植物乳杆菌C8-1产类细菌素的初步研究

从发酵2周的泡菜中分离到66株乳杆菌,以其中4株乳杆菌作为出发菌株进行紫外诱变处理得到一株产类细菌素的突变株C8-1。基于细胞形态、生理生化和16S rDNA测序数据,菌株C8-1被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。菌株C8-1所产的类细菌素具有较宽的抑菌谱,能够抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等多种食品腐败菌和致病菌;有较好的热稳定性,在4℃冷藏5 d和-20℃冷冻5d以及60,80,100℃和121℃分别加热15 min,活性损失均不超过6%;且抑菌活性随pH值增大逐步降低,当pH≥6时,抑菌活性消失,对胃蛋白酶、木瓜蛋白酶耐受性较强,对胰蛋白酶较为敏感。这些数据表明,产类细菌素的植物乳杆菌C8-1在食品加工中具有进一步地潜在应用价值。     

嗜酸乳杆菌产类细菌素Lactobacillin NX2-6的初步研究

从内蒙古传统乳制品酸马奶中筛选出1株产生具有广谱抑菌活性物质的嗜酸乳杆菌NX2-6。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,菌株NX2-6所产生的类细菌素对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌等革兰氏阴性菌及米曲霉等真菌具有较强的抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性明显下降,但仍具有较强的抑菌活性,对α-胰凝乳蛋白酶抗菌活性没有显著变化,因此表明该抗菌活性物质为蛋白类物质或非单一物质。在酸性条件下它具有很好的热稳定性,pH2.0时活性最强,中性或碱性条件下不具有抗菌活性,抑菌活性pH值范围在2.0-5.0。此抗菌物质不同于一般细菌素,属于类细菌素,命名为Lactobacillin NX2-6。菌株NX2-6产物在生防、食品具有潜在的应用价值。     

植物乳杆菌MXG-68所产细菌素的抑菌特性分析

研究乳酸菌细菌素的抑菌特性,为其作为生物防腐剂奠定基础。以酸马奶来源的植物乳杆菌MXG-6所产的细菌素为研究对象,对其抑菌谱、作用方式、相对分子质量及耐受性进行分析。该细菌素对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌活性,属于广谱细菌素,作用方式为杀菌,而不是抑菌和溶菌。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-polyacrylamide gels electrophoresis,SDS-PAGE)确定植物乳杆菌MXG-6所产细菌素的分子质量约6 ku。60、80、100、121℃处理30 min及4、-20℃处理30 d对抑菌活性影响不显著(P 0. 05),在pH 1～10均表现出抑菌活性,表明细菌素具有较好的温度耐受性和酸碱耐受性。有机溶剂及表面活性剂对细菌素的抑菌活性基本无影响(P 0. 05),而EDTA有利于提高抑菌活性。细菌素的抑菌特性分析可为更好地实现细菌素的开发及应用提供一定的理论依据。     

1株乳酸菌所产类细菌素Lactobacillin SD-22的初步研究

自泡菜中分离的329株乳酸菌中筛选出1株具有较广抑菌活性的菌株SD-22,经鉴定为短乳杆菌(Lac- tobacillus brevis)。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,SD-22菌株发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus),枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)等革兰氏阳性菌和大肠杆菌(Esche- richia coli),鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimuniuns)等革兰氏阴性菌具有较好的抑制作用,而且对部分真菌也有抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性略有下降,表明该活性物质为非蛋白成分或起抑菌作用的非单一物质。该活性物质不同于一般细菌素,属于类细菌素,命名为LactobacillinSD-22。它具有很好的热稳定性,在酸性条件下稳定且活性高,对蛋白酶敏感性低,且具有较广的抗菌谱。     

瑞士乳杆菌AJT所产抗菌物质的初步研究

从内蒙古地区传统乳制品中分离的瑞士乳杆菌AJT,培养至6h开始具有抗菌活性,20h达到抗菌活性最大值.用甲醇和乙酸乙酯提取的菌株AJT的抗菌物质,排除酸性产物和过氧化氢干扰后,对大肠杆菌等革兰氏阴性菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌及扩展青霉等真菌具有抗菌活性.抗菌物质经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K和木瓜蛋白酶处理后,抗菌活性下降,但仍然具有活性,表明该抗菌物质由蛋白类或非单一类物质组成,在pH2.0～5.0范围内有抑菌活性,对热稳定,对紫外线照射不敏感,属于类细菌素.     

