心力衰竭大鼠增龄过程中β3-肾上腺素能受体和内皮源性一氧化氮合酶表达变化的研究

目的：研究异丙肾上腺素诱导的心力衰竭大鼠随增龄β3，肾上腺素能身受体(β3受体)及其信号转导途径中相关基因内皮源性一氧化氮合酶(endomyocardial nitric oxide synthase，eNOS)的表达，探讨β3受体和eNOS在老年大鼠心力衰竭中的作用。方法：将异丙肾上腺素诱导的心力衰竭大鼠存活者随机分为成年组(4月龄)、成年对照组、老年组(20月龄)、老年对照组(各7只)。①血流动力学测定。②免疫组化测β3受体蛋白和eNOS基因蛋白表达。③反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法测β3受体mRNA和eNOS mRNA表达。结果：①随增龄成年组和老年组比较，老年组左室收缩末压(LV end systolic pressure，PES)，左室压力最大上升速率(maximal rates of rise of ventricular pressure，dp／dtmin)，左室压力最大下降速度(maximal rates of decline of ventricular pressure，dp／dtmin)绝对值较成年组明显降低[PRS：(72．3&;#177;5．7)和(93．7&;#177;9．6)mmHg；dp／dtmin：(7119&;#177;386)和(8352&;#177;339)mmHg／s；dp／dtmin：(-5011&;#177;380)和(-6143&;#177;534)mmHg／s．F=22．767，18．647，7．930，P均&;lt;0．05]，左室等容舒张时间常数(constant of LV rdaxation，Tc)、左室舒张末压(LV end diastolic pressure．PED)明显增加[Tc：(22．21&;#177;2．53)和(16．44&;#177;1．49)ms．F=6．370，P&;lt;0．01；PED：(12．51&;#177;1．15)和(9．01&;#177;0．42)mmHg。F=20．157．P&;lt;0．05]，且两组与相应对照组比较血流动力学恶化均较明显。②免疫缍化测定心衰大鼠β3受体和eNOS蛋白表达量，eNOS和β3受体在心衰大鼠心肌组织内表达量成年组较老年组阳性细胞明显增加，且两组与相应对照组比较增加显著(F=6．861，5．198，P&;lt;0．05～0．01)。③RT-PCF法测定eNOS mRNA与β-actin的比值老年组(1．22&;#177;0．10)较成年组(0．37&;#177;0．04)和老年对照组(0．93&;#177;0．12)增加显著；成年组较成年对照组(0．23&;#177;0．07)增加明显(F=4．792，P&;lt;0．05)。心衰大鼠β3受体mRNA与β-actin的比值亦随增龄明显增加(F=8．276，P=0．001)。结论：心衰大鼠随年龄的增加β2受体水平和eNOS表达明显增加，β3受体和eNOS表达过度增高可导致心功能降低，β3受体水平和eNOS表达增高可能是心力衰竭不断恶化的原因之一。     

β3-肾上腺素能受体阻断剂对心力衰竭大鼠心功能及内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨β3-肾上腺素能受体(β3-AR)阻断剂(SR59230A)对异丙肾上腺素(ISO)诱导心力衰竭(心衰)大鼠心功能及左室重构影响的作用机制.方法 选择雄性Wistar大鼠85只,采用随机方法分组.8只作为对照组,另77只应用ISO制备心衰模型,共存活20只.再按随机数字表法将存活动物分为ISO组(n=10)及SR59230A组(SR组,n=10).ISO组给予生理盐水1 ml,每日2次腹腔注射;SR组给予SR59230A(85 nmol溶于1 ml生理盐水),每日2次腹腔注射;对照组不予处置.治疗6周后SR组与ISO组各死亡1只,对各组存活大鼠进行有创血流动力学、左心室重量/体重(LVW/BW)比值、肺脏重量/体重(PW/BW)比值测定;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blotting)测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA与蛋白表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定心肌组织环磷酸鸟苷(cGMP)水平.结果 与对照组比较,ISO组左室收缩末期压力(LVESP)、左室压力最大上升或下降速率(±dp/dtmax)均显著降低(P均＜0.01),而心率(HR)、左室舒张末期压力(LVEDP)均显著增高(P均＜0.01).与ISO组比较,SR组LVESP、±dp/dtmax均明显增高(P＜0.05或P＜0.01),但与对照组比较差异仍有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).SR组HR、LVEDP较ISO组均明显降低(P＜0.05和P＜0.01),其中HR与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而LVEDP仍显著高于对照组(P＜0.01).与ISO组比较,SR组eNOS的mRNA和蛋白表达水平及心肌组织cGMP水平均显著降低(P均＜0.01).此外,SR组较ISO组LVW/BW比值及PW/BW比值均明显降低(P均＜0.05).结论 长期给予β3-AR阻断剂SR59230A可以有效阻断心衰动物的β3-AR-NOS-cGMP通路,显著改善心功能,并在一定程度上改善心室重构.     

