柱前衍生反相高效液相色谱法测定贝类中氨基酸含量

建立了贝类中18种氨基酸的柱前衍生反相高效液相色谱分析法。以2,4-二硝基氯苯作为柱前衍生剂,流动相为醋酸盐缓冲溶液和乙腈,梯度洗脱。采用C18柱分离,紫外检测器检测。对氨基酸衍生条件和水解条件进行了优化。18种氨基酸的工作曲线的相关系数范围为0.9915～0.9991;相对标准偏差在0.9%～4.6%之间;检出限为0.24～2.37μg/mL;加标回收率88.6%～115.7%。结果表明本方法无干扰,操作方便,灵敏度较高,可用于贝类中氨基酸的含量检测。      

柱前衍生反相高效液相色谱法测定贝类中氨基酸含量

建立了贝类中18种氨基酸的柱前衍生反相高效液相色谱分析法。以2,4-二硝基氯苯作为柱前衍生剂,流动相为醋酸盐缓冲溶液和乙腈,梯度洗脱。采用C18柱分离,紫外检测器检测。对氨基酸衍生条件和水解条件进行了优化。18种氨基酸的工作曲线的相关系数范围为0.9915～0.9991;相对标准偏差在0.9%～4.6%之间;检出限为0.24～2.37μg/mL;加标回收率88.6%～115.7%。结果表明本方法无干扰,操作方便,灵敏度较高,可用于贝类中氨基酸的含量检测。     

OPA-FMOC柱前衍生反相液相色谱法测定氨基酸含量

采用邻苯二甲醛一氯甲酸芴甲酯(OPA-FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定样品中氨基酸含量,以HypersilC18为分析柱,采用荧光检测器,17min内16种氨基酸完全分离。分离效果,重现性,线性范围均令人满意。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定新疆特色食品馕中氨基酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HCLP)测定新疆特色食品馕中17种氨基酸含量的检测方法。方法通过优化酸水解参数,并以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯为衍生试剂,用乙腈为流动相A,水为流动相B,磷酸盐缓冲液溶液为流动相C进行梯度洗脱,柱温37℃条件下用AccQ-Tag色谱柱(3.9 mm×150 mm, 4μm)进行分离,采用反相-高效液色谱法荧光检测器(激发波长250 nm、发射波长395 nm)进行测定。结果当取样量为100 mg、水解液加入体积为10 mL、水解温度为115℃、水解时间为24 h时,水解效果最好。17种氨基酸线性回归方程的相关系数在0.9985以上(n=3),检出限为0.011~0.058mg/L,回收率为81.6%~116.2%,相对标准偏差为0.41%~6.94%(n=3)。结论该方法操作简单、灵敏度高、线性关系和回收率好,适用于新疆特色食品馕中氨基酸含量的测定。     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定栾果及黄山栾果中的氨基酸含量

为了解郑州地区栾果和黄山栾果中氨基酸的种类及含量,利用异硫氰酸苯酯（PITC）作为柱前衍生剂,采用二元梯度洗脱,在柱温30℃、紫外检测器254nm条件下用柱前衍生-反相高效液相色谱进行测定。结果表明,栾果和黄山栾果中含有17种氨基酸,总氨基酸质量分数分别为15.57%和17.53%。加标回收率在80.5%～115.7%,平均回收率为93.86%;两种样品含有7种人体必需氨基酸,所含氨基酸中谷氨酸含量最高,栾果中组氨酸含量最低,黄山栾果中异亮氨酸含量最低。该法简便、准确,测定结果令人满意,为野生资源栾果的开发利用提供科学参考。      

AccQ-Tag柱前衍生反相高效液相色谱法测定谷物及食糜中氨基酸含量

用AccQ-Tag法测定不同谷物及食糜中氨基酸的含量,并优化原料与酸解剂的比例。采用内标法定量,6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生剂,用反相高效液相色谱仪,2475荧光检测器（激发波长250nm、发射波长395nm）,Waters AccQ-Tag Nova-PakTMC18柱（3.9mm×150mm,4μm）,柱温37℃,以醋酸钠（pH4.95）缓冲液为流动相A,纯乙腈为流动相B,水为流动相C进行梯度洗脱,进样量为10μL。结果发现,5mg原料的最优酸解剂为500μL;17种氨基酸线性回归方程在25～500μmol/L范围内线性良好（胱氨酸（Cys）浓度在12.5～250μmol/L之间）,相关系数r为0.9996～0.9999,测定的平均回收率为97.56%～103.92%（n=3）,相对标准偏差为0.31%～2.75%（n=3）。本法快速简便,能够适用于谷物及食糜中氨基酸含量的测定。     

