大肠癌c-met基因mRNA定量表达研究

目的：检测c-met基因在大肠癌中的表达情况及其在大肠癌侵袭转移过程中的变化规律。方法：采用荧光实时定量PCR方法检测30例大肠癌及切端正常大肠组织c-met基因的mRNA转录水平，采用免疫组织化学sP法检测其蛋白表达情况。结果：c-met在63％（19／30）的正常大肠组织和90％（27／30）的大肠癌组织中阳性表达。大肠癌组织中c-met在mRNA转录和蛋白水平的表达均高于正常大肠组织（P〈0．05）。c-met的表达与大肠癌的淋巴结转移、浸润深度和Dukes分期明显相关，差异具有显著性（P〈0.05）；而与大肠癌的病理组织学类型和分化程度无关（P〉0．05）。结论：c-met在大肠癌的侵袭与转移中发挥着重要作用。检测c-metmRNA含量可作为判断大肠癌浸润、转移的良好参考指标。并可为将来大肠癌的诊断、分期和治疗开辟一个新的方向     

结直肠癌中血管紧张素转移酶mRNA的表达及其临床意义

目的对结直肠癌组织和癌旁组织ACE mRNA进行定量,分析其表达与临床特征的关系,探讨其临床意义。方法运用实时荧光定量PCR检测31例结直肠癌组织及对应癌旁组织ACE mRNA的表达水平,分析其与分化程度、临床分期和转移状态等临床病理特征的相关性。结果 ACE mRNA在低分化结直肠癌患者组的表达明显高于高中分化患者组（P〈0.05）;在有转移患者组的表达明显高于无转移患者组（P〈0.05）;在临床Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期患者组的表达无显著性差异（P〉0.05）。结论 ACE在结直肠癌的分化和转移中发挥着较为重要的作用。     

结直肠癌组织中hTcf-4 mRNA表达的研究

目的:研究hTcf-4mRNA在结直肠癌组织及癌旁正常组织的表达,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法:用荧光定量PCR检测31例结直肠癌标本及相应的癌旁正常组织hTcf-4mRNA的表达。结果:31例癌组织hTcf-4mRNA表达高于癌旁正常组织(P<0.05);Dukes不同分期结直肠癌hTcf-4mRNA表达随着浸润深度的加深其表达有增高趋势(P<0.05)。结论:hTcf-4mRNA在结直肠癌组织中表达增高,并与结直肠癌侵袭转移有关,可作为判定结直肠癌转移及预后的参考指标。     

基质金属蛋白酶-2、7在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨结直肠癌中基质金属蛋白酶-2、7(MMP-2、MMP-7)的表达及其临床意义.方法 采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)法和免疫组化法检测42例结直肠癌组织及其邻近正常黏膜组织中MMP-2 mRNA和MMP-7 mRNA及其蛋白,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系.结果 结直肠癌组织MMP-2 mRNA、MMP-7 mRNA的转录水平和MMP-2、MMP-7的表达水平均显著高于邻近正常黏膜组织(P均<0.05),且均与浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期正相关.结直肠癌组织MMP-2 mRNA转录水平和MMP-7 mRNA转录水平、MMP-2表达水平和MMP-7表达水平均呈正相关(rs=0.454,P=0.003;rs=0.343,P=0.026).结论 MMP-2和MMP-7在结直肠癌发生发展中起重要作用,联合检测二者有助于结直肠癌的恶性程度及生物学行为的判断及预后评估.     

实时荧光定量RT—PCR检测结直肠癌外周血hTERT mRNA的表达及临床意义

结直肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,死亡率较高。在常规影像学发现肿瘤转移之前检测到外周血中隐匿存在的肿瘤细胞对预测肿瘤复发、转移、指导临床治疗等方面具有重要意义。端粒酶与细胞恶变、肿瘤的发生发展密切相关,而端粒酶催化亚基（hTERT）可能在端粒酶活性调节中起重要作用。为此,本研究采用实时荧光定量PCR检测结直肠癌外周血hTERTmRNA的水平,探讨其在直肠癌中的表达及意义。     

Caspase-9在结直肠正常黏膜和癌中的表达

目的:定量测定Caspase-9基因在人类结直肠癌及癌旁正常组织中的表达,从而探讨其在结直肠癌发病中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR技术测定88例配对的结直肠癌组织及癌旁正常组织中Capase-9 mRNA的表达,并分析表达的变化与临床病理特征的关系。结果:Caspase-9在结直肠癌中相对于癌旁正常组织表达下调(P=0.003)。结直肠癌组织分化程度与Caspase-9表达下调相关(P=0.048),与Dukes分期、年龄、性别及是否淋巴结转移无关。结论:Caspase-9在结直肠癌的发病中可能发挥了重要作用,并参与了肿瘤组织的分化。     

