Mutagenizing brewing yeast strain for improving fermentation property of beer

A brewing yeast mutant with perfect sugar fermentation capacity was isolated by mutagenizing the Saccharomyces pastorianus transformant, which carries an integrated glucoamylase gene and has one copy of non-functional alpha-acetolactate synthase gene. The mutant was able to utilize maltotriose efficiently, and the maltotriose fermentability in YNB-2% maltotriose medium increased from 32.4% to 72.0% after 5 d in shaking culture. The wort fermentation test confirmed that the sugar fermentation property of the mutant was greatly improved, while its brewing performances were analogous to that of the wild-type strain and the characteristic trait of shortened beer maturation period was retained. Therefore, we believe that the brewing yeast mutant would benefit the beer industry and would be useful for low caloric beer production.     

Reduced acetaldehyde production by genome shuffling of an industrial brewing yeast strain

High levels of acetaldehyde produced by yeast during fermentation can be of concern to product quality. A novel approach, based on genome shuffling, was applied to reduce the production of acetaldehyde by industrial brewing strain YS86. Four isolates with different impacts of acetaldehyde concentration were obtained from populations generated by ultraviolet irradiation and nitrosoguanidine mutagenesis. These yeast strains were then subjected to recursive pool‐wise protoplast fusion. A strain library that was likely to yield positive colonies was created by fusing the lethal protoplasts obtained from both UV irradiation and heat treatments. After two rounds of genome shuffling, a recombinant YSF2–9 strain produced less acetaldehyde than wild‐type strain YS86, by 64.5 and 66.2% in laboratory and pilot plant fermentations, respectively. The shuffled yeast strain YSF2–9 was genetically stable and may have a potential application in brewing industry for managing acetaldehyde in beer. Copyright © 2017 The Institute of Brewing & Distilling     

啤酒酿造过程中酵母胞内有机锌与风味代谢物质的相关性

为探究酵母不同传代次数和外源添加锌离子对酵母胞内有机锌的影响,并明确酵母胞内有机锌与发酵过程风味代谢物质的相关性,对不同发酵车间、不同代数以及外源添加锌离子发酵的酵母菌株YJ02进行胞内有机锌追踪检测,同时测定其发酵过程中风味代谢物质。结果表明:随着酵母菌株YJ02传代次数和发酵液外源锌离子含量的增加,酵母胞内有机锌均呈现先上升后趋于平稳的趋势,外加锌离子含量保持在0. 4～1. 4 mg/L范围内,对酵母菌株YJ02生长最有利;同时酵母胞内有机锌含量与发酵过程中酯类物质呈现显著正相关,与醛类和醇类物质呈现显著负相关。发酵过程中酵母菌株YJ02利用锌离子的能力是有限的,且胞内有机锌含量与发酵过程中风味代谢物质密切相关,可为后续啤酒酿造过程中风味物质的控制提供理论指导和参考。     

山楂风味啤酒酿造工艺研究

目的 探究山楂风味啤酒酿造工艺的可行性。方法 以进口澳麦、小麦芽、啤酒花、山楂汁和山楂粉等为原料, 采用单醪浸出糖化法、经接种WB-06上面酵母、发酵等工艺制备山楂风味啤酒, 采用pH计检测成品啤酒的pH, 滴定法检测其总酸含量, 邻苯二胺法和碘量法分别检测其双乙酰和总黄酮含量, 并进行感官品评。结果 酿造出的山楂风味啤酒色度值在16~35 EBC, 总黄酮含量大于15 μg/mL, 双乙酰含量低于 0.15 mg/L, 总酸大于5 mL/100 mL。与传统小麦啤酒进行比较, 山楂风味啤酒不仅具有麦芽香和酒花香气, 还具有山楂果的香气, 口味清爽, 苦味适宜。结论 在小麦啤酒酿造工序中添加山楂制品酿造山楂啤酒是可行的, 可获得具有山楂风味, 且品质较好的啤酒。     

