IL-1β诱导骨关节炎细胞模型中FSTL1蛋白的表达及意义

目的 探究卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)在人关节软骨细胞内的表达情况及意义。方法 采用IL-1β刺激人关节软骨细胞24 h建立细胞模型。免疫荧光技术检测FSTL1在正常人软骨细胞内的表达情况;Western Blot对IL-1β诱导的人关节软骨细胞FSTL1表达水平进行检测。结果 免疫荧光结果显示,在正常人软骨细胞内FSTL1蛋白表达广泛且主要分布在细胞质;Western Blot结果显示,IL-1β诱导的人软骨细胞中FSTL1蛋白表达与正常组相比显著减少（P<0.01）。结论 IL-1β诱导显著抑制人关节软骨细胞FSTL1蛋白表达,FSTL1可能是骨关节炎治疗的关键靶点。     

基于NLRP3/Caspase-1通路探讨针刀对兔膝骨关节炎软骨细胞的影响

目的 观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔软骨NLRP3/Caspase-1通路的调控作用及软骨细胞焦亡的影响。方法 选用24只新西兰兔雄兔,年龄均为6个月。使用随机数字表法将其分为3组,分别为空白组、模型组、针刀组,每组各8只。造模方法采用改良Videman法进行固定,造模时间为6周,空白组不予固定。针刀组选取经筋病灶点行针刀松解治疗,每周1次,共治疗3次;空白组和模型组正常饲养,行同样抓捕行为。采用HE染色观察软骨形态学改变;并检测软骨Caspase-1、NLRP3、ASC、IL-1βmRNA和蛋白的表达。结果 空白组软骨细胞均匀地分布在软骨基质中,表面相对光滑,层次结构较为清晰,潮线清晰完整。模型组软骨细胞数量较少,且分布状态较不均匀,表层出现缺损,潮线紊乱。与模型组相比,针刀组软骨表面较光滑,且软骨细胞分布较均匀,排列较规整,潮线较完整。与空白组比较,模型组软骨组织Caspase-1、NLRP3、IL-1β mRNA表达显著上调(P<0.05);与模型组比较,针刀组软骨组织Caspase-1、NLRP3、IL-1β mRNA表达显著下调(P<0.05)。与空白组比较,模...     

大黄素对膝骨关节炎大鼠软骨细胞铁死亡的影响及机制研究

目的 探讨大黄素对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞铁死亡的影响及其机制。方法 96只SD大鼠分为假手术(Sham)组、KOA组、大黄素(EMO)组、大黄素+Nrf2抑制剂(EMO+ML385)组,每组24只,除Sham组外,其余组均采用改良Hulth法构建KOA模型。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)水平;肉眼观察膝关节大体形态;番红O-固绿染色观察膝关节软骨组织病理形态学;原位末端标记(TUNEL)染色检测膝关节软骨细胞凋亡率;生化试剂盒检测膝关节软骨组织中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、亚铁离子(Fe²⁺)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹或免疫组化检测膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA或蛋白表达。结果 ...     

前列腺癌发生发展相关信号转导通路的研究进展

前列腺癌的发生与发展经历一系列复杂的过程,细胞内信号通路的异常是前列腺癌发生发展的重要机制之一。研究表明Hedgehog 信号通路、Wnt 信号通路、Notch 信号通路和MAPK 信号通路与前列腺癌的发生、浸润、转移等有密切关系。本文就现阶段与前列腺癌发生发展相关的信号转导通路的研究进展作一简要综述,以期为临床早期诊断和防治前列腺癌提供新的靶点和参考。     

炎性因子及信号通路在膝骨关节炎中的研究进展

膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)是骨伤科的常见病、多发病,已成为医学界的热点和难点。随着KOA研究的不断深入,炎性因子及相关信号通路在KOA发病机制中的作用逐渐被认识,已成为探索KOA发病机制的突破口。本文从炎症及相关信号通路的角度对KOA病理机制进行综述,发现与KOA相关的致炎因子主要有白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-17(interleukin-17,IL-17)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α);抗炎因子主要为转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)。与炎性反应关系密切并和KOA病理过程相关的信号通路,主要有NF-κB信号通路、JAK/STAT信号通路及Wnt信号通路。这些致炎因子通过激活相关信号通路,促进炎性反应的发生,炎性反应又加重骨及软骨的退变,最终导致KOA的发生并进一步加重。而抗炎因子通过拮抗致炎因子,降低...     

