miR-216a-5p在HMGB1介导的表皮葡萄球菌感染致腹膜透析相关腹膜炎中的作用

目的探讨miR-216a-5p在高迁移率蛋白B1(HMGB1)介导的表皮葡萄球菌感染致小鼠腹膜透析相关腹膜炎(PDAP)中的作用及机制。方法选取健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、感染组、感染+HMGB1抑制剂组,收集腹腔积液及腹膜组织分别进行白细胞计数、HE和免疫组织染色;Real-time PCR和Western Blot检测白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因素-α(TNF-α)、HMGB1、核转录因子-κB(NF-κB)和核转录因子抑制蛋白(I-κB)的mRNA和蛋白表达水平;生信预测发现,miR-216a-5p可能与HMGB1结合,参与其诱导的PDAP的发生,并构建感染+miR-216a-5p mimics组小鼠,通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-216a-5p和HMGB1的关系,采用Real-time PCR、Western Blot、免疫组织染色检测HMGB1的表达变化。结果与对照组相比,感染组小鼠腹腔积液白细胞计数增多,炎性浸润明显,IL-1α、IL-6、TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均升高(均P0.05);HMGB1抑制剂(甘草素)干预后,小鼠腹腔积液白细胞计数下降,炎性浸润改善,IL-1α、IL-6、 TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降(均P0.05)。感染组小鼠NF-κB表达高于对照组,I-κB表达低于对照组;HMGB1抑制剂干预后NF-κB表达降低,I-κB表达升高(均P0.05)。Real-time PCR结果证实,与对照组相比,miR-216a-5p的含量在感染组中显著减少;双荧光素酶报告基因检测提示,miR-216a-5p可直接作用于HMGB1的3’UTR区;与感染组相比,感染+miR-216a-5p mimics组小鼠中HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降(均P0.05)。结论 HMGB1在表皮葡萄球菌感染致小鼠PDAP中发挥重要作用,抑制HMGB1可改善小鼠炎症反应,miR-216a-5p可通过靶向HMGB1参与表皮葡萄球菌感染致PDAP的发生。     

腹膜透析并发腹膜炎的相关因素及诊治体会

目的探讨腹膜透析并发腹膜炎的相关因素及诊治方法。方法以我院2011年1~12月之间收治的92例腹膜透析并发腹膜炎患者为观察对象,对患者的药敏试验和细菌培养结果进行回顾性分析。结果 3代头孢和1代头孢等传统临床治疗药物具有较高的耐药性,且庆大霉素、头孢他啶、左氧氟沙星等耐药性要偏高,而阿洛西林、头孢孟多、丁胺卡那和美罗培南则是较为敏感。结论由本次临床研究结果可见,使用新型抗生素,并对操作者和患者实施培训和再培训,有助于提高临床治疗效果。     

miR-125a-5p在人乳腺癌细胞侵袭和转移中的作用机制研究

目的探讨miR-125a-5p在人乳腺癌细胞侵袭与转移中的作用机制。方法采用荧光定量PCR检测人乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量,利用瞬时转染技术将过表达质粒转染到MDA231中,检测miR-125a-5p质粒在乳腺癌MDA231、MCF-7细胞中的转染效率,利用趋化运动实验与Transwell侵袭试验检测趋化运动能力和运动能力。结果人乳腺癌淋巴结转移、组织分期及雌激素受体均与miR-125a-5p表达水平有关,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-125a-5p在MDA231和MCF-7中表达量较MCF-10A中低,差异有统计学意义(P<0.05);MDA231与MCF-7相比,MDA231中表达量更低,差异有统计学意义(P<0.05)。GAB2在MDA231/miR-125a-5p细胞组的表达量低于MDA231组和MDA231/NC组,差异均有统计学意义(P<0.05);在AntimiR-125a-5p/MCF-7组中的表达量高于AntiNC/MCF-7和MCF-7组,差异均有统计学意义(P<0.05)。穿过基质胶...     

