘤和１２例正常卵巢组织中ＭＤＲ１,ＭＲＰ,ＬＲＰ和ＧＳＴ－π的表达,并分析其与临床,病理特征的关系。结果 （１）在正常卵巢,良性卵巢肿瘤     

细胞周期相关因子cdt1在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达

目的研究儿童急性淋巴细胞白血病中细胞周期相关因子cdt1蛋白及mRNA的表达情况。 方法2005 08—2006 03中南大学湘雅二院儿科以16例首次诊断且未治疗的急性淋巴细胞白血病患儿为实验组，以16例正常儿童为对照组，采集其静脉血进行淋巴细胞分离，采用免疫组织化学染色法检测cdt1蛋白在2组中的表达，采用RT PCR法检测cdt1 mRNA在2组中的表达情况。采用SPSS11.5软件进行数据分析。 结果实验组cdt1蛋白表达高于对照组；实验组cdt1 mRNA表达高于对照组；对照组cdt1蛋白有表达，但其相应的mRNA不表达。 结论急性淋巴细胞性白血病细胞cdt1过度表达，可能参与儿童急性淋巴细胞白血病的发生发展；正常淋巴细胞cdt1存在蛋白与其相应的mRNA表达不一致的现象。     

儿童急性白血病外周血Th17细胞表达及其临床意义分析

摘要：目的　探讨辅助性T细胞17（Th17）细胞表达与儿童急性白血病的发生发展及疾病状态的关系。方法　将2008年8月至2009年12月在华中科技大学同济医学院附属协和医院儿科住院的42例急性白血病患儿分为未缓解组（A组,23例）和缓解组（B组,19例）。18名健康儿童作为对照组（C组）。采用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测各组外周血单个核细胞（PBMC）刺激培养上清液中白细胞介素-17（IL-17）和白细胞介素-23（IL-23）的水平,利用流式细胞术分析PBMC中CD4+ IL-17+细胞的比例。结果　A组和B组IL-17和IL-23均低于C组,差异有统计学意义（P < 0.05）,A组IL-17低于B组,差异具有统计学意义（P < 0.05）,但两组IL-23差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。A组和B组Th17的比例均低于C组,且A组Th17低于B组,差异均具有统计学意义（P均< 0.05）。结论　Th17细胞可能通过分泌IL-17参与了儿童急性白血病发生及病情发展,其水平高低部分反映白血病的疾病状态。     

儿童急性白血病细胞周期蛋白D3、E的表达

目的 探讨细胞周期蛋白D3、E的表达与儿童急性白血病(AL)的关系。方法 采用免疫组织化学法，对广西医科大学第一附属医院儿科2002年1月至2004年5月收治的50例初发或复发儿童AL，其中急性淋巴细胞白血病(ALL)30例(高危ALL 12例，标危ALL 18例)，急性非淋巴细胞白血病(ANLL)20例，和26例完全缓解AL(AL CR)患儿，以及23例同期住院的非恶性疾病患儿(对照组)，检测其骨髓细胞中细胞周期蛋白D3、E的表达情况。结果 AL组中细胞周期蛋白D3、E阳性率分别为54%和46%，高于AL-CR组和对照组(P<0.01)；在ALL和ANLL间差异无显著性(P>0.05)。高危ALL细胞周期蛋白D3阳性率明显高于标危ALL(P<0.01)。化疗前细胞周期蛋白D3、E表达阳性率明显高于化疗缓解后(P<0.01)。细胞周期蛋白D3、E在AL组中的表达呈正相关(r=0.298，P<0.01)。结论 细胞周期蛋白D3、E与儿童AL发病有关，它们的表达存在相关性，可作为疗效观察的指标；细胞周期蛋白D3可能与患儿不良预后有关。 Abstract Objective To investigate the relationship between the expression of cyclin D3，cyclin E and childhood acute leukemia(AL).Methods The expression of cyclin D3 and cyclin E was detected in bone marrow cells from 50 cases of newly diagnosed or relapsing AL，in whom there were 30 cases of acute lymphoblastic leukemia(ALL，including 12 cases of high risk ALL and 18 cases of standard risk ALL ) and 20 cases of acute non lymphocytic leukemia(ANLL)，26 cases of complete remission AL(AL CR) patients and 23 cases of control group(no malignant disease) using immunohistochemical assay.Results 54% AL cases were positive for cyclin D3，and 46% for cyclin E，both being remarkably higher than that of AL CR group and control group(P<0.01).There was no difference between ALL and ANLL in the expression of cyclin D3 and cyclin E(P>0.05).The positive expression of cyclin D3 was higher in high risk ALL than that in standard risk ALL(P<0.01).The expressions of cyclin D3 and cyclin E before chemotherapy were significantly higher than that after remission using chemotherapy(P<0.01).There was significantly positive correlation between the expression of cyclin D3 and cyclin E in AL (r=0.5298，P<0.01).Conclusion In childhood AL，the expression of cyclin D3 and cyclin E is quite high，which is related to the development of AL and might be index of treatment effect.There is positive relation between cyclin D3 and cyclin E.Cyclin D3 might be related to poor prognosis. Key words Acute leukemia;Cyclin;Immunohistochemistry     

