RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组（阴性对照）、si-RasGRF1组（沉默RasGRF1表达）、NG组（空白对照）。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高（P <0.05）,选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <...     

claudin-23在结直肠癌组织中的表达及其对人结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 了解claudin-23在结直肠癌中的表达及其对人结直肠癌细胞株生长、增殖及迁移能力的影响。方法 自四川大学华西医院疾病组织标本库选取6对结直肠癌组织及相应癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR检测组织标本中claudin-23基因的表达量。构建稳定过表达claudin-23的结直肠癌细胞株,用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹验证后,采用CCK-8、Transwell细胞迁移实验检测过表达claudin-23对人结直肠癌细胞生长、增殖以及迁移能力的影响。结果 在结直肠癌组织中claudin-23的表达量较癌旁正常组织中减少（P<0.05）,过表达claudin-23后HCT15细胞间的黏附性降低,细胞呈离散型生长,并且可促进HCT15细胞的生长增殖,此外,过表达claudin-23可使RKO细胞及HCT15细胞的迁移能力明显增强。结论 claudin-23可显著提高人结直肠癌细胞的迁移能力,提示claudin-23可能与结直肠癌的转移相关。     

BRAF在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 研究鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)蛋白在结直肠癌发生锯齿状通路中的表达及其与临床病理因素的关系. 方法 采用免疫组织化学技术检测20例结直肠增生性息肉、20例结直肠腺瘤组织(轻-中度不典型增生7例、重度不典型增生13例)和40例结直肠癌组织中BRAF蛋白的表达,并对其与临床病理因素的关系进行相关性分析. 结果 BRAF蛋白在结直肠增生性息肉、结直肠腺瘤、结直肠癌组织中阳性表达率各组比较差异有统计学意义(P<0.05).BRAF的表达与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移有相关性(P<0.05),而与结直肠癌的发病年龄、性别无关(P>0.05). 结论 BRAF蛋白的表达与结直肠癌的发生发展密切相关.BRAF蛋白表达在结直肠癌的诊断方面可能是比较好的协助诊断分型、判断预后因子.     

AQP-5对结直肠癌细胞生长的影响及机制

目的 探讨水通道蛋白-5(AQP-5)对细胞增殖及凋亡影响及可能的机制.方法 体外常规培养人结直肠癌COLO 205和SW480细胞,取对数生长期的细胞用于实验.通过siRNA技术抑制内源性AQP-5的表达,并经免疫荧光、PCR检测AQP-5-siRNA转染效率,利用MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI和TUNEL检测细胞凋亡情况,RT-PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2表达变化.结果 在COLO 205和SW480细胞株中,转染AQP-5-siRNA后AQP-5表达下调达90%.MTT分析结果显示,与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA组的细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05);流式细胞分析结果发现,与NS-siRNA组细胞相比,转染AQP-5-siRNA后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示:与转染NS-siRNA组相比,转染AQP-5-siRNA明显提升Bax/Bcl-2 mRNA和蛋白的表达.结论 AQP-5-siRNA可体外促进结直肠癌细胞凋亡,其机制可能与Bax/Bcl表达有关.     

P-gp在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 检测结直肠癌P-gp的表达,探讨其临床意义.方法 采用免疫组织化学MaxVisionTM二步法,检测结直肠癌标本78份,癌旁正常肠组织31份.结果 P-gp表达阳性率为83.3%(65/78),与癌周正常组织比较差异有统计学意义(P<0.05),其表达与浸润深度有关,差异有统计学意义(P<0.05),与性别、年龄、临床分期、淋巴结转移无关,差异无统计学意义(P>0.05).结论 P-gp在结直肠癌的原发耐药上起着重要作用,检测P-gp的表达对大肠癌的化疗药物和方案选择具有参考意义.     

MiR-182在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞迁移能力的影响

目的 检测miR-182在结直肠癌中的表达情况及与临床病理参数的关系,探讨其对结直肠癌细胞迁移能力的影响。方法 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测86例患者结直肠癌与对应癌旁组织中miR-182的表达情况,分析其与结直肠癌临床病理参数之间的关系。体外用miR-182 mimics和阴性对照转染结直肠癌HT-29细胞,将实验分为miR-182组、阴性对照组和空白组,transwell小室实验观察 miR-182对HT-29细胞迁移能力的影响。结果 MiR-182在结直肠癌的表达显著高于癌旁(P<0.001),其表达水平与患者的浸润程度(P=0.028)、淋巴结转移(P=0.003)、远处转移(P=0.006)和临床分期(P=0.005)密切相关, 而与年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤大小和分化程度无相关性(P均>0.05)。体外实验进一步表明,miR-182过表达的HT-29细胞迁移数显著高于阴性对照组和空白组(P均<0.05)。结论 MiR-182在结直肠癌中高表达且与肿瘤的转移及进展有关,体外能增强结直肠癌细胞的迁移能力,提示miR-182可作为预防和治疗结直肠癌转移的潜在靶点。     

