大鼠子宫肌层平滑肌细胞诱导血管生长与孕激素的相关性

目的 评价子宫肌层平滑肌细胞(myometrial smooth muscle cell,MSMC)诱导血管生成能力与孕激素的相关性.方法 由大鼠子宫分离培养MSMC用于:①体外研究:受到不同孕激素浓度( 10-13、10-11、10-9和10-7 mol/L)作用的MSMC内VEGF水平;受到孕激素刺激的MSMC内孕...     

子宫腺肌病与血管生成研究进展

子宫腺肌病是指子宫肌层内存在着子宫内膜腺体和间质,并在激素的作用下发生出血、肌纤维结缔组织增生,形成局限性病变或弥漫病变,是育龄期妇女一种常见而难治的疾病。近年来,其发生率有逐年上升的趋势,因其以痛经、月经不调及不育为主要临床症状,严重影响着广大育龄妇女的身心健康和生活质量。目前,由于该病的发病原因尚未完全明了,现就子宫腺肌病的侵袭、血管生成的研究现状综述如下：     

同源盒基因与血管生成

同源盒基因最初是Ｍｃｇｉｎｎｉｓ等在果蝇中发现的 ,在哺乳动物的同源盒基因中 ,有一类是成簇排列在染色体上 ,按前后轴方式表达 ,称为Ａ Ｐ型同源盒基因 ,分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四簇 ,分别位于 7、1 7、1 2、2号染色体上 ,称为共线性 ,每簇又按基因序列的同源性分为 1 3个组。另一类同源盒基因含有歧异的同源盒系列 ,包括许多散在的含同源盒基因及Ｏｃｔ家簇、ｅｎ家簇、ｅｖｘ家簇等。1　同源盒基因与血管发育胚胎发育期几种同源盒基因在心血管系统表达 ,并且产后持续表达。1 1　Ｈｏｘ基因在血管发育中的作用　关于同源盒基因参与血管发…     

增殖和血管生成相关因子在子宫腺肌病的研究进展

子宫腺肌病作为良性疾病,却出现恶性生长的行为：浸润、转移及复发,其发病机制尚不明确。目前众多研究中,以子宫基底层内膜向肌层生长、内陷,子宫内膜及腺体浸润增殖引发子宫腺肌病的学说具有较强说服力。异位内膜增殖与血管生成在疾病的发生发展中起着重要作用,但机理不尽相同,本文就影响子宫腺肌病发病进展的异位增殖及血管生成的相关因素做如下综述。     

VEGF的表达以及血管生成在子宫腺肌病中的意义

目的　通过检测子宫腺肌病在位内膜、异位内膜及异位内膜周围肌层平滑肌组织中VEGF的表达及MVD值 ,探讨血管生成在子宫腺肌病发病机制中的作用。方法　应用免疫组织化学法 (SABC法 )检测 5 6例腺肌病子宫及 2 6例正常子宫中VEGF的表达和MVD值。结果　VEGF在腺肌病组在位内膜和对照组正常内膜中的阳性表达率分别为 5 2 5 %和 46 2 % (P >0 0 5 )。在腺肌病组异位内膜中VEGF的阳性表达率为 75 0 % ,均明显高于在位内膜和对照组正常内膜 (P <0 0 5 )。在异位内膜周围肌层中的阳性表达率为 69 6% ,明显高于对照组子宫肌层 38 5 % (P <0 0 5 )。MVD与VEGF在异位内膜及异位内膜周围肌层中的表达水平呈明显正相关 (P <0 0 1 )。结论　VEGF的表达增强以及与MVD的正相关性提示血管生成在子宫腺肌病的发生发展中发挥作用。     

缺氧诱导因子1与子宫内膜肿瘤血管生成

缺氧诱导因子(HIF)是一类重要的调节缺氧反应基因的转录因子,由HIF-1α和HIF-1β两种亚基组成,在多数肿瘤中表达增高,与肿瘤的生长及其肿瘤血管生成密切相关。在雌二醇诱导子宫内膜肿瘤血管的生成中,HIF-1α是重要的中介物,雌二醇可能通过HIF-1α诱导血管内皮生长因子表达发挥作用,进而促进子宫内膜肿瘤的发生。因此抑制HIF活性可能是治疗癌症的一种途径。     

大鼠血管平滑肌细胞的培养和鉴定

目的:建立一种方便快捷的培养大量大鼠血管平滑肌细胞的方法,为心血管疾病的体外实验研究提供实验材料。方法:采用改良的组织块贴壁法进行原代培养,差异贴壁法纯化细胞,常规胰酶消化法传代,使用倒置相差显微镜进行形态学观察,通过检测平滑肌肌动蛋白对细胞进行免疫组化鉴定。结果:培养4代的平滑肌细胞纯度达96%以上。镜下可见培养细胞呈典型的"峰-谷"样生长,免疫组化染色显示胞质内平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论:本研究所介绍的组织贴块培养法较为成熟,可为心血管疾病病因、机制的研究和防治提供一个理想的实验材料。     