柱前衍生-反相高效液相色谱法研究稻谷中有机硒形态

建立了稻谷中有机硒化合物测定方法,采用温和水解富硒大米蛋白的提取条件,利用柱前衍生―反相高效液相色谱测定水解大米蛋白中有机硒含量。结果表明:采用6 mol/L HCl溶液、50℃水解富硒大米蛋白48 h的条件提取率高。以4–氯–3,5–二硝基三氟甲苯(CNBF)为衍生剂的柱前衍生―反相HPLC检测富硒大米中有机硒化合物主要是硒代甲硫氨酸(SeMet),最低检出限为0.14μmol/L,线性范围为0.40⁴80μmol/L,加标回收率为89.9%480μmol/L,加标回收率为89.9%⁹0.8%,硒代甲硫氨酸含量为4.122μg/g,占有机硒含量65.29%。该方法简便、灵敏、重现性好、干扰少,可为稻谷中有机硒测定提供一种完善检测方法。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定 草本水杨梅叶中氨基酸含量

目的采用柱前衍生反相高效液相色谱法对草本水杨梅叶中氨基酸进行测定。方法样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,与草本水杨梅叶中氨基酸柱前衍生,采用Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-水(80:20,V:V),B为乙腈-三水合乙酸钠缓冲溶液(7:93,V:V,p H 6.5),梯度洗脱;柱温35℃,流速1.0 m L/min,检测波长为254 nm。结果 20种氨基酸在0.039~1.250 mmol/L内呈良好的线性关系(r20.9996)。20种游离氨基酸平均回收率在96.51%~108.06%之间,RSD在0.36%~2.08%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在95.29%~102.13%之间,RSD在0.85%~2.45%之间(n=6)。结论该方法可用于草本水杨梅中氨基酸的检测,其灵敏度高且准确,具有良好的重复性及稳定性。     

柱前在线衍生-反相高效液相色谱法测定羊胎盘

目的：建立一种采用反相高效液相色谱法测定羊胎盘枸杞胶囊中16种氨基酸的含量。方法：样品中的蛋白质在6mol/L盐酸溶液中水解为氨基酸,其中一级氨基酸用邻苯二甲醛(OPA)、二级氨基酸用9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)进行柱前在线衍生;用Agilent Hypersil AA-ODS柱(200mm×2.1mm,5μm)分离;用流动相(0.16%醋酸钠)进行梯度洗脱;经荧光检测器(FLD)检测(激发波长：340nm,发射波长：450nm;15min时,激发波长：266nm,发射波长：305nm)。结果：16种氨基酸在5pmol/ul～250pmol/ul浓度范围内呈现良好的线性关系(r:0.99959～1.00000)(n=5),平均加标回收率(n=9)为91.6%～104.1%,相对标准偏差(RSD)为0.9%～3.7%,最低检测限为0.4pmol～1.2pmol。结论：该方法灵敏度高,具有良好的精密度与准确度,可以有效地控制产品质量。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定狭叶红景天中氨基酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定狭叶红景天中游离及水解氨基酸种类及含量。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(V:V)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(V:V)的乙腈-CH_3COONa溶液(pH=6.5);检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.0019~2.700mmol/L内呈良好的线性关系(r~20.9990)。游离氨基酸平均回收率在97.80%~116.82%之间,RSD在1.93%~2.47%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在99.26%~111.23%之间,RSD在1.70%~2.23%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合对狭叶红景天中氨基酸含量的测定。     

