肠粘膜屏障损伤的机制

综述肠粘膜屏障损伤的原因及粘膜酸中毒、氧自由基、细胞因子、炎性介质、中性多核粒细胞粘附和细胞凋亡等因素参与肠粘膜屏障损伤的机制。     

ICAM-1在大鼠肠粘膜屏障损伤中的作用

目的:探讨ICAM-1在大鼠肠缺血再灌注(I/R)过程中对肠粘膜屏障损伤的作用.方法:采用大鼠肠系膜上动脉(SMA)夹闭1小时后松夹造成缺血冉灌注损伤动物模型.将42只SD大鼠随机分为造模组、对照组和治疗组.分别于缺血即刻、1小时和再灌注1小时3个时相应用免疫组织化学的方法观察小肠ICAM-1表达,同时检测组织髓过氧化物酶和血浆二胺氧化酶活性、门静脉血细菌培养等指标.结果:ICAM-1蛋白表达在对照组肠缺血1小时及再灌注1小时组较造模组、治疗组增多(P<0.05),组织髓过氧化物酶活性、血浆二胺氧化酶活性升高(P<0.05).结论:肠缺血再灌注时肠血管内皮细胞ICAM-1表达增加,由此介导的中性粒细胞在局部聚集、活化可能是肠粘膜屏障损伤的病理生理学基础.     

细胞凋亡在实验性急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障功能障碍中的作用

目的 :探讨细胞凋亡在大鼠急性重症胰腺炎 (ASP)肠道粘膜屏障功能障碍中的作用。方法 :用胰胆管内注射 5 %牛磺胆酸溶液复制大鼠ASP模型。分别对ASP大鼠假手术 (shumoperation ;SO)组和正常组 (normal;N)大鼠 (SO)于术后 3、6、12、2 4h取末端回肠粘膜进行光镜、电镜观察 ,并用分子生物学标记 (TUNEL)方法研究肠粘膜上皮细胞的凋亡。结果 :ASP组大鼠除制模 2 4h光镜下可见肠粘膜上皮细胞脱落外 ,其它时相点肠粘膜均保持完整 ,电镜观察制膜各相点均可见典型凋亡细胞 ,TUNEL法显示制膜 3、6、12、2 4hASP组肠粘膜上皮细胞凋亡指数较假手术组显著增加P均 <0 .0 1,且于术后 6h达峰值 ,凋亡细胞主要分布于肠粘膜隐窝部。结论 :ASP大鼠早期肠粘膜上皮细胞凋亡明显增加 ,上皮细胞凋亡增加可能也参与了ASP时肠道粘膜屏障功能障碍的病理生理过程     

中药促动合剂对SIRS患者肠粘膜屏障损伤及MODS防治作用的临床研究

目的：观察不同中药组方对SIRS患者肠粘膜屏障功能、血清内毒素水平和MODS、MSOF发生发展的影响。方法：把40例患者随机分为4个治疗组，以单纯对照组作为对照，观察单纯大黄组、促动合剂组、促动合剂 生态制剂组患者肠粘膜屏障功能、血清内毒素水平的变化及MODS的发生情况。结果：经过一周治疗后、与单纯对照组比较，三个治疗组患者的病情有不同程度的好转；SIRS患者入院时肠粘膜通透性均有不同程度的异常，表现为乳果糖排泄率升高，甘露醇排泄率明显下降，部分患者L／M增高，三个中药治疗组可不同程度地防止SIRS患者胃腑遭粘膜功能的进一步损伤；SIRS患者均存在不同程度的内毒素血症，中药治疗特别是促动合剂和促动合剂 生态制剂治疗方法可防治SIRS患者血浆内毒素升高；大黄、单纯促动合剂及促动合剂 生态制剂这两种治疗方法可防治SIRS患者血浆内毒素升高；大黄、单纯促动合剂及促动合剂 生态制剂治疗可降低MODS、MSOF的发生率。结论：SIRS患者存在不同程度的肠粘膜屏障功能障碍，表现为肠粘膜通透性增加，血内毒素水平升高，MODS、MSOF发生率升高，单纯大黄、单纯促动合剂，促动合剂 生态制剂具有保护胃肠道粘膜屏障，减轻患者肠粘膜通透性损伤，降低SIRS患者血内毒素含量的作用，可不同程度逆转MODS状态，对MODS的发生、发展具有一定防治作用。     

肠缺血再灌注对肠粘膜屏障损害的超微结构研究

以犬绞窄性肠梗阻为模型，应用扫描电镜研究肠缺血再灌注对肠粘膜屏障的损害及意义。结果肠血再灌注后，小肠粘膜损害呈进行性加重，肠粘膜屏障功能进一步受损。表明肠缺血再灌注所致的肠粘膜屏障功能损害是导致细菌移位，肠源性感染的重要因素。     

