罗氏电化学发光检测系统检测泌乳素的方法学评价及参考范围建立

目的按美国病理家协会(CAP)对实验室的要求,对罗氏电化学发光系统检测泌乳素(PRL)的方法进行评估和建立本实验室的参考区间。方法取中、低值患者混合血清,分别进行批内20次和连续20 d检测,统计分析批内变异系数(CV)和日间CV;用不同浓度低值血清连续检测10 d,统计分析检测功能灵敏度;将高、低值血清按一定比例混合,检测PRL,回归分析确定测量范围;将中值血清按一定比例稀释后检测PRL,分析稀释后样本和原始样本结果的符合程度,得出临床可报告范围(CRR);取292名健康人群样本检测PRL,统计分析建立参考范围。结果中、低值批内CV分别为0.95%、1.16%,日间CV分别为2.39%、3.14%;功能灵敏度为0.065μg/L;分析测量范围(AMR)为0.105~452.88μg/L;CRR为0.065~4 528.80μg/L;本实验室的参考区间男性为3.86~22.80μg/L,女性为4.61~30.74μg/L。结论本系统检测性能符合CAP要求,参考区间上限略高于厂家提供的参数,说明厂家提供的参考区间不可直接引用。     

罗氏电化学发光检测系统乙型肝炎表面抗原定量检测方法学评价及性能验证

目的按美国病理学家协会CAP和ISO15189实验室认可的要求,对罗氏Elecsys MODULAR AN-ALYTICS E-170电化学发光系统乙型肝炎表面抗原(HBsAg)定量检测进行方法学评价和性能验证。方法取患者高、低值混合血清,分别进行批内20次和连续20d检测,计算批内不精密度和批间不精密度;将高、低值血清按一定比例混合后进行检测,验证分析测量范围(AMR);取浓度接近1∶400稀释检测低限值的血清标本,连续检测12d,进行可报告低限值(LoQ)验证;取原倍及自动稀释后均可检测的标本,进行原倍及自动稀释检测,计算其符合程度,进行自动稀释正确度验证。结果高、低值批内不精密度(以变异系数表示)分别为2.23%和1.99%,批间不精密度分别为4.03%和3.16%,LoQ为24.905IU/mL,AMR为22.075～48 158.25IU/mL;自动稀释与原倍检测结果偏差小于20%。结论该系统检测性能符合实验室质量要求。     

罗氏全自动电化学发光免疫分析仪检测白细胞介素-6的方法学评价

目的 评价罗氏Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪模块定量检测白细胞介素-6(IL-6)的分析性能。方法 对罗氏全自动电化学发光免疫分析仪定量检测IL-6的准确度、精密度和线性进行验证,并进行交叉污染率评估实验。结果 经不同批次校准品检测,测定值与靶值的相对偏差为-3.01%～3.84%。批内变异系数(CV)为1.84%～2.80%,批间CV为0.67%～1.43%,检测的准确度和精密度均符合性能标准。IL-6检测回归分析呈一次线性,线性回归方程为y=1.008 1x-1.000 9(R²=0.999 96,P<0.05)。IL-6检测的交叉污染率为0.077%。结论 罗氏Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪对IL-6检测性能的验证结果与仪器生产厂家提供的说明基本一致,符合临床实验室检验的要求,可用于临床标本测定。     

罗氏e601型电化学发光分析仪测定癌胚抗原的方法学性能评价

目的通过对罗氏e601型电化学发光分析仪测定癌胚抗原的方法学性能评价,探讨临床免疫学定量检测的方法学性能验证评价方案和实验方法。方法按照CLSI推荐的方法测定癌胚抗原的精密度、正确度、线性范围和可报告范围、分析灵敏度（最低检测限）、生物参考区间的验证、携带污染率指标进行验证。结果癌胚抗原的方法学评价结果在厂家提供的范围之内,癌胚抗原的生物参考区间范围不受地区和人群等因素的影响。结论罗氏e601型电化学发光分析仪检测系统性能能满足临床要求,评价方案科学可靠,厂家提供的数据必须经验证后才能引用。     