胃癌组织中β-catenin mRNA表达水平及临床意义

目的:检测胃癌组织标本β-catenin mRNA表达水平,并探讨其临床意义.方法:以β-actin为内参照,采用实时荧光定量PCR技术检测45例胃癌患者术后胃癌组织标本、肿瘤边缘5 cm外的正常组织β-catenin基因mRNA的表达水平,并进行比较.结果:胃癌患者术后胃癌组织标本β-catenin mRNA表达水平较正常组织标本高(P<0.01);肠型胃癌β-catenin mRNA表达水平高于弥漫型胃癌(P<0.05);TNM分期早期胃癌β-catenin mRNA表达水平低于晚期(P<0.05);淋巴结有转移者高于无转移者(P<0.01),且与浸润深度相关(P<0.01);胃癌β-catenin mRNA表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关.结论:β-catenin mRNA在胃癌组织中呈高表达,是评价疾病发生、发展的良好指标.     

结直肠癌组织NEDD9的表达及临床意义

目的探讨神经前体细胞发育下调表达蛋白（NEDD9）在结直肠癌组织中表达及意义。方法采用免疫组织化学法,检测NEDD9在92例结直肠癌组织及其癌旁正常组织中的表达,并分析NEDD9表达与结直肠癌临床病理因素及预后的关系。结果 NEDD9在结直肠癌组织中表达阳性68例,癌旁正常组织中表达阳性12例,差异有显著性（χ2=65.35,P〈0.01）;NEDD9在结直肠癌组织表达与TNM分期及其中的pT、pN、pM有关（χ2=3.960-11.476,P〈0.05）。单因素和多因素生存分析显示,NEDD9高表达病人5年总生存率低于35%,NEDD9是影响结直肠癌预后的独立因素（P=0.025）。结论 NEDD9与结直肠癌的侵袭与转移密切相关,NEDD9高表达有可能成为判断结直肠癌病人预后的一个标记物,并为治疗提供新的分子靶点。     

胃癌组织中β-catenin mRNA表达水平及临床意义

目的:检测胃癌组织标本β-catenin mRNA表达水平,并探讨其临床意义。方法:以β-actin为内参照,采用实时荧光定量PCR技术检测45例胃癌患者术后胃癌组织标本、肿瘤边缘5 cm外的正常组织β-catenin基因mRNA的表达水平,并进行比较。结果:胃癌患者术后胃癌组织标本β-catenin mRNA表达水平较正常组织标本高(P<0.01);肠型胃癌β-catenin mRNA表达水平高于弥漫型胃癌(P<0.05);TNM分期早期胃癌β-catenin mRNA表达水平低于晚期(P<0.05);淋巴结有转移者高于无转移者(P<0.01),且与浸润深度相关(P<0.01);胃癌β-catenin mRNA表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关。结论:β-catenin mRNA在胃癌组织中呈高表达,是评价疾病发生、发展的良好指标。     

Caspase-7在结直肠正常黏膜、腺瘤和癌中的表达变化

目的:通过检测caspase-7基因在结直肠正常黏膜、腺瘤、癌中的表达变化并分析其与临床病理特征间的关系.方法:采用实时荧光定量PCR技术对52例结直肠腺瘤以及118例配对的结直肠癌和癌旁正常组织中的caspase-7表达进行测定.结果:Caspase-7在结直肠正常黏膜(P=0.001)和癌(P=0.001)中相对于腺瘤低表达.而在结直肠癌中的caspase-7表达明显低于癌旁正常黏膜(P=0.001).临床病理学特征的分析表明低分化(P=0.021)以及有淋巴结转移(P=0.011)的结直肠癌caspase-7的表达水平更低.结论:Caspase-7在腺瘤中高表达,而在癌中低表达,且表达变化与肿瘤分化及有无淋巴结转移相关.这些均表明caspase-7可能参与了结直肠癌的发生、发展.     

结肠癌组织中蛋白酶活化受体-1的表达及意义

目的 探讨结肠癌组织中蛋白酶活化受体-1（PAR-1）mRNA的表达情况及其临床意义.方法 实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测33例结肠癌患者癌组织及其相应癌旁组织中PAR-1 mRNA的表达情况,分析PAR-1 mRNA与结肠癌分化程度、病理分期以及转移等指标的相关性.结果 结肠癌组织中PAR-1 mRNA的表达明显增高,比邻近癌旁组织平均高4.99倍;二者ΔCt比较,t=9.15,P〈0.01.同时低分化的结肠癌患者组PAR-1 mRNA表达量明显高于中、高分化患者组,P〈0.01;有转移患者组的PAR-1 mRNA表达量明显高于无转移患者组,P〈0.01;而在结肠癌临床Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期患者组之间,PAR-1 mRNA表达量差异无统计学意义,P〉0.05.结论 PAR-1 mRNA在结肠癌中高表达,且与结肠癌的分化及是否转移有关.     

Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白在结直肠癌中的表达意义

目的探讨结直肠癌Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(FLIP)(S)mRNA的表达水平及其临床意义。方法建立检测FLIP(S)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),用该方法检测结直肠癌组织及其癌旁正常组织FLIP(S)mRNA表达水平。结果 FLIP(S)mRNA在结直肠癌组织和癌旁正常组织都有表达,在结直肠癌组织表达水平为0.23±0.19,明显高于癌旁正常组织0.13±0.10(P<0.05)。FLIP(S)mRNA表达水平与结直肠癌组织学分级密切相关(P<0.05),肿瘤分化程度越低,FLIP(S)mRNA的表达水平越高。结论 FLIP(S)在结直肠癌组织中表达升高;在分化越低组织中其表达水平越高;为揭示结直肠肿瘤的发生、发展提供新的理论依据,并为结直肠癌的有效治疗提供新的思路。     

大肠癌患者门静脉血CK20mRNA检测的临床意义

目的：检测大肠癌患者门静脉血CK20mRNA的表达情况，探讨其临床意义。方法：用实时定量荧光逆转录聚合酶链（FQ-PCR）方法，检测72例大肠癌患者门静脉及周围静脉血CK20mRNA的表达情况。结果：大肠癌患者门静脉血CK20mRNA表达的阳性率（72％）高于周围静脉血（43％）（P〈0．01），大肠癌Dukes C，D期门静脉血CK20mRNA高于A，B期（P〈0．01）。结论：门静脉血CK20mRNA表达的检测比周围静脉血检测更准确、敏感，是判断体内隐性播散的可靠方法。     

Galectin-3蛋白在大肠癌中的表达及意义

Galectin-3是一种半乳糖苷结合蛋白，它与特异性细胞表面糖蛋白或糖脂的糖结合域结合。研究显示，Galectin-3在正常细胞及肿瘤中都广泛表达，并起着调节细胞生长与分化、细胞黏附和细胞凋亡的作用，在一些细胞类型中与肿瘤的转化有关。我们采用免疫组化检测55例大肠癌、33例腺瘤及20例正常大肠黏膜组织Galectin-3蛋白的表达，希望能对了解肿瘤转移及判断预后有一定帮助。     

凋亡抑制蛋白Livin在大肠腺瘤-癌序列中的表达差异及意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin在大肠癌、大肠腺瘤及正常大肠黏膜中的表达差异及在不同临床病理特征的大肠癌中的表达差异。方法应用免疫组化ABC法检测Livin在正常大肠黏膜、大肠腺瘤及大肠癌中的表达部位;应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测LivinmRNA在64例大肠癌、36例大肠腺瘤及12例正常黏膜中表达量的差异及其意义。结果 (1)Livin在正常大肠黏膜中不表达,在大肠腺瘤组织中,Livin少量表达在腺泡的底部,而在大肠腺癌组织中呈全层上皮高表达,但两者在LivinmRNA水平上的表达量差异有统计学意义(P=0.001)。大肠腺瘤与正常黏膜相比较,LivinmRNA表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)在大肠癌组织中,LivinmRNA在直肠癌组中表达高于结肠癌组(P=0.001),LivinmRNA表达与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、Duke′s分期、淋巴转移及肿瘤组织类型无关,与肿瘤浸润深度有相关性。结论 (1)凋亡抑制蛋白Livin参与了大肠肿瘤的发生,且在大肠腺瘤-腺癌阶段起到了作用。(2)Livin基因在直肠癌中表达更高,其高表达与大肠癌的浸润密切相关。     

Clinical significance of alpha-fetoprotein mRNA in blood of patients with hepatocellular carcinoma