静止压力诱导血管平滑肌细胞的增殖与凋亡

目的 探讨静止压力对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响。方法 将胚胎鼠血管平滑肌细胞系A10细胞分别在正常大气压下、80、100、200mmHg等静止压力下培养;利用MTT法测定细胞成活率,流式细胞仪测试样品的细胞周期与凋亡率。结果在较低压力下（100mmHg）A10细胞成活率增加,细胞增殖,处于G0／G1期的A10细胞百分比显著降低,增殖指数（PI）显著升高,凋亡率与正常无差异;在200mmHg的压力下成活率降低,G0／G1期A10细胞百分比显著升高,细胞增殖受抑制,凋亡率亦显著增加。结论 较低的压力可促进血管平滑肌细胞增殖,而过高的压力则可诱导细胞凋亡。     

血管内皮细胞对血管平滑肌细胞影响的研究进展

血管内皮细胞(VECs)和血管平滑肌细胞(VSMCs)是血管壁的主要组成细胞。VECs能够保护血管内环境、维持血压以及调节血管运动,是维持血管生理功能平衡的关键。VSMCs可通过舒张和收缩改变血管直径使血管保持适当血压。VECs与VSMCs相邻,它能最先感知血液中的刺激影响VSMCs,进而影响血管的生理状态。在病理条件下,VECs发生损伤和功能失调,导致VSMCs表型转换、增殖及凋亡,进而引发多种心血管疾病。目前,VECs对VSMCs的影响受到越来越多学者的关注,而VECs功能失调对VSMCs的影响与动脉粥样硬化形成之间的关系是今后研究的重点。     

胸腺上皮源性肿瘤诱导微血管生成的预后意义

目的:通过观察胸腺上皮源性肿瘤微血管生成与部分临床病理参数的关系和对患者生存期的影响,探讨微血管密度(microvessel density,mvd)作为评估患者预后指标的临床意义?方法:用免疫组织化学envision法检测单克隆抗体cd34在66例胸腺上皮源性肿瘤手术切除标本中的表达,对其中62例患者随访16~178个月并进行生存分析?结果:mvd在不同性别和年龄组中的差别均无显著性差异(p > 0.05),肿瘤体积增大(≥11.0 cm)时mvd有增高趋势,但与对照组(<11.0 cm)比较差别无统计学意义(p > 0.05)?mvd在各组织学类型之间存在显著性差异(p < 0.05),各masaoka临床分期之间的差异也有统计学意义(p < 0.01)?患者是否合并重症肌无力不影响mvd值(p > 0.05)?kaplan-meier生存曲线显示不同组织学类型之间生存率存在显著性差异(p < 0.01),masaoka临床各分期之间生存率也存在显著性差异(p < 0.01),高mvd值组(≥37.0)5年和10年生存率显著低于低mvd值组(<37.0),差别有统计学意义(p < 0.05)?结论:促微血管生成可能是胸腺上皮源性肿瘤侵袭生长和临床演进的重要事件,mvd可以作为判断胸腺上皮源性肿瘤患者预后的有价值指标,将mvd?who组织学分型?masaoka临床分期结合起来更有利于评估患者的预后?     

存活蛋白反义寡核苷酸诱导食管癌细胞凋亡的研究

目的观察存活蛋白反义寡核苷酸转染对食管癌细胞凋亡、增殖、对化疗药物敏感性的影响。方法设计合成特异性存活蛋白反义寡核苷酸（ASODN）。食管癌EC109细胞系分为6组：空白对照组、空脂质体转染对照组、正义链转染对照组、160、200、240nmol／L ASODN转染组。作用20h后收获各组细胞,Western blot法检测各组细胞生存素表达情况。TUNEL法检测各组细胞的凋亡情况。结果各ASODN转染组细胞存活蛋白表达有不同程度减弱,细胞变圆、折光增强、细胞碎片形成等,而各对照组细胞生长良好。各ASDON转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组（P〈0．05）,以240nmol／L转染组最明显（P〈0．05）。结论封闭食管癌细胞存活蛋白基因,能下调存活蛋白的表达,从而诱导食管癌细胞凋亡,抑制食管癌的发展。     

隐丹参酮诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究

目的探讨隐丹参酮对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其机制。方法用不同浓度的隐丹参酮处理MDA-MB-231细胞24 h。采用MTT、流式细胞术检测不同浓度隐丹参酮对MDA-MB-231细胞活性、凋亡的影响。采用Western blot检测MDA-MB-231细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果与0μmol/L对照组相比,10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L隐丹参酮组MDA-MB-231细胞存活率显著降低,且呈剂量依赖(P0.05)。流式细胞仪检测显示隐丹参酮在20μmol/L浓度时MDA-MB-231细胞凋亡率为(6.34±0.52)%,与对照组(6.09±0.76)%相比无统计学差异(P0.05)。在40μmol/L、80μmol/L浓度时MDA-MB-231细胞凋亡率分别是(18.74±0.65)%、(28.04±3.08)%,与对照组相比有统计学差异(P0.05),且两浓度组之间相比差异亦有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,隐丹参酮在40μmol/L、80μmol/L浓度时,MDA-MB-231细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调(P0.05),同时,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达显著增加(P0.05)。结论隐丹参酮可诱导三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能与激活Bax、Caspase-3和抑制Bcl-2等凋亡调控基因有关。     

