产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的分析

对我院 2 0 0 1年 10月～ 2 0 0 2年 5月临床分离的 30株非重复的产ESBLs大肠埃希菌进行检测 ,了解CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。采用琼脂平皿对倍稀释法进行耐药表型检测 ,抗菌药物为头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢哌酮 舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星和阿米卡星。采用PCR方法进行 β 内酰胺酶基因型分析 ,对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ,用PFGE分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌的同源性。琼脂糖电泳结果表明 30株产ESBLs大肠埃希菌中有 13株携带CTX M基…     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的研究

目的 :了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌中CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。方法 :对 2 0 0 1年 1 0月～ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 30株产ESBLs大肠埃希菌采用琼脂平皿对倍稀释法和PCR方法进行耐药表型和 β 内酰胺酶基因型分析 ;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ;用脉冲场凝胶电泳 (PFGE)分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌同源性。结果 :1 3株菌携带CTX M基因 ,CTX M酶亚型为CTX M 3和CTX M 1 4。产CTX M酶菌株对第三代头孢菌素耐药率高 ,对头孢噻肟…     

大肠埃希菌的耐药特性及其产超广谱β-内酰胺酶的分析

观察大肠埃希菌的耐药特性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况，为临床正确选择抗生素提供药敏依据。用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，用ESBLs表型确证试验检测出产ESBLs的大肠埃希菌。共检出314株大肠埃希菌。对其中298株大肠埃希菌进行了ESBLs检验，检出产ESBLs菌81株，检出率为27．2％；81株产ESBLs菌对多种药物耐药率较高，除亚胺培南、头孢哌酮，舒巴坦、庆大霉素和阿米卡星外，大肠埃希菌产ESBLs株对其他9种抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs株。大肠埃希菌产ESBLs率高，应引起临床高度重视，对检测出的大肠埃希菌均应进行ESBLs检测，产ESBLs细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性，对亚胺培南和头孢哌酮，舒巴坦的敏感性好。     

73株大肠埃希菌耐药表型分析

目的分析临床分离的大肠埃希菌的耐药性、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性率及耐药性之间的关系。方法用微量肉汤稀释法检测2009年10月至2010年3月分离的73株大肠埃希菌的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株。结果 73株大肠埃希菌产ESBLs20株,阳性率为27.4%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率〉95%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率均为95%,但头孢他定耐药率为20%。对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/克拉维酸和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率〈30%,耐药率低于30%的还有头孢西丁、阿米卡星,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。结论本医院分离的产ESBLs大肠埃希菌的比例低于国内其他地区,具有显著的耐药性。     

深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

大肠埃希菌耐药性分析

目的了解大肠埃希茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况;比较产ESBLs菌与非产ESBLs菌时10种抗生素的耐药率.指导临床合理用药.方法收集2007年7月～2008年6月临床分离的大肠埃希菌36株,用双纸片增效试验法和K-B法,进行产ESBLs细菌的检测和药敏试验.结果 36株大肠埃希茵中,共检出产ESBLs菌27株,栓出率为75%,除亚胺培南外,产ESBLs菌对其它10种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌,亚胺培南未发现耐药株.结论本院大肠埃希菌产ESBLs率高,亚胺培南是治疗我院产ESBLs菌引起感染的有效抗生素.     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的　了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的情况及其耐药特点 .方法　对 2 0 2株肺炎克雷伯菌和 134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定 ,纸片扩散法进行常规药敏试验 ,按照NCCLS的标准判读结果 .结果　对 336株儿童患者感染菌株试验 ,共检测出 81株ES BLs菌株 ,ESBLs总产生率为 2 4 .1% ;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为 2 9.7% ,大肠埃希菌产ESBLs率为 15 .7% .产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株 (t=6 .6 0 3,p <0 .0 1) ,对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药 ,对复方新诺明、氨苄西林 /舒巴坦的耐药率也较高 (耐药率高于 6 0 % ) ,且多为多重耐药株 ,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦敏感率较高 (耐药率低于 30 % ) ;所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为 0 .结论　儿童感染细菌ESBLs发生率相当高 ,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌 ,耐药高且多重耐药情况严重 ,治疗较困难 ,需加强ESBLs检测 ,以合理使用抗生素 ,延缓和防止ESBLs的发生和播散     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点.方法对202株肺炎克雷伯菌和134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定,纸片扩散法进行常规药敏试验,按照NCCLS的标准判读结果.结果对336株儿童患者感染菌株试验,共检测出81株ESBLs菌株,ESBLs总产生率为24.1%;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为29.7%,大肠埃希菌产ESBLs率为15.7%.产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株(t＝6.603,p<0.01),对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药,对复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率也较高(耐药率高于60%),且多为多重耐药株,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高(耐药率低于30%);所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为0.结论儿童感染细菌ESBLs发生率相当高,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌,耐药高且多重耐药情况严重,治疗较困难,需加强ESBLs检测,以合理使用抗生素,延缓和防止ESBLs的发生和播散.     