啤酒酵母敲除fks1基因对啤酒风味稳定性的影响

以啤酒酵母工业菌株G-03为模板,扩增得到铜抗性基因cupl和β-葡聚糖合成酶基因fks1.fks1连接pMD-18T Vector得到重组质粒pTK,重组质粒pTK和cupl经BglⅡ、SalⅠ酶切后连接得到重组质粒pKC.以pKC为模板,PCR得到以fks1为整合位点包含cup1的基因片段fks1::cup1.片段转化啤酒酵母工业菌株G-03,通过硫酸铜抗性筛选得到一株啤酒酵母工程菌G-03/C.工程菌的生长速率、死灭温度和絮凝性发生改变.连续发酵3代工程菌常规发酵指标与原菌无较大差异,老化指标TBA降低65.6%,SI系数和RSV分别提高192.7%、26.6%.     

青岛啤酒酵母与高浓酵母筛选高浓酿造酵母融合亲株

以青岛啤酒酵母和高浓精酵母为供试菌株,筛选出生长良好的酵母,为选育具有青岛啤酒风味的高浓酵母做准备.比较了7株酵母不同糖类发酵、离子抗性、二氧化碳减重、发酵液风味品评等指标.结果表明:T1、T2和T3是传统的青岛啤酒发酵菌株,其发酵液口味符合青岛啤酒口味要求,且对Cu2+均不耐受;而G4和G6发酵减重试验和风味物质分析中的乙醛含量指标的评价均优于G5和G7菌株,且它们的发酵液的风味也接近青啤口味.因此,选择T1、T2、T3和G4、G6作100L酿造试验,进一步确定融合亲株.     

酿造过程中添加单宁对啤酒风味稳定性改进的评价

烷醇-烯醛作为自氧化和脂肪降解的最后产物，其转化的增加量与strecker降解中醛类含量的增加都和啤酒风味变坏的程度相符。异α-酸的氧化反应，尤其是不太稳定的反式异构体会导致低俗、粗糙的苦味。几乎和脂肪酸氧化酶的含量一样，麦芽的抗氧化力和糖化条件也都是非常重要的参数，它们足可以影响麦芽及其它原料对氧化等不利影响的抗力。本项工作是研究用没食子单宁(以下简称单宁)来加强糖化过程中抗氧化能力的方法。单宁的作用很多，可以作为金属螯合剂，减少某些自由基。它们对乙醛的绑定和硫醇蛋白的凝结／絮凝也很有效。有关的分析数据，如氨基酸的strecker降解、脂类和异α-酸氧化及感官评价表明，单宁的添加有助于增加最终啤酒的风味稳定性。     

酶法酵母肉类香精的制备

利用酵母酶法制备肉类香精;从啤酒厂废酵母泥、饲料用的酵母粉、啤酒酵母、增香酵母四种酵母菌中筛选最佳生产酵母;同时采用正交实验对酵母自溶条件进行优化,从最佳自溶条件得到的酵母水解液与木糖进行Maillard反应制备肉类香精。结果表明:啤酒厂废酵母适合本实验的研究;正交实验确定其自溶条件为:自溶温度为50℃,pH 5.0,食盐浓度为3%;利用上述自溶水解液制得的肉类香精为稠状的红褐色液体,有较强的肉类香气。     

提高啤酒风味稳定性的几点措施

本文从菌种、生产工艺、添加剂等方面总结了提高啤酒风味稳定性的几点措施：改造啤酒生产菌种、发酵结束之前向发酵液中添加酵母、在生产过程中添加抗氧化剂，同时精选原料，并结合无氧化酿造，利于提高啤酒风味稳定性。     

