化痰通络中药对急性脑梗死模型大鼠溶栓治疗后内质网应激诱发神经细胞凋亡的影响

目的明确化痰通络中药对急性脑梗死模型大鼠溶栓治疗后内质网应激诱发神经细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将160只健康SD大鼠随机等分为4组,即假手术组、模型组、rt-PA组、rt-PA+化痰通络组,每组再随机分为6h、1d、3d、7d四个时相,假手术组以生理盐水造模作为对照,其余各组以栓子盐水悬液制造大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,造模成功后假手术组和模型组尾静脉注入生理盐水干预,rt-PA组尾静脉注入rt-PA干预,rt-PA+化痰通络组给予尾静脉注入rt-PA和化痰通络中药灌胃干预。采用原位末端标记法(TUNEL)观察各组大鼠不同时相海马CA3区神经元凋亡情况,并采用流式细胞仪计数凋亡神经元。通过Western blot法检测梗死脑组织GADD153/CHOP、TRB3和Akt蛋白表达水平。结果同一组内与6h时相比较,各组在24h、72h时相神经元凋亡具有显著性差异(P0.05),并以24h神经元凋亡最多。同一时相内与假手术组比较,模型组神经元凋亡显著升高(P0.05)。同一时相内与模型组比较,rt-PA组在24h、7d时相神经元凋亡明显低于模型组(P0.05),rt-PA+化痰通络组各个时相神经元凋亡均显著降低(P0.05)。与rt-PA组相比,rt-PA+化痰通络组在1d和3d时相神经元凋亡显著(P0.05),其余时相均有降低的趋势。rt-PA+化痰通络组TRB3表达受到抑制(P0.05),而Akt表达受到促进(P0.05)。结论化痰通络中药可明显减轻急性脑梗死模型大鼠溶栓治疗后内质网应激诱发的神经元凋亡,且其机制可能与抑制TRB3和促进Akt蛋白表达有关。     

化痰通络方对急性脑梗死大鼠溶栓后脑微血管内皮细胞构成蛋白基因表达的影响

目的： 观察化痰通络法对急性脑梗死大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂（rt-PA）溶栓后脑微血管内皮细胞构成蛋白基因表达的影响,为化痰通络法防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注损伤提供实验依据。 方法： 240只健康SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络方低、中、高剂量联合rt-PA组（联合组）,每组40只,采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型（MCAO）,rt-PA组与化痰通络方联合rt-PA组于血栓注入后3 h一次性予以rt-PA溶栓治疗,后者联合给予低、中、高剂量（生药3.6,7.2,14.4 g·kg^-1）化痰通络方灌胃治疗,每日2次,分别于造模后6,24,72 h,7 d 4个时点,应用RT-PCR法观察不同时相大鼠皮质及海马紧密连接蛋白Occludin,claudin-1,Zonula occludins protins-1（ZO-1）基因的表达。 结果： 在不同时点,各实验组在不同脑组织中Occludin,claudin-1,ZO-1基因表达量均在6 h最高,24 h最低,72 h,7 d数值逐渐升高,且联合组升高趋势更明显。与组内6 h时比较,rt-PA组、联合低、中、高剂量组Occludin,claudin-1,ZO-1基因表达量多于24,72 h（P < 0.05）。而同一时点与模型组相比,联合中、高剂量组各时点Occludin,claudin-1基因表达量均明显升高（P < 0.05）。而ZO-1基因表达量虽具有相似变化趋势,但仅在24,72 h,7 d差异具有统计学意义（P < 0.05）。 结论： 化痰通络方联合rt-PA溶栓,可通过调控微血管内皮细胞构成蛋白Occludin,claudin-1,ZO-1基因的表达,进而保护血脑屏障完整性,防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注损伤的发生与发展。     

化痰通络方对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后神经细胞凋亡途径中内质网应激相关基因GADD153/CHOP与JNK1表达的影响

