胃气上逆病机的分子生物学机制研究

目的 :研究实验性呕吐状态下家猫机体病理生理学改变 ,为中医学“胃气上逆”病机理论提供实验依据。方法 :以分子生物学方法检测由化疗药物所诱发呕吐猫的血清、脑脊髓液、胃肠及脑组织中 5 -HT及 5 -HI AA含量改变。实验中发现 ,DDP后呕吐反应明显 ,猫的血、脑脊液、脑组织、胃及十二指肠组织中 5 -HT、5 -HI AA的含量均明显升高 ,可以认为中医学所论及的“胃气上逆”的现代医学病理学改变之一 ,是血、脑脊液中 5 -HT、5 -HIAA的浓度 ,脑组织、胃及十二指肠组织中 5 -HT、5 -HIAA的含量明显升高有着密切关系。结果 :观察到因化疗药诱发呕吐的猫 ,其血清、胃肠及脑组织中 5 -HT及 5 -HIAA含量明显高于对照组。结论 :胃气上逆的病理变化的机制之一 ,与血清、脑脊髓液、胃肠及中枢神经组织中 5 -HT及 5 -HIAA过量释放有关。     

胃气上逆病机的分子生物学机制研究

目的：研究实验性呕吐状态下家猫机体病理生理学改变，为中医学“胃气上运”病机理论提供实验依据。方法：以分子生物学方法检测由化疗药物所诱发呕吐猫的血清、脑脊髓液、胃肠及肠组织中5－HT及5－HIAA含量改变。实验中发现，DDP后呕吐反应明显，猫的血、脑脊液、脑组织、胃及十二指肠组织中5－HT、5－HIAA的含量均明显升高，可以认为中医学所论及的“胃气上逆”的现代医学病理学改变之一，是血、脑脊液中5－HT、5－HIAA的浓度，脑组织、胃及十二指肠组织中5－HT、5－HIAA的含量明显升高有着密切关系。结果：观察到因化疗药诱发呕吐的猫，其血清、胃肠及脑组织中5－HT及5－HIAA含量明显高于对照组。结论：胃气上逆的病理变化的机制之一，与血清、脑脊髓液、胃肠及中枢神经组织中5－HT及5－HIAA过量释放有关。     

止吐合剂防治化疗药诱发呕吐的药效学研究

目的 :探讨中药复方防治化疗药诱发呕吐的中枢神经机制。方法 :应用电生理与化学分析相结合的方法 ,比较对照组、NS组、中药组实验动物静脉注射DDP前后不同时间段 ,血、脑脊液中DDP浓度、脑脊液、脑组织中的 5 -HT、5 -HIAA含量变化。结果 :注射DDP后与NS组比较 ,中药组猫的呕吐次数明显减少 ;与此同时中药组脑脊液中DDP浓度明显低于NS组 ,脑脊液及脑组织中 5 -HT和 5 -HIAA浓度较NS组显著降低。结论 :中药复方能够降低猫血脑屏障对化疗药DDP的通透性 ,抑制DDP进入中枢神经系统的量 ;降低脑脊液、脑组织 5 -HT、5 -HIAA含量 ,进而防治DDP所致的呕吐发生     

呕必宁对顺铂所致脑组织5-HT含量变化的影响

目的：探讨中药复方呕必宁防治化疗药诱发呕吐的中枢机制。方法：应用行为学与分子生物学的方法，比较对照组、NS组、中药组实验动物静脉注射DDP前后，动物呕吐反应，血、脑脊液中DDP浓度，脑脊液、脑组织中的5-HT、5-HIAA含量变化。结果：注射DDP后与NS组比较，中药组猫的呕吐率下降；与此同时脑脊液中DDP浓度明显低于NS组、脑脊液及脑组织中5-HT和5-HIAA浓度较NS组显著降低。结论：呕必宁对DDP所致呕吐反应具有防治作用，其机制可能与降低猫脑脊液中DDP的浓度，降低脑脊液、脑组织中5-HT、5-HIAA含量有关。     