类细菌素高产菌CF10的筛选诱变及发酵条件的研究

采用纸片法初筛和杯碟法复筛自黄水中分离出一株抗生物质产生菌CF10,经鉴定为布氏乳杆菌(Lactobacillusbuchneri)。在排除酸性末端产物及过氧化氢的干扰后,CF10菌株发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)等革兰氏阳性菌、大肠杆菌(Escherichiacoli)和绿脓杆菌(Pseudomonaspyocyanea)等革兰氏阴性菌、K酵母(SaccharomycescerevisiaeK)和某些真菌有强烈的抑制作用。经紫外线照射(UV)和硫酸二乙酯(DES)多轮复合诱变,CF10发酵液相对效价较未诱变前提高了258%且具有良好的传代稳定性。通过对该菌株产类细菌素发酵条件的研究发现,以2%麦芽糖为碳源、1%大豆蛋白胨加0.5%酵母粉为氮源,培养温度37℃,初始pH6.0～6.5,培养时间48h,接种量1%,厌氧条件下,有微量K+、Mg2+和Mn2+等金属离子存在,CF10所产类细菌素的抑菌活性最高。     

乳酸乳球菌L9所产类细菌素Lactococcin GJ-9的初步研究

采用双层平板法 ,自 117株分离的乳酸菌中筛选出一株具有较广抑菌活性的菌株L9,经鉴定为乳酸乳球菌 (Lactococcuslactics)。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后 ,L9菌株发酵液对溶壁微球菌 (Micrococcuslysodeikticus)、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusaureus)和枯草杆菌 (Bacillussubtilis)等革兰氏阳性菌以及大肠杆菌 (Escherichiacoli)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium )等革兰氏阴性菌有强烈的抑制作用。表明该菌株产生一具有广谱抑菌活性的物质。经胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性不变 ,表明该活性物质为非蛋白成分 ,属于类细菌素 ,命名为LactococcinGJ 9。它具有很好的热稳定性 ,在酸性条件下稳定且活性高 ,对蛋白酶不敏感 ,且具有较广的抗菌谱     

瑞士乳杆菌AJT所产抗菌物质的初步研究

从内蒙古地区传统乳制品中分离的瑞士乳杆菌AJT,培养至6h开始具有抗菌活性,20h达到抗菌活性最大值。用甲醇和乙酸乙酯提取的菌株AJT的抗菌物质,排除酸性产物和过氧化氢干扰后,对大肠杆菌等革兰氏阴性菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌及扩展青霉等真菌具有抗菌活性。抗菌物质经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K和木瓜蛋白酶处理后,抗菌活性下降,但仍然具有活性,表明该抗菌物质由蛋白类或非单一类物质组成,在pH2.0～5.0范围内有抑菌活性,对热稳定,对紫外线照射不敏感,属于类细菌素。      

瑞士乳杆菌产生的细菌素的抑菌活性研究

主要通过研究对从建昌板鸭发酵过程中分离瑞士乳杆菌产生细菌素的抑菌活性,考察不同温度,不同p H,不同种类酶作用对细菌素抑菌活性的影响。结果证明:蛋白酶能一定程度抑制细菌素的抑菌活性,且胰蛋白酶的抑制程度最强;该细菌素的抑菌活性对温度的耐受力强,即使在100℃处理后仍具有抑菌活性,在-20℃条件下保存时抑菌活性最强;该细菌素p H在1.5~4.0时具有抑菌活性,在p H为1.5时抑菌活性最强。     