上皮性卵巢癌组织中金属硫蛋白与肺耐药蛋白的表达及意义

目的　探讨上皮性卵巢癌中金属硫蛋白 (MT)及肺耐药蛋白 (LRP)的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化SP法及半定量分析方法 ,检测 1995～ 2 0 0 1年上皮性卵巢癌 6 4例 ,复发后二次手术癌组织 17例 ,卵巢良性上皮性肿瘤 16例及正常卵巢组织 14例中MT及LRP的表达 ,并进行相关临床病理因素分析。结果　MT在上皮性卵巢癌中的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织 (P <0 0 1) ,MT表达与细胞分级和腹水相关 ;在上皮性卵巢癌中LRP的阳性率为 78 1% ,与卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织相比差异有显著性意义(P <0 0 1) ;化疗后癌组织中MT的阳性表达率和LRP的强阳性表达率与初治卵巢癌组织中相应的表达率差异有显著性意义 ;MT与LRP表达存在相关性 ,两者同时表达者术后生存时间短 ,易于复发。结论　MT、LRP在上皮性卵巢癌中较恒定表达 ,化疗可以增加癌组织中MT、LRP的表达。联合检测MT、LRP可预测卵巢癌的铂类联合化疗疗效 ,是判断其预后的可靠指标     

Daxx和NF-κB在儿童急性白血病中的表达及其相关性

目的探讨Daxx在儿童急性白血病(AL)骨髓细胞中的表达及其与NF-κB的相关性，同时观察其与AL临床分型和预后的关系。 方法骨髓涂片取自华中科技大学同济医学院附属同济医院2005—2006年收治的AL患儿和骨髓正常的非恶性血液病患儿,应用免疫组织化学链霉素 亲和素-生物素-过氧化酶复合物(SABC)方法检测50例儿童AL骨髓细胞Daxx和NF-κB的表达，对照组为20例非恶性血液病且骨髓正常患儿。 结果在50例AL患儿中，Daxx和NF-κB蛋白阳性表达率分别为38.0%和56.0%，显著高于正常骨髓组织中的表达(P<0.05)；Daxx与NF-κB表达呈强 相关(P<0.05)；急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿高危组Daxx和NF-κB的表达率分别为55.6%和77.8%，标危组分别为0和16.7%，两组之间差异均有 显著性(P<0.05)。 结论Daxx、NF-κB在儿童AL中过度表达，在白血病细胞凋亡和增殖的调控过程中可能起协同作用，且与AL的某些临床特征、疗效和预后密切相 关。     