目的:观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)后期神经细胞凋亡途径中生长抑制DNA损伤基因153(C/EBP homologous protein,GADD153/CHOP)和c-Jun氨基末端激酶-1(c-Jun NH2-terminal kinases-1,JNK1)基因表达的影响。方法:将160只健康SD大鼠随机分为假手术组,模型组,rt-PA组,化痰通络方联合rt-PA组(简称中药组)。采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组与中药组分别给予尾静脉注入rt-PA(5.67 mg·kg-1)及联合化痰通络中药(7.2 g·kg-1)干预,2次/d。于6 h,1,3,7 d 4个时相分别采用RT-PCR检测各组大鼠大脑皮质梗死区组织中GADD153/CHOP与JNK1 mRNA的表达,采用TUNEL法检测各组大鼠大脑神经元细胞的凋亡。结果:与假手术组比较,模型组在4个时相中GADD153/CHOP与JNK1基因表达均明显增高(P0.05),同一时相内与假手术组比较,模型组神经元凋亡显著升高(P0.05);与模型组比较,rt-PA组和中药组在4个时相中均可降低JNK1 mRNA的表达量(P0.05),同时rt-PA组在1 d时可降低GADD153/CHOP mRNA的表达,而中药组可在6 h和1 d时同时降低其表达,差异显著(P0.05),rt-PA组在1 d和7 d时相神经元凋亡明显低于模型组(P0.05),中药组各个时相神经元凋亡均显著降低(P0.05),但rt-PA组与中药组之间无明显差异。结论:化痰通络方可通过降低内质网应激后期神经细胞凋亡途径中GADD153/CHOP与JNK1 mRNA的表达,部分抑制神经细胞的凋亡,从而防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注的发生与发展。     

化痰通络法对急性脑梗死缺血再灌注损伤TNAF-2及Ask1蛋白的影响

目的:探讨化痰通络法对于防治脑梗死溶栓后缺血再灌注损伤时对细胞凋亡及与其相关的TNAF-2及Ask1蛋白的影响。方法:选择健康的SD大鼠160只,随机分为假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络法联合rt-PA组各40只。除假手术组在注射时以生理盐水代替栓子溶液外,其余各组按大脑中动脉栓塞(MCAO)模型制备。每组分6h,1 d,3 d,7 d四个时相。每组每个时相各取10只大鼠Western Blot检测方法,观察梗死脑组织神经细胞中TNAF-2及Ask1蛋白表达的变化。结果:对TNAF-2的影响:同一组内,和6 h相比,各组整体趋势均以1 d时相对丰度值为最高。同一时相内,与假手术组相比,模型组在四个时相中TNAF-2蛋白相对丰度值明显增高(P<0.05);与模型组相比,rtPA组和rt-PA+化痰通络组在四个时相TNAF-2蛋白相对丰度值均明显降低(P<0.05);与rt-PA组相比,rt-PA+化痰通络组在四个时相TNAF-2蛋白相对丰度值无明显变化(P>0.05);同一时相内,与假手术组相比,模型组在6 h、3d时相Ask1蛋白的相对丰度值均明显升高(P<0.05);与模型组相比,rt-PA组四个时相Ask1蛋白的相对丰度值均明显升高(P<0.05),rt-PA+化痰通络组四个时相Ask1蛋白的相对丰度值无明显差异(P>0.05);与rt-PA组相比,rtPA+化痰通络组在四个时相Ask1蛋白的相对丰度值均明显降低(P<0.05)。结论:化痰通络法可以降低TNAF-2及Ask1蛋白的表达,从而有效抑制脑缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡。     

化痰通络法对rt-PA溶栓后急性脑梗死大鼠神经细胞凋亡及Caspase-12表达的影响

[目的]观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠经重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓治疗后内质网应激(ERS)神经细胞凋亡途径中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)蛋白和基因表达及神经元凋亡的影响。[方法]选择160只健康的SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、rt-PA组和实验组共4组。采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),实验组与rt-PA组大鼠经尾静脉注入rt-PA(浓度:5.67 mg/kg)溶栓治疗,并联合化痰通络法中药灌胃(浓度:7.2 g/kg),每日2次。每组分别于为6 h、24 h、3 d和7 d 4个时相,观察梗死区域脑组织神经细胞Caspase-12蛋白和基因的表达,及神经元细胞凋亡的情况。[结果]与假手术组相比,模型组各时相Caspase-12蛋白与基因的表达量均明显增加(P0.05)。与模型组相比,除7 d时rt-PA组Caspase-12蛋白表达减少,差异无统计学意义(P0.05)外,rt-PA组和实验组在其他各时相Caspase-12蛋白与基因的表达均明显减少(P0.05)。与rt-PA组相比,实验组Caspase-12基因在1 d、7 d时表达量明显减少(P0.05),而Caspase-12蛋白表达差异无统计学意义(P0.05),但有下降趋势。[结论]化痰通络法中药可降低急性脑梗死大鼠溶栓治疗后梗死区域Caspase-12蛋白和基因的表达,该法可能通过影响该环节,进而部分抑制内质网应激后期神经细胞的凋亡,从而防治急性脑梗死溶栓后缺血/再灌注的发生与发展。     

