乳腺癌生物学行为变化中钙黏蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白和增殖细胞核抗原的作用

目的:探讨细胞黏附分子钙黏蛋白(E-cad)、层粘连蛋白(LN、Ⅳ型胶原蛋)白(ColⅣ)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达与乳腺癌生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学技术对80例乳腺癌标本E-cad,LN,ColⅣ和PCNA的表达进行检测。结果:非侵袭性癌、分化Ⅰ级及临床早期的乳腺癌中,E-cad低表达率分别为5%,11%及27%;LN和ColⅣ的低表达率分别为11%和21%,11%和21%,52%和48%;PCNA的高表达率分别为37%,37%及41%。侵袭性癌、分化Ⅲ级及临床晚期的乳腺癌中,E-cad低表达率分别为62%,88%及75%;LN和ColⅣ的低表达率分别为77%和82%,75%和88%,86%和92%;PCNA的高表达率分别为69%,81%及86%。无转移和有转移者中,E-cad低表达率分别为14%及69%;LN和ColⅣ的低表达率分别为28%和38%,80%和84%;PCNA的高表达率分别为24%及82%。生存期≥5年和生存期<5年者中,E-cad低表达率分别为28%及83%;LN和ColⅣ的低表达率分别为44%和50%,90%和97%;PCNA的高表达率分别为44%及90%。结论:E-cad,LN,ColⅣ和PCNA的表达可作为判断乳腺癌浸润转移及预后的重要指标。     

系膜增生性肾小球肾炎患者尿Ⅳ型胶原、层粘连蛋白水平的变化及意义

目的探讨系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)患者尿Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、层粘连蛋白(LN)的变化及其与病理改变的关系和作用.方法采用放射免疫分析法对42例肾功能正常的轻、中度系膜增生及合并肾小管病变患者及78例正常人尿C-Ⅳ、LN水平进行检测.结果MsPGN患者尿C-Ⅳ、LN水平[(42.87±5.12)μ g/L,(92.34±29.18)ng/L]明显高于正常对照组[(10.83±1.65)μ g/L,(14.45±5.2)ng/L](P＜0.001);随着系膜增生程度的增加尿C-Ⅳ、LN水平递增,在伴有肾小管病变患者尿C-Ⅳ、LN水平增高最为明显.结论MsPGN存在胶原代谢的异常,尿C-Ⅳ、LN水平随肾脏病理损害的严重程度而增高,尿C-Ⅳ、LN可作为评估MsPGN肾功能的早期指标.     

二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化模型肝脏超微结构形态学与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的变化

