雪貂感染H7N9禽流感病毒动物模型的建立

目的建立雪貂感染H7N9禽流感病毒动物模型。方法A／Anhui／1／2013（H7N9）禽流感病毒经鼻吸入感染雪貂,观察动物临床症状和体征,上呼吸道排毒情况及组织病理学变化。结果雪貂感染后出现体重下降、活动减少以及打喷嚏的临床表现,上呼吸道、心脏、肝脏及嗅球可检测到活病毒,上呼吸道排毒的峰值出现在感染后的第3—5天。血清抗体滴度最高达到1280,外周血淋巴细胞数量减少、粒细胞数量增加。组织病理学显示动物肺脏呈局灶性间质性肺炎及肺泡炎改变,CT显示肺内片状阴影。结论成功建立雪貂感染H7N9禽流感病毒的动物模型,模型的建立为H7N9禽流感发病机制研究、药物及疫苗的评价奠定了实验基础。     

雪貂感染流感病毒H3N2动物模型的建立

目的建立甲型流感病毒H3N2感染的雪貂动物模型。方法按实验要求筛选出流感抗体反应阴性的雪貂,经兽用氯胺酮轻度麻醉后进行滴鼻感染H3N2流感病毒株A/Brisbane/10/07,设立两个稀释度106和107 TCID50,每个稀释度接种3只雪貂,感染后第5天安乐处死。感染前采集鼻甲骨活检,感染后1～5 d鼻甲骨活检检测病毒载量,每天记录雪貂一般临床变化。处死时取雪貂肺、肝、脾、小肠、脑组织作病毒滴度检测,肺组织做病理检查。结果 106和107TCID50的H3N2病毒分别感染雪貂,没有雪貂死亡。雪貂感染后都出现一过性的体温升高,体重的下降,流涕、打喷嚏等症状。在鼻甲骨活检物中可测到病毒载量,肠组织可分离到病毒。肺组织以轻度性间质性肺炎为主要病理变化。结论雪貂感染H3N2病毒株A/Brisbane/10/07后,临床表现、病毒学、分子生物学、病理学方面的检测都可以证实雪貂感染H3N2病毒动物模型已建立,其中106 TCID50病毒滴度的是一个建立感染动物模型比较合适的剂量。     

H7N9禽流感病毒与其他流感病毒对雪貂致病性与传播力的比较

目的 针对2013年3月中国爆发的人感染H7N9禽流感病毒,在雪貂体内进行致病性及传播力的研究,并与甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒进行比较。方法 对新发H7N9毒株、甲型H1N1流感病毒、H5N1禽流感病毒感染雪貂后的临床症状、体征,呼吸道排毒情况,组织病理学变化等进行评价和比较,并对H7N9毒株在雪貂群体中的传播力进行研究。结果 雪貂模型的临床症状、死亡率、病毒传播以及组织病理学分析显示：H7N9病毒的致病性低于H5N1,与2009年起源于北美的甲型H1N1流感病毒相当。新发H7N9禽流感病毒可以在雪貂的呼吸道、心脏、肝脏以及嗅球进行复制。值得注意的是H7N9禽流感可以通过飞沫在雪貂间进行低水平的传播,并且在传播过程中,病毒基因组内有多个位点的氨基酸发生了替换。结论 H7N9禽流感病毒对雪貂的致病性较H5N1禽流感病毒低,与甲型H1N1流感病毒对雪貂的致病性相当,H7N9禽流感病毒可在雪貂间进行传播。     

建立H5N1流感病毒感染雪貂动物模型

目的建立甲型H5N1流感病毒感染雪貂动物模型[1-3]。方法 H5N1流感病毒株A/Vietnam/1203/2004病毒以103和104 TCID50滴度分别感染雪貂。对4～10月龄去势雪貂经兽用氯胺酮轻度麻醉后进行滴鼻感染,每个稀释度接种3只雪貂,感染后第5天安乐处死。感染后每天记录雪貂一般临床变化。感染前0 d采集鼻甲骨活检,感染后1～5 d鼻甲骨活检检测病毒载量和病毒滴度。处死时取雪貂气管、肺、心、肝、脾、肾、小肠、脑组织作病毒滴度检测和病理检查。结果 H5N1103和104 TCID50的病毒分别感染雪貂,雪貂死亡都率在33%。103TCID50和104 TCID50病毒分别感染雪貂,动物都出现持续3 d体温升高,104 TCID50组出现超过20%的体重下降。上呼吸道排毒呈现上升趋势,并可在除呼吸系统以外的组织器官中分离到病毒。感染的雪貂病理表现为重度肺炎。结论雪貂感染H5N1病毒株后在临床表现、病毒学、分子生物学、病理学方面的检测都可以证实雪貂感染H5N1病毒动物模型已建立,104 TCID50病毒滴度是一个建立感染动物模型比较合适的剂量。     