化痰通络方对急性脑梗死溶栓后JNK mRNA表达的影响

目的:探讨化痰通络方对急性脑梗死溶栓后缺血再灌注损伤后调控内质网稳态关键靶点JNK mRNA的影响。方法:将健康SD大鼠160只随机分为假手术组、模型组、rt-PA组、rt-PA+化痰通络法联合组各40只。除假手术组在注射时以生理盐水0.3 mL代替栓子溶液外,其余各组按大脑中动脉栓塞(MCAO)模型制备。rt-PA组予5.67 mg/kgrt-PA溶栓治疗,化痰通络法联合rt-PA组在溶栓基础上予9 mL/kg中药浓煎剂灌胃治疗,2次/d。每组分别于6 h及1、3、7天4个时相各取10只大鼠采用RT-PCR检测方法,观察梗死部位脑组织JNK mRNA表达变化情况。结果:与模型组相比,rt-PA组3、7天时JNK mRNA表达量均下降(P0.05),rt-PA+化痰通络组4个时相JNK mRNA表达量均下降(P0.05);与rt-PA组相比,rt-PA+化痰通络组在第1天时JNK mRNA表达量下降(P0.05)。结论:化痰通络方可通过降低内质网应激后细胞凋亡性信号途径中JNK mRNA表达水平减轻应激脑神经细胞不可逆性致死,达到防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注损伤进一步发展的目的。     

化痰通络方对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后神经细胞自噬途径中Beclin1与LC3蛋白表达的影响

[目的]观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后神经细胞自噬途径中自噬相关蛋白(Beclin1)及微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白表达的影响。[方法]选择160只健康SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络方联合rt-PA组(简称中药组),每组采用6 h、1 d、3 d和7 d 4个时相。采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组与中药组分别给予尾静脉注入rt-PA(浓度为5.67 mg/kg)及联合化痰通络中药(浓度为7.2 g/kg)干预,每日2次。于相应时间点采用Western blot检测各组大鼠大脑皮质梗死区组织中Beclin1及LC3蛋白的表达。[结果]Western blot结果显示:与假手术组相比,模型组在4个时相中Beclin1和LC3蛋白的相对丰度值均明显增高(P0.05);采用rt-PA和rt-PA联合化痰通络法干预后,4个时相内Beclin1与LC3蛋白的相对丰度值均明显下降(P0.05);且rt-PA联合化痰通络组下降更加显著,与rt-PA组比较差异有统计学意义(P0.05)。[结论]化痰通络方可通过降低神经细胞自噬途径中Beclin1与LC3蛋白的表达,部分抑制神经细胞的过度自噬,进而保护神经细胞损伤,从而更好的防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注的发生与发展。     

化痰通络方对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后不同脑区星形胶质细胞特异性蛋白表达的影响

目的：观察化痰通络方对急性脑梗死大鼠重组组织纤溶酶原激活剂（rt-PA）溶栓后不同脑组织中星形胶质细胞相关特异性蛋白水通道蛋白4（AQP-4）及血清中S100β蛋白表达的影响。方法：将240只健康SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络方联合rt-PA组（中药低、中、高剂量组,剂量分别为3.6,7.2,14.4 g·kg^-1）,采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型（MCAO）,rt-PA组与化痰通络方联合rt-PA组于血栓注入后3 h一次性予以 5.67 mg·kg^-1 rt-PA溶栓治疗,后者联合给予低、中、高剂量化痰通络方中药灌胃治疗,6 h组于造模成功后给予中药1次;24 h组于造摸成功后及处死前2 h各给中药1次,共2次;72 h组于造模成功后开始给药,每日给中药2次,持续3 d,共6次;7 d组于造模成功后开始给药,每日给中药2次,持续7 d,共14次。分别于4个时相应用Western blot法观察不同时相大鼠皮质及海马AQP-4蛋白的表达,ELISA法检测血清中S100β蛋白的含量。结果：各实验组不同脑组织AQP-4相对丰度值及血清S100β含量自6 h起逐渐升高,24 h最高,随后逐渐降低,7 d时接近6 h水平;同一时相与假手术组比较,各实验组AQP-4及S100β蛋白均显著升高,说明造模成功。与模型组相比,中药中、高剂量组AQP-4蛋白于24 h或72 h或7 d时分别出现显著下降（P<0.05）,研究结果并无明显集中现象,但整体趋势表明中药中、高剂量组能明显减少AQP-4的表达;rt-PA组、中药低、中、高剂量组S100β虽未出现明显差异,但均有不同程度降低,且以中药组下降趋势明显。结论：①溶栓治疗后,血脑屏障结构及功能损害于24 h时最为严重;②化痰通络方联合rt-PA溶栓可降低不同脑组织中AQP-4表达及血清中S100β含量进而防治急性脑梗死溶栓后出血转化的发生与发展。     