罗氏Modular P800型生化分析仪测量总胆红素的方法学性能评价及参考区间的建立

目的 通过对罗氏ModularP800生化分析仪检测血清总胆红素(TBIL)的方法学性能评价和建立参考区间的研究,探讨临床化学定量检测的方法学性能评价方案和实验方法.方法 取罗氏正常水平质控和病理水平质控物,分别进行批内20次和连续20 d总胆红素的检测,统计分析批内变异(CV)和日间CV;将高、低值血清按一定比例混合,检测TBIL,回归分析确定分析测量范围(AMR);将中值血清按一定比例稀释后检测TBIL,分析稀释后样本测量值和预期结果的符合程度,得出临床可报告范围(CRR);回顾分析376名健康人群血清样本TBIL的检测结果,统计分析建立参考区间.结果 正常水平、病理水平质控批内CV分别为0.63%,0.58%;日间CV分别为2.46%,1.68%;AMR为0.5～741.0μmol/L;CRR为0.5～59 280μmol/L;TBIL的参考区间为2.1～22.3μmol/L.结论 Modular系统检测性能能满足临床要求,评价方案简单易行;参考区间与厂家提供的参数不同,说明厂家提供的参考区间不可直接引用.     

西安地区健康人群电化学发光免疫法检测甲胎蛋白参考范围的建立

目的 建立西安地区健康人群电化学发光法检测甲胎蛋白的实验室参考范围.方法 随机抽取2009年～2010年在西安交通大学医学院第二附属医院健康体检的健康人群1 022例,采用电化学发光法定量检测外周血AFP,并按性别分组.结果 男性95％置信区间为0.70～5.68 μg/L,女性为0.51～5.65 μg/L,男女之间差异无统计学意义(P＞0.05),总体置信区间0.62～5.67 μg/L.结论 采用单侧参考范围,建议西安地区健康人群电化学发光法定量检测外周血AFP的参考范围为95％＜5.67 μg/L,男女无差异.     

罗氏E601电化学免疫发光仪甲状腺功能5项指标正常参考区间的建立

目的：建立本实验室甲状腺功能5项指标：T3,T4,FT3,FT4,TSH的正常参考区间。方法：采用罗氏E601电化学免疫发光仪及其配套试剂、标准品、质控品对300例健康人群的甲状腺功能5项指标进行检测,检测结果经过统计学分析处理,计算每个指标的参考区间。结果：5项指标95％正常参考区间分别为T31．14～3．02nmol／L;T475．45～148．18nmol／L;FT33．52～6．05pmol／L;FT411．82～20．13pmol／L;TSH0．31～4．85mIU／L。结论：实验室甲状腺功能五项指标参考区间的建立,对临床诊疗工作提供了更有意义的参考数据。     

东芝FR-40全自动生化分析仪检测血清胱抑素C的方法学评价及参考区间建立

目的对东芝FR-40全自动生化分析仪免疫比浊法检测血清胱抑素C(CysC)的检测系统进行方法学评价,并建立本实验室的参考区间。方法通过回收试验评价准确度;取高、中、低值混合血清分别进行批内20次和连续20 d检测,统计分析批内和批间变异系数(CV);用不同浓度低值血清连续检测10 d,统计分析检测功能灵敏度;将高、低值血清按一定比例混合,形成不同浓度的5份血清,进行分析测量范围(AMR)评价;通过检测含不同浓度的血红蛋白、胆红素及三酰甘油的血清标本进行干扰试验;取240名健康体检者样本检测CysC,统计分析建立参考范围。结果回收试验显示回收率为97.8%,高、中、低值批内CV分别为1.92%、1.36%、1.61%,批间CV分别为3.67%、2.72%、3.23%;功能灵敏度为0.2 mg/L;AMR为0.31~7.52 mg/L;血红蛋白浓度大于1.2 g/L时产生负干扰,胆红素浓度小于150 mmol/L及三酰甘油浓度小于8.5 mmol/L时无明显干扰;本实验室CysC参考区间为(0.97±0.16)mg/L,男女之间差异无统计学意义。结论本系统检测性能符合美国病理学家协会(CAP)要求,参考区间与厂家提供的参数有较大差异,说明厂家提供的参考区间不可直接引用,也说明了进行方法学评价的重要性。     

电化学发光法检测血清CA72-4的方法学性能评价

目的 对电化学发光法检测血清糖链抗原72-4（CA72-4）进行方法学验证.方法 参考美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件和相关文献,设计验证方案,对CA72-4项目的 精密度、准确度、线性范围、分析灵敏度、生物参考区间和温度稳定性进行验证.结果 实验结果显示,CA72-4批内总不精密度小于3%,批间不精密度小于4%,准确度在±4%以内,线性范围为0.37～291.30 U/mL,参考区间为0.0～8.2 U/mL,分析灵敏度小于0.2 U/mL,均与厂商提供的参数接近.血清标本CA72-4常温可稳定24 h,4 ℃保存可稳定1个月以上.结论 电化学发光法检测CA72-4各项参数与厂商声明基本一致,符合相关质量要求,可应用于临床标本检测.     

