盐酸埃他卡林对脑神经元钠、钾、钙通道的影响

目的　研究盐酸埃他卡林 (Ipt)对脑神经元钠、钾、钙通道的影响。方法　在原代培养的大鼠海马神经元上 ,应用膜片钳全细胞记录技术观察Ipt对钠、钾、钙离子通道电流的影响。结果　Ipt对钠、钙电流幅度以及电流 -电压曲线无影响 ,可增强外向钾电流幅度 ,使电流 -电压曲线上移。其中 ,Ipt 1、10、10 0 μmol·L-1分别使钾通道电流峰值增大为给药前的 (12 1 9± 8 1) %、(114 7± 7 1) %和 (10 9 1±10 0 ) % (P <0 0 1～ 0 0 5 )。给予盐酸埃他卡林 1μmol·L-1的同时给予ATP敏感性钾通道拮抗剂格列本脲 30 μmol·L-1时 ,对钾通道电流无影响。结论　盐酸埃他卡林对脑神经元ATP敏感性钾通道具有激活作用 ,它不影响神经元钠通道和钙通道     

盐酸埃他卡林对PD模型大鼠脑内突触体谷氨酸摄取的影响

目的　研究谷氨酸转运体功能改变与帕金森病(Parkinson’sdisease ,PD)发病的相关性 ,探讨新型ATP敏感性钾通道 (ATPsensitivepotassiumchannel,KATP)开放剂盐酸埃他卡林 (Iptakalimhydrochloride ,Ipt)对PD模型大鼠脑内突触体摄取谷氨酸的影响及其机制。方法　采用 6 hydrox ydopamine(6 OHDA)建立PD大鼠模型 ,制备脑组织突触体 ;用同位素标记法测定L [3 H] glutamate摄取活性。 结果　PD模型大鼠纹状体和皮层的谷氨酸转运功能明显降低 ;Ipt(10、5 0和 10 0 μmol·L-1)具有恢复转运功能的作用 ,此作用可被KATP阻断剂Glibenclamide (2 0 μmol·L-1)逆转。结论　谷氨酸转运体功能下降与PD发病密切相关 ;Ipt通过激活KATP发挥促进谷氨酸摄取的作用 ,有望成为新一代PD治疗药物     

盐酸埃他卡林对大鼠血压及心脏功能的影响

盐酸埃他卡林是军事医学科学院毒物药物研究所自行设计合成的脂肪仲胺类化合物 ,动物实验表明它具有选择性抗高血压作用 ,即对清醒正常血压大鼠的血压影响较轻 ,对清醒高血压大鼠的血压影响明显 ,降压强度与动物血压高低相关。传统的降压作用机制不能解释其抗高血压作用 ,进一步的研究证明盐酸埃他卡林抗高血压作用的机制是作用于ＡＴＰ敏感性Ｋ+通道 ,使细胞膜发生超极化 ,降低细胞内的钙离子浓度 ,而导致血管扩张 ,血压下降 ,属ＡＴＰ敏感性Ｋ+通道开放剂。为进一步了解盐酸埃他卡林心血管作用的特点 ,本文在自发性高血压大鼠及麻醉的Ｗｉ…     

盐酸埃他卡林对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究盐酸埃他卡林(Ipt)对谷氨酸(Gli)所致细胞损伤的保护作用。方法 采用培养PC12细胞,MTT法测细胞存活率。结果 Ipt 1×10~(-10)～1×10~(-4)mol·L~(-1)可拮抗Glu介导的神经毒作用,提高细胞存活率,该保护作用可被10 μmol·L~(-1)格列苯脲(ATP敏感性钾通道拮抗剂)所取消。结论 Ipt可拮抗Glu介导的神经毒作用,该保护作用可能与ATP敏感性钾通道相关。     

盐酸埃他卡林对动脉平滑肌钾电流的影响

目的　探讨抗高血压新药盐酸埃他卡林对动脉平滑肌细胞钾电流的作用。方法　分离大鼠动脉平滑肌细胞 ,用膜片钳全细胞记录技术记录细胞钾电流 ,通过浴槽内给药 ,观察盐酸埃他卡林对钾电流的影响。结果　盐酸埃他卡林(0 1、1、10、10 0 μmol·L-1)均可明显引起正常血压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的[(118 6± 15 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =6 ]、[(10 3 9±5 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =5 ]、[(132 7± 2 3 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =6 ]、[(15 0 1± 2 5 1) % ,P <0 0 1vscontrol,n =7];盐酸埃他卡林 (1、10、10 0 μmol·L-1)均可引起肾性高血压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的 [(12 1 5± 4 2 ) % ,P <0 0 1vscon trol,n =7]、[(132 2± 6 7) % ,P <0 0 1vscontrol,n =8]、[(114 2± 7 7) % ,P <0 0 1vscontrol,n =8];盐酸埃他卡林 (10 μmol·L-1)可引起肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度为初始电流强度的 [(80 6± 10 1) % ,n =5 ],同时间对照     