OPA-FMOC柱前衍生化HPLC法测定两种常用食用菌中蛋白氨基酸和非蛋白氨基酸的含量

本文研究了两种常用食用菌-香菇、金针菇中蛋白氨基酸(PPA)及非蛋白氨基酸(NPPA)的组成及含量,并对其进行营养、呈味评价。采用OPA-FMOC柱前衍生化法确定香菇、金针菇中PAA及NPAA的组成及含量。测定结果表明香菇中含有15种PAA,其含量为10.99 mg/g,含有2种NPAA,其含量为2.37 mg/g,其中必需氨基酸(EAA)含量为4.39 mg/g、呈味氨基酸(FAA)含量为5.40 mg/g;金针菇中含有14种PAA,其含量为16.79 mg/g,含有2种NPAA,其含量为3.99 mg/g,其中EAA含量为5.98 mg/g、FAA含量为9.96 mg/g。本文建立的方法准确可行,可用于两种菌类中的PAA和NPAA测定。香菇中PAA种类多于金针菇,其中EAA种类多于金针菇,金针菇中的PAA、NPAA含量均高于香菇。金针菇营养价值高,味道鲜美,香菇营养价值均衡,为两种常用食用菌的产品再次开发提供依据。     

Free Amino Acids in Dark- and White-muscle Fish as Determined by O-phthaldialdehyde Precolumn Derivatization

ABSTRACT: Free amino acids in fish reflect microbial spoilage, and are precursors of biogenic amines, factors of health concern and indicators offish decomposition. The objective of this research was to quantify levels of free histidine, lysine, ornithine and glutamine, which may become originators of highly undesirable histamine, cadaverine and putrescine in fish tissue. Liquid chromatography using o-phthaldialdehyde (OPA) pre-column derivatization, gradient elution and a C18 column were used for separation. Histidine was higher in white tissue of mahi-mahi and tuna than in red tissue. No significant difference in lysine levels was found between the two tissues of tuna. Glutamine and ornithine were higher in red tissue of mahi-mahi and tuna. Red snapper had higher levels of lysine than histidine.     

柱前衍生高效液相色谱法测定贝类产品中氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法,测定了3种贝类中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等17种氨基酸含量。衍生试剂为6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC),流动相为醋酸盐-磷酸盐缓冲溶液、乙睛、水,梯度洗脱。色谱柱为AccQ·Tag(Waters)氨基酸分析柱,紫外检测。结果显示,氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性范围10～80μmol/L,检出限为0.23μmol/L,相关系数均在0.998以上,相对标准偏差RSD在2.1%～4.8%之间,回收率在91.3%～113.2%之间。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生RP-HPLC法同时测定莲雾中15种游离氨基酸的含量

采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定莲雾果实中15种游离氨基酸含量的方法。采用Atlantis T3柱为固定相,以0.1 mol/L乙酸钠缓冲液(pH6.5,含0.5%三乙胺)和乙腈-水(4:1)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温35 ℃,紫外检测器波长254 nm。各氨基酸组分在2.0~500 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.99,检出限为0.08~0.35 mg/L,定量限为0.35~1.25 mg/L,加标回收率为85.61%~106.68%,相对标准偏差RSD均小于5%。该方法使得15种氨基酸很好的分离,且准确度和精密度好,灵敏度和回收率高,适用于莲雾果实游离氨基酸含量的分析。

     

柱前衍生RP-HPLC法测定肽藻营养粉中游离氨基酸的含量

本研究建立了柱前衍生化反向高效液相色谱法(RP-HPLC)测定肽藻营养粉中游离氨基酸的方法,并确认了肽藻营养粉中的氨基酸种类以及含量。通过研究确定了高效液相色谱法的最佳条件:流动相A:醋酸钠-三乙胺缓冲液(pH 7.20±0.05),加入0.5%四氢呋喃调节峰型;流动相B:醋酸钠缓冲液(pH 7.20±0.05)-乙腈-甲醇(20:40:40),以邻苯二甲醛(OPA)和氯甲酸芴甲脂(FOMC-Cl)为衍生剂,使用Agilent Hypersil ODS色谱柱(5μm,4.0×250 mm),柱温40℃,自动在线衍生,检测波长为338 nm/262 nm。利用该方法检测出17种氨基酸,其中包含8种必需氨基酸,另外结果显示17种氨基酸均呈现良好的线性关系(r0.9990),平均回收率为85%~115%(RSD为1.15%~5.23%,n=6)。10个批次样品中分别检测到至少15种游离氨基酸。表明该方法简便、准确且重复性好,适用于肽藻营养粉游离氨基酸含量测定。     

