左旋四氢巴马汀对大鼠海马脑片缺氧损伤电生理的影响

目的 在海马脑片水平观察左旋四氢巴马汀(L-tetrahydropalmatine,L-THP)对脑组织缺氧后及恢复给氧早期突触功能的影响.方法 大鼠离体海马脑片以人工脑脊液孵育,观察缺氧后海马CA1区诱发群峰电位(population spike,PS)开始减小的时间和消失时间,缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)出现时间、出现率和保持时间,复氧后PS的恢复率和恢复程度等指标并观察L-THP对这些指标的影响.结果 L-THP(0.028,0.14,0.28 mmol·L-1)组脑片PS减小时间、消失时间与缺氧组相比后延,并有显著差异(P＜0.05),但其作用强度随剂量递减.缺氧组脑片平均在658.8 s出现HIP,L-THP 0.028 mmol·L-1组,0.14 mmol·L-1组和0.28 mmol·L-1组脑片出现时间分别推迟为1 152.4和851.1,723.5 s,与缺氧组相比均有显著差异(P＜0.05).各组的HIP出现率分别为100%,33.3%,67.0%,83.3%.复氧30 min后,氧-葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)组的恢复率为8.33%,恢复程度为19.8%.在L-THP组(0.028,0.14,0.28 mmol·L-1),PS的恢复率分别为92%、75%和33.3%,恢复程度分别为82.5%,70.4%和58.6%,与对照组比有非常显著的差异(P＜0.01).结论 L-THP能减缓缺氧时PS幅度的降低速度,减轻和防止脑片突触功能的不可逆损伤,提高脑片的耐缺氧能力,但随着剂量增加而作用减弱.     

左旋硝基精氨酸对缺氧加强氯化钾收缩离体猪冠状动脉的影响

左旋硝基精氨酸（Ｎｉｔｒｏ－Ｌ－Ａｒｓｉｎｉｎｅ，ＮＬＡ）２００μｍｏｌ／Ｌ几乎阻断缺氧加强氯化钾（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）收缩离休猪冠状动脉的作用，并可轻度加强氯化钾收缩反应．左族精氨酸（Ｌ－Ａｒｓｉｎｉｎｅ）２０００μｍｏｌ／Ｌ可部分对抗ＮＬＡ抑制缺氧加强氯化钾的收缩反应，并完全逆转ＮＬＡ加强氯化钾的收缩反应．硝普钠（ＳｏｄｉｕｍＮｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ，ＳＮＰ）０．１，１和１０μｍｏｌ／Ｌ可浓度依赖性地抑制缺氧加强氯化钾收缩反应和氯化钾收缩离休猪冠状动脉的作用。     

改良的新生大鼠海马脑片缺氧缺糖模型的制备方法

目的:介绍一种经济实用的海马脑片缺氧缺糖模型的制备方法.方法:选出生8～10 d的SD乳鼠,分离大脑海马,切成400μm厚的脑片,转至带有Millicel微孔膜插件的培养皿中.分别培养7 d、14 d、20 d和30 d.倒置显微镜观察形态.碘化丙啶(Propidiumiodide,PI)染色后荧光显微镜下检测脑片活力.充入氮气于不同时相点观察脑片缺氧状况.结果:①培养7 d和14 d的脑片中所有细胞PI染色呈阴性,培养30 d时脑片中部分神经元PI染色阳性,细胞变性坏死.②充入氮气时间越长,海马脑片的死亡细胞越多.③充入氮气1.5 h后正常培养24 h可观察到海马脑片CA1、CA3、DG均出现强荧光显色.结论:脑片存活时间约30d,充入氮气1.5 h可建立稳定的缺氧缺糖模型.     

缺氧预适应对小鼠海马脑片LTP的影响

目的:观测缺氧预适应对小鼠海马脑片LTP的影响.方法:小鼠缺氧0次(H0)、1次(H1)、4次(H4)后取海马组织,制备成离体海马脑片,刺激海马CA3区Schaffer侧枝,在CA1锥体细胞层记录各组LTP.结果:H1组海马CA1区LTP诱出率最低,H0、H4组诱出率均高于H1组.H0和H4组小鼠海马脑片在高频强直串刺激后PS增幅的百分率和fEPSP斜率增幅的百分比变化均显著高于H1组(P＜0.01).H0组与H4组差异无统计学意义(P＞0.05).结论:缺氧抑制LTP的诱导,缺氧预适应可以恢复对LTP的诱导,突触可塑性的变化可能参与缺氧预适应小鼠脑保护.     

