锰过氧化物酶对染料刚果红脱色工艺条件的初探

利用锰过氧化物酶对染料刚果红进行降解脱色试验。研究表明：锰过氧化物酶对染料刚果红的最佳脱色条件为H2O2添加量0．15mmol／L,pH5．5,反应温度40℃。     

黄孢原毛平革菌合成锰过氧化物酶的工艺

研究了多种营养条件及培养条件对黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium )WX2 13合成锰过氧化物酶的影响 .当培养基中葡萄糖质量浓度为 10 g/L ,酒石酸铵质量浓度为0 .2 g/L,吐温 80质量浓度为 1g/L ,MnSO4 ·H2 O为 0 .14g/L ,采用苯二甲酸缓冲液 ,最终pH 4 .5 ,2 5 0mL的三角瓶装液量 90mL ,接种量为 1.2× 10 6mL- 1时所获酶活较高 .经条件优化后锰过氧化物酶的活力达到 5 5 9U/L ,比未优化前提高了 36% .加入染料培养 ,发现该酶对所选用的偶氮染料、三苯甲烷类染料、杂环类染料均有较好的脱色效果     

EDTA对木质素过氧化物酶在染料脱色中的影响

在反应液中含 2mmol/LEDTA时 ,2 4h后染料甲基橙的脱色率比未加EDTA的下降约70 % .添加 2mmol/LEDTA明显地抑制了木质素过氧化物酶 (LiP)对多种染料的脱色 .酶动力学研究表明 :EDTA对LiP的抑制属非竞争性抑制 .添加比EDTA稍大量的Zn2 + 能解除EDTA对LiP的抑制 ,其他多种金属离子也能减轻EDTA的抑制作用 .     

染料脱色细菌的筛选及脱色条件的研究

对镇江印染厂泥土中的微生物进行筛选,得到一株对孔雀绿染料具有较强脱色能力的细菌,经初步鉴定为铜绿假单胞菌属(Paeudomonas aeruginosa).并研究了染料浓度、培养时间、培养温度、起始pH值等因素对脱色率的影响.通过正交试验,得出菌种的最佳培养条件为:染料质量浓度50 mg/L,培养时间72 h,培养温度28℃,发酵液起始pH值7.0.     

印染废水的生物酶脱色

染料广泛应用于印染及其他工业。印染行业使用染料有一个特点 ,即一个工厂使用的染料其结构也是多种多样 ,工业废水组成差异很大。因此 ,强调对诸多变化的印染废水进行处理十分必要。经过活性污泥法处理的 90 %的活性染料未发生任何变化就被排放出去。染料污染物具有潜在的毒性和致癌性 ,这一点已引起人们关注。物理和化学方法无法使目前使用的全部染料得到降解或去除 ,有时降解产物毒性甚至更大。一些使用合适的厌氧和嗜氧的联合生物处理可提高染料的降解性 ,但是在厌氧条件下 ,偶氮还原酶通常将偶氮染料分解为相应的胺类 ,其中许多会致低…     

共表达谷氨酰-tRNA还原酶增强染料脱色过氧化物酶在大肠杆菌中的表达活性

染料脱色过氧化物酶(dye-decoloorizing peroxidase,DyP)属于以血红素为辅基的新型过氧化物酶类,常因缺乏辅因子而导致催化活性低。将来源于褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的染料脱色过氧化物酶基因(TfuDyP)与大肠杆菌谷氨酰-tRNA还原酶基因(hemA),构建重组质粒phemA-DyP,转化至E.coli BL21中进行共表达。分别以2,2-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和顽固性染料活性蓝19(RB19)、溴酚蓝、溴甲酚绿为底物检测TfuDyP的催化活力以及染料脱色效率。结果表明,诱导后的共表达菌株pAD胞内血红素含量为9. 8μmol/L,而单独过表达基因TfuDyP的菌株pD仅为3. 4μmol/L。TfuDyP纯酶的全波长扫描分析表明,在菌株pAD中DyP酶与血红素的结合度相比pD有较大幅度的提升。pAD菌株表达的DyP酶活力较pD菌株提高了110%,酶活力的提高使其在染料脱色应用方面也得到增强。在pAD菌株培养基中分别添加谷氨酸(Glu)、FeCl2使得胞内血红素含量、DyP酶活力和染料脱色效率比未添加时进一步提高。以上结果为TfuDyP的功能开发奠定了基础,同时也为其他血红素依赖性过氧化物酶的研发提供借鉴。     