H7N9禽流感病毒在小鼠体内的适应性

目的进一步探讨H7N9禽流感病毒对哺乳动物的感染与致病能力,并对其分子机制进行研究。方法以病毒滴鼻感染小鼠,在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,通过病毒全基因组测序及比对探寻适应的分子机制。结果禽流感H7N9 A/Anhui/1/2013病毒,经过在小鼠体内进行9次传代后,对鼠肺适应株与野生型毒株进行基因比对,发现适应株HA基因,NA基因以及PA亚基共发生了4个有义突变。结论禽流感H7N9 A/Anhui/1/2013病毒经连续传代后基因发生突变,但对病毒的毒力以及致病力影响仍需后续实验验证。     

BALB/c小鼠和雪貂感染H7N9禽流感病毒后的肺组织动态病理学变化

目的 了解用H7N9禽流感病毒分别感染BALB/c小鼠和雪貂后,其肺部动态病理改变,为临床诊断、治疗、预防及机制研究提供帮助。方法 BALB/c小鼠经鼻腔接种10⁶EID₅₀（50 μL）H7N9禽流感病毒后第1、2、3、5、7、14、28天分别安乐死2～3只小鼠;雪貂经鼻腔吸入接种10⁶EID₅₀（500 μL）H7N9禽流感病毒后第3、7、14、28天分别安乐死1只雪貂,分别观察动物的临床特征改变,肺组织的大体组织形态学变化,HE染色观察动态病理改变,免疫组化染色观察病毒分布及肺组织各种炎细胞的浸润情况。结果 感染病毒后的小鼠出现竖毛、嗜睡、死亡等表现,雪貂表现为打喷嚏、鼻腔分泌物、稀便、嗜睡等;大体观察小鼠与雪貂肺组织均可见到暗红色病灶;光镜观察小鼠与雪貂的肺组织均呈现坏死性支气管炎和渗出性间质性肺炎、肺泡炎。感染第2天开始出现炎性病变,7～9 d炎症病变最严重,14 d后逐渐修复吸收,28 d基本完全吸收;T、B淋巴细胞,巨噬细胞不同程度的表达增多,以T细胞增多为主,尤其是CD8⁺ T细胞两种动物均大量表达。结论 H7N9禽流感病毒感染可引起BALB/c小鼠和雪貂肺组织急性支气管炎和肺炎,感染后7～9 d肺部炎症的组织病理学变化最严重,CD8⁺T细胞明显增多,14 d后病灶逐渐吸收。该研究可为临床诊断、治疗、预防该病及进行疾病机制研究提供帮助。     

12例人感染H7N9禽流感病毒性肺炎的临床影像学分析

目的探讨人感染H7N9禽流感病毒性肺炎的临床影像学表现及特点。方法收集深圳市第三人民医院2013年12月18日至2014年1月26日收治的12例确诊为人感染H7N9禽流感病毒性肺炎的临床影像学资料(男6例、女6例),对其临床影像学表现进行分析。结果 12例患者均行胸部X线和CT检查。发病早期(≤4d)行影像学检查8例,病变多起始单侧肺下叶,局限于肺叶段分布,其中右肺下叶3例,左肺下叶2例,双肺下叶2例(病变右侧叶偏重1例,左侧偏重1例),3个肺叶1例;主要表现为磨玻璃影和实变影,可见充气支气管征象;伴小叶间隔增厚4例和胸膜腔积液3例。进展期(5-10d):病变迅速进展,累及双肺多叶,呈多发或弥漫性分布,12例均累及3个肺叶以上,其中10例累及5个肺叶,病变仍以起始部位最严重;伴胸膜腔积液11例,心包积液3例,腹膜腔积液1例。吸收期(≥11d):经抗病毒等治疗,病灶开始吸收,但仍残留条索状影、磨玻璃影及片状实变影。结论人感染H7N9禽流感病毒性肺炎,具有早期表现为单侧肺段和肺叶渗出性病变,48-72h内迅速进展为双肺多叶广泛分布的磨玻璃影和实变影的影像学表现特征。伴胸腹腔积液提示病情严重。影像学检查与诊断对本病的临床诊断、疗效评估和预后判断有重要价值。     

