无细胞百日咳疫苗时代百日咳杆菌黏附素蛋白缺失株的研究进展

无细胞百日咳疫苗接种后的免疫持久性下降和百日咳杆菌变异是导致"百日咳再现"的两个重要原因。百日咳杆菌变异株不表达无细胞百日咳疫苗中所包含的抗原成分,其中以黏附素蛋白的缺失最为常见。大量研究表明黏附素蛋白的缺失对百日咳杆菌的侵袭力和致病性并无明显影响,被认为可以由其他毒力因子代偿。黏附素蛋白缺失株产生的原因,包括IS481序列插入等菌株自身变异相关的分子机制,以及无细胞百日咳疫苗接种后的免疫环境造成的选择性压力。我国目前处在无细胞百日咳疫苗接种初期,尚未报道发现黏附素蛋白缺失株。     

百日咳杆菌诱导大鼠急性感染性脑水肿模型

向左颈内动脉注百日咳杆菌，造成大鼠急性感染性脑水肿模型，生理盐水和正常手术为对照组。结果示注菌１ｈ，４ｈ组左脑含水量分别较正常组和盐水组显著增高；ＥＢ含量注菌组均较对照组显著增高；且注菌侧脑明显蓝染，提示本模型主要系血管源性脑水肿。     

百日咳杆菌诱导大鼠迟发性脑损伤

Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠４０只随机均分为百日咳菌液（４ｈ，２４ｈ）和生理盐水对照（４ｈ，２４ｈ）４组，向前两组鼠左颈内动脉注射百日咳菌液０．２ｍｌ、ｋｇ＾－１（含菌量每ｍｌ１０８亿），以诱导出其感染性脑损伤模型。结果显示：注菌４ｈ时脑水肿、血脑屏障受损、伊文思蓝含量和钠钙离子增高及钾离了减低，胶质细胞     

百日咳杆菌与成年人慢性咳嗽

目的：评价百日咳杆菌引起成年人慢性咳嗽的几率。方法：用细菌培养，PCR和ELISA方法对201名患者急性期和恢复期标本进行检测。结果：我们发现，4名患者百日咳杆菌培养阳性；11名患者(包括培养阳性的患者)百日咳杆菌PCR阳性；33人，包括11名PCR阳性患者中的10名，有最近感染的血清学证据。咳嗽与否不能鉴别百日咳杆菌阳性还是阴性。结论：百日咳杆菌感染是引起成年人慢性咳嗽的非常普遍的原因。这些患者是百日咳传染源，会将百日咳传染给婴儿。对于婴儿这将是灾难性的。     

百日咳杆菌诱导大鼠急性感染性脑水肿模型

向左颈内动脉注射百日咳杆菌，造成大鼠急性感染性脑水肿模型，生理盐水和正常手术为对照组。结果示注菌１ｈ，４ｈ组左脑含水量分别较正常组和盐水组显著增高（Ｐ＜０．０１）；ＥＢ含量注菌组均较对照组显著增高（Ｐ＜０．０１）；且注菌侧脑明显蓝染。提示本模型主要系血管源性脑水肿。     

从血液中分离出1株多重耐药的阴沟杆菌

2005年6月我室从1例外伤患者血液中分离培养出一株多重耐药的阴沟杆菌（Entembacer cloacae），报道如下。     

百日咳杆菌外膜蛋白免疫保护作用及其机理的研究

经戊二醛脱毒前或后的百日咳杆菌外膜蛋白免疫的ＮＩＨ小鼠，其ＰＤ５０分别为９８．１０～１０９．００和６９．３５～７７．０６μｇ／ｋｇ，但其ＬＤ５０分别为３７．９０～４２．１１和１０７．２０～１１９．１１ｍｇ／ｋｇ。脱毒后的百日咳杆菌外膜蛋白１次免疫小鼠的保护率　为７５．０％，小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和Ｔ淋巴细胞转化率明显上升，免疫后第６０ｄ　血清抗体效价达到高峰，以后逐渐下降，抗体类型以ＩｇＭ为主。经脱毒外膜蛋白２次免疫的小鼠保护率高达９５．８％．小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力、Ｔ和Ｂ淋巴细胞转化能力均显著增强，免疫后第１８０ｄ仍能测出较高效价的血清抗体，抗体类型转为以ＩｇＧ为主。实验结果证实，脱毒后的百日咳杆菌外膜蛋白能安全有效地刺激机体产生特异性免疫力，且２次免疫的效果优于１次免疫。     