花椒治疗抑郁作用机制的网络药理学研究

目的 运用网络药理学预测花椒抗抑郁症有效成分的作用靶点及通路.方法 通过TCMSP数据库结合文献获取花椒有效成分,通过SwissTarget、Targetnet数据库获取花椒的作用靶点.GeneCards、OMIM、TTD数据库获取花椒治疗抑郁症的相关基因.运用STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络.通过Cyto...     

牛膝及其活性成分治疗骨关节炎的研究现状

牛膝在骨关节炎(OA)的治疗方面有较好的疗效。牛膝活性成分主要为牛膝皂苷、牛膝多糖和植物甾酮类成分(蜕皮甾酮、β-蜕皮甾酮),这些活性成分主要通过核因子-κB、丝裂原活化蛋白激酶、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B等信号通路,来抑制炎性因子产生、调节软骨细胞代谢、减少细胞外基质降解、抗氧化应激等,干预OA进展。本文对牛膝及其活性成分在OA治疗中的作用及可能的机制进行了综述,以期为相关的OA治疗新药研发提供方向和依据。     

子痫前期患者胎盘组织中MKP-1的表达及意义

目的：探讨MAPK磷酸酯酶-1（MKP-1）在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法检测60例子痫前期患者及30例正常妊娠妇女胎盘组织中MKP—1的表达。结果：正常妊娠组及轻、重度子痫前期组胎盘组织中MKP-1表达逐渐减弱,各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：子痫前期患者胎盘中MKP-1表达水平的变化导致胎盘滋养细胞凋亡与子痫前期的发病及病情发展有关。     

电针治疗对兔膝骨关节炎软骨的影响

目的：初步探讨电针对兔膝骨关节炎（osteoarthritis,OA）模型软骨细胞修复的影响及作用机制。方法健康新西兰大白兔（雄性）60只,随机分为正常对照组,模型组和电针治疗组,每组20只,模型组和电针治疗组均采用伸直位管型石膏固定左膝关节,正常对照组和模型组于喂养6周后取内侧髁软骨观察造模后相关指标变化,治疗组在进行电针治疗15 d后以同样方法观察治疗后相关指标改变情况：软骨细胞形态、蛋白多糖和胶原等基质含量变化。结果正常对照组左膝关节无明显关节积液;模型组左膝关节大部分出现关节积液;电针治疗组大部分动物出现关节积液及滑膜增生。正常对照组软骨表面平整;模型组软骨表层出现溃烂缺失,甲苯胺蓝染色明显减退;电针治疗组软骨细胞数明显增多,甲苯胺蓝染色轻度减退。模型组软骨结构,软骨细胞和潮线完整性评分与电针治疗组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。正常对照组Mankin＇s甲苯胺蓝评分与模型组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）,模型组与电针治疗组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论采用伸直位管型石膏固定法制作兔膝OA模型能较好地模拟OA 的发病过程。电针能有效治疗膝OA,有利于软骨细胞的修复。     

滑膜在骨关节炎发病中的作用研究进展

骨性关节炎是常见的关节疾病,致残率高。滑膜因素在骨性关节炎发展过程中起重要的作用,本文就滑膜在骨关节炎中的作用研究进展予以阐述。     

桦木酸调控LncRNA MFI2-AS1对骨关节炎软骨细胞损伤的保护作用

目的:探讨桦木酸对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对LncRNA MFI2-AS1的调控作用.方法:白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的桦木酸处理细胞,MFI2-AS1小分子干扰RNA(si-MFI2-AS1)及其阴性对照(si-NC)转染至软骨细胞后加入IL-1β处理细胞...     