硝基左旋精氨酸对大鼠睡眠及动脉血压的影响

采用多导描记技术分别观察了硝基左旋精氨酸和左旋精氨酸腹腔注射对大鼠睡眠及动脉血压的影响。结果：Ｌ－ＮＮＡ显著抑制慢波睡眠和快眼动睡眠，使动脉血压升高。     

Nω硝基左旋精氨酸甲酯对大鼠海马CA1区毛细血管的影响

目的 探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响.方法 内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5 μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham组)每日给予5μL生理盐水侧脑室注射,持续4周.然后用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆能力,用试剂盒检测海马组织中NOS活性及NO含量,用体视学方法测定海马和海马CA1区总体积、海马CA1区毛细血管总长度、总表面积和总体积.结果 水迷宫实验中L-NAME组的潜伏期显著长于Sham组(P =0.006);L-NAME组海马组织中的NOS活性及NO含量均显著低于Sham组(P＜0.01);L-NAME组海马体积、CA1区体积与Sham组比较差异无统计学意义(P＞0.05);L-NAME组CA1区毛细血管总长度、毛细血管总表积、毛细血管总体积均较Sham组显著减少(P＜0.05).结论 L-NAME可以导致大鼠空间学习、记忆能力下降和大鼠海马CA1区毛细血管总长度、总表面积以及总体积减少.     

丙泊酚对缺氧大鼠海马脑片诱发电位的影响

目的采用离体海马脑片缺氧模型,观察丙泊酚对缺氧大鼠海马脑片诱发电位的影响。方法用细胞外记录方法,电极刺激海马CA3区谢弗侧支,在CAl锥体细胞层记录诱发电位。观察丙泊酚对缺氧海马脑片诱发电位———顺向群峰电位(OPS)和缺氧损伤电位(HIP)的影响。大鼠海马脑片随机分为4组,每组8个脑片。缺氧组:脑片用缺氧无糖的人工脑脊液(ACSFOGD)灌流14 min,实施缺氧过程;药物组分为P1、P5和P15组:在ACSFOGD灌流液中分别含1,5和15μmol.L-1的丙泊酚。结果缺氧组OPS消失时间为(186±26)s,在缺氧10 min左右,均出现HIP,持续时间为(113±16)s;恢复供氧后,OPS恢复率和恢复幅度分别为25%和(30±23)%。与缺氧组相比,P5及P15组OPS消失时间向后推迟,OPS恢复率和恢复幅度都有增加;并且HIP出现率下降,其出现时间明显延后、持续时间显著增加。而P1组各项指标与缺氧组相比,无明显差异。结论丙泊酚能改善缺氧海马脑片细胞外记录电生理指标,提示对脑缺氧损伤有保护作用。     

银杏内酯对大鼠海马脑片缺血性损伤的保护作用

目的 :研究银杏内酯对海马脑片缺血性损伤的保护作用及其与剂量的关系。方法 :电刺激离体海马脑片诱发顺向群峰电位 (orthodromic population spikes,OPS)的方法 ,观察不同浓度的银杏内酯对缺血条件下 OPS变化的影响。结果 :银杏内酯 (37.5 mg/10 0 m l) OPS恢复幅度和恢复率分别为 (5 4 .8± 4 8.2 ) %、5 7.2 % ,与对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。而且银杏内酯组 OPS恢复幅度与其浓度呈正相关。结论 :银杏内酯对海马脑片缺血性损伤具有保护作用 ,并与浓度呈正相关     