大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌超广谱β—内酰胺酶基因的核苷酸序列测定及分子进化研究

随着人群老龄化、器官移植手术的广泛开展、免疫抑制剂的使用 ,以及社会因素的影响 ,革兰氏阳性杆菌感染发病率有所升高。该类感染包括无芽孢革兰氏阳性菌 李斯特菌、放线菌、棒状杆菌、红斑丹毒丝菌及产芽孢革兰氏阳性菌 芽孢杆菌属、梭状芽孢杆菌属细菌感染。临床医师与临床微生物实验室工作者对此类感染相对较陌生 ,尚未予足够重视 ,目前也难见对革兰阳性杆菌感染的系统资料 ,实验室检测、临床诊断与治疗水平需尽快提高 ,如何认识革兰阳性杆菌感染、如何准确地进行病原学诊断、如何正确地选择治疗药物、如何恰当地进行预防 ,是当代临床…     

医院感染大肠埃希菌耐药性的调查分析

目的 调查分析大肠埃希菌引起的感染及其耐药性,以便指导临床用药.方法 对本院血、尿、痰等标本细菌培养分离出的大肠埃希菌用全自动微生物分析系统鉴定,用纸片扩散法进行抗生素敏感试验,双纸片协同筛选试验检测产超广谱β-内酰胺酶.结果 引起感染的大肠埃希菌对头孢唑林、头孢呋辛、氨苄西林、左氧氟沙星的耐药率为47.8%～78%;对头孢他啶、头孢吡肟、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等均呈现良好的敏感性,耐药率为3.4%～24.6%;对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,分别为0和1.7%.产ESBLs菌株的耐药率比非产ESBLs菌株耐药明显升高.结果 大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类、头孢1代和2代抗生素的耐药性较高;对头孢3代和4代抗生素、头霉素类、阿米卡星、呋喃妥因和哌拉西林/他唑巴坦的耐药性较低;目前对亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦最敏感.结论 应根据抗生素敏感试验选择敏感药物进行治疗,并检测相应的产ESBLs情况.     

聚类分析在大肠埃希菌耐药性研究中的应用

目的 探讨聚类分析在大肠埃希菌临床分离株同类系株的分离及在耐药性监测中的实用价值。方法 用WHONETSE软件对收集的大肠埃希菌的监测数据进行处理，用SPSSl0．0对收集到的药敏试验数据进行聚类分析。结果( 1)聚类分析可以将同类系菌株与非同类系菌株分成不同的类别，以树状图的形式可以直观地反映菌株间的相似性。(2)变量的数量和种类的选择对聚类分析的结果会产生明显的影响。结论 利用大肠埃希菌的药物敏感试验数据进行聚类分析可以将产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌与普通株分开，对推断抗生素的临床疗效具有一定意义；同时可以辨别菌株间的相关性，为进行细菌基因同源性研究提供参考数据。     