BACKGROUND: Alpha-fetoprotein (AFP) messenger RNA (mRNA) in the blood reflects the presence of circulating hepatocellular carcinoma (HCC) cells and is a sensitive marker of HCC extrahepatic metastases. The specificity of this molecular marker and its correlation with the main HCC clinical-pathological parameters remains controversial, however. METHODS: AFPmRNA was determined in 50 HCC patients and in 50 patients with diagnosis of cirrhosis (6), or colon (24) or, pancreatic (20) carcinoma. HCC patients with clinically evident extrahepatic metastasis were excluded. HCC diagnosis was confirmed in all patients by histology on percutaneous biopsies or surgical specimens; pathological grading was assessed at the same time. RESULTS: AFPmRNA was positive in 20 HCC patients (40%) and in 18 patients without HCC (36%). The presence of AFPmRNA in the blood correlated significantly with cholestatic indices (p<0.01), nodule size (p=0.03), vascular invasion (p=0.006) and moderately or poorly differentiated HCC (p<0.0001). Moreover, survival analysis showed a significant impact of AFPmRNA detection on overall (p=0.04) and recurrence-free survival (p=0.0007) after a median follow-up of 17 months. CONCLUSIONS: Although AFPmRNA is frequently detected in the blood, even in benign liver diseases or gastroenteric tumors, in HCC patients without clinical evidence of extrahepatic metastases it seemed to identify the biologically more aggressive tumors.     

乳腺癌组织中PSAmRNA的表达及临床意义

目的　探讨PSAmRNA在乳腺癌组织、癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤组织中的表达及其在乳腺癌发生发展中的意义。方法　以β actin作为内部参照半定量RT PCR方法检测 35例乳腺癌组织、12癌旁乳腺组织和 10例乳腺纤维瘤中PSAmRNA的表达。结果　在乳腺癌组织中PSAmRNA阳性表达率为 5 4 2 8% ,癌旁乳腺组织中为 83 3% ,乳腺纤维瘤中为 90 0 %。乳腺癌组织中PSAmRNA阳性表达率明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤者 ,差异有显著性 (P =0 0 4 1)。而且PSAmRNA在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤组织 ,差异有显著性 (t=5 394、4 6 32 ,P均 =0 0 0 0 )。结论　乳腺癌组织中PSAmRNA的表达水平低于癌旁乳腺组织和乳腺纤维瘤 ,表达下调。     

大肠癌组织中COX-2的检测及其临床意义

目的 探讨COX-2的表达与肿瘤血管密度(MVD)值及临床病理特征的关系,以揭示COX-2在肿瘤的形成、发展和新生血管形成过程中所发挥的作用.方法 采用免疫组织化学法和RT-PCR法测定45例标本的COX-2表达水平,采用CD105标记肿瘤组织中的新生血管计算MVD值,分析COX-2、MVD值与大肠癌生物学性质的关系,分析COX-2表达与MVD的相关性.结果COX-2 mRNA和蛋白的表达在肿瘤是否有淋巴结转移,Dukes分期和肿瘤的不同分化程度各个分组之间差异有统计学意义(均P＜0.05).MVD值在肿瘤是否有淋巴结转移、Dukes分期、浸润深度各个分组之间差异均有统计学意义(均P＜0.05).大肠癌中COX-2在蛋白水平和基因转录水平的表达均与MVD值有正相关(P＜0.05).结论COX-2可能在大肠癌的发生和发展中起重要作用,COX-2促进新生血管的生成,从而促进大肠癌的浸润和转移.     

骨桥蛋白mRNA在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的检测大肠癌外周血中的骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达,探讨其与临床病理分期及淋巴转移的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应技术检测52例大肠癌患者(大肠癌组)外周血单个核细胞中OPN mRNA的表达,并以33例大肠腺瘤患者(大肠腺瘤组)及20例健康人(健康对照组)外周血作为对照。结果 OPN mRNA在大肠癌组外周血单个核细胞中表达的阳性率为65.4%,大肠腺瘤组OPN mRNA阳性率为33.3%,健康对照组外周血中均无靶OPN mRNA表达。大肠癌组与大肠腺瘤组OPN mRNA阳性表达率均高于健康对照组(P均<0.01),大肠癌组OPN mRNA阳性表达率高于大肠腺瘤组(P<0.05)。随着大肠癌Dukes分期的升高,其外周血单个核细胞中OPN mRNA表达阳性率逐渐增高(P<0.05)。有淋巴结转移的表达阳性率高于无淋巴结转移及对照组(P均<0.01);无淋巴结转移患者与大肠腺瘤组之间差异无统计学意义。结论外周血单个核细胞中OPN mRNA阳性表达对大肠癌的淋巴转移及预后判断具有一定价值。     

胸苷酸合成酶mRNA和二氢嘧啶脱氢酶mRNA在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,TS)mRNA和二氢嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidinedehydrogenase,DPD)mRNA在结直肠癌中的表达及其与临床病理的关系。方法:采用半定量RT-PCR检测54例结直肠癌肿瘤及临近正常肠黏膜中TSmRNA和DPDmRNA的表达,比较酶表达水平与临床病理间的关系,并对其中10例采用免疫组化进行蛋白表达定位。结果:结直肠癌组织中TSmRNA含量(1.37±0.72)显著高于正常肠黏膜(0.97±0.59)(P