止呕合剂对猫化疗后体内5-HT和NO含量的影响

目的 :研究DDP诱发呕吐的胃肠道机制和止呕合剂对其的作用。方法 :记录 30只猫的呕吐发生率 ,并用生物化学分析法测定 5 -HT和NO含量。结果 :DDP增加了呕吐发生率 ,提高体内 5 -HT的含量 ,减少NO的含量 ;止呕合剂降低了呕吐发生率 ,减少 5 -HT的含量 ,提高NO的水平。中药组血、胃肠组织中 5 -HT、5 -HIAA浓度都较NS组明显下降而NO水平却明显高于NS组。认为 ,DDP致呕与胃肠组分泌 5H增多、NO减少有关。结论 :DDP诱发呕吐的机制与其提高5 -HT水平 ,降低NO水平有关 ,止呕合剂的胃肠道机制与其降低 5 -HT水平 ,提高NO水平有关。     

连翘对化疗性异食癖大鼠血清和脑组织5-HT及5-HIAA含量的影响

目的:初步探索连翘防治化疗性恶心呕吐的作用机制。方法:用顺铂建立大鼠异食癖模型,造模后72 h,采用HPLC-荧光检测法分别测定大鼠血清及脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。结果:与模型组比较,连翘提取物小、中、大剂量均有降低大鼠血清及脑组织5-HT、5-HIAA含量的趋势,但无统计学差异。结论:连翘防治顺铂所致恶心呕吐的止呕机制可能与5-HT、5-HIAA有关,仍需要进一步实验研究。     

中枢及外周5-HT、5-HIAA在针刺镇痛后效应中的作用

目的 :中枢及外周 5 -HT、5 -HIAA在针刺镇痛后效应中的作用。方法 :以急性佐剂性关节炎 (AA)大鼠作为炎症痛模型 ,针刺昆仑穴 ,观察即时及后效应 ;采用荧光分光光度测定法检测大脑皮质、脑干、炎症局部5 -羟色胺 (5 -HT)和 5 -羟吲哚乙酸 (5 -HIAA)含量。结果 :针刺能提高AA大鼠痛阈并能持续 1h以上 ;提高大脑皮质 5 -HT和 5 -HIAA含量并能持续 30min以上 ;提高脑干 5 -HT和 5 -HIAA含量并能持续 30min以上 ;降低炎症局部 5 -HT和 5 -HIAA含量并能持续 30min以上。结论 :针刺镇痛有即时效应 ,也存在较为显著的后效应 ,外周和中枢的 5 -HT、5 -HIAA可能参与了这一过程。     

蜘蛛香环烯醚萜对肠易激综合征模型大鼠 5-HT和5-HIAA的影响

目的:探讨蜘蛛香环烯醚萜治疗肠易激综合征(IBS)的作用机制.方法:雄性SD大鼠60只,分为空白组、模型组、氟西汀组和蜘蛛香环烯醚萜高、中、低剂量组(24.92,12.46,6.23 mg·kg-1),各10只,以慢性应激加孤养的方法造模,观察蜘蛛香环烯醚萜对各组结肠、血清和下丘脑中5-HT和5-HIAA含量的影响.结果:模型组结肠、血清含量均显著上升,而下丘脑5-HT含量显著下降,5-HIAA和5-HT/5-HIAA变化则不太明显,蜘蛛香环烯醚萜各剂量组对结肠和血清中的5-HT有明显的降低作用,对下丘脑中5-HT则有升高作用.对5-HIAA的影响则无明显变化规律,而对结肠和血清中5-HTr/5-HIAA则表现为降低作用.结论:蜘蛛香环烯醚萜改善IBS症状的机制可能与调节从胃肠到中枢的5-HT水平有关.     