二甲亚砜对大鼠海马脑片谷氨酸毒性损伤的保护作用

目的：研究二甲亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ,ＤＭＳＯ）对海马脑片谷氨酸（ｇｌｕｔａｍｉｃ ａｃｉｄ,Ｇｌｕ）兴奋毒性损伤的保护作用。方法：在离体海马脑片灌流液中加入Ｇｌｕ造成兴奋性毒性损伤,用电生理记录技术观察ＤＭＳＯ对海马脑片顺向群峰电位（ｏｒｔｈｏｄｒｏｍｉｃ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ,ＯＰＳ０的影响。结果：去除Ｇｌｕ １ｈ后,ＤＭＳＯ（５ｍｌ／Ｌ）组ＯＰＳ恢复幅度和恢复     

复方人参制剂抗脑薄片缺氧作用

目的:用整体动物和离体海马脑片实验研究复方人参制剂的抗脑缺氧作用.方法:(1)在密闭三角烧瓶中观察小白鼠缺氧存活时间;(2)在大鼠离体海马脑片上观察缺氧过程中缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)的出现率及缺氧后诱发顺向群峰电位(orthodromic population spike,OPS)的恢复率和恢复程度.结果:(1)小白鼠缺氧存活时间(min):正常对照组26.44±4.58,用药组48.46±16.80,用药组显著延长(P<0.001);(2)对照组OPS恢复率20%,恢复程度30.2±36.6%,HIP发生率80%;人参制剂组OPS恢复率100%,恢复程度84.90±35.0%,未出现HIP.与对照组比较,OPS恢复显著,HIP发生率显著降低(P<0.05).结论:实验用复方人参制剂有明显的抗脑缺氧作用,其作用机制可能是人参降低神经元的兴奋性,减少能耗,从而减轻脑损伤.     

钒酸钠对缺氧大鼠海马脑片突触体膜磷酸酪氨酸蛋白及神经元损伤的影响

目的　研究酪氨酸蛋白磷酸酶 (PTP)抑制剂钒酸钠对缺氧海马突触体膜 (synapticplasmamembranes,SPM)磷酸酪氨酸蛋白 (p -tyr-pr)含量及神经元损伤的影响。方法　采用大鼠海马脑片体外缺氧模型 ,建立了p-tyr-pr测定的ELISA法 ,观察了PTP抑制剂钒酸钠对缺氧大鼠海马脑片突触体膜中p -tyr-pr含量及脑片孵育上清液中乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量的影响。结果　缺氧引起SPM中p -tyr -pr含量下降 ;缺氧前 15min加入钒酸钠 ,则p -tyr-pr显著增加 ,同时LDH漏出量明显升高 ,且其漏出量增加与钒酸钠浓度呈剂量依赖关系。结论　蛋白酪氨酸磷酸化的增加可能起加重缺血性脑损伤的作用。     

牛磺酸对锰致原代培养海马神经元细胞氧化应激损伤的影响

目的：研究牛磺酸对锰引起的海马神经元细胞氧化应激损伤的影响。方法：采用原代培养方法,对大鼠海马神经元细胞进行原代培养后给予牛磺酸干预及染锰处理,用光学显微镜观察细胞形态学改变,MTT法测定细胞活力;荧光测定法检测细胞内活性氧族的生成和增加。结果：各牛磺酸干预组细胞生长活性均高于同级染锰剂量的染锰组;随着处理时间、染锰浓度的增加,细胞内氧化应激活性氧（ROS）含量均跟随增加;牛磺酸一定程度上可拮抗锰引起的原代培养海马神经元细胞氧化应激损伤。结论：牛磺酸对锰诱导的海马神经元细胞氧化应激损伤具有保护作用。     

糖皮质激素对大鼠离体海马神经元电活动的影响

为了分析糖皮质激素对神经系统快速作用的机制,我们首先建立了大鼠海马脑片细胞内记录的技术,然后观察糖皮质激素对海马CA_1、CA_2区神经元细胞膜电位和输入阻抗的影响。实验结果表明;糖皮质激素灌流1～2min即可使一部分海马神经元超极化,同时伴有输入阻抗升高的趋势。这些现象提示:糖皮质激素可以非基因形式作用于细胞膜,作用机制可能在于其改变了膜静息电位。     

