石榴籽多酚的体外抗氧化活性

目的:为拓展石榴籽开发用途,了解其多酚粗提物和纯化物的体外抗氧化活性作用强弱。方法:本实验采用有机溶剂浸提法提取石榴籽中的多酚物质并以有机溶剂萃取法进行纯化,采用ABTS法、邻苯三酚自氧化法、Fenton法和DPPH法测定了石榴籽粗提液及纯化液对ABTS自由基、羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除能力。结果表明,石榴籽中的多酚粗提液和纯化液对ABTS、DPPH自由基均有较强的清除能力,而对超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力较弱;多酚粗提液清除ABTS、DPPH自由基的IC₅₀值分别为37.13 191.82 μg/mL,多酚纯化液清除ABTS、DPPH自由基的IC₅₀值分别为29.11、143.26 μg/mL;纯化液对ABTS自由基、羟基自由基及DPPH自由基的清除能力强于粗提液。     

纤维素酶辅助超声法提取葛根多糖及其DPPH自由基清除能力

本文以柴葛根为原料,以纤维素酶辅助超声法提取葛根多糖的工艺并对其DPPH自由基清除能力进行研究。在单因素研究结果基础上,确定纤维素酶的用量、超声功率、超声时间和超声温度四因素三水平Box-Benhnken组合试验,优化多糖得率条件。结果表明:在纤维素酶用量6.0%,超声功率280 W,超声时间为52 min,超声温度65℃条件下,多糖得率为4.93%±0.02%,与预测值的误差在2%之内。酶辅助超声法提取的葛根多糖对DPPH清除自由基能力IC₅₀值为954.97 μg/mL,热回流法的IC₅₀值为1379.60 μg/mL,维生素C为131.07 μg/mL。因此,纤维素酶辅助超声法提取葛根多糖具有较强清除DPPH自由基活性,为葛根多糖的开发利用的IC₅₀值提供依据。     

响应面法优化超声辅助提取荠菜多酚工艺及其抗氧活性研究

采用超声辅助提取荠菜多酚,并利用响应面法对多酚的提取工艺进行了优化。在单因素实验的基础上,采用四因素三水平的响应面试验优化设计,考察乙醇浓度、提取时间、提取温度和料液比对荠菜多酚提取量的影响,结果显示最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为48%,超声提取时间为27 min,提取温度为57 ℃,料液比为1:33 (g:mL),得到多酚提取量的实验值为28.33 mg/g,与模型预测值(28.35 mg/g)相比,其相对误差为0.07%。通过体外自由基(·OH、O₂-·和NaNO₂)清除能力和还原能力评价了荠菜多酚的抗氧化性,结果显示荠菜多酚具有一定的自由基清除活性和还原能力,荠菜多酚的自由基(·OH、O₂-·和NaNO₂)半数抑制浓度(IC₅₀值)分别为(0.17±0.01) mg/mL、(0.08±0.01) mg/mL和(18.9±0.02) μg/mL。结论:荠菜多酚是一种天然的抗氧化活性剂和自由基清除剂。     

铜藻多酚的分离纯化及抗氧化活性研究

为研究铜藻多酚的分离纯化工艺及抗氧化活性。在超声辅助提取铜藻多酚的基础上采用大孔吸附树脂柱层析法分离纯化铜藻多酚提取物,以V_C为对照采用体外实验分析其抗氧化活性。结果显示:大孔吸附树脂LX-158具有最佳的吸附和解析条件,静态吸附和解析平衡时间为5 h,动态吸附和解析的最佳条件为:粗提液和洗脱剂流速为3 mL/min,上样体积为10 mL,洗脱剂为40%乙醇溶液,洗脱剂体积为120 mL。此条件下铜藻多酚纯度从7.52%提高到40.31%。体外抗氧化活性结果显示:不同浓度的铜藻多酚对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基有明显的清除作用和Fe³⁺还原力,随着多酚浓度增大其抗氧化能力增强,IC₅₀值分别为6.60μg/mL、75.70μg/mL、2.22 mg/mL、5.62 mg/mL。实验证明该纯化工艺可行且稳定,可以作为铜藻多酚纯化的工艺条件。     