肺耐药蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的 :探讨肺耐药蛋白 (lungresistanceprotein ,LRP)在原发性上皮性卵巢癌(POEC)组织中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化SP法检测POEC 6 4例、经化疗后二次手术癌组织 2 3例以及良性卵巢肿瘤 2 1例石蜡标本中LRP的表达 ,并分析 6 4例POEC患者的临床病理资料。结果 :6 4例POEC组织中LRP阳性表达 5 3例 ,阳性率82 .8% ;2 3例化疗后癌组织中LRP阳性表达 2 3例 ,阳性率 10 0 % ;2 1例良性卵巢上皮性肿瘤中LRP阳性表达 7例 ,阳性率 33.3%。POEC中LRP的阳性表达率与良性肿瘤中表达率差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ;化疗后癌组织中LRP的阳性表达率与初治POEC中的表达率差异有显著性 (P <0 .0 5 )。POEC组织中LRP的表达与患者年龄、组织学类型、细胞分级、临床分期和术后肿瘤残存灶大小无关 (P >0 .0 5 ) ;POEC患者LRP阳性表达组近期化疗疗效明显低于阴性表达组 (P <0 .0 5 ) ;但POEC患者LRP表达与患者术后生存时间无关 (P >0 .0 5 )。结论 :LRP在POEC组织中有较恒定的表达 ,化疗可增加POEC组织LRP表达 ,检测LRP可预测化疗近期疗效 ,指导临床化疗方案的选择。     

髓系抗原阳性儿童急性淋巴细胞白血病临床特点及预后

目的分析髓系抗原阳性儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床特点及预后关系。 方法根据国际白血病欧洲协作组(EGIL)标准将1999—2004年上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心收治的33例髓系抗原阳性表达的ALL (My+ALL)分为双表型、双系列型给予正规治疗。对其预后进行观察。 结果(1)My+ALL患儿，双表型26例(78.8%，26/33)，其中B系ALL伴髓系表达17例(65.4%，17/26)，T系ALL伴髓系表达6例(23.1%,6/26)，T系B系 伴髓系表达3例(11.5%,3/26)。双系列ALL患儿7例(21.2%,7/33)。(2)26例双表型ALL患儿治疗35d，缓解率80.7%。7例双系列型ALL仅1例达缓解 (14.3%)。(3)生存状态：双表型26例中20例处于缓解状态(76.9%)，双系列型7例中仅1例(14.3%)。(4)复发情况：双表型6例复发(23.1%，6/26) ，双系列7例中6例复发(85.7%)。 结论髓系抗原阳性表达在儿童ALL时不能作为预后不良的因素，但双系列白血病患儿预后差，复发率高，长期生存机会少。     

儿童急性淋巴细胞性白血病中枢神经系统浸润的防治

目的通过对中枢神经系统白血病(CNSL)的防治，预防和降低白血病的髓外复发机会，提高儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)的长期生存。 方法1999~2003年上海市新华医院对277例儿童ALL的诱导治疗期4~5次鞘内三联注射(甲氨蝶呤、阿糖胞苷、地塞米松)，巩固期后采用大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)24h静脉连续滴注，进入维持后，每3个月1次，总共8~9次，以后改为鞘内注射3个月1次，直至化疗结束，对于超高危ALL患儿(白细胞计数>100×109/L、Ph1染色体阳性)采用头颅照射加鞘内注射。 结果277例ALL患儿发生CNSL 9例，发生率为3.2%，9例CNSL中4例骨髓复发，5例存活，中位生存时间22.2个月。 结论CNSL的防治方法，明显降低了CNSL的发生率，使ALL患儿生存机会提高。发生CNSL的不利因素有高白细胞血症、T细胞性ALL、Ph1阳性染色体改变等。     

FLAG方案治疗儿童难治性及复发 急性髓细胞白血病8例疗效探讨

目的　评价应用FLAG方案治疗儿童难治及复发急性髓细胞白血病的疗效及毒性反应。方法　2004年4月至2011年6月,共8例难治及复发急性髓细胞白血病患儿在中山大学孙逸仙纪念医院儿科接受了FLAG方案治疗,对患儿的临床资料进行回顾性分析。结果　1个疗程后,完全缓解率为75%（6 /8）,部分缓解率为25%（2/8）,总有效率为100%。5例难治患儿中,3例达完全缓解,CR率60%,3例复发患儿均达完全缓解。该方案的主要毒副反应是感染、骨髓抑制和胃肠道反应。结论　FLAG方案是治疗儿童难治及复发急性髓细胞白血病一个选择,可为造血干细胞移植提供机会。     