产细菌素弯曲乳杆菌的分离鉴定及细菌素特性初步研究

从西班牙传统色拉米香肠中分离到一株产细菌素菌株RX-6,其发酵液在排除有机酸、过氧化氢及菌体细胞干扰后,抑菌活性基本无变化;经硫酸铵盐析及透析处理后,抑菌活性明显增强;蛋白酶K处理后,抑菌活性消失,表明起抑菌作用的是蛋白类物质.通过菌体形态观察、生理生化特征实验、16S rRNA序列比对及系统发育分析,鉴定菌株RX-6为弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus).抑菌特性研究结果显示该菌株所产细菌素具有很好的热稳定性和酸碱耐受性,在121℃20min的高温处理后仍能保持一定活性,活性pH范围为3～10;使用安全性高,胃蛋白酶和胰蛋白酶可将其完全分解,而酸性蛋白酶可将其部分分解;抑菌谱较广,对受试的7株李斯特菌(Listeria spp.)、3株金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aereu)、1株大肠杆菌(Escherichia coli及1株假单胞菌(Pseudomonas spp.)等都有明显抑制作用,显示出作为天然食品生物防腐剂的巨大应用潜力.     

The effect of treating whole-plant barley with Lactobacillus buchneri 40788 on silage fermentation,aerobic stability,and nutritive value for dairy cows

Chopped barley forage was ensiled untreated or treated with several doses (1 x 10(5) to 1 x 10(6) cfu/g of fresh forage) of Lactobacillus buchneri 40788 in laboratory silos and untreated or treated (4 x 10(5) cfu/g) in a farm silo. Silage from the farm silos was fed to lactating cows. In the laboratory silo, the effects of inoculation on fermentation and aerobic stability were also compared to silage treated with a commercial inoculant and a buffered propionic acid additive. Inoculation with L. buchneri 40788 decreased the final concentrations of lactic acid but increased concentrations of acetic acid and ethanol in silage from laboratory and farm silos. Silages stored in laboratory silos did not heat after exposure to air for 7 d and were then mixed with alfalfa silage and a concentrate to form total mixed rations (TMR) that were further exposed to air. The TMR containing silages treated with L. buchneri 40788 or a buffered propionic-acid-based additive took longer to heat and spoil than the TMR containing untreated silage or silagetreated with the commercial inoculant. Silage stored in a farm silo and treated with L. buchneri 40788 had fewer yeasts and molds than did untreated silage. Aerobic stability was greater in treated silage alone and in a TMR containing treated silage. Dry matter intake (18.6 kg/d), milk production (25.7 kg/d), and milk composition did not differ between cows fed a TMR containinguntreated or treated silage. These findings show that L. buchneri can improve the aerobic stability of barley silage in laboratory and farm silos and that feeding treated silage had no negative effect on intake or performance.     

乳酸菌的抑菌作用及其发酵性能研究

从样品酸乳中分离得到4个菌株,采用牛津杯法筛选出抑菌活性最高的4#乳酸菌。抑菌谱实验表明:此菌株产生的乳酸菌素不仅对革兰阴性菌如大肠杆菌有较强抑制作用,而且对革兰阳性菌如藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌也有较强的抑制作用,是一种广谱乳酸菌素。发酵性能测试显示:当发酵时间、发酵温度、脱脂乳质量分数、反应体系的pH值分别为72h、37℃、20%和5.5时,酸度可达到443°T。     

芒果酸奶发酵及后熟过程中乳酸菌素的产生及其抑菌作用

为了揭示芒果酸奶在其发酵与贮运过程中抗菌物质的产生及抑菌作用机理,采用指示菌及抑菌培养试验等方法,探讨了芒果酸奶中抗菌物质的种类及作用.结果表明,在芒果酸奶正常发酵并经后熟12 h后,开始有乳酸菌素产生.乳酸菌素随着后熟时间的延长而增加,且对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌效果,乳酸菌素的抑菌作用随着胰蛋...     