化痰通络法对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后MMP-9酶原活化途径中金属蛋白酶MMP3与TIMP-1基因与蛋白表达的影响

目的观察化痰通络法对急性脑梗死大鼠rt-PA溶栓后MMP-9酶原活化途径中金属蛋白酶MMP3与TIMP-1基因与蛋白表达的影响,为化痰通络法防治急性脑梗死溶栓后出血转化提供实验依据。方法选择健康雄性SD大鼠240只,随机分为6组,即假手术组、模型组、rt-PA组、化痰通络法(分高、常规、低中药剂量)联合rt-PA组,每组又分在6 h、24 h、72 h、7 d四个时相,采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组及中药组分别于血栓注入后3 h一次性由尾静脉缓慢注入5.67mg/kg rt-PA,并分别给予高、常规、低剂量中药灌胃治疗(药量分别为:18ml/kg、9ml/kg、4.5ml/kg),每日2次。采用Western Blot法检测化痰通络法干预rt-PA溶栓后MCAO大鼠皮质中MMP-9蛋白表达变化的基础上,分别采用RT-PCR法与Western Blot法检测其对MMP-9上游激活物MMP-3、TIMP-1基因与蛋白表达的影响。结果与假手术组相比,模型组内各个时相大鼠大脑皮质梗死区MMP-9含量均显著增加,具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,rt-PA组MMP-9蛋白、MMP-3基因及蛋白表达量显著升高,而TIMP-1基因及蛋白表达呈下降趋势,差异具有显著性(P0.05)。同一组内不同时相比较,MMP-9蛋白表达量6h最低,并随时间延长逐渐递增,以72h时MMP-9蛋白表达量最高,7d时MMP-9蛋白表达量呈下降趋势,差异均具有统计学意义(P0.05);同一时相,与模型组比较,rt-PA组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组MMP-9的蛋白表达量皆有显著下降趋势(P0.01);与rt-PA组比较,中药中剂量组和中药高剂量组MMP-9的蛋白表达量仍有显著下降趋势(P0.05),虽无统计学意义,但在6h、1d时相以中药高剂量组降低MMP-9蛋白表达量更为明显,72h、7d时相则以中药中剂量组降低MMP-9的蛋白表达量趋势明显。同时与rt-PA组比较,中药中剂量组和中药高剂量组MMP-3表达均有下降(P0.05),且TIMP-1表达亦有上升趋势。结论化痰通络法联合rt-PA溶栓,可通过调控MMP-9上游不同活化途径中的关键因子,部分抑制其活化程度,保护血脑屏障完整性,同时针对溶栓后不同时相调整中药的用药剂量,可以更好的减轻溶栓后出血转化的发生与发展。     

益气化痰通络方对急性脑缺血模型大鼠缺血海马区神经再生及脑内脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察益气化痰通络方对急性脑缺血模型大鼠缺血海马区神经再生及脑内脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为假手术组、模型组、尼莫地平组和益气化痰通络方组,采用改良线栓法制备急性脑缺血大鼠模型。Ayelet Levy评分法测评大鼠神经功能评分,观察大鼠缺血海马区神经再生情况以及脑内BDNF表达的变化。结果模型组大鼠的海马神经元密度和神经功能缺损评分、Caspase-3蛋白含量明显下降(P 0.05),而海马神经元细胞脱落率、Bcl-2蛋白含量、BrdU阳性细胞数目以及BDNF mRNA、BDNF阳性表达和BDNF蛋白明显上升(P 0.05);给予尼莫地平和益气化痰通络方治疗后大鼠海马神经元密度和神经功能缺损评分、Caspase-3蛋白含量以及BDNF m RNA、BDNF阳性表达和BDNF蛋白明显提升(P 0.05),海马神经元细胞脱落率、Bcl-2蛋白含量明显下降(P 0.05),且尼莫地平组与益气化痰通络方组神经功能评分、细胞脱落率、BrdU阳性细胞数目以及BDNF m RNA和BDNF阳性表达比较,差异有统计学意义(P 0.05)。结论益气化痰通络方可改善急性脑缺血模型大鼠缺血海马区神经再生和神经功能损伤,提高BDNF表达。     