南通地区健康人群血清NSE电化学发光法检测参考区间的调查

目的 调查和建立南通地区表观健康人群神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)的参考值区间。方法 选取2017年1月～2018年1月南通大学附属医院体检中心3 874例健康体检者作为研究对象,其中男性2 767例,女性1 107例,通过问卷调查和体格检查排除神经系统、血液病、炎症、肿瘤等疾病,采用罗氏cobase 411全自动电化学发光仪检测NSE水平。根据性别、年龄将受检者分组(男女各7组:<30岁,30～39岁,40～49岁,50～59岁,60～69岁,70～79岁,>80岁),对结果进行统计学分析,建立相应的参考区间。分析性别、年龄分组后的组间差异是否有统计学意义; 将获得的参考区间与试剂盒提供的生物参考区间进行比较,并进行参考区间的验证。结果 NSE水平呈正态分布,男性血清NSE水平(15.79±3.52ng/ml)明显高于女性(13.79±3.04 ng/ml),差异有统计学意义(t=3.102,P=0.037)。但独立样本t检验进行各年龄组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。采用(-overx)&#177; 1.96s确定参考区间,NSE参考区间为8.47～21.07 ng/ml,男性为8.72～21.36 ng/ml,女性为8.06～20.10 ng/ml,对该研究建立的NSE参考区间进行验证符合标准。结论 初步建立了适合该地区表观健康人群的血清NSE参考区间。NSE的参考区间有性别差异,根据不同性别建立的参考区间,可为疾病的诊断和治疗提供准确的依据。     

未成熟粒细胞检测的评估及参考范围的建立

目的探讨血液分析仪定量检测不成熟粒细胞（IG）指数的临床应用;建立本实验室应用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪进行IG检测的正常参考值范围。方法应用临床标本连续测定20次,观察其批内精密度;用2个水平质控物连续测定20 d,观察其批间精密度;分别应用血液分析仪和流式细胞仪对101例标本进行IG指数测定,对其结果进行相关性回归分析和一致性比较;对883例全血标本分别用血液分析仪进行自动幼稚粒细胞计数和手工推片染色后显微镜检分类,比较血液分析仪检测与显微镜镜检的一致性;以Sysmex XE-2100全自动血液分析仪和配套试剂盒测定766名健康者的IG值,以确立本室检测的参考范围。结果高、中、低值检测的批内精密度结果IG绝对计数的CV值分别为4.78%、5.35%、13.06%,IG百分率的CV值分别为3.82%、6.03%、14.54%;批间精密度2个水平的CV值分别为IG绝对值4.38%、5.13%;IG百分率4.3%、5.1%,均〈15%,在允许范围内。与流式细胞法比较具有良好相关性,相关系数（r）为0.916;与人工镜检比较的r为0.8903;年龄间比较各年龄组IG值间P均〉0.05,即年龄间差异无统计学意义;性别间比较P〈0.05,即性别间差异有统计学意义,分性别不分年龄建立本室IG检测的参考值范围为IG绝对值95%可信区间男（0,0.04×10^9/L）;女（0,0.02×10^9/L）。IG百分率95%可信区间男（0,0.5%）;女（0,0.4%）。结论临床应用血液分析仪定量检测IG方法可行,能为临床疾病的诊断和治疗监测提供实验室数据。各实验室应建立本实验室检测的参考值范围。     