锰过氧化物酶产生菌的发酵优化及酶学性质研究

采用愈创木酚初筛平板从无锡惠山、龙山等地筛选出6株阳性菌株,通过摇瓶复筛从中得到一株产MnP活性较高的菌株SYBC—M3;同时进行部分发酵产酶条件的研究。在此基础上,对得到的MnP进行了粗酶的部分酶学性质研究。结果表明,当培养基中豆粕20g／L、蛋白胨10g／L、Tween-200．5g／L、Mn^2＋ 1．5mmoL／L,起始pH5．0时,MnP的活力有较大程度的提高,可达1775U／L;其最适作用温度55℃,最适pH5．0;同时其温度和pH稳定性也较好;pH9．0下24h还可保持90％以上的活性。     

白腐真菌处理染料孔雀石绿的研究

实验研究了白腐真菌B在不同振荡条件下、不同染料浓度、不同碳源浓度等环境因素对孔雀石绿脱色效果的影响。实验结果表明菌株B在染料浓度为100mg·L-1,振荡速度为150r·min-1,碳源浓度为20g·L-1时,其脱色率最高。     

黄孢原毛平革菌产蛋白酶对过氧化物酶的影响

在培养黄孢原毛平革菌产生木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)过程中产生的胞外蛋白酶与LiP和MnP的快速失活有关.该蛋白酶在pH 7的条件下酶活很高,其主要作用是促进LiP和MnP的分解,而不是抑制它们的产生.HgCl2是蛋白酶的抑制剂,其抑制机理类似于HgCl2对蛋白酶K(PK)的抑制.添加HgCl2的发酵液能提高过氧化物酶的酶活和稳定性,最佳添加量为1 μmol/L,最佳添加时间在接种后第5天.     

不同碳源对Klebsiella pneumoniae WA-1孔雀石绿脱色和降解的影响

利用变色圈法从孔雀石绿污染的养殖池塘中筛选到1株具有较强孔雀石绿脱色和降解能力的细菌,经过16S rDNA基因序列比对及系统进化树分析,结合VITEK 2微生物鉴定系统,鉴定该菌为Klebsiella pneumoniae,重命名为K.pneumoniae WA-1.采用分光光度法和硼氢化钾还原-高效液相色谱法研究不同...     

介质阻挡放电电离质谱法快速筛查水产品中孔雀石绿及其代谢物

建立了采用介质阻挡放电电离质谱(DBDI-MS/MS)技术对水产品中孔雀石绿(MG)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)进行快速筛查的方法.样品经提取净化后,在氦气流量为3 L/min、离子源温度为230℃的DBDI 离子源条件下,正离子模式下采用多反应监测(MRM)进行质谱检测.在此条件下,MG和LMG在1～20 μg/...     

玉米朊脱色用活性炭的筛选及其脱色工艺的优化

针对现有玉米朊脱色技术研究中存在的不足,首先建立了玉米朊脱色效果的科学评价方法;其次,以玉米朊保留率和色素残存率为综合评价指标,对不同来源的商用活性炭产品进行了筛选;在此基础上,对影响活性炭脱色效果的因素如脱色时间、脱色温度等工艺参数进行了优化。结果表明,不同厂家生产的活性炭脱色效果存在显著差异,其中活性炭P的脱色效果最佳。优化的脱色工艺参数为:脱色时间1.5 h、固液比1∶75、玉米朊质量浓度40 mg/mL、脱色温度35℃、乙醇体积分数90%、溶液pH 7.0、脱色次数1次。验证试验表明,脱色溶液中玉米朊保留率为67.28%,色素残存率为21.07%,每毫克玉米朊中色素含量为4.609×10-2μg。     

水产品中残留孔雀石绿液质联用分析方法研究

研究了一种针对水产品中残留孔雀石绿和无色孔雀石绿的液质联用分析方法。采用固相萃取方法对样品中的目标物进行净化前处理,以乙腈- 醋酸铵缓冲液作流动相分析食品中的孔雀石绿和无色孔雀石绿,缩短了色谱分离时间,提高了检测灵敏度和分析结果的可靠性,并对柱后衍生化和非衍生化方法以及DAD 和MS 检测方法进行了比较。结果表明本方法具有准确、快速以及灵敏度高的特点,能够适应大规模样品的快速分析要求,目前此方法已经用于水产品中残留孔雀石绿的分析检测。     