β_3肾上腺素能受体与心力衰竭

β_3肾上腺素能受体(β_3-AR)是β肾上腺素能受体的一个亚型,与β_1-AR和β_2-AR同属于G蛋白偶联受体超家族。与β_1-AR和β_2-AR不同,β_3-AR激动对心室肌产生负性肌力作用,并在衰竭心室肌中表达上调。近些年有不同的研究表明β_3-AR可能对心房肌产生正性肌力作用,且在心力衰竭的发展过程中,β_3-AR对心房肌的作用可能比对心室肌更复杂。由于β_3-AR在心力衰竭发展过程中的重要调节作用,β_3-AR也被认为是潜在的治疗靶点。本文拟对β_3-AR与心力衰竭的研究进展作一综述。     

β-肾上腺素受体激酶与心力衰竭的基因治疗

<正>心力衰竭(heartfailure,HF)是多种心血管疾病的终末阶段,其已逐步成为心血管病中最常见、对患者危害最大的疾病,目前发病率不断上升,5年病死率约为50%,与许多恶性肿瘤相当[1]。HF时交感神经活性增强,引起β肾上腺素能     

充血性心力衰竭患儿心肌β肾上腺素能受体系统在心室重塑中作用的研究

ObjectiveTo study the role of myocardium βadrenoreceptor pathway in ventricu lar remodeling ofchildren with congestive heart failure (CHF).MethodsPlasmaconcentrations of norepinephrine (NE) and epinephrine (E) were measured b y highperformance liquid chromatography electrochemistry detection ( HPLCED) in 18 children withCHF.βadrenergic receptor density (Bmax) of lympho cyte was de termined by³Hdihydroalpneolol(³H-DHA) as ligand, and left ventricle mass index (LVMI) by echocardiogram.ResultsPlasmaNE and E levels were significantly increased 〔（520.1±187.3） μg/L and (294.1±178.4）μg/L〕,andthe Bmax was decreased 〔（378. 7± 97.2）fmol/10⁶〕 in normal LVMIpatients compared with the controls 〔（ 189.3±92.4）μg/L,(94.5±45.1）μg/L,and(568.2±101.8）f mol/10⁶,all P<0.001〕.Also,the Bmax decreased moresignificantly i n patients with abnormal LVMI than that in normal LVMI patients 〔（268.5±85.6）fmol/10⁶ vs.(378.7±97.2）fmol/10⁶〕,and that was significantly negatively correlated with LVMI (r=－0.69,P<0.01).ConclusionsPlasmaNE and E levels,as well as Bmax of lymphocytes may be useful parameters t o reflect theseverity of heart dysfunction in patients with CHF.The regulation of myocardium βadrenoreceptorpathway is earlier than the patho logic structura l change of left ventricularremodeling.It is sugested that remodeling of LV mig ht be regulated by myocardial βadrenoreceptorpathway.     

交感神经-β肾上腺素能受体系统在心力衰竭中的调控特征

目的　探讨心力衰竭患者交感神经 β肾上腺素能系统的变化特征及美托洛尔对其影响。方法　对 96例心功能分级 (NYHA)Ⅱ～Ⅳ级患者和 4 0名健康人采用放射性配基 (3 H DHA)结合分析法测定外周血淋巴细胞 β受体密度 (βmax) ;放免法测定血淋巴细胞内环核苷酸 (cAMP)含量 ;高效液相 电化学检测法测定血浆去甲肾上腺素 (NE)浓度。对 6 8例心功能Ⅱ、Ⅲ级的患者在美托洛尔 (12 .5～ 5 0mg)治疗 12周后 ,再次测定上述指标并进行比较。结果　心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组患者与正常对照比较 ,外周血淋巴细胞β受体 密度、cAMP含量依次降低 ,血浆NE浓度依次增加。美托洛尔治疗 12周后外周血淋巴细胞 β受体密度、cAMP含量上调 ,血浆NE浓度降低。结论　交感神经 β肾上腺素能系统参与了心力衰竭的病理生理过程 ,美托洛尔能改善心肌细胞的信息传导 ,有助于心肌细胞生物学功能恢复。     