未成熟粒细胞检测的评估及参考范围的建立

目的探讨血液分析仪定量检测不成熟粒细胞(IG)指数的临床应用;建立本实验室应用Sysmex XE-2100全自动血液分析仪进行IG检测的正常参考值范围。方法应用临床标本连续测定20次,观察其批内精密度;用2个水平质控物连续测定20 d,观察其批间精密度;分别应用血液分析仪和流式细胞仪对101例标本进行IG指数测定,对其结果进行相关性回归分析和一致性比较;对883例全血标本分别用血液分析仪进行自动幼稚粒细胞计数和手工推片染色后显微镜检分类,比较血液分析仪检测与显微镜镜检的一致性;以Sysmex XE-2100全自动血液分析仪和配套试剂盒测定766名健康者的IG值,以确立本室检测的参考范围。结果高、中、低值检测的批内精密度结果IG绝对计数的CV值分别为4.78%、5.35%、13.06%,IG百分率的CV值分别为3.82%、6.03%、14.54%;批间精密度2个水平的CV值分别为IG绝对值4.38%、5.13%;IG百分率4.3%、5.1%,均<15%,在允许范围内。与流式细胞法比较具有良好相关性,相关系数(r)为0.916;与人工镜检比较的r为0.8903;年龄间比较各年龄组IG值间P均>0.05,即年龄间差...     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C参考范围的设立及在糖尿病肾功能评价中的作用

目的确立本实验室半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）的参考范围和界定肾功能不全分期的CysC水平。方法检测120名健康体检者CysC水平,确立本实验室CysC参考范围。选取200例血肌酐（Cr）为45～1001μmol／L的样本,进行血清Cr、尿素（Urea）、尿酸（UA）和CysC检测,了解CysC与cr的相关性;测定100例糖尿病患者的CysC,了解其CysC水平。结果本实验室健康人群CysC参考范围为≤1．02mg／L,CysC与cr的相关系数（r）为0．7346,CysC水平在2．18—3．15mg／L和≥3．16mg／L可分别作为界定。肾功能不全氮质血症期和尿毒症期的衡量标准,糖尿病患者的CysC水平明显高于一般人群。结论CysC是衡量糖尿病患者肾功能状况的理想指标。     

磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能评估及成年女性AMH参考区间的建立

目的 评价磁微粒吖啶酯化学发光法检测抗苗勒管激素(AMH)的性能,建立成年女性AMH的参考区间.方法 依据美国临床试验室标准化协会(CLSI)相关文件对磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能(空白限、检测限、定量限、精密度,线性范围)进行评价.采用线性回归分析和相对偏移评估电化学发光法与磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH...     

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C参考范围的设立及在糖尿病肾功能评价中的作用

目的确立本实验室半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)的参考范围和界定肾功能不全分期的Cys C水平。方法检测120名健康体检者Cys C水平,确立本实验室Cys C参考范围。选取200例血肌酐(Cr)为45～1 001μmol/L的样本,进行血清Cr、尿素(Urea)、尿酸(UA)和Cys C检测,了解Cys C与Cr的相关性;测定100例糖尿病患者的Cys C,了解其Cys C水平。结果本实验室健康人群Cys C参考范围为≤1.02 mg/L,Cys C与Cr的相关系数(r)为0.734 6,Cys C水平在2.18～3.15 mg/L和≥3.16 mg/L可分别作为界定肾功能不全氮质血症期和尿毒症期的衡量标准,糖尿病患者的Cys C水平明显高于一般人群。结论Cys C是衡量糖尿病患者肾功能状况的理想指标。     

上海地区血清丙氨酸转氨酶测定结果一致性和参考范围调查

目的探索上海地区血清丙氨酸转氨酶(ALT)临床检测结果的一致性,并进行表面健康人群的参考范围调查。方法每次实验前将c.f.a.s.中含有的根据国际临床化学家联合会(IFCC)推荐方法要求测得的ALT值传递到1份新鲜人混合血清,以此校准各参加医院检验科的ALT检测系统。32家医院检验科先后进行了9次实验,并在检测结果基本一致后分别进行了7598例和21970例年龄为17~78岁的表面健康人员ALT测定值调查。结果校准前各参加医院检验科之间的ALT检测值变异系数(CV)为17.1%~20.5%,校准后各医院之间检测值具有良好的一致性,CV降至1.42%~5.97%。2次ALT参考范围调查中男性和女性的第95百分位值分别为58和45U/L,约相当于30或23赖氏法单位;第97.5百分位值分别为67和55U/L,约相当于35或29赖氏法单位;第99百分位值分别为75和67U/L,约相当于39或35赖氏法单位。结论采用统一的校准血清,可以使不同医院(不同检测系统)之间ALT检测值差异明显减小,一致性显著增加。     