桂枝汤对体温双向调节作用机理探讨——对下丘脑5-羟色胺的影响

脑室注射5-HT，一小时内能诱致大鼠发热。测定发热大鼠和体温低下大鼠下丘脑组织的5-HT及其代谢产物5-羟吲噪蜡酸(5-HIAA)的含量，发现在发热动物中5-HT含量升高．5-HIAA含量下降；在低体温大鼠．5-HT和5-HIAA含量均较正常降低。桂枝汤口饲给药，既能抑制5-HT脑室注射引起的发热反应；在解热扣提高低体温动物肛温的同时．能使发热大鼠下丘脑中5-HT含量显著降低，5-HIAA含量升高；使低体温大鼠下丘脑的5-NT含量上升、5-HIAA含量下降。实验结果提示．桂枝汤对体温的双向调节，部分通过影响体温中枢神经递质5-HT实现的．     

复方天麻制剂镇痛的中枢和外周神经递质作用机理实验研究

目的 探讨复方天麻制剂镇痛的中枢与外周神经作用机制.方法 以福氏完全佐剂制作慢性疼痛动物模型,采用高效液相电化学检测法与高效液相荧光检测法检测复方天麻制剂对中枢及外周神经递质的影响.结果 复方天麻制剂使全脑5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)含量明显上升;使血清5-HTP,5-HIAA含量降低.结论 复方天麻制剂通过升高脑组织神经递质含量和降低血清神经递质含量达到镇痛作用.     

眼针对肠易激综合征模型大鼠结肠组织和血清5-HT、5-HIAA的影响

目的观察肠易激综合征（Irritable bowel syndrome,IBS）模型大鼠远端结肠组织5-羟色胺（5-hydroxytryp-tamine,5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA）的表达以及眼针干预的影响。方法实验动物分成正常组、模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。各组采用ELISA法检测血清和远端结肠组织中5-HT和5-HIAA水平。结果与正常组比较,模型组5-HT和5-HIAA水平均显著升高,5-HT转化率也显著升高,但5-HT的增加量明显高于5-HIAA的增加量,提示5-HT降解与合成分泌的不相匹配可能是模型组大鼠5-HT水平升高的重要原因;而与模型组比较,眼针组5-HT和5-HIAA水平明显下降,眼针组5-HT转化率显著降低。结论 5-HT降解与合成分泌的不相匹配可能是模型组大鼠5-HT水平升高的重要原因,眼针干预可有效改善IBS大鼠5-HT代谢,使5-HT恢复至正常水平。     

中药防治化疗药所致胃肠道反应的实验研究

探讨旋复代赭汤加味对化疗药 DDP所致胃肠道反应的机理。以家兔体表 EGG的改变和血中 5 - HT、5 - HIAA、MTL为指标 ,进行组内对照和组间对照研究。结果 ,预先投用旋复代赭汤加味能防治 DDP所引起的 EGG改变 ,同时使血中 5 - HT、5 - HIAA、MTL保持在正常水平。结论 ,该方对DDP所致胃肠道反应具有防治作用 ,其机制之一可能是通过抑制胃肠道粘膜细胞分泌 5 - HT、MTL实现的。     

6-姜酚对化疗大鼠异食癖及5-HT水平的影响

目的观察6-姜酚对化疗性大鼠异食癖及5-羟色胺(5-HT)水平的影响,初步探讨6-姜酚防治化疗性恶心呕吐(CINV)的相关机制。方法将雄性SD大鼠随机分为空白对照组、6-姜酚正常对照组(50 mg·kg^-1)、昂丹司琼正常对照组(2.6 mg·kg^-1)、模型组、昂丹司琼治疗组(2.6 mg·kg^-1)及6-姜酚高剂量(100 mg·kg^-1)、低剂量(50 mg·kg^-1)治疗组,每组6只;每天分2次灌胃给药。首次给药1 h后,采用腹腔注射顺铂(6 mg·kg^-1)建立大鼠化疗性异食癖模型,以大鼠高岭土摄食量作为其恶心呕吐程度指标。造模24 h后取血、回肠和脑干,采用高效液相电化学法测定各组大鼠外周(血清、回肠)和中枢(延髓)的5-HT及其最终代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)水平。结果(1)与空白对照组比较,模型组大鼠高岭土摄入量显著升高(P<0.001)。与模型组比较,6-姜酚高、低剂量治疗组大鼠高岭土摄入量显著降低(P<0.01)。(2)与空白对照组比较,模型组大鼠的回肠、延髓、血清5-HT水平均显著升高(P<0.05),模型组大鼠回肠、延髓、血清5-HIAA水平均变化不明显(P>0.05)。与模型组比较,6-姜酚高剂量治疗组大鼠回肠组织的5-HT水平显著降低(P<0.05);6-姜酚高、低剂量治疗组大鼠延髓组织的5-HT水平显著降低(P<0.01)。结论6-姜酚可抑制化疗性大鼠异食癖,具有防治CINV的作用,其机制可能与降低中枢及外周5-HT水平有关。     