头针对脑缺血再灌注大鼠神经功能评分、脑梗死体积及皮层神经元损伤的影响

目的：观察头针对脑缺血再灌注大鼠神经功能、脑梗死体积及皮层神经元损伤的影响。方法：采用线栓法复制右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,采用12分评分法评定各组大鼠神经功能的缺损程度;TTC染色法测定不同时间点各组大鼠的脑梗死体积;HE染色法观察各组大鼠皮层神经元的损伤。结果：头针组大鼠在再灌注24h、48h、72h脑梗死体积较模型组下降最为明显（P〈0.05）;再灌注48h、72h神经功能缺损评分较同期模型组明显减低,具有显著性差异（P〈0.05）;再灌注48h、72h皮层神经元损伤较模型组明显减轻,神经元丢失减少。结论：随着针刺次数的增加和治疗时间的延长,头针可明显减小脑梗死体积、减轻大鼠的神经功能缺损程度和皮层神经元的缺血损伤,对脑缺血再灌注大鼠具有明显的神经保护作用。     

化痰通络法联合尿激酶溶栓对急性脑梗死大鼠血浆F1+2、D-D表达的影响

目的：通过观察化痰通络法联合尿激酶溶栓对急性脑梗死大鼠血浆凝血酶原片段1＋2（F1＋2）、D-二聚体（D-D）表达的影响,探讨其对大鼠脑梗死后凝血、纤溶系统的作用机制。方法：SD大鼠128只,随机分为4组,即假手术组、模型组、尿激酶组、化痰通络法联合尿激酶组（治疗组）,采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,分别给予中药灌胃及尿激酶溶栓,Elisa法检测化痰通络法联合尿激酶溶栓对急性脑梗死后6h、72h、7d、14d血浆F1＋2、D-D表达的影响。结果：化痰通络法联合尿激酶溶栓能明显抑制F1＋2、D-D的表达。结论：中药联合尿激酶对脑梗死溶栓后凝血、纤溶机制具有一定影响,可能是其发挥脑保护作用的机理之一。     

化痰通络法对急性脑梗死大鼠神经细胞凋亡蛋白表达的影响

目的:探讨化痰通络方对重组组织纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后的急性脑梗死大鼠内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)后期神经细胞凋亡途径中Caspase-3蛋白以及Caspase-9蛋白表达的影响。方法:将健康160只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、rt-PA组和实验组,每组各40只。采用自身栓子法以制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),rt-PA组与中药组分别给予SD大鼠尾静脉注入rt-PA(浓度:5.67 mg·kg-1)及联合化痰通络中药(浓度:7.2 g·kg-1)干预,,每日2次。每组分为6 h、1 d、3 d和7 d四个时相,并分别采用蛋白印迹法观察脑组织神经细胞中Caspase-9与Caspase-3蛋白的表达,采用TUNEL法观察各组大鼠脑神经元细胞的凋亡情况。结果:凋亡信号途径中Caspase-9蛋白以及Caspase-3蛋白的表达:与假手术组比较,模型组在4个时相中Caspase-9蛋白与Caspase-3蛋白表达量增加明显,差异具有统计学意义(P0.05);而与模型组比较,rt-PA组和实验组在4个时相中Caspase-9蛋白与Caspase-3蛋白的表达量均降低差异具有统计学意义(P0.05),与rt-PA组比较,实验组Caspase-9蛋白在1 d和7 d时表达量明显下低,Caspase-3蛋白在6 h、1 d、7 d时降低显著差异具有统计学意义(P0.05)。结论:化痰通络法可以通过降低内质网应激后期神经细胞凋亡途径中Caspase-9与Caspase-3蛋白的表达,并且部分抑制神经细胞的凋亡,从而防治急性脑梗死溶栓后缺血再灌注的发生与发展。     