基于网络药理学及生物信息学探讨防风治疗骨关节炎的物质基础及作用靶点研究

摘要：目的:运用网络药理学及生物信息学方法探讨防风治疗骨关节炎的物质基础及作用靶点。方法:通过相关数据库获得了防风的活性成分、预测靶点以及骨关节炎相关基因,并对有效成分-疾病交集靶点进行了蛋白互作、网络构建和富集分析;同时从基因表达综合数据库（GEO）中获得人骨关节炎的差异基因,进行通路富集,以验证防风作用于骨关节炎的可能通路。最终将可能有效成分与潜在靶点进行分子对接验证。结果:通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）,筛选获得了防风中18种有效成分,共对应82个靶点。通过Gene Cards数据库筛选,获得了2 496个骨关节炎相关基因,最终得到52个有效成分-疾病交集靶点。GEO数据集分析后得到688个骨关节炎的差异基因。最终预测防风中的汉黄芩素可能通过蛋白激酶Bα（AKT1）作用于磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）通路以调节骨关节炎。结论:本研究探讨了防风治疗骨关节炎可能的活性成分及靶点,为研究防风治疗骨关节炎机制提供了理论基础。     

不同阻断剂在人绒毛滋养层细胞中p38MAPK信号传导通路的作用

目的 针对三种不同的阻断剂在人绒毛滋养层细胞中p38MAPK信号传导通路的作用进行比较,探讨人绒毛滋养层细胞受阻断剂对其侵袭性的影响程度.方法 分别对阻断剂影响EMMPRIN表达的程度采用RT-PCR及Western blot方法分别进行观察.人绒毛滋养层细胞在浓度不同佛波酯作用下,对其中p38MAPK活性变化采用ELISA方法进行检测,人绒毛滋养层细胞侵袭作用采用trans well细胞侵入系统进行检测,将浓度不同的p38 MAPK抑制剂加入其中,对阻断剂影响人绒毛滋养层细胞侵袭性的效果进行观察.结果 p38MAPK抑制剂分别由5、10、15及20 μmol·L-1浓度持续24h作用后,对EMMPIRN分别达到7.4％、24.5％、31.7％及39.2％的的抑制率;p38MAPK抑制剂10μmol· L-1浓度进行24h培养后,能够对EMM PRIN基因和蛋白表达具有21.5％的抑制率,培养48h与72h可分别达到45.5％和75.9％的抑制率.分别采用佛波酯0.1、1、10 μmol·L-浓度加入培养细胞中持续30min作用,采用时间剂量依赖方式将p38MAPK激活,p38MAPK抑制剂采用时间剂量依赖方式对佛波酯激活p38MAPK进行抑制.结论 在人绒毛人绒毛滋养层细胞中EMMPRIN表达中体现出p38MAPK信号传导途径,该通路对于侵袭人绒毛滋养层细胞的行为具有重要作用,p38MAPK抑制剂在防治子痫前期-子痫中将发挥重要作用.     

Hsulf-1在肝癌细胞系中的作用及STAT3信号通路研究

目的基于肝癌细胞中人硫酸酯酶-1(human sulfatase-1,Hsulf-1)基因对STAT3信号通路的影响,探讨Hsulf-1基因在肝癌发生发展中的作用。方法应用RT-PCR方法测定Hsulf-1在肝癌细胞中的表达;通过Western blot方法测定Huslf-1在HGF加入前后对STAT3磷酸化(p-STAT3)水平及下游蛋白的影响。结果 5-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-d C和曲古抑菌素Actrichostain A,TSA)处理Hep G2细胞中Hsulf-1表达增加,且2者具有协同作用;与正常细胞相比,Hsulf-1在肝癌细胞系中(Hep G2,Hep3B,Huh-7,SMMC-7221)表达水平下降,在转染pc DNA3.1(+)/Hsulf-1以及pc DNA3.1(+)/STAT3siRNA-Hsulf-1中的Hep G2细胞,Hsulf-1的蛋白表达量增加,p-STAT3和c-met的表达水平下降,在未转染组以及转染阴性siRNA的Hep G2细胞中,结论则相反。结论 Hsulf-1在肝癌细胞中表达下降;Hsulf-1在肝癌细胞中可抑制由HGF刺激的p-STAT3及下游蛋白的表达水平。     