充血性心力衰竭患儿心肌β肾上腺素能受体系统在心室重 …

目的：研究充血性心力衰竭患儿心肌β肾上腺素能受体系统在左室重塑中的作用。方法;采用高效液相色谱－电化学法对１８例ＣＨＦ患儿测定血浆去甲肾上腺素,肾上腺素浓度,用＾３Ｈ－ｄｉｈｙｄｒｏａｌｐｎｅｏｌｏｌ放射配基结合分析法测定外周血淋巴细胞β受体密度最大值,并以心脏超声仪测定和计算左心室心肌重量指数。     

大鼠窒息心脏骤停期间脑皮质β肾上腺素能受体和血中NO的变化

目的研究心脏停搏期间脑皮质β肾上腺素能受体(β受体)的变化,检测心脏停搏前后血液NO浓度变化,探讨其意义。方法采用放射性配基结合分析方法,检测大鼠在窒息心脏停搏期间脑皮质β受体的变化。采用化学发光法,检测动物心脏停搏前后血中NO浓度的变化。将动物随机分为正常对照(A),手术对照(B),窒息10min(C)、20min(D)和30min(E)5组,每组6只。结果β受体数量D和E组分别与A、B、C组比较,差异极其显著(P<0.01)。各组间受体亲和力无明显变化。C组血中NO浓度与A、B组比较,差异极其显著(P<0.01)。结论在窒息心脏骤停早期,脑皮质β受体数量无明显变化,随着心脏停搏时间延长,其数量明显增加。心脏停搏以后,与心脏停搏前比较,血中NO浓度明显升高。     

人参对老年大鼠脑组织β肾上腺素能受体含量的影响

目的:观察具有大补元气、生津止渴、安神益智功效的人参对老年大鼠不同脑区β肾上腺素能受体含量的影响,分析该作用是否有剂量依赖性。方法:实验于2003-05/2004-12在中山大学中山医学院人体解剖学教研室的脑研究室完成。①选用清洁级健康SD大鼠30只,雌雄不拘,体质量400～600g,18～20月龄。按随机数字表法将大鼠分为3组:对照组、高剂量人参水煎液组、低剂量人参水煎液组,每组10只。②高剂量人参水煎液组:灌胃含生药1.5g/(kg·d)人参水煎液(吉林生晒参,均购于广州药材公司。分别第1次用8倍水分煎2h,第2次6倍水分煎1.5h,浓缩至含生药2kg/L)3mL;低剂量人参水煎液组:灌胃含生药0.5g/(kg·d)人参水煎液3mL;对照组:灌胃蒸馏水3mL,连续3周。③3周后,麻醉大鼠,开颅分离前额皮质、海马、小脑皮质、丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段。用放射配基受体结合分析法测定各组大鼠前额皮质、海马、小脑皮质、丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量。④先行单因素方差分析,再用Student-Newman-keals方法对各组数据进行统计学处理。结果:老年大鼠30只均进入结果分析。①中枢皮质结构各脑区肾上腺素能受体含量:给药3周后,高、低剂量人参水煎剂组大鼠前额皮质、海马、小脑皮质的β肾上腺素能受体含量均明显高于对照组(t=2.71～4.21,P<0.05～0.01),其中高剂量人参水煎剂组作用更为明显。②中枢皮质下结构各脑区β肾上腺素能受体含量:给药3周后各组大鼠丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量比较,差异不明显(P>0.05)。结论:人参可选择性提高老年鼠前额皮质、海马、小脑皮质β肾上腺素能受体含量,且高剂量人参水煎液[含生药1.5g/(kg·d)]作用更为明显,但对丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量无明显影响。     

