治疗药物浓度监测用质控物的制备和应用

目的：对治疗药物监测用液体质控血清的制备进行研究,并对其稳定性进行观察。方法：用15％乙二醇小牛m清配制含茶碱、苯巴比妥及卡马西平的治疗药物浓度监测用质控血清。将其用于室间质评,在同一时间在全国32家实验室进行测定；同时,在本实验室对其进行连续两年的监测,观察其稳定性。结果：以全国32家实验室测定均值作为总体,用本实验室测定均值与其比较,进行t检验,茶碱、苯巴比妥及卡马西平的浓度变化无统计学意义(P值均＞0．05)。结果表明,液体血清在2～8℃条件下保存2年后,茶碱、苯巴比妥和卡马西平浓度值均稳定性良好。结论：该液体质控m清的均一性、稳定性良好,可以作为室内、室间质控物使用。     

全国红细胞沉降率室间质量评价

目的：通过开展室间质量评价活动提高临床实验室检测质量。方法：每年定期向参加红细胞沉降率室间质量评价活动的单位发放质评物，参加实验室用常规方法并回报结果，部临检中心对回报进行结果统计分析。结果：2001、2002全国红细胞沉降率室间质评的平均及格率分别为96．4％、93．3％。结论：大部分实验室的测定结果成绩较好，但仍存在一些问题有待解决。     

375例抗癫痫药物血药浓度监测结果分析

目的 通过对抗癫痫药物血药浓度的监测,为调整药物剂量、评价药物不良反应和保证治疗效果提供依据。方法 采用荧光偏振免疫法及高效液相色谱法对未合并用药的138例服用丙戊酸、151例服用卡马西平、21例服用苯妥英、65例服用苯巴比妥的癫痫患者进行血药浓度监测。结果 丙戊酸、卡马西平、苯妥英和苯巴比妥有效血药浓度范围分别为50-100、4—12、10-20和15-40μg／mL,有效血药浓度范围内的控制率明显高于浓度范围外的控制率。苯妥英和苯巴比妥均有中毒病例发生。结论 血药浓度监测对抗癫痫药物的个体化给药十分必要,应紧密结合临床症状,做到安全、有效用药。     

HPLC法同时测定3种抗癫痫药物血药浓度

采用反相高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的血药浓度，操作简便，重复性好，灵敏度高，分析时间短。药物浓度C与峰面积比A（As／Ai）呈良好的线性关系（γ皆0.9999），相对回收率分别为101.6％，110．71％，107．10％；日内日间RSD皆≤6.14％。适用于临床常规检测。     

2014年全国血清治疗药物监测(卡马西平、地高辛、苯妥英、茶碱、丙戊酸)室内质量控制结果分析

目的 调查全国血清治疗药物监测(卡马西平、地高辛、苯妥英、茶碱、丙戊酸)室内质量控制的精密度现状,并与目前所确定的室内质量控制精密度的评价标准进行比较,提出改进措施。方法 采用基于Web方式的室间质量评价(EQA)软件系统,收集2014年2月份参加全国血清治疗药物监测EQA计划的175家实验室的室内质量控制数据,包括当月的和累积的室内质量控制变异系数、质控规则、所使用的方法、仪器、室内质控品的厂家等信息。使用Microsoft Excel 2013和SPSS 13.0对数据进行分析。将EQA范围(地高辛为20%,其余项目为25%)定义为允许总误差(TEa),将1/3TEa和1/4TEa定义为允许不精密度的评价标准,计算这5个项目的室内质量控制变异系数的通过率。血清治疗药物监测项目的允许不精密度评价标准为8.33%(1/3TEa)和6.25%(1/4TEa),地高辛为6.67%(1/3TEa)和5%(1/4TEa)。结果 分别有94家、97家、61家、43家和116家实验室回报了卡马西平、地高辛、苯妥英、茶碱、丙戊酸的室内质控数据。>60%的实验室(63.93%~76.29%)使用伯乐检测系统,只有<40%的实验室(23.71%~36.07%)使用其他检测系统。不同项目间的室内质控变异系数通过率都存在显著统计学差异,卡方值为10.689~19.255,均P<0.05。不同检测系统间,只有丙戊酸在当月和累积不精密度在1/3TEa时的通过率存在显著统计学差异(P<0.05)。结论 通过对当月和累积的室内质控数据的变异系数的监测,并将室内质量控制数据计算的变异系数与相关要求进行比较,可以评价该检测系统的不精密度水平是否满足规定的质量要求。     