用融合蛋白在大肠杆菌中高表达百日咳杆菌毒素蛋白S3亚基…

用多聚酶链反应和基因重组技术通过百日咳毒素Ｓ３亚基因和高表达质粒ＰＭＡＬ－Ｃ构建了麦芽糖结合蛋白和亚基蛋白的融合基因，并在大肠杆菌中高效表达了融合蛋白。     

从胸水中分离出一株人赭杆菌

人赭杆菌隶属于假单胞菌属第Ⅲ群 ,为条件致病菌 ,在自然界分布广泛 ,可从河水、土壤中分离出来 ,也可从临床血液、尿液等标本中分离出来[1] 。我们从一例胸腔积液患者的胸水标本中分离到一株人赭杆菌 (Ｏｃｈｒｏｂａｃｔｒｕｍａｎｔｈｒｏｐｉ) ,报告如下。1　临床资料　　患者 ,女 ,48岁 ,助剂厂工人。因胸腔积液于 1999年 3月2 0日入院。入院时查体 :胸廓对称 ,左侧略饱满 ,呼吸力度及语颤减弱 ,左侧胸第 8后肋以下呈叩浊音 ,两肺未闻及干湿罗音。实验室检查 :ＷＢＣ 3 0× 10 9/ＬＮ 0 60Ｌ 0 3 9Ｍ 0 0 1,ＥＳＲ 40ｍｍ/ｈ。尿常…     

百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素的功能性应用研究进展

百日咳杆菌分泌的腺苷酸环化酶毒素(adenylate cyclase toxin, CyaA)是百日咳杆菌的重要致病因子之一,同时也是诱发机体产生抗百日咳免疫的潜在保护性抗原之一.近年来的研究表明,CyaA不仅具有腺苷酸环化酶活性和溶血素活性,还在疫苗佐剂、抗原呈递、蛋白疫苗载体、肿瘤治疗和免疫调节等方面,有深入的研究价值.本文主要对百日咳杆菌CyaA的应用研究现状作一综述,旨在对CyaA的研究价值进行探讨.     

尿标本中分离出一株放射土壤杆菌

我科于2004年7月从急性泌尿系感染患的尿中分离出一株放射土壤杆菌。报告如下。     

戊二醛脱毒前后的百日咳杆菌外膜蛋白及其组分的毒性与免疫原性

应用TritonX-100抽提和Sephadex G-100层析获得百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)及其5个组分(OMP_1～OMP_5).OMP_1～OMP_4均具有促白细胞增多、组胺敏感和胰岛活化蛋白的活性.OMP及其各组分对中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)具有毒性作用,可使该细胞聚集生长、~3H-TdR掺入量下降,及核糖体大量脱落和膜旁颗粒减少等现象.OMP组分OMP_1～OMP_4经0.3%戊二醛处理后,上述生物学活性均明显下降,CHO细胞不出现聚集生长,~3H-TdR掺入量明显高于未脱毒的组分,与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05).脱毒前后的OMP各组分对小鼠的主动保护作用未见明显变化(P>0.05).实验结果表明,戊二醛能有效地降低OMP_1～OMP_4的毒性,但脱毒后的OMP_1～OMP_4仍具备较强的免疫原性和保护力.因此,OMP及其组分经戊二醛处理后,有希望成为百日咳杆茵的无细胞疫苗.     

脑脊液标本中分离出一株弗劳地枸橼酸杆菌

患者女，4 1/2岁，发热2天，体温不降，出汗较多，微咳，不吐，饮食一般，睡眠不佳，后发现患儿出现四肢抽动，口吐白泡，晚上急送我院就诊，门诊以（1）上感；（2）低钙惊厥；（3）瑞氏综合征收治。     

百日咳杆菌毒素S1亚单位与谷胱甘肽S—转移酶融合基因在大肠杆菌 …

研究了百日咳杆菌毒素Ｓ１亚单位与谷胱甘肽Ｓ－转移酶融合蛋白（ＧＳＴ－Ｓ１）在大肠杆菌中的表达。并一步纯化了重组ＧＳＴ－Ｓ１，首先用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增出长度为５６０ｂｐ的编码百日咳毒素Ｓ１亚单位的ＤＮＡ片段。     

用融合蛋白在大肠杆菌中高表达百日咳杆菌毒素蛋白S＿3亚基基因

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和基因重组技术通过百日咳毒素Ｓ＿３亚基基因和高表达质粒ｐＭＡＬ－Ｃ构建了麦芽糖结合蛋白（ＭＢＰ）和（Ｓ＿３）亚基蛋白的融合基因，并在大肠杆菌中高效表达了（ＭＢＰ－Ｓ＿３）融合蛋白。该融合蛋白产率占细胞总蛋白含量的２５％，并且能用蛋白酶因子Ｘａ将融会蛋白切开，得到ＭＢＰ（４２ＫＤ）和Ｓ＿３亚基蛋白（２１．８７ＫＤ）．该方法表达式效率高。纯化过程简单，为基因工程技术生产该毒素提供了新的途径。     

58株不动杆菌的分离鉴定

不动杆菌为一种机会致病菌,在机体抵抗力下降时易致继发感染,故对此类菌的正确鉴定甚为重要。笔者对５８株不动杆菌进行分离鉴定,现将结果报告如下。１材料和方法１．１材料血琼脂基础、麦康凯基础、克氏双糖铁、微量生化鉴定管（均购自浙江省军区后勤部卫生防疫检验所...