miR-146a-5p及miR-9-3p对炎症反应及脂代谢调节因子的作用

目的 通过检测microRNA-146a-5p(miR-146a-5p)、microRNA-9-3p(miR-9-3p)对HepG2细胞白介素受体相关激酶-1(interleukin receptor-associated kinase-1,IRAK-1)、ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding gassette transporter A1,ABCA1)蛋白水平表达的影响,探讨miR-146a-5p及miR-9-3p对炎症反应及脂代谢调节因子作用。方法 以HepG2细胞为试验对象,分别进行miR-146a-5pmimics转染及miR-9-3pmimics转染,采用Westernblot检测miR-146a-5p对HepG2细胞IRAK-1蛋白表达的影响及miR-9-3p对HepG2细胞ABCA1蛋白水平表达的影响。结果 miR-146a-5p转染组IRAK-1蛋白水平显著低于对照组;miR-9-3p转染组ABCA1的蛋白水平显著低于对照组,差异均具有统计学意义（P=0.001）。结论 miR-146a-5p能够显著下调HepG2细胞IRAK-1蛋白表达,miR-9-3p能...     

miR-103a-3p/RCAN1通路在铝致大鼠学习记忆损害的作用

目的 探究miR-103a-3p/钙调磷酸酶调节因子1(Regulator of calcineurin 1, RCAN1)通路在麦芽酚铝致大鼠记忆损伤中的作用。方法 将32只雄性SD大鼠按体重随机分为对照组（0μmol/kg）、低剂量染铝组（10μmol/kg）、中剂量染铝组（20μmol/kg）和高剂量染铝组（40μmol/kg）,每组各8只,对照组大鼠腹腔注射0.9%的生理盐水,染铝剂量组腹腔注射相应浓度的麦芽酚铝溶液,隔天染毒,持续3个月。染毒结束后用水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力;实时荧光定量PCR法检测miR-103a-3p和RCAN1基因表达;Western blotting检测大鼠海马中RCAN1,糖原合成激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化tau蛋白的相对表达量。结果 染铝组大鼠前5 d逃避潜伏期均高于对照组,在第6 d空间探索期,染铝组在目标象限停留时间以及穿过平台的次数均低于对照组（P<0.05）;与对照组相比,染铝组大鼠海马miR-103a-3p基因表达水平下降（P<0.001）,而RCAN1基因表达水平升高（P<0.001）;与对照组相比,染...     

miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法设置miR-con组、miR-219a-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-219a-5p组、miR-219a-5p+pcDNA组、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4组、miR-con+SMC4-WT组、miR-con+SMC4-MT组、miR-219a-5p+SMC4-WT组、miR-219a-5p+SMC4-MT组,转染均用脂质体法。qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于人正常皮肤细胞HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表达水平显著升高,miR-219a-5p表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进Caspase-3蛋白表达,抑制Cyclin D1蛋的表达;抑制Wnt/β-catenin信号通路激活。miR-219a-5p靶向负调控SMC4的表达,转染SMC4野生型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而转染SMC4突变型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性差异不显著。且过表达miR-219a-5p,SMC4表达水平显著降低;抑制miR-219a-5p表达,SMC4表达水平显著升高。过表达SMC4能逆转miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2的增殖抑制和凋亡促进的作用。结论 miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Wnt/β-catenin及SMC4信号通路有关,将为皮肤鳞状细胞癌的预防和治疗提供新靶点。     

miR-15a-5p/SALL4在乳腺癌患者组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-15a-5p/人类婆罗双数样基因4(SALL4)在乳腺癌患者组织中的表达及临床意义。方法2016年3月—2019年7月在温州市中心医院采集62例首次确诊乳腺癌患者的癌旁组织及癌组织标本,通过实时荧光定量PCR及免疫印迹法检测各组织标本中miR-15a-5p、SALL4基因及其蛋白的表达,探讨miR-15a-5p表达水平与患者临床病理特征的关系,分析癌组织中miR-15a-5p与SALL4的相关性,验证二者之间的靶向关系。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中miR-15a-5p表达水平显著降低,SALL4 mRNA和蛋白表达水平均显著增加,差异均有统计学意义(t=17.458、17.634、14.714,均P<0.05),乳腺癌组织中miR-15a-5p与SALL4表达呈显著负相关(r=-0.787,P<0.05),且SALL4是miR-15a-5p的直接靶基因;肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及雌激素受体/孕激素受体(ER/PR)呈阴性表达,miR-15a-5p低表达的比例明显较高,差异均有统计学意义(χ^(2)=7.839、11.088、6.798,均P<0.05)。结论在乳腺癌组织中,miR-15a-5p呈低表达,SALL4呈高表达,二者之间存在靶向关系,miR-15a-5p低表达与乳腺癌患者肿瘤直径、TNM分期及ER/PR表达有关,可见miR-15a-5p/SALL4有望成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