抗癫痫药物的血清浓度、疗效和不良反应观察

目的：观察癫痫患在长期服用抗癫痫药物期间的血药浓度，疗效和严重的不良反应。方法：采用美国产全自动荧光免疫偏振分析仪和相应的试剂药盒对本市可评价的213例癫痫患进行血药浓度监测，并观察各种抗癫痫药物的疗效和严重不良反应。结果：卡马西平，丙戊酸，苯胺英，苯巴比妥和氯硝西泮分别有95．7％，45．8％，30．4％，80．5％和70．3％例次在有效治疗血药浓度范围中；严重不良反应较少见；卡马西平和丙戊酸疗效较佳，苯妥英疗效较差，结论：卡马西平（除婴儿痉挛外）和丙戊酸宜作为癫痫患的首选药物，血清浓度分别宜控制在6－8μg/ml和60－90μg/ml，苯妥英不宜用于癫痫的治疗。     

2012年儿童药物浓度监测分析

目的对本院2012年儿童血药浓度监测结果进行回顾性分析,为临床合理用药提供依据。方法采用酶增强免疫分析法(EMIT)测定,对服用丙戊酸钠、苯妥英、卡马西平、地高辛、茶碱、甲氨蝶呤、环孢素、他克莫司的病人进行血药浓度监测,并对4055例监测结果进行统计和分析。结果丙戊酸钠的受检例数最多,2679例(75.89%),平均浓度(58.70±25.97)μg/ml,地高辛的受检例数最少,只有2例。三个免疫抑制剂项目中,甲氨蝶呤的受检例数最多,463例(31.1%)。结论血药浓度监测对指导儿童临床合理用药具有重要作用。     

一种基于常规生化仪的低成本治疗药物监测新技术

目的：国内尚无市售自主研发的治疗药物监测（ therapeutic drug monitoring, TDM）酶放大免疫检测原理（ enzyme multiplied immunoassay technique, EMIT）试剂盒。比较基于EMIT的自主研发试剂盒与Viva-E试剂盒和基于FPIA的AXSYM检测试剂盒用于TDM相关性能,评价其用于TDM的可行性。方法通过进行卡马西平、丙戊酸和苯巴比妥方法学比较,评价Viva-E、AXSYM分析仪配套检测试剂盒和自主研发试剂盒的灵敏度、准确度及精密度。并对83例卡马西平、80例丙戊酸和72例苯巴比妥临床样本进行检测,比较自主研发试剂盒和AXSYM分析仪配套检测试剂盒测定结果相关性。结果3种试剂盒分别测定卡马西平、丙戊酸和苯巴比妥的回收率均高于90％。其中自主研发试剂盒3种药物的回收率在98．7％～103．9％,定量下限依次为2、10、5μg／mL,精密度均＜10％,标曲单点校正后结果偏差＜3％。其血清样本检测结果与AXSYM试剂盒检测结果相关性较好（R2＞0．985）,差异无统计学意义（P＞0．05）。 Bland-Altman分析的95％ LOA依次为（－1．32,1．26）、（－15．24,15．17）和（－3．69,3．00）,仅有5％的点落于95％置信区间外。结论自主研发试剂盒性能与现进口试剂盒基本一致,方法学结果符合生物样本检测要求,可用于临床生物样本检测。     