A representative prescription for emotional disease,Ding-Zhi-Xiao-Wan restores 5-HT system deficit through interfering the synthesis and transshipment in chronic mild stress-induced depressive rats

Ethnopharmacological relevance

Ding-Zhi-Xiao-Wan (DZ, also known as Kai-Xin-San) is a famous traditional Chinese medicine used for the treatment of emotional disease. Previously, we have found that in a variety of animal models of depression (such as tail suspension model, model of chronic fatigue and forced swimming model) DZ demonstrated significant antidepressant behavior and promoted the production of 5-hydroxytryptamine (5-HT). However, the mechanisms of 5-HT regulation are still unclear. Therefore, the current study is designed to further investigate the antidepressant effect of DZ by observing its influence on 5-HT synthesis, metabolism, transport and other key links, so as to clarify the molecular mechanism of its 5-HT regulation.

Materials and methods

Solitary rising combined with the chronic unpredictable mild stress (CMS) was used to establish the rat model of depression. The rats were given DZ for 3 weeks, the behavior change and the following items in hippocampus and prefrontal cortex were detected simultaneously: 5-HT, 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA), tryptophan hydroxylase (TPH), aromatic amino acid decarboxylase (AADC), monoamine oxidase (MAO) and 5-HT transporter (5-HTT) were observed.

Results

Our results showed that treatment with the DZ significantly improved the behavior and simultaneously increased the 5-HT level in the hippocampus, prefrontal cortex tissues and hippocampus extracellular of depressive rats. In future studies revealed that DZ could significantly increase the protein and mRNA expression of the key enzymes TPH during the 5-HT synthesis process in the hippocampus and prefrontal cortex of the depressed rats, and suppress the expression of 5-HTT protein and mRNA at the same time. But it had no effects on MAO-A and MAO-B activities.

Conclusion

We believe that antidepressant effect of DZ is caused by the increase of 5-HT synthesis and reduction of 5-HT re-uptake, and eventually increase the content of 5-HT in the brain and the synaptic gaps.     

解郁丸抗抑郁作用机制的初步研究

目的 :初步探讨解郁丸抗抑郁作用机制。 方法 :采用高剂量阿朴吗啡导致体温下降试验,5-羟色胺酸(5-HTP)诱导甩头行为试验以及高效液相色谱-电化学检测法测定小鼠下丘脑、皮层、海马等脑内单胺类递质及其代谢产物含量。 结果 :解郁丸能显著拮抗高剂量阿朴吗啡所致小鼠体温下降;增加5-HTP诱导甩头行为。解郁丸单次和连续14 d给药,可提高下丘脑中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)与DA的代谢产物3,4-二羟基苯乙二醇(DOPAC)的比值;也可使皮层中5-HT,NE,5-HT的代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),DOPAC含量升高,降低5-HT与5-HIAA及DA与DOPAC的比值;并可提高海马中5-HT与5-HIAA及DA与DOPAC的比值。解郁丸可使利血平化小鼠下丘脑中NE,5-HIAA,海马中5-HT,5-HIAA,DA与DOPAC的比值明显升高。 结论 :解郁丸抗抑郁作用机制可能与调节不同脑区的5-HT,NE等神经递质有关。单次和连续14 d给药可增加不同脑区5-HT,NE,DA的含量,连续14 d给药对利血平化所致不同脑区单胺类递质含量下降也有不同程度的翻转效应。     