miR-200c过表达对表皮葡萄球菌感染致腹膜透析相关腹膜炎大鼠的作用

目的探究过表达微小RNA-200c(miR-200c)对表皮葡萄球菌感染所致的腹膜透析(PD)相关腹膜炎大鼠的干预效果及相关作用机制。方法选取40只SD健康雄性大鼠,10只为正常组,其余30只建立表皮葡萄球菌感染所致PD相关腹膜炎大鼠模型,并分为模型组、抑制miR-200c组、过表达miR-200c组,正常组、模型组使用生理盐水干预,抑制miR-200c组大鼠使用antagomiR-200c进行干预,过表达miR-200c组大鼠使用agomiR-200c进行干预。对各组大鼠腹膜功能、腹水白细胞计数、菌落计数进行统计,酶联免疫吸附实验法检测白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)水平,免疫透射比浊法检测免疫球蛋白水平,蛋白免疫印迹法检测ZEB1、ZEB2、E-钙黏蛋白表达。结果过表达miR-200c组大鼠Durea/Purea、葡萄糖转运率、菌落计数低于模型组、抑制miR-200c组,高于正常组;超滤量低于正常组,高于模型组、抑制miR-200c组(P0.05)。过表达miR-200c组大鼠IL-8、IL-17、IgA、IgM、IgG水平、ZEB1、ZEB2相对表达量均低于模型组、抑制miR-200c组,高于正常组;E-钙黏蛋白表达低于正常组,高于模型组、抑制miR-200c组(P0.05)。结论过表达miR-200c对表皮葡萄球菌感染所致PD相关腹膜炎大鼠进行干预,能够提升大鼠腹膜功能,改善腹水白细胞计数及表皮葡萄球菌计数,减轻大鼠炎症反应,提升大鼠免疫功能,调控ZEB1、ZEB2、E-钙黏蛋白表达,具有一定的腹膜保护作用。     

LINC00943靶向调控miR-125a-5p对幽门螺杆菌诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响

目的 探讨LINC00943对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及其分子机制。方法 将GES-1细胞分为Control组、Hp组、Hp+si-NC组、Hp+si-LINC00943组、Hp+miR-NC组、Hp+miR-125a-5p组、Hp+si-LINC00943+anti-miR-NC组和Hp+si-LINC00943+anti-miR-125a-5p组,实时荧光定量PCR检测LINC00943和miR-125a-5p表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫蛋白印迹检测凋亡蛋白表达;酶联免疫吸附法检测白细胞介素-8(IL-8)和IL-1β、乳酸脱氢酶(LDH)水平;双荧光素酶报告基因实验检测LINC00943和miR-125a-5p靶向关系。结果 与Control组比较,Hp组LINC00943表达、凋亡率、Bax蛋白、IL-8、IL-1β、LDH升高,miR-125a-5p表达、Bcl-2蛋白降低(P<0.05);敲减LINC00943或过表达miR-125a-5p可减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤;LINC00943靶向调控miR-125a-5p...     

咪唑安定联合miR-135a-5p影响宫颈癌细胞HeLa增殖 迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨咪唑安定对宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法 以RPMI-1640培养基对HeLa细胞常规培养，分别用25、50、100μmol/L的咪唑安定处理，记为低、中、高剂量组，常规培养的细胞作为NC组；将miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞，记为anti-miR-135a-5p组、anti-miR-NC组；miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞后用100μmol/L的咪唑安定处理，记为anti-miR-135a-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组。CCK-8检测细胞活性；Western blot法检测蛋白表达；克隆形成实验检测细胞克隆；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-135a-5p表达水平；Transwell检测细胞迁移和侵袭。结果 不同剂量咪唑安定处理后，HeLa细胞活性、CyclinD1、MMP2、MMP9表达、细胞克隆、迁移和侵袭数量、miR-135a-5p表达降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。下调miR-135a-5p降低HeLa细胞活性、MMP2、CyclinD1、M...     