反相高压液相色谱法测定人血清苯巴比妥、苯妥英、卡马西平

采用反相高压液相色谱法测定抗癫痫药物苯巴比妥、苯妥英及卡马西平的血清浓度。用苯乙酮作内标,甲醇:水(40/60,V/V)作流动相,流速为0.5ml/min,柱温为60℃,检测波长为216nm。用丙酮沉淀血清蛋白质,离心后直接进样,进样量2μ1。计算待测药物及内标峰高,用内标法测定药物含量。苯巴比妥、苯妥英、卡马西平最低检测限分别为1μg/ml,0.5μg/ml,0.5μg/ml。除氯硝安定干扰卡马西平测定外,安定、丙戊酸、异戊巴比妥、巴比妥、利眠宁、血清内源性物质及药物代谢产物均不影响测定。本法操作简便,精密度及准确性良好。     

抗癫痫药物的血清浓度监测

目的 观察癫痫患者在长期服用抗癫痫药物期间的血清药物浓度、疗效和严重药物不良反应.方法 自1989年1月至2006年1月,采用美国产全自动荧光免疫偏振分析仪和相应的试剂药盒对本市可评价的273例癫痫患者进行血清药物浓度监测,并观察各种抗癫痫药物的疗效和严重不良反应.结果 卡马西平、丙戊酸、苯妥英、苯巴比妥和氯硝西泮分别有91.1%、46.9%、30.4%、72.8%和86.9%例次在有效治疗血药浓度范围内;严重不良反应较少见;卡马西平和丙戊酸疗效较佳,苯妥英疗效较差.结论 卡马西平(婴儿痉挛除外)和丙戊酸宜作为各型癫痫患者的首选药物,单用时血清药物浓度分别宜控制在6～10μg/ml和60～100μg/ml;苯妥英尽可能不用于癫痫的治疗.     

癫痫病人撤换苯妥英钠和苯巴比妥的临床研究

目的探讨在癫痫病人中用卡马西平、托吡酯替换苯妥英钠、苯巴比妥的临床效果。方法将62例原先使用苯妥英钠、苯巴比妥的癫痫病人,采用首选卡马西平或托吡酯进行渐进缓慢先添加新药、后撤退原用药的方法,对苯妥英钠、苯巴比妥进行替换。结果30例病人完全由卡马西平单药替换,11例病人完全由托吡酯单药替换。撤换时间为3～6个月的复发率为38％,而撤换时间为7～12个月的复发率为18％,两者差异有显著性（P〈0．05）。结论卡马西平、托吡酯均可推荐作为选择的药物对苯妥英钠、苯巴比妥进行替换。     

全国血站血清丙氨酸氨基转移酶检验室间质量评价

目的：通过血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）检验室间质量评价工作，掌握全国血站血清ALT检验状况，使ALT检验逐步规范化，提高血站实验室ALT检验的水平和质量。方法：参照美国AABB／CAP能力验证检验方案，建立我国血站血清ALT检验室间质量评价方案。通过定期向全国参评实验室寄发质控样品，然后对其回报数据进行统计分析，作出实验室检验水平评价，检验方法学评价及试剂盒临床使用评价。结果：从2001年三次质评结果看，获满分的实验室从53．7％提高到64．3％（速率法）、从24．8％提高到48．3％（赖氏法），全年平均得分在80分以上的实验室所占百分比为；ALT（速率法）71．7％，ALT（赖氏法）45．9％。速率法与赖氏法相比较，在检验CV值（精密度）方面，速率法比赖氏法要低约10个百分点；在检验准确性方面，速率法比赖氏法的符合率要高约10个百分点。试剂临床使用质量评价反映出，国产ALT检验试剂质量较差，速率法试剂质量优于赖氏法试剂。结论：开展全国血站血清ALT检验的室间质量评价，有助于提高实验室的检验水平，有助于临床检验试剂盒的选用及检验方法的改进。     