氧自由基在肝硬化门脉高压大鼠肠粘膜屏障损伤中的作用及别嘌呤醇的保护作用

为探讨氧自由基在肝硬化门脉高压大鼠肠粘膜屏障中的作用及别嘌呤醇的保护作用,建立肝硬化门脉高压大鼠模型,分别检测正常对照组、肝硬化门脉高压组及治疗组中丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XO)以及细菌移位(BT),并观察肠粘膜形态学及超微结构的改变。结果显示正常对照组肠系膜淋巴结培养阳性率为40.0%,脾为13.3%,门静脉和肝均为0.0%;肝硬化门脉高压组,肠系膜淋巴结培养阳性率为50.0%,脾、肝、门静脉分别为20.0%、40.0%、30.0%;治疗组肠系膜淋巴结、脾、肝、门静脉培养阳性率依次为45.1%、18.2%、18.2%、0.0%;3组细菌移位率分别为11.5%、35.0%、20.4%;空肠组织中MDA含量(μmol/L),肝硬化门脉高压组高于治疗组和正常组(P＜0.01);XO含量(U/L),肝硬化门脉高压组高于治疗组和正常组(P＜0.01)。提示氧自由基是导致肝硬化门脉高压大鼠肠粘膜屏障障碍的重要因素;别嘌呤醇抑制XO转化为氧自由基可以减轻肠粘膜屏障受损。     

谷氨酰胺对肠粘膜细胞凋亡影响的研究进展

谷氨酰胺(glutamine,Gln)是血液循环和组织内自由氨基酸池中含量最丰富的氨基酸,参与多种代谢必需物质的合成,并为肠粘膜和其他增生活跃的细胞(如免疫细胞)提供主要的能量[1].     

组织胺对肠粘膜屏障功能的调节作用研究

The model of CaCo2 cell monolayer system has been generally accepted as a standard method for in vitro study of the relationship between the epithelium and microbial invasion. In this study, we set up the model with a simplified method and used it to observe if histamine, which is an important inflammatory factor in gastroenteric tract, can offer some barrier protection from E. coli invasion. After two weeks' routine incubation, the established CaCo2 cells monolayer systems were co-cultured with 1 x 10(-8) mmol/L, 1 x 10(-7) mmol/L and 1 x 10(-6) mmol/L histamine DMEM for 2 hours, and with frank DMEM as control for the same length of the time. For observation on time course effect of histamine, the co-cultures with 1 x 10(-6) mmol/L histamine DMEM were kept up for 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 and 18.0 hours. Bacterial invasion ws assessed by quantitating the number of E. coli within the coultured epithelial cells. The results showed that histamine significantly inhibited the invasion of E. coli to epithelial cells(P < 0.05). The colony counts in co-cultures with 1 x 10(-7) mmol/L and 1 x 10(-8) mmol/L histamine DMEM were 52.5, 30.3 and 91.3 respectively, compared with 563 in control group. In the study of the time course effect of histamine, the colony conuts of co-culture with histamine DMEM for 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 and 18.0 hours were 135.5, 64.0, 29.5, 36.0 and 22.5 respectively. It was concluded that histamine can enhance the protective barrier function of intestinal epithelium against E. coli invasion.     

急性胰腺炎并发肠粘膜屏障损害机制与作用

急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）并发症多,病死率高,发病机制复杂,继发的细菌感染、内毒素血症亦是其危险因素。近年来,随着对急性胰腺炎中MODS、细菌移位、肠源性感染等的深入研究,肠道的粘膜屏障功能逐渐被人们所重视。肠粘膜屏障能起到防止肠道内致病细菌、毒素等有害物质透过肠壁到达肠外,以及保持机体内环境的稳定等重要作用”。在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）、创伤、手术、放化疗、严重感染等应激状态下,肠粘膜的结构和功能会受到损害,表现为电镜下发现肠粘膜微绒毛部分上皮脱落、减少;绒毛高度、宽度显著减低,面积减少;细胞紧密连接破坏;凋亡细胞增加;肠道粘膜通透性（intestinal permeability,IP）出现病理性升高。     

谷氨酰胺对放射损伤大鼠肠粘膜屏障功能和抗氧化能力的影响

目的　观察谷氨酰胺对放射损伤大鼠肠粘膜屏障功能和抗氧化能力的影响。方法　Wistar雄性大鼠 3 0只 ,随机分对照组 (Control)、添加谷氨酰胺照射组 ( +GLN)和未添加谷氨酰胺照射组 ( GLN)。以不同饲料喂养至第 15天 ,+GLN和 GLN两组动物给予 9Gy60 Co γ射线照射 ,继续分组喂养至第 2 0天处死全部动物 ,进行肠道细菌移位、血清内毒素含量、血清还原型谷胱甘肽 (GSH)和超氧化物歧化酶 (SOD)含量测定。结果　肠道细菌移位率和血清内毒素含量 +GLN组明显低于 GLN组 ,血清GSH、SOD水平 +GLN组显著高于 GLN组 (P <0 .0 1)。结论　饲料中添加谷氨酰胺对放射损伤大鼠的肠粘膜屏障功能具有明显的保护作用 ,并能增强机体的抗氧化能力。     