Effect of Extrinsic Parameters on the Production of a Bacteriocin by Lactobacillus buchneri,Isolated from Mexican Raw Sausages

Bacteriocins are antimicrobial peptides acting on certain pathogens and spoilage microorganisms. They have recently been considered as natural alternative to food preservatives. The objective of this work was to study the inhibition spectrum of a bacteriocin produced by Lactobacillus buchneri, isolated from a Mexican sausage, against Listeria monocytogenes and several lactic acid bacteria, and the influence of several extrinsic parameters on bacteriocin activity. Culture media (MRS or APT) had no significant effect on bacteriocin production (p < 0.060) although higher activity was observed in MRS (220 AU/mL). Conversely, temperature significant affected production (p > 0.001). Bacteriocin activity was also increased by 100% nitrogen atmosphere (180 AU/mL) as compared to N₂/CO₂ (50:50) (150 AU/mL) and 100% CO₂ (60 AU/mL). Maximum activity occurred at the end of the exponential growth phase. This bacteriocin inhibited some Listeria monocytogens strains and several lactic acid bacteria, mainly Lactobacillus sp.     

嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2抑制大肠杆菌作用机理的探讨

将离子交换色谱纯化获得的抑菌效价为380.60 AU/mL的嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2作用于大肠杆菌（Escherichia coli）,从死亡率、细胞膜损伤及引起胞内物质外泄方面,探讨Lactobacillin XH2抑制大肠杆菌的机理。结果表明：Lactobacillin XH2作用于大肠杆菌后,在3 h内大肠杆菌死亡率达96%,菌体细胞变形并出现孔洞,菌体短小且不规整。进一步分析发现,细胞膜通透性增大,胞内K+快速大量泄露,膜电位紊乱失衡;胞内紫外吸收物质、乳酸脱氢酶等生命大分子物质大量流失;同时导致了大肠杆菌胞内三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）外泄,细胞物质代谢、能量代谢失常,最终导致了菌体死亡。这些现象表明,孔道形成（pore formation）理论可能同样适用于Lactobacillin XH2对革兰氏阴性菌大肠杆菌的作用机理。     

复合诱变增强植物乳杆菌fmb10的抑菌性能研究

以植物乳杆菌fmb10为出发菌株,依次通过Co60γ射线、低能氮离子束诱变、硫酸二乙酯(DES)诱变、EMS诱变等手段对菌株进行单一和复合诱变改良,以期提高其抑菌活性。结果表明,菌株fmb10对低能氮离子束注入和EMS诱变敏感,通过低能氮离子注入和EMS化学诱变,获得一株抑菌活性强、遗传特性稳定的正向突变菌株fmb10-Z。通过测定,发现菌株fmb10-Z不仅保留了广谱抑菌活性,且抑菌活性有不同程度的提高,对大肠杆菌的抑菌圈直径与出发菌株相比提高了23%,细菌素相对效价比原始菌株提高了1.5倍,诱变效应明显。     

类细菌素产生菌LC47的选育及其代谢产物的初步研究

采用纸片法初筛和杯碟法复筛自黄水中分离出一株类细菌素产生菌LC47，经鉴定为布氏乳杆菌（Lactobacillus buctmeri）。在排除酸性末端产物及过氧化氢的干扰后，LC47菌株发酵液对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）等革兰氏阳性菌、大肠杆菌（Eschenchia coli）和铜绿假单胞菌（Pseudomonas pyocyanea）等革兰氏阴性菌、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和某些真菌有强烈的抑制作用。经紫外线照射（UV）和硫酸二乙酯（DES）多轮复合诱变，LC47发酵液相对效价较未诱变前提高了216％，且具有良好的传代稳定性。通过对该菌株产类细菌素发酵条件的研究发现，以2％麦芽糖为碳源、1％大豆蛋白胨＋0．5％酵母粉为氮源，培养温度37℃，起始pH6．0～6．5，接种量1％，厌氧条件下培养48h，有微量0、Mg2^＋NH4^＋和Mn^2＋等金属离子存在，LC47所产类细菌素的抑菌活性最高。