一氧化氮合酶在百草枯中毒肾脏的表达及褪黑素对其的影响

目的 观察百草枯(paraquat,PQ)中毒肾组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达及褪黑素对其的影响,进一步探讨其病理生理机制.方法 SD大鼠126只随机分为正常对照组(A组)、PQ中毒组(B组)和褪黑素(melatonin,MT)治疗组(C组),每组42只.B、C组腹腔注射PQ(25 mg/kg),A组腹腔注射等量生理盐水,15 min后C组腹腔注射MT(10 mg·kg·d-1).观察肾组织病理学变化及iNOS表达.结果 ①A组大鼠镜下肾组织结构清晰,未见充血、水肿及空泡变性等病理变化;B组肾组织结构清晰度下降,中毒后3 h即可见充血、水肿及空泡变性等病理变化,1 d达顶峰,其后缓解趋势不明显;C组病理变化明显减轻且缓解趋势明显.②A组iNOS多不表达,少数标本可有皮质部肾小管上皮细胞、肾小球内皮细胞胞浆弱表达.B组中毒后3 h在皮质部肾小管上皮细胞及肾小球内皮细胞的胞浆中表达增加,随时间延长明显增强,1 d达高峰,其后维持较强表达水平;C组亦出现表达,但表达水平较B组降低,1 d达高峰,其后减弱,3 d后维持在较低水平,5 d时所有标本仍均有表达,6 h～5 d差异有统计学意义(P<0.05).结论 iNOS参与了PQ中毒肾损伤的发病过程; MT对PQ中毒肾组织有保护作用,其可能是通过抑制iNOS起作用,但其调节途径尚需进一步探讨.     

热休克预处理对小鼠烧伤的保护作用及机制初探

观察热休克预处理对小鼠烧伤的保护作用。结果发现经热休克（肛温４２℃，１５ｍｉｎ）预处理后小鼠对烧伤的抵抗力明显增强，表现为烧伤后４８ｈ内小鼠存活率和心肌组织中过氧化氢酶活性明显高于对照组，而硫代巴比妥酸反应物质则低于对照组。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳表明，热处理可能导致多种热休克蛋白合成增加。其保护机制可能与热休克诱导的热休克蛋白表达及其抗氧自由基作用有关。     

银杏叶提取物抗大鼠肾缺血/再灌注损伤的实验研究

目的:探讨银杏叶提取物(EGb)能否诱大鼠肾脏表达HO-1并减轻其缺血/再灌注损伤。方法:采用切除右肾,夹闭左肾动脉50min/再灌注24h的动物模型。32只雄性Wistar大鼠随机均分为4组:假手术组、缺血再灌注(I/R)组、EGb组(术前24h腹腔注射EGb20mg/kg)、EGb ZnPPⅨ组(EGb20mg/kg ZnPPⅨ45μmol/kg),检测肾组织中HO-1蛋白表达及HO-1活力、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)和血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及肾组织形态学改变。结果:①EGb明显诱导肾内HO-1表达并使其活力增加(P<0.01);②同假手术组比较,I/R组Cr、BUN、MDA升高(P<0.05),TAOC降低(P<0.05),肾组织损伤严重,I/R前用EGb诱导HO-1表达可逆转上述病理改变(P<0.05),用HO的抑制剂ZnPPⅨ可部分抑制EGb的保护作用。结论:EGb通过诱导肾内HO-1表达,可明显改善大鼠的I/R性肾损伤,其作用机制可能同HO-1增强肾组织抗氧化能力有关。     

复方高原春颗粒对缺氧脑损伤CAI区Fos蛋白表达的影响

目的研究中藏药高原春颗粒对缺氧脑损伤CAI区Fos蛋白表达的影响。方法利用缺氧脑损伤模型,通过免疫组织化学方法,观察24 h缺氧结束时及复氧后24 h两个时段大脑海马CAI区Fos蛋白表达的变化,同时观察预防性应用高原春颗粒后对上述指标的影响。结果缺氧后大脑海马CAI区Fos蛋白表达减少,而服用高原春颗粒后,缺氧大脑海马CAI区Fos蛋白表达有一定程度的增加。结论中藏药复方高原春颗粒的抗缺氧作用可能与影响大脑海马CAI区Fos蛋白表达有关。