疫情防控背景下翻转课堂在医院感染学教学中的应用效果

目的 评价翻转课堂模式在医院感染学课程体系设置中应用的效果,为多种教学模式相结合在医院感染学课程教学中提供科学依据。方法 将长治医学院临床医学专业5年制本科116名学生作为研究对象,随机分配到试验组和对照组,每组58名,对照组采用传统课堂讲授方法,试验组采用翻转课堂讲授方法。临床实习期间对手卫生执行的正确性和依从性进行观察;问卷调查对翻转课堂教学模式的满意度;通过测试对教学效果进行评价。结果 翻转课程的设置总满意度达63.79%。翻转课堂较传统教学模式,手卫生正确率比较,差异无统计学意义（P>0.05）,但手卫生依从率（88.05% VS 47.91%）、消毒隔离技术及格率（86.21% VS 48.28%）、职业暴露防护及格率（84.48% VS 36.21%）比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 翻转课堂在医院感染学教学中目标达成率高。     

虚拟仿真技术在医院感染预防与控制教学中应用的研究进展

医院感染预防与控制教学中, 以虚拟仿真技术为基础的教学方式既能规避传统面对面教学方式带来的感染风险, 又有助于弥补医学生临床实践时间和试验资源不足的缺憾, 促进教学工作更好地进行。本文主要阐述虚拟仿真技术的概念、特点, 及其在医院感染预防与控制教学中的应用和发展历程等。     

多学科协作在儿童多重耐药菌医院感染防控中的应用

目的 探讨多学科协作(MDT)管理在儿童多重耐药菌(MDRO)医院感染防控中的效果.方法 选取2017年1月1日—2018年12月31日某省三级甲等儿童医院住院患者送检微生物培养分离出MDRO的患儿为研究对象.2017年1月1日—12月31日干预前采用常规MDRO医院感染预防和控制措施,2018年1月1日—12月31日...     

噬菌体在医院感染防控中的研究进展

目前医院感染预防与控制面临着许多亟待解决的问题, 多重耐药菌防控的有效性、生物膜的有效清除、水源性传播病原体的鉴定与防控、环境物体表面消毒的持续有效性等都对医院感染防控提出了更高的要求。噬菌体是侵袭细菌的病毒, 也可以传递赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体在降低多重耐药菌和清除生物膜中所展示出的特异性和有效性, 使其具有成为医院感染防控新方法的潜力。本综述总结噬菌体在医院感染防控中的相关研究, 包括在对抗多重耐药菌、清除生物膜方面的优势, 以及在医院感染病例识别、环境清洁消毒、水源性传播防控和医院综合管理中的应用。     

埃可病毒感染特征及医院感染防控要点

人肠道病毒(HEV)属小RNA病毒科中的肠道病毒属,是重要的人类致病原,作为普通的机会性感染病原体可感染各年龄人群,婴幼儿的发病率明显高于成人。HEV的传染性较强,可引起流行和暴发。HEV包括脊髓灰质炎病毒、A组柯萨奇病毒、B组柯萨奇病毒、埃可病毒(EchoV)及新型肠道病毒,可导致脑(膜)炎、支气管炎、心肌炎、手足口病、弛缓性麻痹、1型糖尿病等疾病,其中由EchoV导致的感染较重,特别是新生儿在医院获得的感染,往往导致暴发流行。近年来,我国由EchoV引起的感染暴发疫情时有发生,传染性强。2019年广东某医院发生的新生儿EchoV感染,导致了5例致死性病例,后果严重,影响力极大。此文对EchoV感染特征及医院感染防控要点进行综述,以期为感染诊治及医院感染防控工作提供帮助。     

医院感染防控的早期探索与实践案例

 我国自1985年开始开展医院感染防控工作,在国家全面开展医院感染防控工作以来,我国医院感染防控工作者为感染防控作出较大贡献。作为中国医院感染防控工作最早的专职人员之一,用亲身的实践经历结合文献分析,对我国医院感染防控早期实践探索进行总结,并列举10个典型案例,以期对我国医院感染防控工作有借鉴作用。     

