雅连炮制工艺研究及不同炮制品中7个生物碱的含量测定＊

目的 建立雅连不同炮制品的炮制工艺，测定炮制前后7个生物碱的含量，构建雅连科学的质量控制方法，以提升雅连药材、饮片、精制饮片的质量控制水平。方法 通过四因素三水平的正交实验，以生物碱总含量为指标，筛选了酒雅连、姜雅连、萸雅连的最佳炮制工艺；采用高效液相色谱法测定雅连不同炮制品总生物碱以及7个生物碱（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、格陵兰黄连碱）含量。经方法学验证，该方法精密度、重现性、稳定性均符合要求。结果 确定了雅连各炮制品的最佳炮制工艺；含量测定结果表明，萸黄连炮制后总生物碱含量最高，姜黄连次之，皆高于生品，7个生物碱含量，因炮制方法不同差别较大。结论 雅连各炮制品最佳炮制工艺的确定结合多指标成分定量，可以有效控制雅连药材的质量，为2020年版《中华人民共和国药典》黄连药材质量标准的完善与提高提供参考。     

雅连和味连对内毒素致小鼠死亡率的影响

目的:研究雅连和味连对内毒素所致小鼠死亡率的影响。方法:采用小鼠尾静脉注射脂多糖的方法,连续48h观察小鼠死亡情况。结果:味连小剂量组能明显延长小鼠受脂多糖攻击后的存活时间(P<0.01),雅连小剂量组和味连小剂量组均能降低脂多糖致小鼠死亡率,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论:味连小剂量能够明显延长内毒素小鼠的生存时间,降低死亡率,其作用优于雅连。     

草连与味连的生物碱比较分析

目的：比较研究草连与味连药用部位的生物碱差异。方法：采用TLC法比较草连与味连中生物碱种类的差昔,UV法比较两者生物碱含量的差异。结果：草连根茎中几乎不含表小檗碱,草连叶与根茎中总生物碱含量均低于味连根茎中生物碱含量。结论：草连与味连生物碱种类与含量存在差异,草连的药用价值较低。     

雅连HPLC指纹图谱的初步研究

目的建立雅连的HPLC指纹图谱鉴定方法。方法用RP-HPLC(DAD)法,梯度洗脱,测定雅连的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果初步建立了雅连的指纹图谱。结论HPLC指纹图谱法重现性好,可作为黄连的一项质控指标。     

雅连种质资源的本草学研究

通过古代不同时期的本草对黄连药材的不同记述,结合部分现代研究的成果,解析本草中黄连药材名的建立与不同种质之间的相关关系,结果表明黄连药材自有应用记载以来,随着社会的进步、人口与需求的增加,人们的质量认识水平从黄连的产地划分到性状差异至种质资源异同等呈现逐步提高,使黄连药材名称从统一到细分,药材商品涉及我国黄连属所有植物的根茎,其中雅连在黄连药材的沿革中具有举足轻重的作用,拟为黄连属植物系统发育与个体分布、生态环境与药用种质资源等的相关性研究提供参考.     

不同品种和产地黄连的生物碱含量测定

不同品种和产地黄连的生物碱含量测定刘岱杨立新崔淑莲胡世林(中国中医研究院中药研究所北京100700)黄连为中医临床上最常用的药物之一,味苦性寒,长于清热燥湿、泻火解毒,香连丸、黄连上清丸为其代表方剂。历代医家早就注意到产地对黄连质量有明显影响,汉末李当之《药录》云:“惟取蜀道郡黄肥而坚者为善,”《唐本草》云:“蜀道者粗大,味极浓苦,疗渴最佳,江东者节如连珠,疗痢大善。”李时珍认为:“今虽吴蜀皆有,性以雅州、眉州者....     

