体外永久培养的人鼠杂交瘤

小鼠骨髓瘤细胞SP2/0(HGPRT~-)与人体外周血淋巴细胞经PEG介导融合、HAT培养基选择,获得了体外永久培养的人鼠杂交瘤。细胞遗传学分析证实杂种群体中尚保留着5—12条人染色体,未查见种间染色体易位。A_4单克隆中保留了人9、11、X、11、18、19、22号染色体。杂种细胞G6PD同工酶电泳出现三带型酶谱,表明人和鼠的G6PD在杂种细胞中均有表达。对杂种细胞及其亲本的自发多核化现象和细胞松弛素B的多核效应进行了观察比较。这种人鼠杂交细胞可望用于制备人类免疫球蛋白链基因克隆和人类单克隆抗体,也可用于人类基因定位及恶性表达分析等方面的研究。     

一种虫草子实体的人T培养(简报)

分离的虫草无性型在马丁和3种大米培养基上均可形成子实体,子实体具明显的向光性;培养基中添加蛋白胨和酵母浸膏,子实体分化多而快;较低的温度(15～20℃)有利于子实体分化;培养基中添加虫草茵茵丝体的提取液和覆盖松针,促进子实体形成,长速也快。     

人转化生长因子β1在大肠杆菌胞内表达的研究

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGFβ)是细胞增殖、分化的重要调节蛋白之一,同时还参与了细胞外基质形成、胚胎发育、骨重建等多项病理和生理过程,并在创伤愈合、免疫抑制、肿瘤抑制等多方面具有广阔的     

人胎肝基质细胞培养上清液中造血生长因子的分析

采用人胎肝造血基质细胞的体外液体培养技术,结合造血干细胞和祖细胞的体外测试方法,研究了造血基质细胞所释放的造血生长因子与造血干细胞和祖细胞之间的相互作用。结果表明,在适宜的条件下,人胎肝造血基质细胞可在体外传代培养达100d之久。培养过程中,对不同时间收集的培养上清液进行测试的结果表明,这些贴壁细胞可以不断地释放多种造血活性物质。在100d培养过程中,上清液中始终都可以检出CFU-S增殖刺激物活性。培养第24天的上清液中还可检出BPF和GM-CSF活性。这些造血活性物质对CFU-S的生理状态和祖细胞的增殖与分化有着深刻的影响。但是在培养上清液中未检出IL-3样活性物质。     

人胸腺上皮细胞培养上清液促进鼠胸腺细胞和细胞株增殖的研究(英文)

胸腺是细胞分化发育的场所,源于骨髓的前Ｔ细胞。在以胸腺上皮细胞为主体的基质细胞作用下,增殖、分化、成为成熟Ｔ细胞,迁移至外周。胸腺基质细胞通过细胞与细胞之间的直接接触和分泌细胞因子影响细胞分化发育的各个阶段。本文探讨了人胸腺上皮细胞培养上清液（ＴＥＣＳＮ）对鼠胸腺细胞、８５、Ｂｅ１３、ＨＤＭａｒ、Ｍｏｌｔ４、Ｒｅｈ以及Ｊｕｒｋａｔ细胞株增殖的影响。取人胸腺组织,用０．１５％的胰酶消化组织块后,将其接种到培养瓶中进行培养,收集上清液。将ＴＥＣＳＮ加到鼠胸腺细胞悬液中,２ｈ后加３ＨＴｄＲ,观察鼠胸腺细胞自发性掺入３ＨＴｄＲ有无改变。同时将ＴＥＣＳＮ＋ＣｏｎＡ加入鼠胸腺细胞悬液中培养４８ｈ,收获细胞前１８ｈ加入３ＨＴｄＲ,测定ＣＰＭ值。此外,ＴＥＣＳＮ加入８５细胞株及其它细胞株悬液中,观察ＴＥＣＳＮ对这些细胞株增殖的影响。上述各实验均设有对照组（Ｔａｂ．１）。结果表明：ＴＥＣＳＮ本身能增强鼠胸腺细胞３ＨＴｄＲ自发掺入,其３ＨＴｄＲＣＰＭ值明显大于对照组（Ｆｉｇ．１）。ＴＥＣＳＮ单独使用不影响胸腺细胞增殖,ＣｏｎＡ单独作用能促进鼠胸腺细胞增殖反应,而ＴＥＣＳＮ与ＣｏｎＡ共同使用,胸腺     

肝细胞生长因子:一种多功能细胞因子

肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＨＧＦ）,又名离散因子（ｓｃａｔｅｒｆａｃｔｏｒ）。其受体ｃ－ＭＥＴ是原癌基因ｃ－ｍｅｔ的产物。ＨＧＦ和ｃ－ＭＥＴ在多种细胞中都有产生,组织分布广泛。ＨＧＦ具有器官再生、创伤愈合、胚胎形成...     

一种改进的杂交瘤细胞电融合方法

一种改进的杂交瘤细胞电融合方法邹翔（南京大学医学院南京２１０００８）刘琴芝,裴红英,郁文芳,安节,陈伯权（中国预防医学科学院病毒学研究所北京１０００５２）陈刚,赵南明（清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京１０００８４）我们对国...     

