神经母细胞瘤中Trk基因的表达及临床意义

目的本研究通过检测不同分期神经母细胞瘤(NB)患儿中Trk基因家族的表达分布,了解Trk家族表型在不同分期的NB中表达的差异。方法收集2005年-2013年期间中山大学孙逸仙纪念医院儿童肿瘤专科确诊的12例NB患儿病理标本,全部病例取其病理标本切片4张,分别通过免疫组织化学方法检测TrkA、TrkB和Trk C的表达。结果本组NB病例共有Ⅱ期3例,Ⅳ期9例;Ⅱ期NB中有TrkA阳性2例(67%),TrkB阳性2例(67%),TrkC阳性2例(67%);Ⅳ期NB中有TrkA阳性3例(33%),TrkB阳性9例(100%),TrkC阳性2例(22%),分别比较Ⅱ期及Ⅳ期的TrkA、TrkB和Trk C阳性率,发现差异均无显著性(P0.05)。结论不同Trk基因在不同分期的NB中分布各异,TrkA及Trk C在预后较好的Ⅱ期NB中阳性率为67%,TrkB在预后较差的Ⅳ期NB中全部阳性,说明Trk基因家族的表达分布与NB的分期及预后有关。本组病例组间Trk基因分布无显著差异的原因可能与样本量过少有关。     

荧光原位杂交检测神经母细胞瘤1pLOH的临床意义

为检测神经母细胞瘤（ＮＢ）１号染色体短臂杂合性缺失,并观察（１ｐＬＯＨ）与临床预后的关系,应用荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ）－用非放射性物质标记核酸探针,根据核酸杂交原理,在间期核和染色体上检测特异性ＤＮＡ序列的一项新技术,检测了２０例神经母细胞瘤患者的１ｐＬＯＨ,结果６例有１ｐＬＯＨ,占３０％,并观察到１ｐＬＯＨ大多发生在年龄大于２岁的Ⅲ期／Ⅳ期的经母细胞瘤患者中,结果表明：１．神经母细胞瘤在１ｐ     

Wnt-5a基因在神经母细胞瘤中的表达及意义

目的本研究旨在研究神经母细胞瘤Wnt-5a基因的表达,并探讨其与肿瘤的临床分期、病理分型及对化疗的反应等的关系。方法选择2003年至2008年住院治疗的77例神经母细胞瘤病例进行研究,其中恶性神经母细胞瘤病例（43例）和节细胞性神经母细胞瘤病例（19例）为实验组,良性神经节细胞瘤病例（15例）为对照组。采用蛋白质免疫印迹杂交（Western blotting）方法检测肿瘤组织中Wnt-5a基因的表达。结果与对照组[光密度值（4．79±0．75）×10^5]相比,Wnt～5a基因在实验组中的表达[1、2、3、4和4s期的光密度值分别为（2．87±0．43）×10^5、（2．13±0．35）×10^5、（2．07±0．44）×10^5、（1．73±0．11）×10^5]明显下调（P〈0．01）。在实验组中,Wnt-5a基因在3、4和4S期的表达[光密度值分别为（2．13±0．35）×10^5、（2．07±0．44）×10^5、（1．73±0．11）×10^5]显著低于1、2期[光密度值为（2．87±0．43）×10^5,P〈0．01）];4期病例中,Wnt－5a基因在神经母细胞瘤中的表达低于节细胞性神经母细胞瘤（P〈0．05）。术前化疗的3、4期病例Wnt－5a基因的表达[光密度值分别为（2．13±0．35）×10^5、（2．07±0．44）×10^5]显著低于良性对照组[光密度值为（4．79±0．75）×10^5,P〈0．01）],也低于未予化疗的1、2期病例[光密度值为（2．87±0．44）×10^5,P〈0．01）]。结论Wnt-5a基因的表达与肿瘤的临床分期和恶性侵袭程度呈负相关。     

化疗对神经母细胞瘤MYCN基因表达及其影响

目的：观察ＭＹＣＮ（Ｎ－ｍｙｃ）基因在神经母细胞瘤中的扩增及定位情况，探讨化疗对其表达的影响。方法：１７例神经母细胞瘤病例，按Ｅｖａｎｓ临床分期，其中６例术前接受化疗，用ＭＹＣＮ基因探针进行核酸原位杂交。ＭＩＡＳ－３００图像分析系统对切片进行灰度扫描并作ｔ′检验。结果：１７例神经母细胞瘤标本中ＭＹＣＮ基因的位杂效检测阳性者１１例（６４．７％）。ＭＹＣＮ基因定位于神经母细胞瘤细胞核内。临床分期对ＭＹ     