盐酸埃他卡林对大鼠离体工作心脏功能的影响

盐酸埃他卡林是军事医学科学院毒物药物研究所在新药研究中发现的一个结构新颖的抗高血压药物。在清醒自发性高血压大鼠上 ,埃他卡林降压作用确切、平稳、持久、对心率影响轻 ,且具有选择性抗高血压作用 ,同时盐酸埃他卡林的降压作用既可被ＡＴＰ敏感性Ｋ+ 通道拮抗剂格列本脲[1,2 ] 所对抗也可被格列本脲所预防 ,格列本脲的对抗效应具有剂量依赖性 ,提示盐酸埃他卡林的降压作用可能与心血管ＡＴＰ敏感性Ｋ+ 通道有关。在麻醉正常血压大鼠上采用直接插管法观察不同剂量的盐酸埃他卡林对外周血压及心功能的影响 ,以及格列本脲的干扰作用 ,结…     

盐酸埃他卡林对血管内皮细胞分泌功能的影响

目的 :研究新型抗高血压药物盐酸埃他卡林(Ipt)对血管内皮细胞分泌功能的影响。方法 :采用灌流消化法分离小牛主动脉内皮细胞 (BAEC) ,观察Ipt对BAEC分泌内皮素 1(ET 1)、前列环素 (PGI2 )和一氧化氮 (NO)的影响 ,同时观察Ipt对培养的BAEC胞浆游离Ca2 浓度的影响。结果 :在Ipt浓度为 10 -6mol·L-1及以上时 ,能够剂量依赖性地抑制培养的BAEC合成分泌ET 1,并在Ipt 10 -5mol·L-1及以上时促进NO的合成分泌 ,同时在Ipt浓度为10 -4mol·L-1及以上时 ,显著地增高BAEC胞浆游离Ca2 浓度。结论 :Ipt通过抑制内皮细胞合成分泌ET 1和促进NO的合成分泌 ,从而使ET和NO的平衡状态得到改善 ;尚能增加内皮细胞 [Ca2 ]i,有利于内皮细胞合成NO增加 ,从而增强内皮介导的舒血管效应。     

中国健康成年志愿者单次口服盐酸埃他卡林片耐受性研究

目的：在中国健康成年志愿者体内评估单次口服盐酸埃他卡林片的安全性、耐受性。方法：采用区组随机化设计,选择18～50岁健康志愿者52名,随机分配至2．5、5、10、15、20、25mg剂量组,其中2．5、25mg组各有6名受试者,其余各组均有10名受试者,男女各半,每组中均有2人（男、女各1人）接受安慰剂。严密观察给药前后的临床症状、体征、实验室指标变化,并观察试验期间发生的不良事件。结果：入选受试者给药后症状、体征以及实验室检查指标均未见有异常的改变。试验中未见严重不良事件,未见可能与药物有关的临床不良反应。结论：52名中国健康受试者单次空腹口服盐酸埃他卡林片最大剂量达25mg,比较安全,耐受性较好。     

盐酸埃他卡林片的制剂学研究*

目的：筛选盐酸埃他卡林（iptakalim hydrochloride）片的处方及优化工艺,对本片进行质量研究。方法：处方及工艺研究采用比较法,含量、含量均匀度及溶出度测定为溶剂萃取酸性色素比色法（BCG法）,有关物质检查采用HPLC法（示差折光检测器）。结果：所选处方合理、工艺可行;BCG法灵敏、可靠、重复性好、操作简单,能够很好地控制本片的质量。结论：按照该处方及工艺压制的盐酸埃他卡林片具有良好的稳定性;制定了本片的制剂质量标准,为新药报批提供了制剂研究资料。     

盐酸埃他卡林对自发性高血压大鼠肾组织细胞外基质降解系统的影响

目的观察埃他卡林(iptakalim hydrochloride,Ipt)对自发性高血压大鼠(spontaneously hyper-tensiverats,SHR)肾组织细胞外基质降解系统的影响。方法SHR于第12周龄进入实验,实验分组如下Ipt1、3、9mg·kg-1·d-1剂量组,苯那普利(benazepril)3mg·kg-1·d-1治疗组及SHR空白对照组,另设同月龄同种属正常血压大鼠(Wistar Kyotorat,WKY)为正常对照组,灌胃给药每天1次,持续给药12周,应用免疫组织化学和RT-PCR技术,观察埃他卡林对高血压大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)表达的影响。结果埃他卡林长期降压治疗同时上调肾组织局部MMP-9mRNA和蛋白水平,同时一致性降低TIMP-1、TGF-β1及Ⅳ型胶原转录和蛋白水平。结论埃他卡林对肾脏靶器官的保护作用机制可能通过抑制肾脏局部TGF-β1表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,从而促进细胞外基质的降解,减少细胞外基质的积聚。     