USP14在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨USP14在结直肠癌中的表达及其临床意义。 方法 选取225例结直肠癌患者肿瘤组织及对应的远端正常组织,采用免疫组化法检测USP14表达情况,并分析其与临床病理参数间的关系。 结果 结直肠癌组织中USP14表达显著高于正常组织(χ²=11.62,P<0.05),USP14表达情况与患者性别(χ²=0.205,P=0.651)、年龄(χ²=1.274,P=0.259)、远处转移(χ²=0.739,P=0.390)、TNM分期(χ²=3.082,P=0.079)无显著相关。生存分析发现,USP14阳性表达患者的平均生存时间(63.78个月,95% CI:57.37~70.19)明显短于USP14阴性表达患者(83.09个月,95% CI:75.40~90.78,P=0.003)。COX比例风险回归分析表明,USP14表达(HR=2.213,P=0.002)和TNM分期(HR=3.237,P=0.000)可作为结直肠癌患者的独立预后因素。 结论 USP14在结直肠癌发展中发挥重要作用,USP14表达是结直肠癌患者的独立预后因素。     

结直肠癌干细胞和微环境对结直肠癌转移的影响

结直肠癌是最常见的癌症之一,过去虽然对早期结直肠癌的治疗已取得了长足进步,但其转移机制尚不清楚,针对结直肠癌的转移尚无有效治疗方法,而远处转移是结直肠癌引起死亡的主要原因。结直肠癌干细胞的存在促进了结直肠癌的发生发展,而基质细胞与结直肠癌细胞发生物质交换,为结直肠癌细胞提供营养物质,因此结直肠癌干细胞与癌细胞所处的微环境对结直肠癌发生远处转移起着至关重要的作用。未来,对结直肠癌干细胞和微环境的深入研究可以预防和治疗结直肠癌的转移,并为发生远处转移的结直肠癌患者的治疗提供新思路。     

自噬影响结直肠癌奥沙利铂耐药的研究进展

结直肠癌是世界上最常见的癌症之一,其发病率在全球呈上升趋势。奥沙利铂是治疗结直肠癌的一线化疗药物,在治疗结直肠癌时,可通过多种信号通路影响细胞自噬而导致治疗性耐药。自噬是细胞内的一种分解代谢过程,将自身的细胞质成分如细胞器、蛋白质等物质进行降解。自噬在奥沙利铂治疗结直肠癌时具有双重作用,既可以促进肿瘤细胞存活又可以导致肿瘤细胞死亡。因此,深入研究自噬通路有望为克服结直肠癌耐药提供理论依据。本文就自噬如何影响结直肠癌细胞对奥沙利铂的耐药进行综述,为结直肠癌患者的治疗提供新思路。     

结直肠癌组织CypB表达及其对癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察伴或不伴淋巴结转移的结直肠癌组织中亲环素B（CypB）的表达变化,研究CypB质粒敲除对结直肠癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织芯片中59例结直肠癌组织CypB表达,其中31例无淋巴结转移,28例伴淋巴结转移。构建CypB的RNA干扰质粒,测序鉴定后转染结直肠癌细胞系SW1116（SW1116-siCypB）,设立阴性对照（SW1116-NC）;Westernblotting分析CypB敲除效果。分别采用划痕实验和细胞侵袭实验评估和检测CypB敲除对SW1116细胞迁移和侵袭能力的影响。结果伴淋巴结转移结直肠癌组织中CypB表达显著高于无淋巴结转移结直肠癌组织（P〈0．01）。与SW1116-NC比较,SW1116-siCypB的CypB表达明显减少,细胞迁移和细胞侵袭能力均显著降低,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论CypB在结直肠癌淋巴结转移过程中具有重要作用,有望成为防治结直肠癌淋巴结转移的分子靶点。     

RNF2在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨环指蛋白2(RNF2)在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响.方法 采用免疫组织化学法检测RNF2在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达,并利用过表达的慢病毒转染HCT116细胞构建过表达RNF2的HCT116细胞系,通过CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测过表达RNF2对结直肠癌细...     

iASPP在结直肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨结直肠癌及癌旁组织中iASPP的表达及其临床意义?方法:采用免疫组化法检测iASPP在55例结直肠癌组织及47例癌旁组织中的表达情况,分析iASPP表达与肿瘤浸润深度?分化程度?淋巴结转移的相互关系?结果:①结直肠癌组织中iASPP的阳性表达率高于癌旁组织(P < 0.01);②在高?中和低分化结直肠癌组织中iASPP阳性表达与肿瘤细胞的分化程度有关(P < 0.01);③在T1~T4期结肠直癌中,iASPP阳性表达与肿瘤浸润深度有关(P < 0.01);④结直肠癌组织中iASPP的表达与淋巴结是否转移有关(P < 0.01)?结论:结直肠癌组织中iASPP的阳性表达率高于癌旁结肠组织,且其表达与肿瘤的分化?肿瘤浸润深度及淋巴结是否转移有关,可能为结直肠恶性肿瘤的诊断提供帮助?     