生长抑素对大鼠不同肠段粘膜机械屏障损伤的保护作用

目的比较重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）大鼠末段回肠及右半结肠起始段粘膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白表达的差异和生长抑素对肠粘膜机械屏障的保护作用。方法Spraque-Daw-ley大鼠90只，随机分为3组，对照组、SAP组、治疗组。术后6、12、24h分批处死大鼠，取末段回肠及右半结肠起始段，用原位末端标记技术、免疫组化技术，检测肠粘膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白的表达。结果（1）SAP组与对照组比较，肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达上调，细胞凋亡增加；治疗组和SAP组比较，肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达下调，细胞凋亡减弱；差异均有显著性。（2）SAP组中各时相点，结肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达及细胞凋亡较回肠更强，差异有显著性。（3）各组各时相点bcl-2蛋白表达受抑制。结论SAP大鼠结肠粘膜机械屏障损伤较回肠更大；肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达的上调是其细胞凋亡增加的重要原因；早期用生长抑素能有效保护SAP大鼠肠粘膜机械屏障。     

组织胺对肠粘膜屏障功能的调节作用研究

为探讨组织胺对肠粘膜屏障功能的调节作用,采用CaCo2细胞单层肠上皮系统-感染模型,将1×10-6mmol/L、1×10-7mmol/L和1×10-8 mmol/L三种不同浓度的组织胺DMEM细胞培养液分别加入已形成类似肠上皮的CaCo2细胞单层系统中,和定量的大肠杆菌混合培养.观察侵入细胞的大肠杆菌量,并用同样的方法测试组织胺调节作用的时间效应.结果:经浓度为1×10-6mmol/L、1×10-7mmol/L和1×10-8mmol/L组织胺液处理过的CaCo2细胞液的细菌培养结果分别为52.5、30.3和91.3个,而对照组为536.2个,显示不同浓度的组织胺均能明显减少大肠杆菌进入上皮的数量(P＜0.05).观察不同的作用时间段发现:对照组及组织胺-DMEM培养0.5、1.0、2.0、4.0和18.0小时后的细菌入侵数分别为101.5、135.5、64.0、29.5、35.5和22.55个,说明组织胺的作用有其时相性.上述实验结果表明,组织胺能增强肠粘膜的屏障功能,减少大肠杆菌对肠上皮细胞的侵袭作用.     

生长激素对肠粘膜屏障保护作用的临床研究

目的 探讨腹膜炎病人肠粘膜通透性的变化规律及生长激素对肠粘膜屏障的保护作用。方法 40例急性弥漫性腹膜炎病人分为两组，常规治疗组20例，生长激素治疗组20例，10名健康成人为正常对照组。所有病人在入院24h内行手术治疗，生长激素治疗组于术后第1天开始皮下注射生长激素，每天8U，连用7d，其它治疗与常规治疗组一样。术后1、4、8d测定肠粘膜通透性，并观察临床基本情况、营养指标及治疗结果。结果 腹膜炎病人肠粘膜通透性显著高于正常人，生长激素治疗组肠粘膜通透性随治疗进程迅速下降，术后第8d显著低于常规治疗组。生长激素治疗组病人恢复较快，营养状态保持较好，术后并发症少，白细胞计数回落快，住院时间缩短。结论 腹膜炎病人肠粘膜通透性显著升高，生长激素对肠粘膜屏障具有一定保护作用，并有助于提高临床治疗效果。     

组胺对肠粘膜屏障功能的影响

目的探讨组胺对肠粘膜屏障功能的影响.方法采用体外单层CaCo-2细胞和失血感染大鼠模型为对象,细菌易位数量为指标,观察组胺对肠粘膜屏障功能的影响.结果①体外实验显示,经1×10-6mol/L、1×10-7mol/L和1×10-8mol/L三种不同浓度的组胺处理过的CaCo-2细胞液细菌培养结果分别为8.2×106CFU/ml、4.8×106CFU/ml和14.3C×106FU/ml,其细菌易位数量明显低于对照组(83.8×106CFU/ml)(P＜0.05).②动物实验提示,组胺(浓度为1×10-6mol/L)治疗组大鼠肝、淋巴结平均组织含菌量分别为0.88×106CFU/g1.69×106CFU/g.而对照组肝、淋巴结平均组织含菌量分别为82.62×106CFU/g和48.46×106CFU/g.其组胺治疗组肝、淋巴结平均组织含菌量明显低于对照组(P＜0.05).结论小剂量组胺有抑制细菌进入上皮细胞,抑制肠道细菌易位的作用.     