郑州市首例人感染H7N9禽流感病例的实验室检验分析

目的:对郑州市首例人感染H7N9禽流感病例进行实验室诊断和分析,以提高实验室应急检测能力。方法:采集郑州市管城区1例疑似病例的鼻、咽拭子样本,提取病毒RNA,采用甲、乙型流感通用引物和探针、季节性流感(包括H1N1、H3N2)特异性引物和探针、甲型H1N1流感特异性引物和探针以及H5N1和H7N9特异性引物和探针,以Real-time RT-PCR方法检测流感病毒核酸。结果:乙型流感、季节性流感(包括H1N1、H3N2)、甲型H1N1流感和H5N1高致病性禽流感扩增结果均为阴性;甲型流感通用引物和H7N9亚型流感病毒扩增结果均为阳性。结论:样本经河南省疾控中心与国家疾控中心复核检测,证实该患者为郑州市首例人感染H7N9禽流感病例。     

H7N9禽流感病毒小鼠感染动物模型的建立

目的 观察贯叶连翘提取物经口给药9个月对Beagle犬长期毒性反应.方法 选用Beagle犬28条,随机分为4组,每组6～8条,雌雄各半.以0.3、0.55、1.0 g/kg剂量的贯叶连翘提取物（胶囊）经口给药,每日1次,每周6次,连续38周,停药恢复期8周.在整个实验期间,每日观察受试动物的一般活动状况,每周称体质量1次,并于给药前、给药10、20、30、38周、停药8周时,作心电图（Ⅱ导联ECG）检查,前肢抽血作血液学和血清生化学检测,收集尿液作尿常规检验,给药20、38周、停药8周时,处死部分动物取主要脏器和组织称重,并作组织形态学检查.结果 在给药10、20、30、38周和停药恢复期8周时,各剂量组和对照组动物一般活动状况、心电图检查、血液学和尿常规检测均未见有明显的异常改变.但在给药20、30周时高剂量组动物ALP、给药38周时中、高剂量组TBIL升高（P＜0.05或P＜0.01）,届时,高剂量组动物肝脏系数上升（P＜0.05）.病理检查亦显示,给药20周时,高剂量组雌、雄各有1条动物肝细胞轻度颗粒变性,雌性有1条肾曲管轻度颗粒样变性;给药38周时,仅高剂量组动物少量肝细胞或肾近曲小管有轻度颗粒样变性.其余各剂量组动物各时点的血液学和血清生化学指标、脏器系数、组织形态学变化与相应对照组比均无显著性差异（P＞0.05）.结论 贯叶连翘提取物连续给药20、38周时,0.55、1.0 g/kg组Beagle犬肝、肾组织形态和功能呈现轻度的毒性反应,但停药后可随时间而逐步恢复正常,其毒性反应程度与给药剂量和服用持续时间呈正相关.贯叶连翘提取物经口给Beagle犬的安全剂量为0.3 g/kg,相当临床治疗抑郁症拟用剂量的40倍.     

H7N9禽流感病毒小鼠感染动物模型的建立

目的 建立H7N9小鼠感染动物模型。方法 1?08,1?07或1?06 TCID50H7N9禽流感病毒原液（A/Anhui/1/2013）滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标：临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果 被感染的小鼠表现为竖毛、弓背、体重下降;病理表现为间质性肺炎,感染后第2天开始在呼吸道脱落细胞中检测到病毒;免疫组化或病毒分离方法在肺、肾、脑、肠、脾等组织检测到病毒;感染后14d在小鼠血清中血凝抑制试验特异性抗体效价达到160;淋巴细胞减少,单核细胞增多。结论 H7N9感染BALB/c小鼠模型与人类禽流感感染疾病的基本特征相似,为研究该病的发病机制及药物疫苗的研发提供了工作基础。     

人感染H7N9禽流感研究进展

自2013年3月H7N9禽流感疫情爆发以来,截止到2015年7月18日,中国疾病预防控制中心传染病报告系统共报告实验室确诊病例628例,死亡161例,病死率约为25.6%,目前病例主要分布在广东、江苏、浙江、福建、上海等东部省市。冬春季是高发季节,病人多有禽类接触史。从人和禽分离到的H7N9病毒的基因序列发生了多处关键氨基酸位点突变等遗传进化,增强了病毒对人的遗传适应性、致病性和毒力,对首选治疗药物NA抑制剂(磷酸奥司他韦)产生了耐药性。H7N9禽流感病毒可能会在其天然宿主或人体内不断发生基因突变及基因重配而产生新的变异。     

日本称H7N9禽流感病毒发现变异

环球网报道,13本东京大学教授河冈义裕及客座研究员渡边登喜子等在10日发行的英国科学杂志《自然（Nature）》网络版上发表研究成果称,此前在中国出现多个感染者的H7N9禽流感病毒部分基因已发生变异,更易在哺乳类动物身上感染并增殖。     