火麻籽壳多酚不同提取工艺及其抗氧化性

采用8种不同方法提取火麻籽壳多酚,通过对比不同提取方法的提取率与提取物抗氧化活性,筛选出火麻籽壳多酚的最佳提取方法。采用大孔树脂对最佳提取工艺的多酚粗提物样品进行纯化,确定其纯化条件。结果表明:超声波辅助醇提法多酚提取率最高,多酚提取率为2.34 mg/g。不同提取方法所得多酚提取液对DPPH·和ABTS⁺·都有清除能力,其中超声波辅助醇提法所得样品在不同浓度水平均表现出较强的自由基清除能力。纯化火麻籽壳多酚的最佳树脂为X-5,其吸附率和解吸率分别为74.5%和44.5%,乙醇解吸液浓度为90%。纯化后多酚对DPPH·和ABTS⁺·的清除能力与样品浓度之间存在量效关系,其IC₅₀值分别0.38 mg/mL和0.10 mg/mL,纯化后的火麻籽壳多酚具有较高的抗氧化活性。     

栓皮栎橡子果仁多酚抗氧化与抑菌活性研究

采用溶剂萃取秦巴山区栓皮栎橡子果仁,大孔树脂分离纯化、紫外光谱分析、红外光谱分析、高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)分析栓皮栎橡子果仁多酚的成分组成,DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率等、抑菌圈直径研究了其抗氧化活性及抑菌特性。结果表明:栓皮栎橡子果仁粗多酚得率为20.5%,其多酚含量为345 mg/g没食子酸当量,经D4020大孔树脂纯化后多酚得率为34%,多酚含量提高至702 mg/g没食子酸当量;紫外光谱分析、红外光谱分析表明其结构中均具有酚羟基、羰基和芳烃C=C骨架等结构;HPLC分析纯化的橡子果仁多酚至少含有28种物质,其中包括咖啡酸、原儿茶酸、鞣花酸、阿魏酸、槲皮素和山奈酚6种多酚物质,含量分别为24.9、14.6、3.2、2.2、0.5、0.2 mg/g;橡子果仁纯多酚及对照V_C清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为2.50、3.20 μg/mL,清除ABTS+自由基IC₅₀值分别为28.67、28.82 μg/mL,ABTS+自由基清除能力与V_C相当,对Fe3+还原能力与V_C差异较小,但对亚铁离子螯合能力远低于EDTA-2Na,抗脂质过氧化能力与V_C相当,说明栓皮栎橡子仁多酚具有较强抗氧化能力;栓皮栎橡子仁粗多酚、纯多酚均对阪崎杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及大肠杆菌具有较强抑制作用,对李斯特菌的抑制作用较弱。研究结果表明栓皮栎橡子果仁多酚含量丰富,其多酚具有较强抗氧化性和广谱抑菌活性,是开发保健品和天然抗菌剂的良好材料。     

香芋皮多酚的超声提取工艺优化及其抗氧化活性

为了对香芋进行高效利用,以香芋加工副产物香芋皮为原料,采用超声波辅助提取香芋皮多酚,在单因素试验基础上结合正交试验方法对香芋皮多酚提取条件进行优化,并初步评价其体外抗氧化活性。结果表明,香芋皮多酚最佳的提取工艺为:超声功率400 W,乙醇浓度45%,料液比1:55 g/mL,超声时间35 min,此条件下香芋皮中多酚得率达到(23.61±0.36)mg/g。抗氧化活性实验表明,在最佳条件下提取得到的香芋皮多酚具有一定的还原能力,20.0 μg/mL的香芋皮多酚还原能力为0.4431±0.0027,并且其对DPPH自由基和ABTS自由基清除作用均表现出良好的清除效果,相应的IC₅₀值分别为(5.6647±0.2545)和(36.3630±2.4013)μg/mL,说明香芋皮多酚具有较强的抗氧化活性。     

静乐黑枸杞花青素的纯化及其抗氧化特性

目的:探讨静乐黑枸杞花青素的纯化工艺及其抗氧化活性。方法:比较HPD100、D101、NKA、AB-8、HPD400等五种树脂对静乐黑枸杞花青素的吸附与解析性能,筛选最佳树脂,并优化其纯化条件;采用DPPH自由基、OH自由基和ABTS自由基法,比较黑枸杞样品纯化前后的抗氧化活性。结果:HPD100大孔树脂对于静乐黑枸杞花青素有良好的纯化性能,适宜的工艺条件为:静乐黑枸杞粗提液上样浓度为0.2 mg/mL（含生药量）、上样体积为49 mL、洗脱剂为75%的乙醇溶液、洗脱剂用量42 mL,在此条件下,纯化后花青素的纯度由2.38%提高至17.82%。静乐黑枸杞具有较好的抗氧化能力,其粗提液和纯化液清除DPPH·的IC₅₀ 值分别为0.208 和0.011 mg/mL;对ABTS+·清除能力的IC₅₀ 值分别为0.476 和0.064 mg/mL;纯化液清除·OH 的IC₅₀ 值为6.24 mg/mL。结论:大孔树脂吸附法分离纯化静乐黑枸杞花青素工艺合理,且纯化后抗氧化活性明显提高。     