荧光原位杂交检测神经母细胞瘤1pLOH的临床意义

为检测神经母细胞瘤 (NB) 1号染色体短臂杂合性缺失 (1pLOH) ,并观察(1pLOH)与临床预后的关系 ,应用荧光原位杂交技术 (FISH)———用非放射性物质标记核酸探针 ,根据核酸杂交原理 ,在间期核和染色体上检测特异性DNA序列的一项新技术 ,检测了 2 0例神经母细胞瘤患者的 1pLOH ,结果 6例有 1pLOH ,占 30 % ,并观察到 1pLOH大多发生在年龄大于 2岁的Ⅲ期 /Ⅳ期的神经母细胞瘤患者中。结果表明 :1 .神经母细胞瘤在 1p36 .2— 36 .3区域内有杂合性缺失 ;2 .1pLOH与NB分期密切相关 (P <0 .0 1 ) ;3.1pLOH与病人确诊时的年龄密切相关 (P <0 .0 5 ) ;4.1pLOH与NB预后密切相关 (P <0 .0 1 )。     

神经母细胞瘤相关基因的研究进展

神经母细胞瘤(Neuroblastoma)是最常见的小儿颅外恶性肿瘤,在小儿所有肿瘤相关死亡中约15%由它所致[1].该肿瘤具有原发部位隐匿,早期诊断困难,恶性程度高、发展迅速和早期转移等临床特点,往往预后较差.一项欧洲人群调查研究显示,神经母细胞瘤患者5年生存率仅为59%[2].……     

胚胎肾上腺分化过程视黄酸受体表达及神经母细胞瘤发生的关系探讨

目的 探讨视黄酸受体在胚胎肾上腺分化过程中的表达及其对神经母细胞瘤发生的可能作用机制。方法 以原位杂交方法测定20例胎儿肾上腺和5例神经母细胞瘤的视黄酸受体RARα，β，γ和RXRα，β，γ，并以阳性细胞光密度值作统计分析。结果 视黄酸受体阳性集中显示于神经母细胞结节，随胎龄增加表达增强，胚胎19周后表达减弱；在分化不良型神经母细胞瘤中的视黄酸受体表达强度明显高于分化良好型。结论 视黄酸受体参与了肾上腺神经母细胞的分化过程，与神经母细胞瘤的分化程度密切相关。     

转神经生长因子基因诱导神经母细胞瘤分化的研究

目的观察转染神经生长因子（nerve growth factor，NGF）基因诱导神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）细胞系的分化，探讨NGF在NB细胞分化中的作用。方法取本院住院NB患儿新鲜手术标本，进行原代细胞培养并分离纯化，建立细胞系，作为细胞模型。通过脂质体法介导含有NGF基因的载体质粒转染NB细胞。倒置相差显微镜观察转染前后细胞的形态学变化；MTT法及有丝分裂指数测定细胞增殖的改变。结果转染后的NB细胞表达较高水平的NGF，细胞增殖受到抑制并发生形态学改变。结论所建立的NB为可诱导型，即N型；转染NGF基因的NB细胞表达较高水平的NGF；转染NGF基因的NB细胞系表现为增殖抑制和分化。     

小儿肾母细胞瘤、神经母细胞瘤肿瘤组织培养的临床应用

目的：对比组织法与病理切片在肿瘤淋巴结转移的阳性率。方法：对14例肾母细胞瘤、6例神经母细胞瘤进行肿瘤组织、淋巴组织瘤旁培养，涂片进行病理诊断、并与传统的病理切片对比，结果：肿瘤组织培养与病理切片结果完全一致。对区域淋巴结转移的诊断，淋巴结组织培养优于病理切片，两者淋巴结转移的阳性率，肾母细胞瘤为66．6％（6／9）和33．3％（3／9）；神经母细胞瘤为50％（3／6）和33．3％（2／6），结论：淋巴结组织培养对肿瘤淋巴结转移的诊断率高于病理切片，对临床分期、治疗及预后判断具有重要的指导意义。     