皮质酮对大鼠海马神经元电压门控性钙通道及其突触活动的影响

目的　研究皮质酮对海马神经元电压门控性钙通道和突触活动的影响 ,以阐明其作用机理。方法　以培养的新生大鼠海马神经元为标本 ,使用膜片钳技术的全细胞记录方式 ,通过压力注射给药的方法观察皮质酮对神经元电压门控性钙通道及其自发性突触活动的影响。结果　皮质酮 1、10和 10 0μmol·L- 1可使神经元电压门控性钙电流的幅度分别增加 (14± 8) %、(41± 13) %和 (5 8± 9) % ,其增强效应具有明显的浓度依赖性特征 ,但没有电压依赖性 ,也不改变钙通道的电学特征。 10 0 μmol·L- 1皮质酮可使海马神经元突触活动的发生频率增加约 4倍。在使用河豚毒素阻断神经元的突触传递活动后 ,皮质酮仍然可以诱发低频 (4.6± 1.0 )Hz低幅 (0 .18±0 .0 9)nA的兴奋性突触后电流。结论　皮质酮对海马神经元电压门控性钙电流及其突触活动有明显的增强作用。皮质酮的即刻增强效应可能与其调节基因表达的作用无关。     

盐酸埃他卡林对缺氧诱导神经细胞凋亡的影响

目的 :探讨盐酸埃他卡林 (Ipt)对缺氧诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法 :用电镜和流式细胞分析技术 ,检测原代培养的大鼠皮质神经细胞凋亡 ;应用免疫组化法 ,观察凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax表达的改变。结果 :Ipt 10 μmol·L-1可减轻缺氧诱导的细胞染色质浓缩现象 ,逆转缺氧诱导的Bcl 2表达的下调 ,对Bax表达无显著影响 ;Ipt(0 .1～10 μmol·L-1)能剂量依赖性地降低凋亡细胞百分率 ,以 10 μmol·L-1浓度组效果最好 ,其作用可被ATP敏感性钾通道特异性阻断剂格列本脲 (Gli)所拮抗。结论 :Ipt对缺氧诱导的神经细胞凋亡有明显的抑制作用 ,其作用机制与ATP敏感性钾通道、Bcl 2表达相关。     

罗哌卡因和布比卡因对大鼠海马神经元谷氨酸电流的影响

目的:观察和比较不同浓度的局麻药罗哌卡因和布比卡因对大鼠海马神经元谷氨酸诱发电流的作用,以探讨罗哌卡因神经毒性低的可能机制。方法:分离大鼠海马神经元并培养,利用全细胞膜片钳技术记录细胞谷氨酸诱发电流,并观察罗哌卡因和布比卡因对谷氨酸电流的影响。结果:谷氨酸(100μmol.L-1)可在海马神经元细胞上诱发出一内向电流,并且此电流可被非N-甲基-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂DNQX所阻断;布比卡因(10、50、100μmol.L-1)和罗哌卡因(10、50、100μmol.L-1)均可使海马神经元细胞的谷氨酸诱发电流明显降低;罗哌卡因高浓度(501、00μmol.L-1)时对谷氨酸诱发电流的降低幅度显著高于布比卡因高浓度时。结论:布比卡因和罗哌卡因对大鼠海马神经元细胞的谷氨酸诱发电流都有明显的抑制作用,罗哌卡因的抑制作用明显高于布比卡因。     

司帕沙星、联苯乙酸对大鼠海马神经元GABA-A和离子型谷氨酸受体的作用(英文)

目的 :观察司帕沙星单用和与联苯乙酸合用时 ,对γ 氨基丁酸 (GABA) ,NMDA ,AMPA和海人藻酸诱导电流的作用。方法 :应用全细胞式膜片钳技术在急性打散的新生大鼠海马锥体神经元上记录GABA ,NMDA ,AMPA和海人藻酸的诱导电流。结果 :司帕沙星 1mmol·L- 1对GABA诱导的电流有迅速可逆的抑制作用 ,抑制率为 (4 7.6±s2 .9) % ,而联苯乙酸 10 μmol·L- 1无抑制作用。但联苯乙酸 (10 μmol·L- 1)与司帕沙星 1mmol·L- 1合用时 ,稍稍增强抑制作用 ,司帕沙星单用或合用联苯乙酸 (10 μmol·L- 1)对GABA诱导电流的IC50 分别为 (2 38± 2 1) μmol·L- 1和 (89± 5 ) μmol·L- 1。司帕沙星、联苯乙酸或司帕沙星合用联苯乙酸对NM DA ,AMPA和海人藻酸诱导的电流无明显作用。结论 :提示司帕沙星 ,或与联苯乙酸合用时所产生的中枢神经毒性可能与抑制GABA诱导的电流有关 ,而与NMDA ,AMPA和海人藻酸诱导的电流无关。     