超声波—大孔树脂联用提取富集追风七总黄酮及其清除自由基活性研究

采用超声波法提取、大孔树脂富集纯化追风七总黄酮,并测试其清除自由基活性能力。以液料比、乙醇浓度、超声功率、超声温度、超声时间为自变量,总黄酮提取量为因变量,采用单因素试验和响应面设计优化提取工艺;以总黄酮的吸附量和解析率为评价指标,考察纯化追风七总黄酮大孔树脂的吸附性和洗脱参数;采用清除DPPH自由基活性评价追风七中总黄酮的抗氧化能力。结果表明:超声提取追风七总黄酮的最佳工艺为:超声功率300 W、乙醇浓度45%、液料比161(mL/g)、超声时间102min,超声温度73℃,在该条件下总黄酮提取量为17.02mg/g;AB-8树脂富集纯化追风七总黄酮最佳工艺条件为:树脂柱径高比16,上样质量浓度为0.5g/mL,上样量为20mL(2BV),乙醇体积分数40%,洗脱液用量60mL(6BV)。纯化后总黄酮保留率达83.3%,精制倍数达4.5倍,总黄酮含量达61%。清除自由基试验结果表明:总黄酮纯化物的IC50明显小于总黄酮提取物,略大于VC,其DPPH自由基清除IC50值为57.4μg/mL,其IC50大小顺序为VC总黄酮纯化物总黄酮提取物。     

微波超声协同提取白刺果原花青素工艺及抗氧化性研究

本实验以白刺果为原料,采用单因素结合响应面法对微波超声协同提取白刺果原花青素工艺进行优化,并以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、羟自由基和总还原能力评价其抗氧化活性。结果表明,乙醇浓度、液料比、微波时间和超声温度对白刺果原花青素得率的影响明显,优化后的工艺条件为乙醇浓度65%,液料比14.5 mL/g,微波时间2 min,超声温度50 ℃,白刺果原花青素得率平均值为（17.289±0.402）mg/g,与理论预测值相差2.4%,说明由该模型优化的最佳提取工艺条件稳定可靠,具有实际应用价值。利用大孔树脂对提取物进行纯化后的纯度达到81.4%。体外抗氧化试验结果表明,白刺果原花青素不仅具有良好的还原能力,对ABTS自由基和DPPH自由基均具有较强的清除能力,IC₅₀分别为0.261 mg/mL和0.159 mg/mL,对羟自由基也具有一定的清除能力,IC₅₀为0.712 mg/mL。因此,微波超声协同能够明显地提高提取效率,且白刺果原花青素具有较强的体外抗氧化活性,为全方位利用白刺资源提供科学参考。     

香菇多酚超声波提取工艺及抗氧化性分析

以干香菇为原料,乙醇溶液作为提取溶剂,在单因素试验的基础上,结合响应面法优化了香菇多酚的提取工艺,并采用大孔树脂吸附法对香菇多酚进行分离纯化,通过体外试验来评价其抗氧化活性.试验结果表明,香菇多酚的最佳工艺参数为乙醇浓度50％、提取温度74℃、料液比1∶42 (g/mL)、超声功率146 W,在此条件下,香菇多酚得率为...     

刺果番荔枝叶多酚提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本试验选用原料为刺果番荔枝叶,使用乙醇溶剂提取其中的多酚类物质,分别比较乙醇体积分数、提取温度、液料比、提取时间4个要素对多酚提取量的影响,并采用响应面法中的Box-Benhnken中心组合试验确定最优提取工艺。采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)法研究刺果番荔枝叶多酚抗氧化活性,比较在最优工艺条件下提取的刺果番荔枝叶多酚与抗坏血酸的清除能力。结果表明:乙醇体积分数55%、液料比50:1 (mL/g)、提取时间96 min、提取温度60 ℃时,多酚提取量最大,达到(20.37±0.34) mg/g。刺果番荔枝叶多酚对DPPH自由基、羟自由基(·OH)的半抑制浓度(IC₅₀)分别为133.33、264.65 μg/mL,样品在试验范围内的最大清除率分别为(51.34%±2.68%)、(52.50%±2.29%)。综上表明,刺果番荔枝叶多酚具有较好的抗氧化能力。     