谷氨酰胺治疗梗阻性黄疸大鼠肠粘膜屏障损伤的实验观察

４５只大鼠随机分成３组，Ａ组为手术对照组，Ｂ组为梗阻性黄疸组，Ｃ组为梗阻性黄疸谷氨酰胺治疗组。结果显示，Ｃ组肠壁蛋白质和ＤＮＡ含量明显高于Ｂ组。粘膜厚度、绒毛高度及绒毛表面积等指标Ｃ组民于Ｂ组，Ｃ组在上述组织学观察数据上均与Ａ组相近，且肠道细菌易位率及门静脉内毒素水平明显低于Ｂ组，结果表明，口服谷安有助于防治梗阻性黄疸大鼠肠粘膜屏障损伤和肠萎缩，降低肠道细菌易位率及内毒素血症的发生率。     

肠粘膜屏障损害与肠外／肠内营养

肠道在维持机体正常 营养中起着极其重要的作用。在重症病人或长期进行肠外营养时肠道粘膜的结构和功能可能受到损害,可导致毒素/细菌移位。联合应用谷氨酰胺和生长激素可改善肠粘膜功能。本文阐述了肠粘膜屏障损害的早期诊断方法及肠外/肠内营养中应用谷氨酰胺和生长激素对肠粘膜屏障功能的改进等。     

精氨酸对肠粘膜屏障功能的影响

目的：了解精氨酸对肠粘膜屏障功能的影响。方法：雄性ＳＤ大鼠３０只,随机分为三组。精氨酸组予精氨酸０．２５ｇ腹腔注射,假手术组和肠梗阻组予生理盐水作对照,１次／ｄ,共５ｄ。再手术将肠梗阻组、精氨酸组大鼠结扎回肠,造成单纯性机械性肠梗阻模型,假手术组仅作剖腹探查。术后２４ｈ处死大鼠采集标本。结果：①细菌移位率和移位数水平肠梗阻组和假手术组相比明显升高,精氨酸组和肠梗阻组相比明显减少。②血浆内毒素水平肠     

关于Caco-2细胞构建肠粘膜屏障模型的相关研究

目的 通过用Caco-2细胞的体外培养,建立肠粘膜屏障的模型。方法 通过对Caco-2细胞在体外transwell小室中连续培养21 d,并对培养的细胞进行形态学观察、跨膜电阻测定、inulin-FITC通透率测定,评估肠屏障模型是否构建成功。结果 通过体外连续培养Caco-2细胞形成了致密单层,可见细胞层单层排列,相互融合,边界清晰,细胞间紧密连接清晰可以见,21 d TER值为496.32±6.02(Ω·cm2),inulin-FITC的通透率<0.5%。结论通过细胞形态学观察,跨膜电阻测定及inulin-FITC的通透率显示Caco-2细胞体外构建肠屏障模型成功,此模型对于相关疾病的研究具有一定意义。     

灵芝多糖对失血性休克复苏时肠粘膜损伤的保护作用及机制

目的:探讨灵芝多糖(GLP)对失血性休克再灌注复苏时肠粘膜损伤的保护作用及机制。方法:复制家兔失血性休克再灌注复苏模型,随机分成假手术组(S组)、生理盐水再灌注复苏组(NS组)和质量分数为1%的GLP再灌注复苏组(LS组),于放血前、休克40min、再灌注复苏40min和90min时观察细菌的移位情况;复苏90 min时,检测肠粘膜SOD活性、MDA和TNFα含量的变化;同时取回肠末端观察肠粘膜的损伤情况和用TUNEL法检测肠粘膜细胞凋亡情况。结果:1随着再灌注复苏时间的延续,NS组血液细菌阳性率增加,细菌移位增加,明显高于LS组和S组(P<0.05);2NS组和LS组肠粘膜SOD活性明显低于S组,而LS组又明显高于NS组(P<0.05);NS组和LS组肠粘膜MDA和TNFα含量明显高于S组,而LS组又明显低于NS组(P<0.05);3NS组肠粘膜损伤明显重于S组和LS组,且肠粘膜凋亡细胞百分数也明显高于S组和LS组(P<0.05)。结论:失血性休克再灌注复苏过程中肠粘膜的损伤与局部脂质过氧化反应增强、TNFα介导的炎症反应及肠粘膜细胞的凋亡增多等有关,而GLP对此损伤有保护作用。