全国血站丙型肝炎病毒抗体检验室间质量评价

目的：通过丙肝病毒抗体检验室间质量评价工作，掌握 全国血站丙肝病毒抗体血液筛查状况，使献血员血液筛查逐步规范化，提高血站实验室检验的水平和质量。方法：依据国际标准化组织颁布的ISO指南“实验室能力验证试验的建立和实施”，参考美国AABB/CAP血液检验室间质量评价方案，建立我国丙肝抗体检验室间质量评价方案。通过定期向全国参评实验室寄发质控样品，然后对其回报的数据进行统计分析，作出实验室检验水平评价、试剂临床使用评价。结果；参加室间质量评价的单位为：2000年有235家血站参数，2001年有270家血站参加，2002年有310家血站参数。2000-2002年共计发放9批45支质控样品，其中32支阳性样本，13支阴性样本。2000-2002年阳性样本检出率的平均值为98.8%,阴性样本检出率的平均值为99.6%.2000-2002年获满分的实验室所占百分比为：2000年94.9%,2001年79.8%，2002年97.3%，对9批质控样品检测使用国产试剂（主要厂家）的符合率最低为：2000年97.1%，2001年90.5%,2000年97.1%；使用进口试剂（主要厂家）的符合率最低为；2000年100%，2001年86.0%,2002年95.0%。对强阳性或弱阳性样本检测 ，国产试剂（主要厂家）的平均吸光度值A/临界值co高于进口试剂；但对阳性及阴性样本检测，国产试剂（主要厂家）的CV值要大大低于进口试剂。结论：通过室间质评，血站实验室检验水平有明显提高，试剂使用逐步规范化。在检验试剂方面，几家主要国产厂家的试剂灵敏度要高于同类进口试剂，但国产试剂在特异性方面，试剂批内及批间精密度方面较进口试剂仍有差距。     

胶束电动毛细管色谱法和荧光偏振免疫法测定癫痫患者血浆中苯妥英浓度的比较

目的:比较治疗药物监测中胶束电动毛细管色谱法(MECC)和荧光偏正免疫法(FPIA)测定血浆中苯妥英的浓度。方法:收集该院31例服用苯妥英的癫痫患者稳态浓度的血浆样品,分别以MECC和FPIA进行测定,用回归法考察两种方法测定结果的相关性。结果:两种方法无显著差异,具有良好的相关性(P>0.05)。回归分析的线性方程YFPIA=1.044×XMECC,相关性分析r=0.967。结论:MECC法可在无TDx仪的情况下替代FPIA,而且成本较低,快速简便。适用于苯妥英单用,以及苯妥英与常用抗癫痫药物(卡马西平、扑米酮、丙戊酸、苯巴比妥、氯硝西泮)合用的临床监测。     

Antiepileptic drug-induced multidrug resistance P-glycoprotein overexpression in astrocytes cultured from rat brains

Background Intractable epilepsy may be due to multidrug resistance induced by conventional antiepileptic drugs. The phenomenon is sometimes associated with an overexpression of multidrug resistance gene 1 ( MDR1 ). The purpose of this study was to determine if the overexpression of MDR1 could be induced in astrocytes from rat brains in vitro using antiepileptic drugs.Methods Astrocyte cell cultures from postnatal Wistar rats (within 24 hours of birth ) were established. Different concentrations of the antiepileptic drugs phenytoin, phenobarbital,carbamazepine, and valproic acid were added to the cultures for 10, 20, or 30 days. The expression of P-glycoprotein (Pgp), the protein product of MDR1, was investigated with immunocytochemistry.Results Less than 5% of normal, untreated astrocytes had detectable Pgp staining at any time point. Phenytoin, phenobarbital, carbamazepine, and valproic acid induced the overexpression of Pgpin astrocytes in a dose- and time-dependent manner. Significantly higher levels of Pgp staining were detected at therapeutic concentrations of certain antiepileptic drugs (20 μg/ml phenobarbital, 40μg/mlphenobarbital, and 20μg/ml phenytoin) on day 30. Upregulation of Pgp was detected when using higher concentrations of phenytoin, phenobarbital, and valproic acid on day 20 and when using higher concentrations of any of the four antiepileptic drugs on day 30.Conclusions Treatment with antiepileptic drugs may contribute to the overexpression in astrocytes of MDR1 and its protein product, Pgp. The mechanism leading to MDR must be considered in patients under qoinq lonq-term treatment with antiepileptic drugs.     