人表皮生长因子(hEGF)在实验室诞生

1993年4月19日,在中国科学院组织的专家鉴定会上,一致通过了对中科院上海生物化学研究所“人表皮生长因子(hEGF)基因工程实验室研究”成果的鉴定。这亦是上海生化所在年内提前超额完成的首项国家“八五”攻关任务。     

用免疫点试验检测未浓缩的杂交瘤培养上清液中的同型和轻链型鼠单克隆抗体

<正>长期以来生物化学家们在核酸的工作中就广泛利用硝酸纤维素滤膜作为一种固相支持物以吸附和固定核酸。Towbin等(1979)首先证实它在从聚丙烯酰胺胶转移或贴印蛋白的用途,随后又用于检测抗体。Sharon等(1979)和Hawkes等(1982)介绍了一种点-免疫结合试验,直接应用硝酸纤维膜中的抗原点来筛选单克隆抗体和其它抗体。 单克隆抗体技术的广泛应用,在许多实验室就产生了一种需要,即从大量的单克隆蛋白中简便地检查鼠免疫球蛋白同型物(isotype)和轻链类。生产抗同型血清既费力又费钱。如果将抗体固定在硝酸纤维膜上     

人结缔组织生长因子(CTGF)的原核表达研究

随着对细胞前早期基因认识的深入,一组在多个种群中具有较高同源性的前早期基因家族——CCN(CTGF,Cyr61/Cef10,Nxov)得到了人们的注意[1]。其产物在细胞受到创伤刺激时产生,并具有促进和调节创伤修复的功能.其中的人结缔组织生长因子(CTGF)由于对成纤维细胞、结缔组织基质...     

苏云金芽孢杆菌液体培养物上清液中杀虫活性物质的研究

采用离心、拄层析、氨基酸组成及序列分析、生物鉴定等方法,对具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌培养物上清液进行了研究。发现上清液中杀虫活性的出现时间与菌的自溶同步。上清液中含有的分子量为60—kDa的蛋白是起杀虫作用的主成分,分离纯化该蛋白质,对其进行了氨基酸组分和N末端序列分析。结果表明,该蛋与P1蛋白在N端有18个氨基酸的序列完全一致,氨基酸的组分相似,说明二者同源。同时还发现,上清液与沉淀混用能提高杀虫活性。     

一种热稳定的人胎盘源促细胞生长因子

胎盘细胞中含有丰富的生物学活性物质.通过在 90℃温度下酸性介质抽提、乙醇沉淀、DE-52阴离子交换层析、高效液相色谱层析,从人胎盘组织中分离纯化得到一种热稳定的小分子量促细胞生长因子.该物质对人羊膜细胞、小鼠成纤维细胞、小鼠骨髓瘤细胞等多种细胞有较高的刺激生长活性.这种物质被称为人胎盘源促细胞生长因子Ⅰ(Human Placental Growth Factor-I,简称HPGF-1),它是一种分子量为1900的肽类物质,是由一条含有10个氨基酸残基的肽链和非肽部分组成的化合物.肽链部分的分子量为1195,其氨基酸组成已被测定,N-末端残基为 Phe.非肽部分的分子量为692. 该因子的等电点为6.8.     

一种高效产生小鼠杂交瘤的电融合方法

近年来,细胞电融合技术(Electrofusion)得到了迅速发展和应用.特别是在单克隆抗体领域,人们希望能以电融合技术的高融合频率来更有效地获得分泌单抗的杂交瘤.现主要有两种较有效的电融合方法来实现这一目的:一是Nova/Hopkins的抗原—抗生物素—生物素桥联(antigen-avidin-biotin bridge)方法,另一种则是Zimmermann电融合法.Nova/Hopkins方法虽然非常有效,但其较适用于中高亲和性的抗原—抗体系统     

一种分离人血浆脂蛋白(a)的简便方法

短时间超速离心(4h)结合抗人 apo(a)免疫亲和层析分离纯化了人血浆 Lp (a),所得制品经聚丙烯酰胺凝胶电泳和 double-decker 火箭免疫电泳等鉴定为纯品.与国外常规分离 Lp (a)的方法相比,该法具有简便,经济,提纯周期短和 Lp (a)纯度高等优点,得率提高一倍以上.     

一种不表达免疫球蛋白但产生高频率分泌抗体的杂交瘤的人骨髓瘤细胞系

<正>kohler和Milstein的方法已被广泛地使用以生产能分泌予定特异性的单克隆抗体的小鼠杂交瘤。他们的原始方法是使用次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶核苷(HAT)敏感的骨髓瘤细胞系P3-X63Ag8。该技术近来的应用中已使用了P3-X63Ag8的不分泌免疫球蛋白的变株。NSI/1-Ag     

人胎胸腺上皮细胞的培养及其上清液中胸腺激素的测定

人胎儿胸腺组织在体外培养,30天内基本为上皮细胞生长。其主要依据是电镜下可见细胞浆内普遍存在张力纤维,细胞之间有桥粒连接。用脐血花环法测定胸腺激素活性,结果表明,在所收集的胸腺细胞培养上清液中确有胸腺激素活性存在。