化痰通络法联合尿激酶溶栓对急性脑梗塞大鼠不同脑区炎性因子的影响

目的 通过观察化痰通络法联合尿激酶溶栓对急性脑梗塞大鼠不同脑区炎性因子的影响,探讨其对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制.方法 SD大鼠136只,随机分为5组,即正常组、假手术组、模型组、尿激酶组、化痰通络法联合尿激酶组,采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,分别给予中药灌胃及尿激酶溶栓,Elisa法检测化痰通络法联合尿激酶溶栓对急性脑梗塞后6 h,72 h,7 d,14 d脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素细胞-1β(1L-1β)、细胞黏附因子-1(ICAM-1)等炎性因子蛋白表达的影响.结果 化痰通络法联合尿激酶溶栓能明显抑制TNF-α、1L-1β、ICAM-1蛋白的表达.结论 中药联合溶栓可减少溶栓后缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制相关炎性因子表达有关.     

化痰通络方治疗急性脑梗死临床观察

目的观察化痰通络方治疗急性脑梗死的临床疗效。方法将患者随机分为两组，对照组予以疏血通及奥扎格雷钠静脉输注，治疗组在对照组治疗基础上联合自拟方化痰通络方口服。均在治疗前及治疗14d比较两组神经功能缺损评分量表（NIHSS）~。结果治疗组治疗14d后NIHSS评分及临床症状的改善优于对照组（P〈0．05）。结论化痰通络方可促进神经功能恢复，提高临床疗效。     

针刺对脑梗死大鼠神经功能缺损及脑缺血体积的影响

目的:观察针刺对脑梗死大鼠神经功能缺损及脑缺血体积的影响。方法:将280只大鼠随机分为模型组90只、针刺组90只、假手术组90只、空白对照组10只。前三组又按术后1 h、3 h、6 h、9 h、12 h、24 h、3 d、7 d、12 d共9个时相分为9组,每时相各10只。以Longa腔内线栓法复制大鼠脑梗死模型为研究对象,采用神经症状评分(neuropathy symptom score,NSS)及TTC染色法观测脑梗死后不同时相神经功能缺损、脑组织缺血体积变化及电针人中穴的干预效应。结果:各时相针刺组、模型组NSS评分与空白组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。针刺组与同时相模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。针刺组、模型组脑缺血体积与空白组比较,差异均有统计学意义(P0.01);而假手术组与空白组比较,差异无统计学意义(P0.05)。与同时相模型组比较,针刺组脑梗死大鼠脑缺血体积6 h后均小于同时相模型组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:针刺能显著改善脑梗死后神经功能症状,减少脑缺血体积,可改善脑梗死的预后。     

地黄饮子加减方与化痰通络汤对MCAO大鼠神经功能的影响

目的观察地黄饮子加减方与化痰通络汤对大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠神经功能的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组[灌胃尼莫地平药液12 mg/(kg·d)]、地黄饮子加减方组[灌胃地黄饮子加减方药液7.9 g/(kg·d)]与化痰通络汤组[灌胃化痰通络汤药液6.5 g/(kg·d)],每组8只,假手术组和模型组灌胃等量蒸馏水,连续干预7天。建立MCAO大鼠模型,分别在术后3 h、6 h、1 d、6 d、7 d进行神经功能评分,采用放射免疫法检测干预后大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和血清皮质酮(cortisone,CORT)的水平,免疫组织化学染色法检测大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分升高,CRH、ACTH降低(P0.05,P0.01),CORT及脑组织MMP-9表达升高(P0.01)。与模型组比较,地黄饮子加减方组和化痰通络汤组大鼠神经功能评分明显降低,CRH、ACTH升高,CORT及脑组织MMP-9表达降低(P0.05,P0.01)。与尼莫地平组比较,地黄饮子加减方组血清CORT降低(P0.05),化痰通络汤组MMP-9表达降低(P0.01)。结论地黄饮子加减方与化痰通络汤均能明显改善MCAO模型大鼠的神经功能。其机制可能与地黄饮子加减方调节紊乱的HPA轴功能、化痰通络汤抑制大鼠MMP-9表达有关。     