蛋氨酸、半胱氨酸及苏氨酸对啤酒酵母产二氧化硫和乙醛的影响

为探究啤酒酵母中SO_2和乙醛产量的影响因素,以遗传背景相似但SO_2与乙醛产量差别较大的菌株D-A-14和M14为对象,研究在发酵过程中外添加与硫代谢相关的3种氨基酸(蛋氨酸、半胱氨酸和苏氨酸)对菌株产SO_2及乙醛的影响。结果表明,蛋氨酸能明显降低菌株M14总SO_2和乙醛产量,而半胱氨酸对两者产量影响均较小;同时200 mg/L苏氨酸显著增加2种菌株的总SO_2产量,增加水平均达40%以上,有效增强发酵液中抗氧化能力。Pearson相关性分析表明,两者产量的变化存在着正相关性(r=0. 502)。研究3种氨基酸对啤酒酵母产SO_2以及乙醛的调整水平,可为解决啤酒老化问题提供理论基础和解决方案。     

啤酒酵母的保藏

<正> 在啤酒厂,良好地保藏酵母以防菌种死亡、衰退、变异,从而保持其原有的生产性能,是啤酒酿造中重要的一环。使菌种在非生产期时处于不活跃状态是保藏酵母的基本原理,这可通过两种方法进行。一是采     

啤酒发酵过程中酵母环境压力应答机制研究进展

在啤酒发酵过程中,生产高质量的啤酒要求相应的工艺条件以保证啤酒的质量以及酵母的活力。大多数的风味物质都是在后熟的过程中形成,在后熟过程中,啤酒酵母暴露在不同的压力条件下,包括渗透压、pH、酒精浓度、营养以及温度等。在长期的驯化过程中,啤酒酵母自身表现出各种压力应答机制以适应啤酒发酵过程。本论文概述了啤酒发酵过程中啤酒酵母受到的压力,重点探讨了啤酒酵母在后酵期经受的压力以及压力应答的分子机制,并对如何提高啤酒酵母环境压力应答能力进行了展望。     

啤酒酵母乙醛代谢关键酶相关性研究

乙醛是啤酒中的主要风味物质,其代谢主要来自酵母细胞。酵母中乙醇脱氢酶及乙醛脱氢酶是乙醛代谢的关键酶,对乙醛变化起着重要作用。跟踪啤酒酵母发酵过程中相对酶活力及乙醛变化,发现两种乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的相对酶活力与发酵过程乙醛含量变化具有一定相关性。同时对低产乙醛啤酒酿酒酵母kb2-4与出发菌株啤酒酵母kb进行发酵试验,跟踪检测相对酶活力及乙醛含量,其乙醇脱氢酶Ⅰ和乙醇脱氢酶Ⅱ及乙醛脱氢酶相对酶活力均高于出发菌株,平均增幅分别为15.5%,11.6%和5%。3种酶活性的变化协同作用可以使乙醛含量降幅最大为33.8%。     

酿造单宁在啤酒生产中应用

随着市场竞争的日趋激烈和啤酒技术的飞速发展,啤酒的保鲜期及非生物稳定性,成为酿造工作者所致力于研究的课题。酿造单宁对于成品啤酒抗老化性能、改善啤酒风味和提高保质期具有较好的应用前景。     

不同种类麦芽对下面发酵啤酒酿造风味的影响

为了从源头控制下面发酵啤酒的发酵生产并提高其品质,通过啤酒发酵模拟体系,系统评价英国麦芽（Eng）、加拿大麦芽（Can）和德国麦芽（Ger）对下面发酵啤酒酿造风味的影响。分别测定了3种麦芽的品质指标及所酿啤酒的理化指标;并采用顶空固相微萃取（HS-SPME）和气相色谱质谱联用（GC-MS）法检测了所酿啤酒中风味物质组成和含量上的差异。结果表明,加拿大麦芽的库尔巴哈值（45%）、浸出率（≥77%）、糖化力（414 WK）和α-氨基酸态氮（118 mg/L）等品质指标和酒精度（2.97%vol）、原麦汁浓度（8.63 °P）、实际浓度（2.76%）、外观浓度（1.17%）、实际发酵度（67.97%）和外观发酵度（86.41%）等所酿啤酒的理化指标适中,啤酒中风味物质种类多样（75种）、相对含量丰富（271.82%）、比例协调,是最适合酿造Lager啤酒的麦芽种类。该结果可为高品质啤酒的工业化生产提供理论依据。     