人感染H7N9亚型禽流感病毒分子生物学研究进展

2013年3月至今,我国多个省市地区发生了人感染H7N9禽流感疫情并引起较高的病死率,而从2016年秋季开始的第5波疫情显得尤为严重,这使得人感染H7N9禽流感作为严重危害我国人民健康的重大急性传染性呼吸道疾病而备受关注。本文综述了近年来关于人感染H7N9亚型禽流感病毒在基因组进化及哺乳动物适应性突变方面的分子生物学研究进展,以期推动人感染H7N9禽流感防控策略的研究。     

1例人感染H7N9禽流感病毒病例报道

<正>人感染H7N9禽流感病毒病(简称"人感染H7N9禽流感")是由H7N9禽流感病毒感染人类引起的一种急性呼吸道传染病。2013年3月31以来,中国国家卫生和计划生育委员会通报,在中国的长江三角洲地区发生了人感染H7N9禽流感疫情,随后在中国大陆其他地方也有该类疫情报告[1-2]。该病临床上主要为发热、咳嗽等重症肺炎表现,临床上难以与其他病毒感染的重症肺炎区分。早期诊断和尽早使用奥司他韦治疗对提高病例治愈率具有重要意义。本文报     

H7N9禽流感病毒研究现状

2013年3月在中国华东地区爆发了一场严重的人类感染禽流感疫情,导致此次疫情的病原体为一种全新的H7N9 禽流感病毒,该病毒以其对人类的高致病性及远高于H5N1禽流感病毒的传播速度而引起全球广泛关注。本文就H7N9禽流感病毒的病原学?致病的分子基础?流行病学?临床特征及防治措施等方面的研究现状进行综述,旨在了解人感染H7N9禽流感的研究进展,为人感染H7N9禽流感的有效防控提供科学依据。     

新型甲型H7N9禽流感病毒研究进展

自2013年3月以来,我国华东地区上海、安徽、江苏、浙江、广东和香港等地先后发生不明原因重症肺炎病例,绝大多数患者曾有活禽鸟接触史,经病原体分离鉴定后,确诊为人感染H7N9禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)[1],由国家卫生和计划生育委员会(原卫生部)于2013年3月31日正式通报。截至2014年3月7日全国共确诊H7N9禽流感病例384例,死亡100例,目     

H7N9禽流感病毒在小鼠体内的适应性研究

目的进一步探讨H7N9禽流感病毒对哺乳动物的感染与致病能力,并对其分子机制进行研究。方法以病毒滴鼻感染小鼠,在BALB／c小鼠肺组织中连续传代,通过病毒全基因组测序及比对探寻适应的分子机制。结果禽流感H7N9A／Anhui／1／2013病毒,经过在小鼠体内进行9次传代后,对鼠肺适应株与野生型毒株进行基因比对,发现适应株HA基因,NA基因以及PA亚基共发生了4个有义突变。结论禽流感H7N9A／Anhui／1／2013病毒经连续传代后基因发生突变,但对病毒的毒力以及致病力影响仍需后续实验验证。     

H7N9禽流感病毒前期研究进展评述

2013年2~3月,新型甲型流感病毒(H7N9)人类感染首次被发现发生在中国华东地区,感染以迅速进展的肺炎、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和致死性转归为特点[1]。禽类感染甲型流感H7亚型在世界范围内偶有发生,但H7N9病毒感染人类尚属首次报道。我国将该病称为人感染H7N9禽流感病毒病(简称"人感染H7N9禽流感")。中国的疾病防控和科研部门及时对该病毒特性进行了科学研究,快速明确了病因、流行规律和疾病流行特点,评估了传播风险,为政府部门科学制定防控措施提供了依据。许多重要的研究成果都分别     

H7N9禽流感病毒的遗传特性研究进展

2013年3月31日国家卫生与计划生育委员会通报上海和安徽确诊3例人感染H7N9禽流感病毒,尚属全球首次报道。美国、韩国等多个国家曾在火鸟、野鸭和野鸡等禽类中检出H7N9,但从未发现感染人的情况,世界卫生组织(WHO)对人感染H7N9禽流感病毒的疫情高度关注。笔者综述H7N9禽流感病毒的溯源、抗原变异、致病机制、传播机制及预防控制等遗传特征的研究进展,旨为H7N9禽流感病毒的防控和治疗提供参考依据。     

人感染H7N9禽流感病毒重症患者的护理体会

正H7N9亚型禽流感病毒,是新型病毒,对其知之甚少,病死率很高。我院3月份发现全国首例人感染H7N9禽流感病例后,又收治1例重症人感染H7N9禽流感病人,经积极抢救和精心护理,完全康复出院,现将护理体会报告如下。