反义寡核苷酸抑制耐药基因逆转产ESBLs大肠埃希菌的多重耐药性

目的 研究抑制产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(E.coli)耐药基因CTX-M表达的反义寡核苷酸(AS-ODNs)对其耐药性的影响.方法 用脂质体包裹AS-ODNs W086后导入目的细菌B052,通过平板克隆形成实验计数菌落数(CFU);微量法测定细菌生长曲线;通过RT-PCR法检测B052耐药基因CTX-M的表达变化,用液体稀释法检测W086对B052最小抑菌浓度(MIC)影响.结果 AS-ODNs W086明显抑制B052的生长,W086各剂量组B052的CFU与空白对照组比较明显减少(P＜0.05),且具有浓度依赖性抑制效应,而单纯脂质体组、单纯W086组及对照链组与空白对照组无明显差异;W086能显著抑制B052 CTX-M的表达.结论 AS-ODNs能特异高效地与CTX-MmRNA结合并阻断其表达,有效逆转了B052的多重耐药性;AS-ODNs为解决细菌耐药问题提供了一个新的研究策略.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌遗传标记和耐药基因的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因（整合子qacE△1、转座子tnpU）、氨基糖苷类修饰酶编码aac（6′）-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac（6′）-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC型β-内酰胺酶的分子流行病学研究

目的 研究北京大学第三医院分离的大肠埃希菌（E.coli）和肺炎克雷伯菌（Klebsiellapneumoniae,Kpn）中超广谱β-内酰胺酶（ESBL）和质粒AmpC型β-内酰胺酶（p-AmpC）的分子流行病学特征.方法 收集2003年6月至2004年7月无重复临床分离E.coli和Kpn共293株,对其中产ESBL和/或p-AmpC的86株进行研究.采用琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度;等电聚焦电泳测定β-内酰胺酶等电点;接合实验判断β-内酰胺酶基因位置和移动性;PCR及其产物测序确定基因型;ERIC/BOX-PCR判断菌株克隆性（E.coli菌株分型同时结合种系进化群PCR结果）.结果 PGR产物测序结果显示：我院E.coli和Kpn中只产生ESBL、只产生p-AmpC、同时产生两种酶菌株的发生率分别是30.8%（60/195）、17.3%（17/98）、0.5%（1/195）和1.0%（1/98）、0.5%（1/195）、6.0%（6/98）;E.coli中ESBL以CTX-M-14型酶为主（70.5%）,Kpn中则以CTX-M-3（30.4%）、CTX-M-9（30.4%）、CTX-M-14（21.7%）常见,p-AmpC均为DHA-1型;发现blacrx-M-52（GenBank登录号DQ223685）,该基因编码的β-内酰胺酶和CTX-M-3相比有两处点突变（A77V和P167S）,导致对头孢他啶的水解活性比头孢噻肟高（临床株相应接合子MICCTX=16 μg/ml,MICCAz≥256 μg/ml）.产酶株多数呈多重耐药,对美罗培南敏感.E.coli种系进化群D群以一个克隆株为主,而Kpn则以两个克隆株常见.结论 我院存在分别或同时产生ESBL和p-AmpC酶的E.coli和Kpn,相应常见酶型分别是CTX-M型和DHA型,菌株间呈一定程度的同源性.应对产生两类酶的菌株进行持续的表型监测和深入的机制研究.     

吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的基因分型

目的对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带的ESBLs耐药基因进行分型,为临床合理应用抗生素提供理论依据。方法收集住院患者标本中分离出的51株大肠埃希菌和32株肺炎克雷伯菌,经PCR对上述菌株所携带的ESBLs耐药基因进行分型。结果产ESBLs大肠埃希菌中耐药质粒编码TEM型、SHV型和非TEM非SHV型超广谱β-内酰胺酶基因的百分率依次为80.4%,7.8%和11.8%;而在肺炎克雷伯菌中的百分率依次为78.1%,71.9%和25.0%。多数产ESBLs肺炎克雷伯菌同时产生一种以上的β-内酰胺酶。结论获得了吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的不同基因型,ESBLs基因型具有地区性差异。     

尿路感染大肠埃希菌耐药性分析

目的 了解尿路感染大肠埃希菌对临床常用抗菌素的耐药性,指导临床合理使用抗菌药物.方法 按<全国临床检验操作规程>第二版接种分离,分纯菌落均经先德AR/S.2X全自动微生物培养鉴定系统鉴定到种,药敏采用深圳黑马生物工程有限公司生产的药敏板检测,用先德AR/S.2X微生物药敏分析系统进行药敏及产超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)的分析判定.结果 大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉的耐药率已大于80%,对三代头孢菌素,氟喹诺酮类抗菌素耐药也很严重达46.5%-67.7%,ESBLs检出率分别为53.2%.结论 大肠埃希菌对临床常用抗菌药耐药严重,应加强耐药检测,降低细菌耐药率.     