LED活化MPPa光动力作用诱导人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨LED活化MPPa介导的光动力作用诱导人卵巢癌细胞凋亡的光化学生物学效应.方法 应用PI染色结合流式细胞仪分析以及透射电镜观察LED活化MPPa光动力作用对人卵巢癌细胞凋亡的影响.结果 细胞凋亡率图示LED活化MPPa光动力作用后人卵巢癌细胞周期前出现一个明显的凋亡亚峰,其凋亡率达17.36%,而其余三对照组细胞周期前未见凋亡亚峰出现.LED活化MPPa介导的光动力作用组大部分细胞表现为细胞膜完整皱缩、核膜完整、核染色质浓集、出现核周间隙等细胞凋亡征象,而单纯LED辐照组、单纯MPPa光敏剂处理组和假辐照组三对照组中出现凋亡小体等凋亡征象的细胞非常少见.结论 LED可以作为一种新型的光源活化MPPa等光敏剂介导光动力作用,从而有效诱导人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞凋亡.     

诱导人羊膜上皮细胞横向分化为肝细胞样细胞

目的:通过体外诱导分化实验,评价人羊膜上皮细胞(hAECs)向肝细胞样细胞分化的能力.方法:采用地塞米松(Dex),HGF,IGF等细胞因子联合诱导hAECs向肝细胞样细胞分化,诱导周期为2周,诱导过程中采用RT-PCR鉴定albumin(ALB),CYP1A1,CYP1A2,IGFR,c-met等肝细胞相关关键功能基...     

不同方法诱导脂肪干细胞分化为类施万细胞

目的寻求一种有效的方法将脂肪干细胞在体外诱导分化为类施万细胞。方法采用2种不同的诱导剂使用方法诱导大鼠脂肪干细胞,从形态学、抗S-100、抗GFAP免疫细胞化学染色阳性率、染色灰度值,MTT法细胞活性测定来比较其效果的不同。结果2种方法均可有效地诱导大鼠脂肪干细胞分化为类施万细胞,改良法诱导的细胞在形态上更接近施万细胞,抗S-100、抗GFAP阳性率、染色灰度值均优于传统法;MTT细胞活性测定显示改良法对细胞活性影响较小。结论改良法体外诱导大鼠脂肪干细胞的效果优于传统法。     

TRAIL与GX15-070联用诱导卵巢癌细胞凋亡的研究

[目的：探讨联合应用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）和GX15-070诱导卵巢癌细胞系A2780细胞凋亡的作用及其机制。方法：以联用或未联用GX15-070的TRAIL作用于卵巢癌A2780细胞,采用MTT法检测细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（?ψm）,比色测定试剂盒检测caspase-9、caspase-8和caspase-3活性。结果：TRAIL能在一定程度上降低卵巢癌A2780细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低?ψm、提高caspase-9、caspase-8和caspase-3活性,而GX15-070能显著增加TRAIL降低卵巢癌A2780细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低?ψm、提高caspase-9和caspase-3活性的效应。结论：GX15-070通过凋亡信号通路的内源性途径,促进卵巢癌A2780细胞对TRAIL诱导凋亡效应的敏感性。     

激活态雪旺细胞对神经干细胞分化作用的研究

目的探讨激活态雪旺细胞(SCs)对神经干细胞(NSCs)的分化作用。方法取出生24 h内的SD乳鼠脊髓NSCs,分离培养并传至4代。取体重(100±5)g的SD大鼠,结扎右侧坐骨神经,1周后取双侧坐骨神经,左侧提取正常坐骨神经分离培养SCs(普通SCs),右侧提取结扎变性的坐骨神经分离培养SCs(激活态SCs),均采用双酶消化加差速贴壁法。将SCs与NSCs应用Transwell培养皿联合培养,分为三组:A组为激活态SCs与NSCs;B组为普通SCs与NSCs;C组仅为NSCs。于培养的第2、4、6天检测各组NSCs活性。1周后,Western blot检测各组SCs表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平,免疫荧光检测各组NSCs分化比例。结果传至4代的NSCs生长稳定,分离的SCs 7 d后大量增殖呈旋涡状。联合培养后MTT法检测细胞活性,第2、4天三组细胞的活性差异无统计学意义(P>0.05),第6天C组活细胞比例开始降低,A、B组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),A组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测A组细胞表皮生长因子(EGF)表达水平(0.486±0.028)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平(0.385±0.023)均高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。MAP-2荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(35.26±2.53)%]高于B组[(27.63±3.45)%],差异有统计学意义(P<0.05);GFAP荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(62.42±3.78)%]低于B组[(70.18±1.26)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活态SCs能够促进NSCs向神经元的分化进程,提高神经元的分化比例。