蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ~（２＋）浓度变化。蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ~（２＋）浓度增加；悬液中加入ＣａＣｌ＿２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ~（２＋）继续增加。维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板内Ｃａ~（２＋）增加．但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ~（２＋）的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ~（２＋）的释放和细胞外Ｃａ~（２＋）进入细胞内。     

蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度变化，蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度增加，悬液中加入ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ＾２＋继续增加，维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板Ｃａ＾２＋增加，但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ＾２＋的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋的释放和细胞外Ｃａ＾２＋进入细胞内。     

Cromakalim对培养心肌细胞内游离钙的影响

1材料和方法取生后24～48h的SD乳鼠心室肌，剪碎后经0．125％胰蛋白酶消化制成细胞是液，用含20％小牛血清的DMEM培养基稀释成106／ml，接种子Petri培养皿中，培养24～48h细胞贴壁生长，以D－Hank’s液冲洗培养皿3次，加入0．3mllμmol／LFuo－3－AM，避光置37°C1h，吸出梁液，以D－Hanks液再洗3次，加入1．omlD－Hank’s液后用于检测。Cromakalim对正常心肌细胞内游离钙的作用分《个组，每组观察8个培养血：Hank’s组，Cromill又分IX10二‘mol／L、IX10’mol／L及IX10‘mol／L3个实验组。Crom对A／R时心肌细胞内Ca’”的影…     

严重烧伤对豚鼠心肌细胞内K^＋浓度的影响

目的：探讨严重烧伤早期心泵功能降低的机理。方法；用自制Ｋ＾＋－ＩＳＭＥ检测正常及３５％体表Ⅲ度烧伤后１，３，８，２４ｈ豚鼠心肌细胞内Ｋ＾＋浓度的变化，结果：严重烧伤早期心肌细胞对Ｋ＾＋浓度降低，结论；烧伤后心肌细胞内Ｋ＾＋浓度降低是静息电位和动作电位幅值降低的直接原因，也是导致心脏收缩及舒张功能降低的主要因素之一。     

Amiloride预防性给药对压力超负荷心肌肥厚大鼠左室肥厚形成及心肌细胞内游离钙的影响

采用压力超负荷心肌肥厚模型,以Fura-2/AM作为荧光指示剂,观察Amiloride(Ami)和Enalapril(Ena)预防性给药对压力超负荷左室肥厚(IVH)大鼠心肌肥厚的形成及心肌细胞[Ca2+]i的影响.结果表明,压力超负荷时,左心室重与体重之比(LVWW/BW)明显增加(P<0.01),左室心肌细胞内确有钙超载现象;Ami和Ena组的LVWW/BW较IVH组明显降低(P<0.01),左室心肌细胞[Ca2+]i亦明显降低(P<0.01).给予KCl 40 mmol·L-1、NE 20μmo1*L-1,预防给药组左室心肌细胞[Ca2+]i的增加值明显低于LVH组.     

人参皂甙Rg1对缺氧豚鼠心肌细胞游离钙浓度降低作用的研究

目的探讨人参皂甙(ginsentosides,Gin)单体Rgl及维拉帕米(verapamil,Ver)对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化的影响.方法采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注,胶原酶Ⅰ型分离心肌细胞,用荧光指示剂方法(Fura-2/AM)标记心肌([Ca2+]i)变化.将心肌细胞悬液分为3组对照组、Rgl组和Ver组.观察缺氧后心肌[Ca2+]i的变化.结果(1)正常氧状态心肌[Ca2+]i均值为(125.4±10.3)nmol/L(n=20).(2)缺氧状态下,心肌[Ca2+]i增加与缺氧时间(程度)直线相关,相关系数r为0.98左右.(3)Rgl对缺氧后心肌[Ca2+]i增加明显延缓.结论Rgl在缺氧条件下,使心肌[Ca2+]i明显下降,从而阻止心肌细胞内钙超载,其作用与Ver相似,我们认为Rgl具有心肌细胞的保护作用.     