575株泌尿外科泌尿道感染大肠埃希菌耐药性分析

目的：了解医院泌尿外科泌尿道感染的主要病原菌及大肠埃希菌的耐药率,为临床合理用药提供依据。方法对2011~2013年泌尿外科住院泌尿道感染患者尿培养分离出的575株大肠埃希菌进行药敏分析。结果泌尿道感染以革兰氏阴性杆菌为主,其中大肠埃希菌占院54.2%~69.3%;产ESBLs菌株检出率为院36.9%~46.3%;2011~2013年泌尿外科及全院大肠埃希菌大多抗菌药物耐药率呈下降趋势,但对青霉素类、头孢一代耐药率较高,产ESBLs株耐药率明显高于非产ESBLs。结论泌尿道感染大肠埃希菌分离率最高,且细菌耐药严重,特别是产ESBLs株耐药更为严重,应当加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

超广谱β-内酰胺酶代表株的临床分布和药敏

大肠埃希氏菌是临床感染最广泛的细菌,这些菌对很多药物的敏感性很高,容易治疗。近来由于抗菌药物的不断开发及临床大量应用,出现了一些产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的菌株,而大肠埃希氏菌是这类细菌的代表株,因而有必要对它做出一些调查研究。为了解大肠埃希氏菌在重庆地区的耐药特性,以便临床医生合理选用抗生素和有效控制ESBL感染提供依据,将临床分离的大肠埃希氏菌对14种抗生素的耐药性进     

神经外科医院感染及产超广谱β-内酰胺酶菌株感染分析

目的 研究神经外科医院感染的主要病原菌分布及其耐药情况，以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株感染特点，为临床治疗提供依据。方法 通过对患者病历及细菌培养和药敏试验结果的统计分析，计算各种病原菌的构成比和各种抗菌药物的耐药率，不同年份比例的变化趋势采用趋势检验。结果 2003～2005年神经外科281倒患者分离菌株共408株，其中革兰阴性菌占77．2％，革兰阳性菌22．8％。G^-菌对常用的大多数头孢类抗生素耐药率极高，对亚胺硫霉素的敏感率93．7％。G^＋菌对青霉素类抗生素已基本耐药，对万古霉素的敏感率80．6％。分离产ESBLs菌株36株，各年产ESBLs菌占各年总菌株数的比例呈逐年上升趋势。36株产ESBLs菌株对临床常用抗生素耐药率普遍较高，对亚胺硫霉素无耐药。结论 G^- 菌是神经外科医院感染的主要病原菌；病原菌耐药性普遍较高；产ESBLs菌株引起的感染率逐年升高；预防细菌耐药．必须积极采取综合措施，建立细菌耐药监测系统，合理使用抗菌素，以求达到控制或延缓细菌耐药。     

病毒性肝炎后肝硬化住院患者血液感染大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶基因型调查CSCD

目的研究病毒性肝炎后肝硬化住院患者血液感染的大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶基因型。方法连续收集2011年1月至12月分离自病毒性肝炎后肝硬化住院患者血培养阳性的大肠埃希菌,VITEK-II鉴定细菌,K-β药敏试验检测细菌的药敏,多重PCR、PCR、测序及比对等对大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶基因型进行分析。结果肝硬化主要原因为病毒感染,共收集79株大肠埃希菌,PCR扩增产物测序、比对：20株大肠埃希菌产TEM-1型β-内酰胺酶;仅有的-株产SHV-1型β-内酰胺酶,未检测出TEM型和SHV型超广谱β-内酰胺酶;40株产CTX-M型超广谱B-内酰胺酶,CTX-M-1群20株,CTX-M-9群26株,其中有6株菌同时产两群CTX-M型超广谱β-内酰胺酶,测序比对出CTX-M-3、CTX-M-15、CTX-M-14等八种基因型。结论病毒性肝硬化患者血液感染的大肠埃希菌超广谱B内酰胺酶最常见为CTX-M型,CTX-M-14是最常见的基因型。