上海地区血清丙氨酸转氨酶测定结果一致性和参考范围调查

目的 探索上海地区血清丙氨酸转氨酶（ALT）临床检测结果的一致性,并进行表面健康人群的参考范围调查.方法 每次实验前将c.f.a.s.中含有的根据国际临床化学家联合会（IFCC）推荐方法要求测得的ALT值传递到1份新鲜人混合血清,以此校准各参加医院检验科的ALT检测系统.32家医院检验科先后进行了9次实验,并在检测结果基本一致后分别进行了7 598例和21 970例年龄为17～78岁的表面健康人员ALT测定值调查.结果 校准前各参加医院检验科之间的ALT检测值变异系数（CV）为17.1%～20.5%,校准后各医院之间检测值具有良好的一致性,CV降至1.42%～5.97%.2次ALT参考范围调查中男性和女性的第95百分位值分别为58和45 U/L,约相当于30或23赖氏法单位;第97.5百分位值分别为67和55 U/L,约相当于35或29赖氏法单位;第99百分位值分别为75和67 U/L,约相当于39或35赖氏法单位.结论 采用统一的校准血清,可以使不同医院（不同检测系统）之间ALT检测值差异明显减小,一致性显著增加.     

健康人群胰岛素参考范围及测定稳定性的调查

目的 建立本实验室人血清胰岛素(insulin)水平的参考范围并且调杳其测定稳定性.方法 采用Architect i2000化学发光免疫分析仪和相应的检测试剂、校准品和质控品检测血清胰岛素值并评价检测方法 .测定413名健康成年人血清胰岛素水平,分析各项生理和实验室指标对胰岛素的影响,建立本实验室的胰岛素参考范围,并对胰岛素在不同温度下的稳定性进行探讨.结果 胰岛素的批内和天间不精密度分别为1.67%和2.60%,检测精密性良好,符合临床使用要求.按照每10岁1个年龄间隔分为4个年龄组,组间胰岛素水平(中位数分别为5.6、5.2、5.3、5.7 mU/L)差异无统计学意义(X<'2>=1.929,P>0.05).女件胰岛素水平(中位数为5.7 mU/L)明显高于男性(中位数为5.0mU/L)(Z=3.696,P<0.01).以第97.5%位数为参考值上限,第2.5%位数为参考值下限,建立不同性别的胰岛素参考范围.女性胰岛素的参考范围为2.6～11.8 mU/L,男性胰岛素的参考范围为2.3～11.6 mU/L,不同于胰岛素其他检测方法 的参考范围.胰岛素与体重指数和三酰甘油旱明显正相关(r值分别为0.115、0.143,P值分别为0.019、0.004),与高密度脂蛋白呈明显负相关(r=-0.179,P=0.000).25℃胰岛素活性可稳定4 h,4 ℃可稳定24 h,-20℃胰岛素至少可以稳定7 d.结论 性别是影响人血清胰岛素水平的重要生理因素,应根据不同性别设立胰岛素的参考范围.胰岛素免疫学活性在各种温度条件下并非很稳定.     

血糖新评估指标1,5脱水山梨醇正常人群参考区间的建立

目的：建立1,5脱水山梨醇（1, 5-anhydroglucitol,1,5AG）的正常人群参考区间,并验证其临床适用性。方法：选取2015年8月至2017年12月,上海市宝山区中西医结合医院的健康体检人群1 175名（其中男性510名,女性665名）作为参考区间建立组,分析年龄、性别间的1,5AG水平差异,建立1,5AG正常人群参考区间;另选取同期上海市宝山区中西医结合医院内分泌科就诊的患者,根据糖尿病诊断标准（WHO 1999年）将患者分为验证疾病组（300例,其中男性136例）及验证对照组（169例,其中男性75例）,以自建参考区间对验证疾病组及验证对照组进行判断,1,5AG检测结果在参考区间内判为阴性,小于参考区间判为阳性,比较2个验证组间的阳性率用以验证自建1,5AG参考区间的临床适用性。结果：1,5AG水平在不同年龄及性别间存在差异,小于30岁男性的参考区间为86~418 μmol/L,女性为37~382 μmol/L;30~59岁男性的参考区间为79~406 μmol/L,女性为43~297 μmol/L;大于等于60岁阶段男性的参考区间为86~404 μmol/L,女性为27~278 μmol/L。根据自建参考区间判断,验证疾病组中糖尿病患者的1,5AG水平低于验证对照组（非糖尿病患者）,验证疾病组糖尿病患者的1,5AG阳性率高于验证对照组（71% 比5%）,提示自建的1,5AG参考区间适用于临床应用。结论：本研究以上海地区人群为基础,建立了1,5AG的参考区间,其有性别、年龄差异,为今后设计大规模人群参考区间提供参考。