耳念珠菌感染与医院感染防控研究现状

耳念珠菌(Candida auris)是2009年首次发现的一种可引起侵袭性感染的多重耐药酵母菌,且具有如下特点:实验室传统的形态和生化检验方法难以将其鉴定,临床分离株通常为多重耐药菌,感染致死率高,在环境物体表面和定植人群中能长时间存在。该菌目前传播机制以及消毒措施尚不明确,30多个国家陆续有其感染病例和医院感染事件的报道,正逐渐成为一个新的全球性威胁。我国已有18例耳念珠菌感染病例的报道。为提示耳念珠菌医院感染传播的风险,帮助医疗机构完善医院感染防控方案,本文就耳念珠菌感染以及其医院感染防控现状作一综述。     

FMEA风险评估法在ICU多重耐药菌医院感染防控中的应用

目的采用失效模式与效应分析法(FMEA)筛选出重症监护病房(ICU)多重耐药菌高风险因素,为防控提供参考依据。方法 FMEA风险评估法筛选出ICU多重耐药菌医院感染的高风险因素,提出改进措施并落实,比较干预前后的效果。结果筛选出的高风险事件为患者过多需加床,清洁工隔离意识薄弱,实习生和轮科生隔离意识薄弱。干预前多重耐药菌医院感染发生率为4.78%(89/1 861),干预后为2.08%(34/1 636),干预前后比较,差异有统计学(χ2=18.76,P0.05)。干预后耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌医院感染发生率为0.31%,低于干预前的1.40%,差异有统计学意义(P0.05);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类肠杆菌的医院感染发生率干预前后比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论 FMEA可指导医院感染管理科和ICU发现多重耐药菌感染防控中的薄弱环节,有的放矢地进行预防和控制。     

FMEA风险评估法在ICU多重耐药菌医院感染防控中的应用

目的 采用失效模式与效应分析法（FMEA）筛选出重症监护病房（ICU）多重耐药菌高风险因素，为防控提供参考依据。方法 FMEA风险评估法筛选出ICU多重耐药菌医院感染的高风险因素，提出改进措施并落实，比较干预前后的效果。结果 筛选出的高风险事件为患者过多需加床，清洁工隔离意识薄弱，实习生和轮科生隔离意识薄弱。干预前多重耐药菌医院感染发生率为4.78%（89/1 861），干预后为2.08%（34/1 636），干预前后比较，差异有统计学（χ²=18.76，P<0.05）。干预后耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌医院感染发生率为0.31%，低于干预前的1.40%，差异有统计学意义（P<0.05）；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、产ESBLs肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类肠杆菌的医院感染发生率干预前后比较，差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 FMEA可指导医院感染管理科和ICU发现多重耐药菌感染防控中的薄弱环节，有的放矢地进行预防和控制。     

基于FMEA法在重症监护病房器械相关感染防控中的应用

目的 采用失效模式与效应分析（FMEA）法筛选出重症监护病房（ICU）医院感染及导管相关感染发生的高风险事件,为ICU制定医院感染预防控制措施提供依据。 方法 通过风险识别确定20个风险因素,采用FMEA风险评估筛选出高、中高风险因素,制定相对应的感染防控措施并监督落实,比较干预措施实施前后呼吸机相关肺炎（VAP）、中心静脉导管相关血流感染（CLABSI）、导尿管相关尿路感染（CAUTI）情况。 结果 筛选出4个高风险因素,分别为感染多重耐药菌患者未遵循有效隔离措施、大剂量使用抗菌药物、床单元清洁消毒不合格、诊疗物品交叉使用;筛选出4个中高风险因素,分别为在拔管或气囊放气操作之前忽略气囊上分泌物的清除工作、手卫生依从性差、非本科室人员流通多、探视人员探视制度执行不到位。针对高、中高风险因素,实施对应的防控措施,VAP、CLABSI、CAUTI日发病率分别由2018年的7.62‰、2.99‰、1.90‰降至2019年的3.93‰、1.01‰、0.62‰;医院感染发病率、医院感染例次发病率分别由4.98%、6.89%降至2.37%、3.14%。 结论 基于FMEA法的风险评估能够发现ICU医院感染预防与控制中的薄弱点,为防控ICU医院感染提供科学有力的证据。