三氧化二砷联合全反式维甲酸诱导治疗儿童急性早幼粒细胞白血病的临床研究

目的观察三氧化二砷(As2O3)联合全反式维甲酸(ATRA)诱导治疗儿童急性早幼粒细胞白血病(APL)能否提高疗效，及改善其毒副反应。 方法2000年2月至2005年1月于北京大学人民医院儿科就诊的初治APL患儿12例,观察经As2O3和ATRA联合治疗后的缓解情况、凝血功能恢复及毒副反应等；并与1994~2000年入院的11例单用ATRA治疗的初治APL患儿作对照。 结果(1)As2O3联合治疗组完全缓解率高于对照组，11例完全缓解(11/12)，缓解率为91.7%；对照组完全缓解8例，1例脑出血死亡，完全缓解率72.7%(8/11)。(2)联合治疗组凝血指标于治疗后(7.82±4.12)d恢复正常，对照组于治疗后(14.33±5.77)d恢复正常，差异具有显著统计学意义(P<0.01)。(3)联合治疗组胃肠道反应、肌肉疼痛、肝功异常发生率较对照组高，但都为轻度一过性改变；对照组肾功能异常、头痛发生率较高。(4)联合治疗组治疗后白细胞升高的峰值明显低于对照组，且白细胞增高持续时间亦较短。 结论As2O3联合ATRA治疗具有更高的诱导缓解率；能较快地改善凝血功能；无严重的不可逆毒副反应发生。     

CT检查在儿童白血病合并卡氏肺囊虫肺炎诊断中的价值

目的探讨儿童急性白血病合并卡氏肺囊虫肺炎早期诊断的方法。 方法2001年1月至2004年3月，天津市儿童医院对5例急性白血病和恶性淋巴瘤合并卡氏肺囊虫肺炎(PCP)患儿的临床表现、实验室检查、胸部X线平片及胸部CT检查资料进行分析，寻找可能的早期诊断的方法。 结果1例胸部平片表现无异常，而CT显示两肺细线状和网状影像。其余4例胸部平片表现异常，同期CT显示双侧肺叶病灶数目和范围均有所增多，主要为小叶间隔和小叶内间质增厚及支气管血管束增粗。 结论PCP患儿最初X线平片可显示正常，而CT改变的出现早于X线平片。胸部CT检查在白血病合并PCP的早期诊断中具有重要价值。     

儿童双表型白血病的临床特征及预后分析

目的分析儿童双免疫表型白血病的临床及生物学特征，评价儿童急性白血病双免疫表型与治疗相关因素及预后的临床重要性。方法自1998年1月1日至2003年5月31日进入XH 99治疗方案的所有新诊治的急性白血病(AL)患儿，诊断采用MICM分型诊断，治疗分别按AML XH 99、ALL XH 99危险度分类标准进行分层治疗。用流式细胞仪进行免疫表型分析，根据免疫表型结果将患儿分为4组，伴有/无髄系相关抗原表达的急性淋巴细胞白血病(My+ALL/My-ALL)以及伴有/无淋系相关抗原表达的急性髓系白血病(Ly+AML/Ly-AML)。生存分析采用Kaplan Meier方法；生存率之间的比较采用log rank检验；临床及生物学特征与治疗相关因素的分析采用χ2检验或Fisher精确概率法(双尾)。结果①174例提供免疫分型的ALL患儿中，My+ALL患儿34例，占19.54%，其与My-ALL组患儿除在B ALL组患儿达缓解时间有统计学差异外(P<0.05)，其它临床、生物学特征及治疗反应均无统计学差异(P>0.05)；两组患儿5年无事件生存(EFS)率分别为\[(61.76±8.33)%与(68.03±5.55)%\],log rank检验两组患儿5年EFS率无统计学差异(P=0.0526)。②74例提供免疫分型结果的AML患儿中，Ly+AML患儿18例，占24.32%，其与Ly-AML组患儿临床、生物学特征及治疗反应无统计学差异(P>0.05)；两组患儿5年EFS率分别为\[(39.82±13.59)%与(51.29±9.70)%\],log rank检验两组患儿5年EFS率无统计学差异(P=0.3164)。结论双免疫表型对儿童白血病预后无明显影响，可用同样现行的化疗方案治疗这部分患儿。     

基因标志物在急性白血病的应用

随着科学技术的发展,RT-PCR及实时定量PCR技术的普及,基因检测能够较为普遍的开展,现在对近年来研究较为深入的部分基因在白血病患者的表达及使用情况作一综述。