新正天丸对偏头痛患者血单胺类递质的影响

目的：通过观察新正天丸（XZTW）对偏头痛患者血浆、血小板5－羟色胺（5－HT）、5－羟吲哚乙酸（5－HIAA）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）的影响,探讨XZTW治疗偏头痛的机制。方法：用荧光分光光度法检测47例偏头痛患者（发作期组21例、间歇期组26例）和23例正常人血浆及血小板5－HT、5－HIAA、DA、NE含量。结果：偏头痛发作期组血浆5－HT含量低于对照组,5－HIAA高于对照组,间歇期组5－HT高于发作期组,5－HIAA含量低于发作期组,其中发作期组、间歇期组血浆DA、NE含量均低于对照组,经XZTW治疗后血浆5－HT、5－HIAA、DA和NE均与治疗前有显著性差异;发作期组血小板5－HT高于对照组,而5－HIAA、DA均低于对照组,间歇期组仅DA高于对照组,经XZTW治疗后血小板5－HT、5－HIAA、DA和NE含量均与治疗前有显著性差异。结论：单胺类递质在偏头痛的病理过程可能有重要意义,而XZTW可以调节偏头痛患者外周单胺类递质水平。     

消痰和胃方防治化疗延迟性呕吐的机制研究

目的:探索消痰和胃方防治化疗诱导延迟性呕吐的作用机制。方法:大鼠分为空白组、模型组、格拉司琼组(盐酸格拉司琼灌胃2.70mg/kg)和消痰和胃组(消痰和胃方灌胃2.448g/kg),观察顺铂(6mg/kg)腹腔注射造模后0-72h高岭土与正常饲料摄食量;采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法检测72h时大鼠血清、脑干、小肠组织中5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。结果:顺铂干预后0-72h各组正常饲料摄食量存在统计学差异(P0.01),消痰和胃组与模型组比较可明显增加大鼠正常饲料摄入量,并且优于格拉司琼组(P0.01);各组血清与脑干5-HT含量存在统计学意义(P=0.0119和P=0.0000),消痰和胃方可降低顺铂诱导后血清与脑干中5-HT含量,并且优于格拉司琼(P0.05)。结论:消痰和胃方可改善顺铂诱导的厌食症状,其防治化疗延迟性呕吐的机制可能与降低血清与脑干5-HT含量有关。     

慢性束缚应激对大鼠行为学和杏仁核5-HT、5-HIAA 含量的影响及加味甘麦大枣汤的干预

目的：探讨慢性束缚应激对大鼠在旷场迷宫中的行为学参数和大脑杏仁核部位5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量的影响,以及加味甘麦大枣汤的干预作用。方法：采用经典的慢性束缚应激的实验方法,复制大鼠慢性应激的模型,然后记录大鼠在旷场迷宫中的行为学参数;分离大鼠大脑杏仁核部位,采用酶联免疫吸附法测定其中5-HT、5-HIAA 的浓度,进而推算出慢性束缚应激对杏仁核部位5-HIAA/5-HT 比值的影响,并探究加味甘麦大枣汤对其的干预作用。结果：实验结果表明,与空白组相比,模型组大鼠在穿格数、直立次数和理毛次数这三个行为学参数上明显减少（P ＜0．05）,而排便次数这个参数则显著增加（P ＜0．05）;杏仁核部位5-HT、5-HIAA 含量以及5-HIAA/5-HT 比值明显减小（P ＜0．05）。与模型组相比,给药组大鼠在穿格数和理毛次数这两个指标上显著增加（P ＜0．05）,排便次数明显减少（P ＜0．05）;在直立次数这个指标上虽有增加的趋势,但无统计学意义（P ＞0．05）。杏仁核部位5-HT、5-HIAA 的含量显著升高（P ＜0．05）,虽然5-HIAA/5-HT 的比值有升高的趋势,但是无统计学上的差异（P ＞0．05）。结论：慢性束缚应激使大鼠在旷场迷宫中的各行为学参数明显改变,使大鼠杏仁核部位5-HT 和其代谢产物的含量以及5-HT 能神经系统的兴奋性降低。中药复方加味甘麦大枣汤能明显对抗慢性束缚应激对大鼠造成的影响。