基于网络药理学方法分析落新妇苷干预骨关节炎的作用机制及实验验证

目的通过网络药理学预测落新妇苷治疗骨关节炎的潜在机制,并通过实验进行验证。方法从PubChem获得落新妇苷分子化学式C₂₁H₂₂O₁₁,通过PharmMapper和Swiss Target数据库筛选出与落新妇苷相关的靶点;在GeneCards、TTD、Disease Gene Search Engine 3个数据库筛选出与骨关节炎疾病密切相关的靶点基因;将落新妇苷-靶点基因和骨关节炎-靶点基因的网络合并,筛选出共同作用靶点,导入String数据库,导入Cytoscape进行可视化分析;将靶点基因上传到DAVID（https://david.ncifcrf.gov/）进行基因功能和KEGG通路富集分析。建立白细胞介素（IL）-1β诱导的人软骨细胞模型,造模同时给予落新妇苷低、高质量浓度（12.5、25.0 μg/mL）干预,CCK8法检测药物干预1、2、3 d软骨细胞活性;Western blotting法和实时荧光定量RCR法检测药物干预24 h后肿瘤坏死因子（TNF）-α和G1/S-特异性周期蛋白-D1（CCND1）蛋白和mRNA表达。结果通过挖掘数据获得377个与落新妇苷相关的潜在靶点和2 758个骨关节炎的潜在基因;对网络进行对接,获得43个潜在靶基因,随后构建PPI网络;关键基因为TNF、癌基因同源物（HRAS）、肿瘤标志物热休克蛋白90α（HSP90AAS）、淀粉样蛋白前体蛋白（APP）和CCND1;关键通路为AGE/RAGE信号通路、肿瘤聚糖信号通路、MAPK信号通路、P13K-AKT信号通路、细胞增殖、凋亡等。与模型组比较,落新妇苷低、高质量浓度组人软骨细胞吸光度（A_{450 nm}）值均显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）,TNF-α蛋白和mRNA表达均显著降低（P<0.05）,CCND1蛋白和mRNA表达均显著升高（P<0.05）。结论落新妇苷可能通过直接作用于STAT1、STAT3、RAS等靶点,干预AGE/RAGE通路,从而调节TNF-α和CCND1的表达,进而促进软骨细胞的增殖和抑制炎症因子的产生。     

整合素α5β1在Hartley豚鼠自发性骨关节炎关节软骨退变中的作用研究

目的 观察豚鼠原发性骨关节炎(OA)模型中疾病进展的相关病理改变,探究整合素α5β1对OA的关节软骨退变的初步作用,为OA的治疗提供参考。方法 选取3周龄的SPF级Hartely雌性豚鼠24只,进行1周的适应性喂养并记录初始体重后对其进行编号,然后采用随机分配法将24只豚鼠分为基线组、对照组、ATN-161治疗组、盐水治疗组4组,每组6只。其中基线组豚鼠在实验开始时处死,对照组豚鼠正常饲养3月龄时处死,ATN-161豚鼠在正常饲养3个月后开始予以ATN-161腹腔注射1 mg/(kg·3 d)直至3个月后处死,生理盐水治疗组豚鼠在正常饲养3个月后开始予以生理盐水腹腔注射1 mg/(kg·3 d)直至3个月后处死。取所有处死豚鼠的膝关节软骨标本,对其进行苏木精-伊红(HE)染色,观察并使用Mankin评分评估软骨退变程度;记录免疫组织化学染色分析力学传导分子(整合素α5β1)、氧化应急指标观察[基质金属蛋白酶(MMP)-13]以及细胞凋亡指标(Bax、bcl-2)在软骨中的表达情况。结果 HE染色组织学和Mankin评分结果显示,对照组豚鼠在3月龄时即发生了OA样改变,并且随着月龄的增长...