凋亡调控基因Survivin、Caspase-3在神经母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨Survivin、Caspase-3在神经母细胞瘤中的表达及意义。方法 共收集郑州大学医学院存档石蜡标本45例,其中神经母细胞瘤26例,神经节细胞瘤9例,正常肾上腺组织10例;26例神经母细胞瘤按不同因素分成若干组别。运用原位杂交、免疫组化及TUNEL法检测各组织间Survivin、Caspase-3的表达及细胞的凋亡情况。结果 Survivin在神经母细胞瘤组中的表达明显高于神经节细胞瘤组及正常组(P<0.01);并且其表达高低与神经母细胞瘤的年龄、临床分期及病理分型有关(P<0.001);Caspase-3及凋亡指数则与神经母细胞瘤的组织分型、临床分期及病理分型有关(P<0.05)。直线相关分析:神经母细胞瘤中Survivin与Caspase-3呈负相关(r=-0.702,P=0.005),Survivin与凋亡指数呈负相关(r=-0.696,P=0.000);而Caspase-3和AI在三种组织中均呈正相关(r=0.888、0.989、0.958,P均=0.000)。结论 Survivin表达与神经母细胞瘤的恶性度有关,主要通过抑制Caspase-3来抑制凋亡,可作为一种新的神经母细胞瘤临床诊断及判别预后标志物,在调控神经母细胞瘤的凋亡方面扮演了一个关键的角色;Caspase-3高表达则可以显著诱导神经母细胞瘤凋亡,有助于神经母细胞瘤的良性进展。这些研究为临床治疗神经母细胞瘤提供了一条新思路。     

DKK-1在神经母细胞瘤中的表达及其意义

目的 研究Dickkopf-1 (DKK-1)在儿童神经母细胞瘤(NB)中的表达及其意义.方法 运用免疫组织化学方法检测DKK-1在42例NB,19例神经节细胞瘤及15例正常肾上腺组织中的表达水平.运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测DKK-1在分化程度依次增高的3株NB细胞株IMR-32、SK-N-SH和SH-SY5Y中的mRNA及蛋白表达水平.结果 免疫组织化学研究发现DKK-1在正常肾上腺组织中呈强阳性表达(免疫组织化学评分为1.912±0.047),在神经节细胞瘤组织中呈弱阳性表达(免疫组织化学评分为1.214±0.095),在NB组织中呈阴性表达(免疫组织化学评分为0.371±0.293).神经节细胞瘤和NB中DKK-1的表达量分别与正常对照组相比较,差异均有统计学意义(all P＜0.001).在3种组织中,不同组间DKK-1表达量的差异有统计学意义(F=211.375,P＜0.001).qRT-PCR研究发现DKK-1在IMR-3、SK-N-SH和SH-SY5Y中平均相对表达量分别为(25.323±8.651)％、(58.852±10.223)％和(75.385±9.381)％,均呈低表达水平,不同组间DKK-1表达差异有统计学意义(F=57.628,P＜0.001).Western blotting研究发现在IMR-32、SK-N-SH和SH-SY5Y中DKK-1蛋白表达相对灰度值依次增高,分别为0.093±0.016、0.397±0.051和0.411±0.062,不同组间蛋白表达差异有统计学意义(F=156.783,P＜0.001).结论 DKK-1在NB组织及细胞株中均呈低表达水平,且DKK-1在NB中的表达可能与该肿瘤的分化密切相关,提示其或许可以作为一个特殊的分子标记物用于NB的早期诊断及预后监测.     

生长抑素受体在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的探讨生长抑素受体(SSTR)亚型SSTR1、SSTR2和SSTR5在神经母细胞瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测SSTR1、SSTR2和SSTR5在60例神经母细胞瘤组织中的表达情况。结果在60例中,SSTR1表达阳性14例(23%);SSTR2表达阳性23例(38%);SSTR5表达阳性40例(67%)。SSTR1、SSTR2和SSTR5的表达在不同性别、临床分期及有无淋巴结转移患儿之间差异均无显著性(P>0.05)。SSTR5在低分化和高分化神经母细胞瘤中的表达差异有显著性(P<0.05)。结论 SSTR5在低分化神经母细胞瘤中的表达显著高于高分化者,提示SSTR5可作为低分化神经母细胞瘤潜在的治疗靶点。     

E-cad、β-cat在神经母细胞瘤中的表达及其与预后的关系

目的 探讨E-cad、β-cat蛋白在神经母细胞瘤中的表达及其与该肿瘤特征和预后的关系。方法 用免疫组化Envision法检测90例神经母细胞瘤瘤组织E-cad、β-cat蛋白的表达，结合随访资料进行统计学分析。结果①FH型β-cat的阳性率(67．1％)显著高于UFH型(40．0％)(P=0．028)；②神经母细胞瘤β-cat异常表达率(100％)显著高于节细胞神经母细胞瘤(89．3％)(P=0．009)；③E-cad的阳性表达率和异常表达率与肿瘤的组织学分型具有显著相关性；④肿瘤的分期和病理分型对生存时间有显著意义；⑤E-cad、β-cat的阳性表达率和异常表达率均与有无淋巴结转移显著相关。结论 E-cad、β-cat复合体对维持细胞间粘附有重要作用，其结构异常和功能紊乱可促进肿瘤的浸润和转移，联合检测粘附分子E-cad、β-cat可作为NB侵袭、转移能力和分化程度等预后因素相关的指标，可对神经母细胞瘤的临床预后进行综合评估。     