强制性运动联合高压氧对脑缺血大鼠神经功能及GAP-43表达的影响

目的 观察强制性运动联合高压氧对局灶性脑缺血大鼠的不同时间点神经功能评分及灶周生长相关蛋白-43 （GAP-43）表达的影响.方法 将200只SD雄性大鼠采用插线法制作大脑中动脉闭塞（MCAO）局灶性脑缺血模型,随机分为假手术组、模型组、强制性运动组（CIMT组）、高压氧组和强制性运动联合高压氧组各40只,每组随机分为7d、14d、21 d、28 d和35d5个亚组,每个亚组各8只大鼠.造模24h后模型组和正常组动物自然饲养,不作特殊处理,其他组行相应治疗,分别于相应时间进行神经功能缺损评分,随后取脑采用免疫组织化学方法观察每个时间点脑梗死灶周围GAP-43的表达.结果 假手术组神经功能缺损评分为0,造模后各时间点强制性运动联合高压氧组大鼠神经功能缺损评分明显低于模型组、CIM组和高压氧组（P＜0.01）,与模型组比较,CIMT组、高压氧组在28 d和35 d神经功能缺损评分减低（P＜0.05）,CIM组在造模后35 d与高压氧组神经功能缺损评分相当（P＞0.05）.强制性运动联合高压氧组与模型组进行比较,在14、21、28 d时能够显著上调GAP-43表达（P＜0.05）,且强于CIMT组和高压氧组（P＜0.05）;在35 d缺血区周围GAP-43表达增加,但CIMT组和高压氧组差异无统计意义（P＞0.05）.结论 强制性运动联合高压氧可促进脑梗死灶周围GAP-43的表达,改善大鼠神经功能,可能与缺血损伤神经元的再生和修复有关.     

化痰通络法联合尿激酶溶栓治疗急性脑梗死临床研究

【目的】评价中药联合尿激酶溶栓治疗急性脑梗死的临床疗效,为脑梗死急性期临床综合治疗方案提供依据。【方法】将符合纳入标准的急性脑梗死患者60例,随机分为试验组和对照组。在常规治疗的基础上,试验组采用化痰通络法联合尿激酶治疗,对照组采用尿激酶治疗。两组尿激酶连续给药3d,试验组化痰通络中药汤剂,1剂/d,治疗14d。分别记录两组患者治疗前后的美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、Barthel指数评分、改良Rankin指数评分变化情况。[结果】化痰通络法联合尿激酶组在NIHSS评分、Barthel指数评分改善方面均优于尿激酶组（P〈0．05）;在残障（改良Rankin指数）评估方面,统计学处理两者虽无差异（P〉0．05）,但化痰通络法联合尿激酶组呈现出一定优势。【结论】1）化痰通络法联合尿激酶溶栓可改善脑梗死患者的神经功能,提高患者日常生活能力和社会活动参与能力,提升患者生存质量。2）中药联合尿激酶溶栓治疗急性脑梗死疗效确切,且优于单纯尿激酶溶栓治疗。     

柔肝通络汤对MCAO大鼠内源性干细胞表达的影响

目的观察柔肝通络汤对缺血再灌注脑损伤大鼠内源性神经干细胞增殖分化表达的影响。方法采用改良Longa法制作大鼠大脑中动脉堵塞(MCAO型)所致缺血再灌注脑损伤模型;将120只SD雄性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组(蒸馏水灌胃)和柔肝通络汤组(柔肝通络汤灌胃),其中按照缺血2 h再灌注6 h、1 d、3 d、7 d、14 d各分为5个亚组,每组6只。动态观察各时间点大鼠神经功能学评分;腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记脑组织内增殖细胞,分别采用BrdU/NeuN神经元核抗原(Neu N)、BrdU/GFAP胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记大脑皮质缺血区域新生神经元和星形胶质细胞,并计算阳性细胞数目。结果与模型组比较,柔肝通络汤组术后3、7、14 d神经功能缺损评分明显降低(P 0.05);柔肝通络汤组BrdU、BrdU/NeuN的阳性细胞数目均明显升高(P 0.05),BrdU阳性细胞数在第7日达到高峰,随后呈下降趋势,BrdU/NeuN在第3～7日增加迅速,第7日后增加缓慢;给药后BrdU/GFAP的阳性细胞数较模型组减少(P 0.05)。结论柔肝通络汤可以促进缺血再灌注脑损伤大鼠内源性神经干细胞增殖,并分化为成熟神经元,同时抑制星形胶质细胞的过度增殖,促进神经再生和修复,改善神经功能。