孔雀石绿单克隆抗体的制备及鉴定

以合成的孔雀石绿- 牛血清白蛋白(MG-BSA)为免疫原免疫Balb/c 小鼠,利用杂交瘤细胞技术,建立1 株稳定分泌孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞5G6,其分泌的抗体亚类为IgG1,轻链为κ型。间接ELISA 测定腹水效价达1.28 × 105。间接竞争ELISA(ciELISA)显示其对孔雀石绿的50% 抑制浓度(IC50)为1.36ng/ml,除结晶紫(CV)外,与无色孔雀石绿(LMG)没有交叉反应。     

孔雀石绿多克隆抗体的制备与筛选

设计并成功合成了三种孔雀石绿半抗原,所有半抗原均采用活化酯法分别与血匙兰蛋白(KLH)偶联制备成免疫抗原,与卵清蛋白(OVA)偶联制备成包被抗原。利用所制备的三种免疫原免疫新西兰大耳白兔都获得了高效价的抗孔雀石绿抗体,并将每一种抗体都与三种包被抗原进行组合配对,通过间接竞争酶联免疫吸附检测(ELISA)方法筛选出最佳的抗体-包被抗原组合,筛选出的抗体采用Sepharose FF-Protein A亲和层析柱纯化,采用间接ELISA法测定效价及鉴定特异性。经测定筛选出的抗体效价达到1:12000,IC50值为0.65 ng/mL,交叉反应表明该抗体有较好的特异性,与结构类似物结晶紫的交叉反应率为18.73%,与隐性孔雀石绿及隐性结晶紫的交叉反应率低于10%。本研究为建立快速检测食品中孔雀石绿残留的免疫分析方法奠定了基础。     

绿茶微粉对染料亚甲基蓝和孔雀石绿的吸附研究

亚甲基蓝和孔雀石绿是造成水体污染的偶氨工业染料.本文研究在不同的颗粒、pH、吸附剂量、吸附时间条件下绿茶微粉对亚甲基蓝和孔雀石绿的吸附效果,并分析其吸附速率曲线和吸附等温线.结果表明,常温下绿茶微粉能够较好地吸附亚甲基蓝和孔雀石绿,且颗粒越小吸附效果越佳;亚甲基蓝和孔雀石绿最佳吸附pH分别是7和5,吸附饱和量分别是19.37 mg/g和16.50 mg/g.在初始染料质量浓度20 mg/L条件下,240 min左右可达到吸附平衡.吸附动力学分析表明,绿茶微粉对亚甲基蓝和孔雀石绿的生物吸附平衡数据均与拟二级速率方程拟合度较好,吸附规律分别符合Langmuir和Freundlich等温式.     

孔雀石绿褪色光度法测定食品中亚硫酸盐含量

研究了测定食品中亚硫酸盐的最佳检测条件,建立了简便测定食品中亚硫酸盐的褪色光度法。实验发现:在温度25℃、pH7.0磷酸盐缓冲液条件下反应5min,亚硫酸盐能使孔雀石绿褪色,在最大吸收波长615nm处测量孔雀石绿的褪色强度。亚硫酸盐含量在0～0.6mg/L范围内呈良好线性关系,回归方程为:ΔA=0.65C+0.0603,其测定相关系数为0.9997,方法的最低检出限为0.1μg/ml,加标回收率为95.8%～103.1%。本法所用仪器简单、操作方便、选择性好,应用于食品中亚硫酸盐的测定结果令人满意。     

木素基吸附材料对孔雀绿的吸附性能研究

以木素磺酸镁为原料,制备了木素基吸附材料,采用静态吸附实验方法研究了该吸附材料(LBCA)对孔雀绿的吸附性能。考察了溶液pH值、溶液初始浓度、吸附时间、吸附温度对吸附过程的影响。结果表明,当pH为10,温度为306K下,吸附量可达0.825mmol/g,LBCA对孔雀绿的吸附较符合Langmuir吸附等温式;吸附是自发进行的,并且是吸热过程,LBCA对孔雀绿的吸附符合二级动力学模型。     

孔雀石绿的禁用及其替代药物美婷

水霉病是水产养殖中常见的真菌性疾病,且危害严重. 过去防治水霉病最有效的药物是孔雀石绿,但孔雀石绿具有高毒性、致癌、致畸和致突变的副作用,我国于2000年将其列为禁用药物. 然而,由于孔雀石绿抗水霉效果好、廉价易得、缺少相应代替药物等因素,偷用行为时有发生且屡禁不止,严重危害水产品的质量安全. 由上海海洋大学研发的“美婷”制剂在全国多省市的实践应用中显示出较好的抗水霉效果和安全性,对彻底杜绝孔雀石绿的使用,保障水产品的质量安全具有重大意义.