化疗及非化疗组神经母细胞瘤干细胞标志物的表达及意义

目的探讨干细胞标志物CD133、ABCG2、CD117及nestin在神经母细胞瘤化疗组及非化疗组患儿中的表达及意义。方法收集上海交通大学附属新华医院小儿外科保存完好的20例神经母细胞瘤肿瘤组织的石蜡标本,按术前是否经历化疗分为术前化疗组和未化疗组,每组各10例,采用免疫组化SupperVision法检测4种标记物在肿瘤组织中的表达。结果CD133、ABCG2、CD117及nestin干细胞标志物在未化疗神经母细胞瘤组织中的平均阳性细胞率低于化疗后残留神经母细胞瘤组织中阳性细胞率的平均值,差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患儿年龄、性别、分期及组织分型比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论儿童神经母细胞瘤中可能存在肿瘤干细胞,肿瘤干细胞对常规化疗药物具有耐药性。     

先天性神经母细胞瘤发病机制与临床特点的研究进展

神经母细胞瘤是儿童最常见的颅外实体肿瘤,来源于肾上腺髓质或交感神经节.先天性神经母细胞瘤约占神经母细胞瘤患儿总数的5％,大多数患儿于出生后1个月内确诊.与1岁以上神经母细胞瘤患儿相比,新生儿神经母细胞瘤有其独特的病程.本文就先天性神经母细胞瘤的发病机制、临床表现、治疗方法以及预测患儿长期预后的生物学因素进行综述.     

p14ARF/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在不同组织结构类型的神经母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨p14ARF＜/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在不同组织结构类型的神经母细胞瘤(组织结构良好型,FH型;组织结构不良型,UFH型)中的表达及其意义.方法 收集近6年来本院保存的儿童神经母细胞瘤石蜡标本33例,男17例,女16例;年龄范围1个月～15岁,平均年龄33.1个月;随访时间21～87个月,平均随访时间45.5个月,其中UFH神经母细胞瘤10例,平均肿瘤分期3期;FH神经母细胞瘤23例,平均肿瘤分期2.57期.利用组织芯片的高通量、低误差、经济省时等优点,将二组标本制作成组织芯片,再行免疫组织化学SP法检测p14ARF/p16β与Oct-4、Nestin、GFAP在神经母细胞瘤中的表达.结果 相对于FH神经母细胞瘤,UFH神经母细胞瘤中的p14ARF/p16β表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而Nestin和GFAP在二组肿瘤中表达均较低,Oct-4二组表达类似.二组之间差异无统计学意义(P0.05).UFH组失随访1例.平均随访时间34.5个月,随访时存活率66.6%;FH组失随访2例,平均随访时间49.5个月,随访时存活率80.9%,二组之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 p14ARF/p16β基因的失活在肿瘤的发生中起着重要作用,UFH神经母细胞瘤中p14ARF/p16β的低表达表明了肿瘤分化较差,肿瘤分期较高;而Nestin、Oct-4和GFAP表达类似.表明了不同组织结构类型的神经母细胞瘤(FH型和UFH型)均具有一些最原始的神经干细胞的生物学特征,具有进一步分化的潜力.并使得神经母细胞瘤进展迅速,呈现恶性的组织表型.FH型预后相对较好,可能与患儿不同的年龄、肿瘤分期、是否转移和复发均有关.     

Management of Wilms' tumor and neuroblastoma

Wilms' tumor and neuroblastoma resemble each other in usual presentation and by their occurrence in young children. However they represent a dichotomy in advances in treatment. In Wilms' tumor, survival of patients has dramatically improved as a result, of multimodal therapy, whereas in neuroblastoma little advance in treatment has occurred. Development of rational chemotherapeutic regimens through better understanding of drugs and of cell cycle kinetics as well as investigation of other modalities of therapy, i.e. immunotherapy, etc., may be helpful in improving survival in the years to come.     

Wilms' tumor and neuroblastoma

Significant differences exist between the European and North American treatment protocols for Wilms' tumor and neuroblastoma. There are variations in biopsy technique, timing and extent of initial surgery, chemotherapy protocols and dosage routines, as well as the type of salvage therapy. With the consolidation of the two major North American study groups into a single entity (Children's Oncology Group), the European and North American study groups represent the only remaining large-scale venues for treatment comparison. It is important to study and understand the variation in treatment protocols in order to maintain an open forum of scientific investigation that will lead to improving the care and outcome of children with cancer. It is anticipated that the unification of the North American groups will lead to greater interest and scientific cooperation with the European study group. This paper will serve as a forum for such a discussion at a local level.