盐酸埃他卡林对高血压心脏重构的作用

目的　在自发性高血压大鼠 (spontaneouslyhyperten siverat,SHR)和脑卒中易感型自发性高血压大鼠 (stroke pronespontaneouslyhypertensiverat,SHRsp)上 ,评价盐酸埃他卡林 (iptakalimhydrochloride ,Ipt)对高血压心脏重构的实验治疗学作用。方法　SHR于第 12周龄进入实验 ,赖诺普利 (lisinopril,Lis) 12mg·kg-1,Ipt 3mg·kg-1灌胃每天 1次 ,连灌 4wk ;SHRsp于第 11周龄进入实验 ,实验设Ipt0 2 5、1和 4mg·kg-13个剂量组及溶剂对照组 ,灌胃给药每天 1次 ,持续给药 12wk ,观察药物对高血压心脏重构的影响。结果　实验期 4wk内 ,SHR对照组血压和心率进行性增高。Ipt能有效控制SHR的血压 ,降压效果确切 ,且可抑制SHR心率加快的趋势 ,但对SHR高血压心脏重构无明显作用。相同实验条件下 ,Lis也能有效控制SHR的血压 ,降压效果确切 ,对心率无明显影响 ;Lis治疗可减轻SHR高血压心脏重构。实验期 12wk内 ,SHRsp溶剂对照组血压持续性进行性增高。Ipt 3个剂量组均能降低SHRsp血压 ,Ipt 4mg·kg-1组在给药后第 4周开始出现心率减低。Ipt 3个剂量组的左心室和室间隔 (LV +S)重量及其与体重的比值[(LV +S) /BW ]低于溶剂对照组。 4组动物之间的右室重量(RV)均无差异。结论　Ipt能有效地控制SHR和SHRsp的血压 ,其对     

Regulation of spontaneous inhibitory synaptic transmission by endogenous glutamate via non-NMDA receptors in cultured rat hippocampal neurons

The regulation of gamma-aminobutyric acid (GABA)-mediated spontaneous inhibitory synaptic transmission by endogenously released glutamate was studied in cultured rat hippocampal neurons. After 7 days in vitro (DIV), both spontaneous excitatory postsynaptic currents (sEPSCs) and spontaneous inhibitory postsynaptic currents (sIPSCs) could be detected. After 15 DIV, most postsynaptic spontaneous currents occurred as sEPSC/sIPSC sequences when recorded at a holding voltage of -30 mV. In the presence of the glutamate alpha-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid (AMPA) receptor subtype antagonist LY303070, both the frequency and amplitude of sIPSC were strongly and reversibly reduced. The N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist, 2-amino-5-phosphonopentanoic acid (AP5), had no effect on sIPSC while cyclothiazide strongly increased sIPSC frequency. Under blockade of AMPA receptors, the kainate- and GluR5-selective kainate receptor agonists, (RS)-2-amino-3-(3-hydroxy-5-tert-butylisoxazol-4-yl) propanoic acid) (ATPA) and (S)-5-iodowillardiine (5IWill), induced a large enhancement of the frequency of small-amplitude sIPSC which was blocked by the non-NMDA receptor antagonist, 2,3-dihydro-6-nitro-7-sulfamoyl-benzo(f)quinoxaline (NBQX). All of these effects were sensitive to tetrodotoxin (TTX). In the presence of LY303070 and TTX, kainate could induce a small inward current while GluR5 agonists had no effect. In the presence of NMDA and AMPA receptor antagonists, the glutamate uptake inhibitor L-trans-pyrrolidine-2,4-dicarboxylic acid (t-PDC) could restore sIPSC. When NBQX was used as an AMPA antagonist, the stimulatory effect of t-PDC was blocked while the group I metabotropic glutamate agonist, 3,5-dihydroxyphenylglycine (DHPG), induced a strong enhancement of sIPSC. Therefore, both AMPA and kainate receptors can regulate inhibitory synaptic transmission in cultured hippocampal neurons, the former by tonic activation, the latter when the glutamate concentration is increased by impairing glutonate uptake.