腹腔游离癌细胞测定在大肠癌治疗中的临床意义

目的：评价腹腔游离癌细胞测定的临床价值。方法：126例进展期大肠癌患者，术中探查前先用100ml生理盐水冲洗腹腔，然后从Douglas窝中取出50ml生理盐水进行细胞离心检测，共检测出癌细胞阳性72例（57.14%)，将其随机分成两组，一组接受早期腹腔温热化疗及静脉化疗，另一组接受静脉化疗，结果：静脉化疗组腹腔内复发9例，肝转移4例；早期腹腔温热化疗组，腹腔内复发2例，肝转移3例，两组复发率有显著差异；两组均未见严重并发症。结论：腹腔游离癌细胞测定有助于指导大肠癌术后早期进行腹腔温热化疗并对判断大肠癌预后有一定的价值。     

氨基酸转运蛋白SLC6A14在大肠癌中的表达特征及其促癌功能研究

目的 研究氨基酸转运蛋白SLC6A14在大肠癌中的表达特征及其促进大肠癌细胞生长的作用.方法 采用实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测35对大肠癌及癌旁组织中SLC6A14 mRNA的表达水平;Western印迹法检测SLC6A14在大肠癌细胞株HT-29和SW620中的蛋白表达;免疫组化法检测108例...     

结直肠癌中NOB1基因的表达及意义

目的探讨NOB1在结直肠癌中的表达及其意义。方法用免疫组织化学SP法对60例结直肠癌和癌旁正常组织(距癌组织大于3.0 cm)中NOB1的表达进行检测;并分析其与结直肠癌临床病理因素的关系。结果 NOB1在结直肠癌组织中表达阳性的有32例(53.3%),NOB1在癌旁正常组织中表达阳性有10例(16.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。在结直肠癌组织中NOB1的表达与患者性别、年龄、肿瘤组织的分级和淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论 NOB1在结直肠癌中表达升高,可能在结直肠癌的发生发展过程中起重要作用。NOB1能否成为结直肠癌治疗的新靶点,有待进一步研究。     

短程全反式维甲酸对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨短程全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ATRA对LoVo细胞的生长抑制率并筛选合适的药物用量,流式细胞仪检测ATRA诱导的肿瘤细胞周期和凋亡率变化。结果选择1.0μmol·L-1ATRA作为进一步实验的工作浓度。1.0μmol·L-1ATRA作用12 h后G1期细胞开始增多,48 h后G1期细胞明显增多并伴S期、G2/M期细胞减少(P<0.05)。1.0μmol·L-1ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率的组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论短程1.0μmol·L-1ATRA主要通过阻滞LoVo细胞于G1期并诱导其细胞发生早期凋亡,可明显抑制肿瘤细胞的增殖。     

血清核仁素检测在结肠癌中的临床应用

目的:探讨核仁素(nucleolin)在结肠癌患者血清中的水平与临床意义?方法:用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测172例结肠癌患者?24例直肠癌患者和80例健康体检者血清中核仁素含量,并分析血清核仁素水平与结肠癌患者临床病理特征之间的关系?结果:结肠癌患者血清中核仁素含量为(228.9 ± 212.4)pg/mL,直肠癌患者为(115.1 ± 34.5)pg/mL,健康对照组为(101.13 ± 32.4)pg/mL?结肠癌患者血清核仁素水平明显高于健康对照组(P < 0.001),直肠癌患者与健康对照组间差异无统计学意义(P > 0.05)?在结肠癌检测中,血清核仁素敏感性为91.9%?特异性为83.8%,癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)敏感性为68.6%?特异性为85.0%?浸润型结肠癌患者中血清核仁素水平明显高于隆起型和溃疡型(P < 0.05)?结肠癌患者血清核仁素水平与年龄?性别?肿瘤大小?分化程度?浸润程度?淋巴结转移?远处转移?TNM分期?Ducks分期均无相关性(P均 > 0.05)?结论:结肠癌患者血清核仁素检测敏感性和特异性较高,敏感性优于CEA,特异性与CEA相当,对结肠癌的诊断有潜在应用价值?     

卵巢癌顺铂耐药细胞系的建立

目的 :建立人卵巢癌体外耐药模型 ,研究卵巢癌对顺铂的耐药特征。方法 :模仿临床卵巢癌化疗模型 ,采用中等浓度、间歇作用法 ,从人卵巢癌细胞株SKOV3培养出对顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP ;倒置显微镜下观察细胞形态 ;MTT法、单克隆形成法检测耐药细胞的耐药指数 ;流式细胞仪检测两种细胞的细胞周期分布。结果 :SKOV3/DDP细胞形态无明显改变 ;耐药指数用MTT法检测为 1 8,单克隆形成法检测为 8;SKOV3主要分布于G0 -G1期 ,SKOV3/DDP主要分布于S期及G2 -M期。结论 :中等剂量、间歇作用法可以诱导出卵巢癌细胞株SKOV3对顺铂耐药性。此项研究结果可为临床卵巢癌化疗方案的制定、复发癌二线化疗药物的选择提供理论依据