新疆红肉苹果多酚的纯化、组成分析与抗氧化活性

本文以新疆红肉苹果为原料,在超声辅助提取红肉苹果多酚的基础上筛选大孔吸附树脂纯化多酚提取物,用高效液相色谱分析纯化后多酚的组成,并以V_C为对照采用体外试验分析其抗氧化活性。结果表明,在5种大孔树脂中NKA-Ⅱ树脂对新疆红肉苹果多酚的吸附和解析效果最好,其静态吸附与解析平衡时间分别为6和10 h;动态吸附和解析试验的最佳纯化工艺为:上样浓度为0.8 mg/mL,上样流速为4.0 BV/h,上样体积为3.5 BV,洗脱液乙醇的浓度为75%;在此条件下,纯化后的新疆红肉苹果多酚的纯度由原来的35%提高至84%。高效液相色谱分析确定纯化后的新疆红肉苹果多酚主要含有10种单酚类物质,其中绿原酸的含量最高(123.15 μg/mL),其次是槲皮苷和原花青素B₂(25.28、21.96 μg/mL)。体外抗氧化试验结果表明,不同浓度多酚对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子均具有明显的清除作用,清除率分别达到93.99%(0.1 mg/mL)、99%(0.8 mg/mL)、98%(0.4 mg/mL),并且对脂质过氧化具有明显的保护作用。该试验结果为进一步研究红肉苹果多酚的抗癌活性奠定了基础。     

美藤果壳多酚物质的提纯及其抗氧化性

以美藤果壳为主要原料,用乙醇提取法提取美藤果壳多酚,考察乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间对美藤果壳多酚得率的影响。在单因素试验的基础上,进行正交试验优化提取工艺参数后,通过大孔树脂纯化粗提物,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定其中主要多酚物质,并利用Fenton体系和1,1-二苯基-2-苦苯肼(DPPH·)体系测定其提取成分的抗氧化活性,并与特丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ)、维生素C(vitamin C,VC)、丁基羟基甲苯(butylated hydroxytoluene,BHT)进行对比。结果表明:影响美藤果壳多酚得率的4个因素中,影响程度为:提取温度>乙醇浓度>料液比>提取时间。最佳工艺:提取温度90℃,乙醇浓度70%,料液比1∶55(g/mL)和提取时间2.0 h,此时的多酚得率为4.79%。美藤果壳多酚主要为没食子酸、芦丁、儿茶素、单宁和异槲皮苷,对羟自由基和DPPH自由基的清除作用均优于TBHQ、VC、BHT,半数清除浓度分别为5.86×102μg/mL和7.51μg/mL。     

柠檬桉树皮单宁的提取纯化及抗氧化活性

采用溶剂法对柠檬桉树皮中的单宁进行提取,用大孔吸附树脂法纯化粗提物,考察了不同纯度单宁的总抗氧化性以及对DPPH·和·OH自由基的清除能力。结果表明,提取柠檬桉树皮中单宁的最佳工艺条件为提取温度60℃、提取时间150 min、乙醇体积分数40%、料液比1:50 g·mL-1,此条件下单宁得率为13.67%。大孔吸附树脂纯化的最佳工艺参数为:以HPD826树脂为吸附树脂,上样流速1.0 mL/min,上样浓度1.33 mg/mL,洗脱流速1.0 mL/min,乙醇洗脱剂体积分数50%;乙酸乙酯萃取物、大孔树脂纯化物、萃余相经大孔树脂纯化物、萃取相经大孔树脂纯化物的纯度分别为39.91%、47.97%、72.43%、76.90%;乙酸乙酯萃取物的总抗氧化性最大,为单宁酸的116.88%;当质量浓度为10 μg/mL时各纯度单宁对DPPH·清除率达到最大,分别为62.53%、65.11%、58.80%、69.37%、79.63%;当浓度为1.0 mg/mL时,对·OH清除率达到最大,分别为83.08%、70.55%、77.53%、65.37%、77.46%。结论表明:乙酸乙酯萃取物、萃取相过大孔树脂纯化物、大孔树脂纯化物和粗提物的抗氧化能力较强,萃余过大孔相树脂纯化物的抗氧化能力较弱。     