平贝母中总生物碱的含量测定

<正> 近年来研究证明平贝母有效成分主要为生物碱类,不仅具有祛痰作用,还有明显的降压作用(徐东铭等。药学学报1982;17:355)。对其内在质量的研究文献报道较少[李萍等。中国药科大学学报1990;21(5):319]。本文利用溴麝香草酚蓝和平贝母中生物碱在pH5时形成离子对后,定量萃取于氯仿中进行比色测定这一原     

黄连商品种类现状考察

通过实地调查和文献研究,搞清目前三种黄连商品的种植、生产情况。现今市场销售的黄连商品,基本上都是"味连",又分为"鸡爪连"、"单枝连"两种,"鸡爪连"是药农采收加工的味连商品,"单枝连"是药商对"鸡爪连"进行二次加工的味连商品;不同产地的"味连"栽培管理、种植年限基本一致,其质量无明显差别,现"味连"商品已无"南岸连""北岸连"之分。雅连现仅在四川省眉山市洪雅县有种植生产,种植面积达80多亩,栽培品种是"大红袍",每年出产的少量雅连药材,主要加工成酒炙雅连袋泡茶。云连主产云南省怒江州,在怒江种植量在10万亩以上,年采收2万亩以上,药材产量110 t以上;云连除在怒江州本地农产品市场有销售外,也销售到华东沿海地区,并在昆明菊花园药材市场有销售。     

野生半夏总生物碱含量的测定

目的用紫外分光光度法测定东北地区野生半夏中总生物碱的含量。方法以溴百里香本分蓝为显色剂,λmax=407 nm,测得生物碱在1.6~8.0μg/ml范围内具有良好线性关系,r=0.999。结果生物碱含量为0.1377%。结论与其他地区相比,该含量较高。     

峨眉黄连与三角叶黄连不同居群盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量测定

通过峨眉黄连、三角叶黄连不同海拔高度的居群中小檗碱类生物碱含量的比较,拟证实生态环境和栽培管理对其药材质量影响较大;黄连药材种质资源不同,质量存在较大的差异,峨眉黄连根、根茎、叶的小檗碱含量均较高,间接说明古代雅连药材质量优于其它黄连(同在野生状态下)与基源种质有关。     

云南黄连自然资源及其保护问题的研究

目的系统调查研究云南黄连的资源分布、生物学和生态学特性、利用历史和现状,为科学保护和合理开发利用这一传统地道药材提供基础资料。方法室内文献资料和标本查阅、药用民族植物学调查和野外考察相结合的方法。结果研究报道云南黄连的生物学和生态学特性、生长发育规律、自然分布特点和利用历史及现状。结论应加强保护野生种质资源和合理开发利用这一药用植物。     

RP-HPLC梯度洗脱测定叶下珠中没食子酸的含量

叶下珠PhyllanthusurinariaL.为大戟科叶下珠属植物叶下珠的干燥全草,具有平肝清热、利水解毒的功效。现代药理实验证明,叶下珠具有抗乙肝病毒、保肝等作用[1]。没食子酸为其有效成分之一,是可水解鞣质的单体,具有抗病毒作用,在多种中药材中存在。然而,已报道的没食子酸测定方法对杂质干扰耐受力不强,重现性较差。没食子酸相对分子质量小,结构中带有羟基和羧基,极性很大,通常只适合用正相键和柱分析,但是正相柱使用成本高,不及反相柱普及率高,如何建立适合反相色谱柱分析的方法尤显重要。在反相柱上测定没食子酸含量,关键是增大流动相中水…     

高效毛细管电泳测定黄连、肉桂配伍前后黄连主要生物碱的含量

目的：建立黄连生物碱的高效毛细管电泳定量方法,并考察黄连与肉桂配伍前后黄连主要生物碱的含量。方法：用高效毛细管电泳法含量确定。结果：测定组分具有良好的线性关系和分离度,４种生物碱的回收率分别为９８．２８％,９８．３８％,９７．７８％,９８．８９％,ＲＳＤ分别为０．８６％,１．１２％,１．０６％,１．１１％。结论：高效毛细管电泳法定量准确可靠,方法简便可行,重复性好。黄连与肉桂配伍后黄连的各种生物碱含量均有不同程度的降低。     

三角叶黄连ISSR反应体系的建立与优化

目的 针对三角叶黄连ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系,为进一步研究三角叶黄连的种质资源遗传多样性奠定基础.方法 通过筛选引物并设定影响三角叶黄连ISSR-PCR反应诸因子的不同梯度,检测其不同反应体系的扩增效果,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立三角叶黄连ISSR-PCR稳定可靠的反应体系.结果 建立了可用于三角叶黄连ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系:25 μLPCR反应体系中,内含10×PCR Buffer 2.5 μL,1.5 mmol/L Mg~(2+),200 μmol/L dNTP,0.3 μmol/L 引物,40 ng模板,1.0 U Taq DNA聚合酶.扩增程序为94℃预变性5 min,然后进行35个循环:94℃变性30 s,(据不同引物的退火温度)复性60 s,72℃延伸90 s,循环结束后72℃延伸7 min,4℃保存.结论 所建立的三角叶黄连ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,可以较好地应用于三角叶黄连的种质资源遗传多样性及居群鉴别的研究.     