柱前衍生化HPLC法测定叶游离氨基酸成分及风味评价

建立柱前衍生化HPLC法测定柊叶游离氨基酸的方法,对其营养价值和风味进行评价。柱前衍生化HPLC法以异硫氰酸苯酯为衍生试剂,色谱条件为：C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,醋酸钠缓冲液-乙腈（93：7）和乙腈-水（4：1）为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长为254 nm。结果表明,18种氨基酸均呈现良好的线性关系（R²>0.9990）,柊叶游离氨基酸的平均回收率分别为98.3%~105.6%（RSD为0.63%~3.11%,n=6）。所建立的方法稳定、灵敏、重现性好,可用于柊叶游离氨基酸的定量分析。柊叶含有18种氨基酸及8种人体必需氨基酸,必需氨基酸总量为38.85%,接近于WHO/FAO模式值（40.0%）,各种必需氨基酸组分达到WHO/FAO氨基酸成人模式的需求;鲜味氨基酸和甜味氨基酸的含量分别为10.73和5.20 mg/g,占呈味氨基酸总含量的22.58%和46.59%;鲜味氨基酸Asp和甜味氨基酸Thr的含量较高,分别为3.75 mg/g和3.33 mg/g,鲜味氨基酸Asp和芳香族氨基酸Cys的RCT值分别为125.00和20.50,对风味贡献最高。总之柊叶氨基酸种类齐全,比例合理,呈味氨基酸含量丰富,具有极大开发价值。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定野芭蕉不同部位的18种氨基酸含量

氨基酸是构成蔬菜口感的主要成分,蔬菜品质与其成分和含量密切相关。为更好地开发野芭蕉资源,采用柱前衍生-高效液相色谱法测定野芭蕉芯、野芭蕉花、野芭蕉苞片的水解氨基酸组成。结果显示,野芭蕉3个部分均含18种氨基酸,总含量均大于33 mg/g,其中野芭蕉苞片的氨基酸总含量最高;野芭蕉3个部分均含8种必需氨基酸,野芭蕉芯和芭蕉苞片的必需氨基酸含量占总氨基酸含量的比例均大于37%;野芭蕉3个部分的甜味氨基酸与鲜味氨基酸总含量远高于苦味氨基酸含量,药用氨基酸含量占总氨基酸含量的比例均大于70%。野芭蕉含有丰富氨基酸,可以作为新资源食品开发。     

2,4-二硝基氟苯柱前衍生HPLC检测树莓中游离氨基酸

目的：建立一种简单、快速、可同时检测22 种氨基酸的色谱方法,并利用此方法对树莓中的游离氨基酸进行检测和分析,为树莓的开发提供科学依据。方法：以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生试剂,Hypersil ODS2色谱柱,流动相A为40 mmol/L pH 6.4乙酸钠溶液,流动相B为体积分数50%乙腈-水溶液,梯度洗脱,反相高效液相色谱,二极管阵列检测器,检测波长360 nm。结果：22 种氨基酸线性方程的相关系数范围为0.993 1～1.000 0,相对标准偏差在0.95%～4.98%之间,加标回收率为97.10%～103.39%,最低检出限为0.39～2.87 μg/mL,定量限为1.29～9.47 μg/mL。利用所建方法检测出树莓中含有14 种游离氨基酸,其中6 种人体必需氨基酸,占总氨基酸含量的29.36%。结论：所建方法操作简便、重复性好,树莓氨基酸含量丰富,有开发价值。     

高效液相色谱法同时测定糯米酒中17种氨基酸

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)用以测定糯米酒中的17种氨基酸。采用OPA试剂柱后衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测糯米酒中17种氨基酸的含量。结果表明,该方法测定17种氨基酸的线性相关系数R在0.9990～0.9998,平均回收率为94.5%～98.7%,精密度RSD为0.51%～1.90%。该方法专属性强、操作方便、灵敏度高,可用于糯米酒和花雕酒等黄酒中17种氨基酸含量的检测。     

碱性氨基酸影响肉品品质及机理的研究进展

肉及肉制品在加工和贮藏过程中会出现食用品质下降、营养功能降低等问题,寻求能够改善肉品品质的绿色健康改良剂具有重要意义和经济价值。碱性氨基酸可以作为NaCl以及NaNO₂等传统食品改良剂的替代物,在工业生产与应用中受到广泛关注。作者概述了碱性氨基酸对肉品的质构、色泽、嫩度的影响,并着重从影响蛋白质的溶解度、热聚集、凝胶性、氧化稳定性、调控蛋白酶活性等方面阐述了碱性氨基酸对肉品品质的作用机理,为碱性氨基酸在肉品中的应用和推广提供参考。