微型啤酒的酿造与酵母扩培技术

在微型啤酒设备中,一般不设计酵母扩培罐,所用酵母以外购为主,接种酵母的优劣就成了啤酒质量的关键。介绍了一种简捷方便、自主进行酵母逐级扩大培养的实用技术,争取做到酵母自备自用。同时,选用优质原料,采用科学合理的糖化、发酵工艺,确保酿制出优质的鲜啤酒,以满足广大消费者的需要。     

The use of atmospheric and room temperature plasma mutagenesis to create a brewing yeast with reduced acetaldehyde production

High acetaldehyde levels in beer from yeast metabolism is a major concern for brewers in China. To obtain a strain with lower acetaldehyde production, this work reports a novel approach based on atmospheric and room temperature plasma mutagenesis and high‐throughput screening using 4‐methylpyrazole + disulphiram plating. A mutant LAL‐8a with lower acetaldehyde‐producing capability was obtained. The alcohol dehydrogenase activity decreased by 54% compared with the wild‐type M14 and the aldehyde dehydrogenase activity increased by 64% of the wild‐type strain. Through domestication and fermentation in EBC tubes, the mutant LAL‐8a was shown to produce 2.2 mg/L acetaldehyde, 88.2% less than the wild‐type strain M14. In addition, the ratio of higher esters to alcohols in beer fermented by the mutant LAL‐8a (0.28) was higher than M14 (0.16). The fermentation performance of LAL‐8a was similar to that of the wild‐type M14. This work suggests strain LAL‐8a a promising option for the brewing industry. © 2018 The Institute of Brewing & Distilling     

不同固定化酵母载体对啤酒风味成分影响研究

采用气相色谱分析法,主要考察了山毛榉木片、多孔陶瓷和海藻酸钠3种固定化酵母载体对啤酒风味物质成分的影响。结果表明,不同固定化酵母载体对啤酒风味物质成分的形成有较大影响,其中海藻酸钠载体固定化酵母的牢固程度最好,且载体正丙醇、异丁醇和异戊醇含量分别高于成品啤酒9%、8%和12%,啤酒含醇量较高,适于醇厚型啤酒发酵;山毛榉木载体生成的酯类物质较多,载体乙酸异丁酯、乙酸乙酯、乙酸异戊酯和己酸乙酯含量分别高于成品啤酒20.1%、14.3%、12.5%和17.4%,含酯量较高,适于淡爽型啤酒发酵;与另两种载体相比,多孔陶瓷载体双乙酰含量达到0.14 mg/L,不适合用于啤酒发酵。     

啤酒发酵过程中酵母代数对风味物质的影响

采用静态顶空气相色谱分析法对不同代数的酵母发酵产风味物质做了跟踪研究,结果表明,0、1、2代酵母对于发酵风味物质的影响比较明显,且具有一定的的规律性,除乙醛外,甲酸乙酯、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、乙酸异戊酯及异戊醇发酵后期的生成量均是1代>0代>2代。     

现代化啤酒酿造技术——固定化酵母工艺

<正> 自80年代发现适应酵母生存的高性能载体材料,酵母固定化技术在啤酒迮续发酵中的应用,再次引起人们的兴趣,然而,完整的啤酒连续发酵技术,仍然处于试验性阶段。至80年代后期,用于快速成熟和无醇啤酒生产的技术得到开发,并应用于工业上,使固定化酵母工艺再次成为啤酒工业的宠儿。最近,基伊埃集团Tuchenhagen研制出一种运用固定化酵母发酵罐所需的专业技术和设备,奉文将就固定化酵母连续发酵技术在一般和无醇啤酒生产中的应用进行探讨。