三角叶黄连丛枝菌根真菌的多样性研究

目的:调查三角叶黄连主产区根围中丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)的资源和分布情况。方法:采用碱解离-乳酸甘油酸性品红染色法观察三角叶黄连根系侵染情况,并计算侵染率;采用湿筛-倾注-蔗糖离心法分离提取孢子,利用形态特征及组织化学染色的方法对AMF孢子进行分类鉴定。结果:三角叶黄连能与AMF形成菌根,不同产地采集三角叶黄连菌根侵染率不同,为23.3%～34.4%;从6个产地共分离出了6属30种丛枝菌根真菌,其中无梗囊霉属Acaulospora 17种、球囊霉属Glomus 7种、巨孢囊霉属Gigaspora 2种、内养囊霉属Entrophospora 1种、类球囊霉属Paraglomus 1种和原囊霉属Archaeospora 2种,无梗囊霉属和球囊霉属是三角叶黄连根系土壤中AMF的优势种群;道地产区洪雅的AMF最丰富。结论:三角叶黄连是菌根营养型植物,其产区AMF具有丰富的多样性,是三角叶黄连的扩大生产和无公害丰产栽培中具有重要应用前景的生物资源。     

RP-HPLC法同时测定黄连中四种原小檗碱型生物碱的含量

目的：建立用RP-HPLC技术同时测定黄连中小檗碱、巴马亭、黄连碱及药根碱等4种原小檗碱型生物碱含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。测定黄连药材中上述4种原小檗型生物碱的含量。结果：4种原小檗碱型生物碱的平均含量分别为：5．74%（RSD=1．7%）（n=9）,1．33%（RSD=1．3%）（n=9）,3．67%（RSD=2．8%）（n=9）,0．95%（RSD=5．2%）（n=9）。结论：该方法可用于同时测定黄连中4种原小檗碱型生物碱的含量,且简便、准确、可靠、快速,并具重现性。     

大孔吸附树脂纯化黄连中4种生物碱的含量测定

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定大孔吸附树脂富集纯化后的黄连提取物中4种生物碱含量的方法。方法:以X-5型大孔吸附树脂对黄连提取物中总生物碱进行富集纯化,采用高效液相色谱法同时测定其中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量。结果:黄连提取物经大孔吸附树脂纯化后,表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的平均含量分别为1.45%、2.62%、7.03%和17.95%,未经纯化的黄连提取物中的平均含量分别为0.67%、1.05%、1.86%和8.54%。结论:X-5型大孔吸附树脂可有效富集纯化黄连中的生物碱类成分。     

关于当归、吴茱萸药对提取及含量测定的研究

目的:当归和吴茱萸药对是古方温经汤治疗月经不调、痛经的主要成分,确定当归和吴茱萸药对的提取方法。方法:采用紫外可见分光光度法对药对中总生物碱进行含量测定研究;采用HPLC法对药对中的阿魏酸、吴茱萸碱和吴茱萸次碱进行含量测定研究。结果:文章所提供的方法准确、重复性线性关系等符合要求,测定结果稳定、可靠,为当归、吴茱萸药对配伍的提取方法研究提供了依据。结论:单煎合并比合煎所得到的阿魏酸及吴茱萸碱含量高,本法可以为确定药对提取的方法提供科学可靠的依据。     

HPLC测定克咳片中生物碱成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定克咳片中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱含量的方法。方法色谱柱：phenomenex Synergi Polar-RP柱(4.6 mm×250 mm,4μm);流动相：甲醇∶0.092%磷酸溶液(含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺)＝1.5∶98.5;检测波长：210 nm;流速：1.0 mL/min;柱温：30℃。结果盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的线性范围分别为6.51×10-3～0.651μg(r＝0.9999)、6.27×10-3～0.627μg(r＝1),平均加样回收率(n＝6)分别为102.26%、103.71%,RSD 分别为0.34%、0.22%。结论该方法简便、准确,重复性好,专属性高,结果可靠,可有效控制克咳片中生物碱成分的质量。