背景:肝纤维化的发展伴随诸多的形态学和机能学的改变,二甲基亚硝胺所致的大鼠肝纤维化模型病变类似于人类肝纤维化病变。目的:观察二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化发生过程中形态学与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的动态变化。设计:随机对照动物实验。单位:延边大学医学院病理教研室实验室。材料:选用80只3月龄Wistar雄性大鼠,清洁级,体质量175～200g,由延边大学医学院动物中心提供。试剂:二甲基亚硝胺美国Sigma公司产品,α-平滑肌肌动蛋白为Dako公司产品,天狼猩红(Siriusred)为Aldrichchem公司产品,血清透明质酸、层粘连蛋白和Ⅳ型胶检测试剂盒为华美生物工程公司产品,兔抗鼠的一抗为Dako,Denmak生物公司的产品。仪器:日本产JEM-1200EX透射电镜;日本产酶联免疫检测仪;北京航空航天大学研制开发的CMTAS多功能真彩色病理图象分析系统。方法:实验于2004-06/2005-12在延边大学医学院完成。摸球法随机将大鼠分成2组。模型组(n=40):给予腹腔注射10g/L二甲基亚硝胺(10μL/kg),1周连续注药3d(1次/d),持续4周;对照组(n=40):在同一时间段内注射同样剂量的生理盐水;分别在实验开始7,14,21,28d处死大鼠,处死前左心室取血,血清样品被冷冻在-70℃的低温冰箱中备实验用,处死后取其肝组织用于光镜和电镜的样品制备。①用ELISA法测定在肝纤维化形成过程中血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的动态变化。②采用苏木精-伊红染色、组织化学的天狼猩红染色观察肝纤维化形成过程中组织形态学变化及对肝纤维化分级(肝纤维化程度分为0～4级,0级:没有肝纤维化;1级:汇管区有纤维化;2级:汇管区与汇管区之间形成纤维间隔;3级:肝小叶中出现纤维间隔,并且肝的正常结构出现病理改变;4级:形成肝硬化),同时计算胶原纤维的面密度。③采用透射电镜技术、免疫组织化学的α-平滑肌肌动蛋白染色观察肝星状细胞的转化情况及分布特点。④对肝纤维化形成过程中胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白含量的相关分析。主要观察指标:①肝纤维化形成过程中血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的变化。②肝纤维化形成过程中形态学变化、肝纤维化的分级情况及胶原纤维的面密度。③肝星状细胞的转化情况及分布特点。④肝纤维化形成过程中胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白含量的相关分析结果。结果:纳入80只大鼠,实验组34只造模成功,与对照组40只全部进入结果分析。①模型组第7天至28天血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量明显高于对照组(P<0.05),其中第28天增加程度最大。②模型组汇管区在腹腔注射二甲基亚硝胺后第7天出现出血坏死,第14天仍可在汇管区观察到出血、坏死,并且还可见较薄的纤维间隔,第21和28天可见较厚的纤维间隔;模型组大鼠腹腔注射二甲基亚硝胺后第7,14,21,28天胶原纤维面密度的百分比明显高于对照组(P<0.05),其中第28天增加的幅度最大;对照组大鼠纤维化病理分级与模型组大鼠各时间点相比差异显著(P<0.01),模型组大鼠的第7天较第14,28天组有明显差异(P<0.01)。③a-平滑肌肌动蛋白染色有阳性细胞出现,并且在这一阶段在电镜下观察到正处在“转化的肝星状细胞”;模型组第21和28天,在电镜下观察到典型的成纤维细胞。④胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量呈正相关(r=0.707,0.675,0.662,P<0.01)。结论:二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化发生过程中,在不同时间段内形态学与血清标志物透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原呈动态变化,并且在不同的时间段内胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量呈正相关。     

慢性肾脏病患者血清和尿透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原及层粘连蛋白的变化及其临床意义

目的探讨慢性肾脏病患者血清和尿透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、层粘连蛋白(LN)的变化与肾功能的关系。方法将90例慢性肾脏病患者分为肾功能正常组、氮质血症组、尿毒症组,对照组为健康体检者,测定血、尿HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ含量。结果血清C-Ⅳ、LN及PCⅢ水平:氮质血症组、尿毒症组与对照组组间差异,氮质血症组与尿毒症组组间差异均有统计学意义(P0.01)。血清HA水平:各组间差异均有统计学意义(P0.01)。氮质血症组、尿毒症组血清HA、PCⅢ、C-Ⅳ、LN水平分别与血肌酐(Cr)水平呈正相关。尿液C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ水平:各组间差异均有统计学意义(P0.01)。尿液HA水平:氮质血症组、尿毒症组与对照组组间差异,及氮质血症组与尿毒症组组间差异均有统计学意义(P0.01)。氮质血症组、尿毒症组尿液C-Ⅳ、LN水平分别与血Cr水平呈正相关(P0.05),氮质血症组、尿毒症组尿HA分别与血Cr水平呈负相关(P0.01)。结论血清、尿液HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ的变化可作为临床判断肾纤维化发生与发展的间接参考指标,联合测定四种指标在血清和尿中的变化情况,比单一指标检测可能可以进一步提高判断肾纤维化发生和进展的敏感性和特异性。