辣木籽多酚的分离纯化研究

辣木籽多酚已经被证明有极好的抗氧化功能,为了更好的研究辣木籽多酚的生物活性及理化性质,对提取出的粗提物进一步的分离和去除杂质非常有必要。本研究对超声辅助提取的辣木籽多酚经一步纯化,测定了五种不同类型的大孔树脂中辣木籽多酚的吸附率、解吸率,筛选出分离纯化辣木籽多酚的最佳大孔树脂,采用静态、动态吸附解吸实验研究辣木籽多酚分离纯化的适宜条件。结果表明:D-101大孔树脂效果最好并确定最优的吸附,解吸条件为:样品液pH为5,上样液浓度为3mg/mL,洗脱液为80%的乙醇溶液,上柱流速为2mL/min,洗脱流速为2mL/min,在此条件下得到的辣木籽多酚的纯度由10.37%提高到32.29%。纯化效果明显,对辣木籽多酚的分离纯化提供了指导意义。     

芒果皮渣多酚的提取分离及抗氧化活性分析

以芒果皮渣为原料,通过单因素实验优选粗多酚的提取方法和工艺参数;采用不同极性有机溶剂萃取粗多酚,筛选多酚含量最高的组分,并通过HPD100型大孔树脂分离纯化;进一步,采用LC-Q-TOF-MS法对纯化组分初步定性并比较了不同溶剂萃取相和纯化组分的体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助法对芒果皮渣多酚的提取效果较好,最佳提取条件为:乙醇浓度80%、浸提时间1.5 h、浸提温度60℃、超声功率250 W、液料比30:1 mL/g,在此条件下,多酚得率为9.68%;乙酸乙酯相所得多酚含量最高,达到254.41 mg/g;从树脂纯化组分中共鉴定出17种化合物,主要包括黄酮、黄酮醇、酚酸和鞣质等,具有优异的抗氧化活性,其清除DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的IC50值分别为0.191×10-3 mg/m L、0.081 mg/mL、0.43 mg/mL和0.63mg/m L。表明乙酸乙酯相中的纯化组分是深入挖掘芒果皮渣抗氧化功效的物质基础。     

梨幼果多酚的纯化及其抗氧化性

采用5种大孔吸附树脂分离纯化梨幼果多酚,并测定其抗氧化性。结果表明,综合分析吸附与解吸效果,NKA-9大孔树脂性能较好,最适合用来纯化梨幼果多酚;NKA-9大孔树脂对梨幼果多酚进行纯化时,最适宜的条件为:将2 mg/m L的多酚提取液调至p H值为5.0,设定进样流速为1 m L/min,充分吸附,然后用70%的乙醇为洗脱液进行动态洗脱,洗脱流速为1 m L/min,用此方法纯化后的梨幼果多酚的纯度从6.23%提高到30.68%;梨幼果多酚粗品对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radicals,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)radicals,ABTS~+·)、亚硝酸基的IC50值分别为:151.07、152.48、490.35μg/m L;梨幼果多酚纯品对DPPH自由基、ABTS~+·、亚硝酸基的IC_(50)值分别为:122.12、130.78、392.09μg/m L;纯化后的多酚样品抗氧化能力比粗品有所增强。     

青藏高原狭果茶藨子黄酮纯化工艺及抗氧化活性研究

以青藏高原产的狭果茶藨子为原料,研究其黄酮纯化工艺及抗氧化活性。通过静态吸附试验对D101、D218、D315、HPD-600、AB-8这5种大孔树脂进行筛选,考察上样浓度、上样量、上样流速以及洗脱剂浓度、洗脱流速对狭果茶藨子黄酮吸附和解吸性能的影响,确定最佳树脂类型和纯化工艺条件;以羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除率和金属螯合能力为考察指标,评价纯化前后狭果茶藨子黄酮的抗氧化能力。黄酮纯化工艺研究结果表明:AB-8大孔树脂对狭果茶藨子黄酮的纯化效果较好,其对黄酮吸附率达93.01%,解吸率达73.54%;在上样浓度12 mg/mL、上样量40 mL、上样流速2.0 mL/min以及洗脱液乙醇浓度60%、洗脱流速2.0 mL/min条件下,狭果茶藨子黄酮纯度从6.09%提高到46.43%。抗氧化试验结果表明:狭果茶藨子黄酮有较强的羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除能力及金属螯合能力,经过AB-8大孔树脂纯化后其抗氧化活性显著增强,其中对DPPH自由基、羟自由基清除能力及金属螯合能力尤为突出,作用效果甚至强于同浓度下传统抗氧化剂Vc,其对DPPH自由基的清除率最高可达94.08%,金属螯合率最高达81.27%,说明狭果茶藨子黄酮具备开发成新型天然抗氧化剂的潜力。