蜂毒素对骨肉瘤细胞系细胞增殖的影响

为了解蜂毒素对骨肉瘤细胞生长、增殖的作用。以骨肉瘤U2OS细胞体外培养，采用台盘蓝排染法观察蜂毒素对细胞生长的影响，MTT法测定细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞周期和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：蜂毒素可明显抑制U2OS细胞生长、增殖，下调PCNA的表达，对细胞周期的影响表现为S期细胞的阻滞。提示蜂毒素具有抑制骨肉瘤U2OS细胞株生长、增殖的作用。     

温度对纪鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的 探讨温度以纪鼠心肌细胞内游离钙的影响 方法 用萤光探针Ｆｕｒａ－２及ＢＣＥＣＦ染料结合计算机图处理技术，观察温度对心肌细胞内Ｃａ＾２＋浓度的影响。结果 发现低温引起细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度明显上升，而异搏定能显著地降低低温心肌细胞内的游离Ｃａ＾２＋浓度，结论低温对幼鼠心肌细胞不利。     

温度对幼鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的探讨温度对幼鼠心肌细胞内游离钙的影响。方法用萤光探针Fura－2及BCECF染料结合计算机图像处理技术，观察温度对心肌细胞内Ca2 浓度的影响。结果发现低温引起细胞内游离Ca2 浓度明显上升（P＜0．05），而异搏定能显著地降低低温心肌细胞内的游离Ca2 浓度（P＜0．05）。结论低温对幼鼠心肌细胞不利。     

醛固酮对新生大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 观察醛固酮对新生大鼠心肌细胞凋亡影响并探讨其机制.方法 取新生大鼠心肌细胞培养36 h后,加入不同浓度醛固酮(0.01～10.0 μrmol/L).分别用吖啶橙(AO)荧光染色法和流式细胞术检测心肌细胞凋亡.用免疫组化法测定心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 醛固酮加入细胞24 h后,随着其浓度的增高,凋亡细胞所占比例逐渐增加,Bax表达逐渐增强,Bcl-2表达减弱,Bcl-2/Bax比值下降,与对照组相比,差异有显著性意义(P＜0.05).结论 醛固酮明显促进心肌细胞的凋亡,且具有浓度依赖性,这可能与醛固酮能下调Bcl-2蛋白表达及上调Bax蛋白表达有关.     

安律胶囊对豚鼠心室肌细胞钾离子通道的影响

目的：通过研究安律胶囊对豚鼠心室肌细胞钾离子通道的影响，以探讨其抗心律失常的作用机制。方法：采用膜片钳全细胞记录技术记录了安律胶囊对单个豚鼠心室肌细胞钾电流的影响。结果：①安律胶囊清膏2、20、200μg／L可使IK1幅值从给药前的（-2．06±0．29，nA）降低到（-1．95±0．34、-1．67±0．43和-1．62±0．25，nA），大剂量具有显著的统计学意义（P〈0．05）；在对IK1时效关系的实验中，在200斗g／L的安律胶囊清膏作用下，未计时时最大内向峰值钾电流为（-1．60±O．27,nA），1min、4min、8min后，最大内向峰值钾电流分别为（-1．56±0．35，-1．34±0．26和-1．26±0．29，nA），无统计学意义（P〉0．05）。②安律胶囊清膏2、20、200μg／L可使Ito1幅值从未给药时的（1．14±0．17，nA），降低到（1．13±0．17、1．10±0．16和1．06±0．13，nA），但无统计学意义（P〉0．05）。③安律胶囊清膏2、20、200μg／L可剂量依赖性的降低Ik，分别使Ik幅值从给药前的（1．45±0．15，nA），降低到（1．42±0．15、1．29±0．10和1．20±0．11，nA），中剂量组具有显著的统计学意义（P〈0．05），大剂量具有极为显著的统计学意义（P〈0．01）；在对Ik时效关系的实验中，在200μg／L的安律胶囊清膏作用下，未计时时最大内向峰值电流为（1．45±0．15，nA），1min、4min、8min后，最大内向峰值钾电流分别为（1．21±0．10，1．20±0．12和1．11±0．13，nA），无统计学意义（P〉0．05）。结论：安律胶囊对IK1有-定的阻滞作用且可剂量依赖性的阻滞Ik，但不具有时间依赖性，对Ito1无阻滞作用，这是其抗心律失常作用的机理之一。     

氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位的影响

目的研究氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位的影响,探讨氧化苦参碱的抗心律失常作用机制。方法酶解法分解豚鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录氧化苦参碱对动作电位的影响。结果氧化苦参碱1μmol·L-1对豚鼠单个心室肌细胞静息膜电位和超射值无明显影响;但可使动作电位复极50%时程（APD50）从给药前（534.7±29.62）ms缩短至（490.3±47.39）ms（n=5,P〈0.01）,使动作电位复极90%时程（APD90）从给药前（572.1±49.98）ms缩短至（549.8±35.42）ms（n=5,P〈0.01）,冲洗后APD50恢复至（498.1±31.78）ms（n=5,P〈0.01）,APD90恢复至（554.2±61.28）ms（n=5,P〈0.01）。结论氧化苦参碱可缩短心室肌细胞动作电位时程,提示此机制可能参与氧化苦参碱的抗心律失常作用。     