An audit of therapeutic drug monitoring of anticonvulsants.

An audit of therapeutic drug monitoring (TDM) of anticonvulsants was performed to assess both its use and misuse in the management of patients with epilepsy. Over a four week period all samples received for phenytoin, carbamazepine, sodium valproate and phenobarbitone assays were included in the audit. The aims were to establish the source of the specimens, the reasons for the requests and to ascertain what action, if any, would be taken when the result of the assay was provided. A total of 163 separate assays were performed over the four week period (43 phenytoin, 74 carbamazepine, 41 valproate, 5 phenobarbitone). Only 18.7% of all requests originated from the adult neurology department. The vast majority of tests had been ordered by junior medical staff (only 10% by consultants) and approximately 50% were 'routine' with no satisfactory clinical reason for the request offered. There was a tendency to manipulate prescribed doses on the basis of drug levels alone without taking the clinical picture into consideration. These results demonstrate a general ignorance, especially amongst junior medical staff, of the value of TDM of anticonvulsants, and reinforce the need for both an educative and interpretive service to be provided by the Chemical Pathology Department.     

酶联免疫吸附试验测定血清苯妥英钠浓度

建立酶联免疫吸附实验测定苯妥英钠血药浓度的方法。方法采用碳二亚胺法将化学修饰后的苯妥英钠与人血清白蛋白结合,再与被氧化物酶结合,作为酶标抗原,自制免抗苯妥钠多克隆抗体。结果抗苯妥英钠ＩｇＧ稀释倍数１：２００、酶标记抗原１：１００时,标准曲线最理想;该方法的测定灵敏度为２．８７μｇ／ｍｌ,线性范围２．９－３０μｇ／ｍｌ,批内变异系数３．３％－１０．２％,批间变异系数５．１％－１３．２％,回收率９０％     

大疱性表皮坏死松解型药疹致疹药物文献分析

目的 了解引发大疱性表皮坏死松解型药疹的药物致疹发生频率.方法 收集1989~2011年文献中有关大疱性表皮坏死松解型药疹的报道病例,对致疹药物进行统计,并分析致疹药物的不良反应发生率,推算大疱性表皮坏死松解型药疹的发生率.结果 统计表明,引发大疱性表皮坏死松解型药疹的药物品种有51种,阳性病例176例,抗感染药物涉及17种69例,神经精神类药物6种46例,解热镇痛药物4种28例.单一品种中卡马西平引发个案26例（发生率为5.04%）,氨基比林引发个案18例（发生率为0.68%）,苯巴比妥和阿莫西林各9例（发生率分别为1.24%和0.37%）.结论 引发大疱性表皮坏死松解型药疹的药物以抗生素类药物、神经精神类药物和解热镇痛类药物常见,致疹发生率较高的药物有卡马西平、苯妥英钠、别嘌醇和扑热息痛等.     

乡镇卫生院、社区卫生服务中心临床实验室常规生化室间质量评价

目的评价乡镇卫生院、社区卫生服务中心临床实验室常规生化项目的检测能力。方法由宝鸡市临床检验中心向各参评单位统一发放质控样本,每年2次,每次发放5个不同批号质控样本,在规定的时间内对15个项目进行测定。将测定结果通过宝鸡市临床检验质控中心室间质量评价网络上报系统进行回报。所有数据由该系统收集、处理和分析。结果常规生化项目5次室间质量评价总成绩合格率依次为20.9%、23.00%、43.0%、68.13%、77.5%,合格率逐次提高(P<0.05)。结论参加常规生化室间质量评价,可以帮助实验室分析实验室中存在的问题,采取相应的措施提高检测结果的质量,减小实验误差,保证检验结果的准确性。