重组bcl-xL腺病毒对心肌细胞凋亡的影响

[目的]探讨转染人类抗凋亡基因bcl-xL能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性,评价它对心肌细胞的抗凋亡作用.[方法]体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,建立模拟心肌缺氧模型;将携带人类bcl-xL基因的重组腺病毒感染心肌细胞;免疫细胞化学染色法分析bcl-xL蛋白的表达;TUNEL法检测凋亡指数;荧光显微镜下观察心肌细胞表达绿色荧光蛋白,用Hoechst33342染色观察细胞核的形态变化.[结果]转染rAd-bcl-xL/s的心肌细胞表达bcl-xL蛋白阳性单位(PU)(17.84±3.42)明显高于正常对照组(11.02±2.56)与rAd-bcl-xL/as转染组(8.53±2.25)(P＜0.01);缺氧诱导后心肌细胞凋亡指数为(45.67±8.47)%,而转染rAd-bcl-xL/s后的细胞凋亡指数减少至(9.42±2.48)%,有显著性差异(P＜0.01),未见典型的凋亡小体.[结论]腺病毒介导的bcl-xL基因能高效转染心肌细胞,并表达目的基因;外源性bcl-xL基因对体外培养的心肌细胞具有抗凋亡作用,能够提高心肌细胞对缺氧的耐受性,促进损伤心肌的恢复.     

急性缺血对豚鼠心室肌细胞L型钙通道电流的影响

目的　观察急性缺血对豚鼠心室肌细胞 L型钙通道电流 (ICa- L)的影响。　方法　采用膜片钳全细胞记录方法 ,分别于模拟急性缺血后 0 ,5 ,10 ,15和 2 0 m in记录 ICa- L。　结果　模拟急性缺血状态后豚鼠心室肌细胞ICa- L明显受抑 ,L钙电流峰值最大值较对照组下降 2 5 .6 5 %± 4 .13% (P<0 .0 5 ) ;但其最大活性电压和 ICa- L的 I- V曲线形态无明显改变。　结论　模拟急性缺血状态可明显抑制豚鼠心室肌细胞 L 型钙通道电流 ,但不影响最大活性电压和 ICa- L的 I- V曲线形态     

镁对心肌细胞钾通道和钙通道的调节

镁离子对阳离子通道有重要的调节作用,与机体的多种生理功能密切相关。高镁血症或低镁血症可致机体出现多种功能障碍。镁离子可通过与通道蛋白的直接结合、通过酶和G蛋白的间接作用、通过膜表面电荷效应或是通过与膜磷脂的相互作用等方式发挥其对细胞功能的调节作用。本文主要综述离子镁对心肌细胞膜上主要的钾离子通道和钙离子通道的功能调节及其可能机制。     

X射线联合阿霉素诱发体外培养心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察X射线联合阿霉素对体外培养心肌细胞的损伤作用．探讨X射线联合阿霉素与心肌细胞凋亡的关系。方法用40GyX射线联合5μg／ml阿霉索作用于培养3d的心肌细胞．分别孵育不同时间．用MTT法测定其生长抑制率，测定培养基中乳酸脱免酶（LDH）的含量。并分别用共聚焦显微镜、流式细胞仪技术、DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测凋亡发生的情况。结果随着40GyX射线联合5μg／ml阿霉索作用时间的延长（3h、12h、24h、48h）。心肌细胞生长抑制率逐渐增加；培养基中LDH含量明显增加；X射线联合阿霉素使心肌细胞凋亡增加。结论X射线联合阿霉素对心肌细胞的损伤作用较单用X射线或阿霉索增大，联合作用使心肌细胞凋亡率进一步增加。     

绞股蓝皂甙对电解产生氧自由基损伤心脏的保护作用

绞股蓝皂甙(GPS)25μg·ml~(-1)灌流对离体豚鼠Langendorff心脏电解性氧自由基所致心肌损害具有明显保护作用,可降低室颤发生率,抑制电解损伤后冠脉压升高及心肌收缩力减弱,并抑制心肌丙二醛的产生,保护心肌组织中超氧化物歧化酶的降低,吲哚美辛25μmol·L~(-1)几乎完全取消GPS作用,提示GPS对电解氧自由基损伤心脏保护与其促进前列腺环素合成有关。     

氧自由基抑制心肌细胞膜钾通道活动及丹酚酸A的作用

本实验应用膜片钳技术发现黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶产生的氧自由基能明显抑制心肌细胞膜钾通道活动,中药丹参提取的有放成分之一丹酚酸A能逆转被抑制的通道活动。