β3受体激动剂对心力衰竭大鼠β3-肾上腺素能受体基因表达及其对细胞凋亡的影响

目的　研究β3受体激动剂 (BRL 37344 )对异丙肾上腺素诱导的心力衰竭 (心衰 )大鼠β3肾上腺素能受体 (β3AR)基因表达水平的影响 ,探讨β3AR在心衰中的作用。方法　将 Wistar大鼠随机分为 : 组(正常对照组 10只 )、 组 (正常用药组 10只 )、 组 (心衰组 30只 )和 组 (心衰用药组 35只 )。 组和 组尾静脉注射 BRL 37344为 0 .4 nm ol· kg- 1 · min- 1 ,每周 2次 ,连续 6周 ; 组和 组尾静脉注射等量生理盐水。 6周后检查以下指标 :血流动力学变化 ;免疫组织化学和 Western Blot法测定 β3AR蛋白表达 ;逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法测定 β3AR m RNA表达 ;原位缺口末端标记法 (TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果　1与 组比较 , 组、 组、 组左室收缩末压 (PES)、左室压力最大上升速率 (dp/ dtm ax)和左室压力最大下降速率 (dp/ dtmin)逐渐减小 ,左室舒张末压 (PED)和左室等容舒张时间常数 (Tc)逐渐增加。 组与 组比较仅 PED出现统计学差异 (P<0 .0 5 ) ,其余各组间两两比较均有差异 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 ) ;2β3AR蛋白及其 m RNA表达 、 组较 、 组明显增高 , 、 组间比较无显著性差异 ; 组较 组升高更明显。 3 、 组较 、 组心肌细胞凋亡数明显增加 (P均 <0 .0 1) , 、 组间比较无显著性差异     

核因子κB与诱导型一氧化氮合酶在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

目的:观察抑制核因子κB的活性对糖尿病大鼠肾组织诱导型一氧化氮合酶表达的影响及与肾功能损害的关系。方法:实验于2005-09/2006-07在辽宁医学院生物化学实验室完成。将45只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和PDTC干预组3组,每组15只。模型组和PDTC干预组大鼠腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg制备大鼠糖尿病模型,正常对照组注射相应体积的柠檬酸缓冲液。造模成功后PDTC干预组腹腔注射核因子κB活性抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC),2次/d,剂量按每周20mg/kg。于注射链脲佐菌素12周末检测血清肌酐、尿素氮和24h尿蛋白定量,然后处死大鼠,留取肾标本,观测肾脏的病理改变并以Western-blot法检测核因子κB的含量,免疫组化法分析核因子κBP65及诱导型一氧化氮合酶的表达,同时应用直线相关法分析这2项指标的表达与生化指标间的关系。结果:30只大鼠进入结果分析。①模型组肾组织中核因子κBP65阳性小管数多于正常对照组和PDTC干预组[(49.35±3.87)%,(1.76±0.82)%,(24.61±3.05)%,P<0.01],PDTC干预组高于正常对照组(P<0.01)。②模型组肾组织中诱导型一氧化氮合酶阳性小管数多于正常对照组和PDTC干预组[(51.63±4.75)%,(2.52±0.93)%,(26.41±2.86)%,P<0.01],PDTC干预组高于正常对照组(P<0.05)。③模型组核因子κB的灰度值明显高于正常对照组和PDTC干预组(0.2995±0.006,0.1375±0.005,0.2045±0.004,P<0.01),PDTC干预组高于正常对照组(P<0.05)。④模型组和PDTC干预组血清肌酐、尿素氮和24h尿蛋白均高于正常对照组(P<0.01,0.05),但PDTC干预组几项指标均低于模型组(P<0.01)。⑤直线相关分析结果显示核因子κB的表达与诱导型一氧化氮合酶的表达、肾功能损害呈显著相关。结论:抑制核因子κB活性能使诱导型一氧化氮合酶的表达减少进而降低肾功能损害,提示大鼠糖尿病肾病的发生可能与肾组织中核因子κB活化介导诱导型一氧化氮合酶表达上调有关。     

多发性脑梗死大鼠海马一氧化氮合酶改变

目的:探讨一氧化氮合酶与多发性脑梗死的关系,探讨其发病机制。方法:选用Wistar大鼠,应用微栓子栓塞阻断法建立多发性脑梗死性缺血模型,借用一氧化氮合酶组织化学染色方法、透射电镜技术并结合显微图像分析观察大鼠海马CA1区神经元的一氧化氮合酶变化。结果:手术后1h和4h实验组一氧化氮合酶阳性反应物平均灰度值(152.4±5.6,164.1±7.6)与正常对照组190.5±6.0比较明显减低(P<0.01)。缺血对照组189.3±6.2与正常对照组比较,差异无显著性意义。结论:一氧化氮合酶阳性反应物的减少与多发性脑梗死的发生、发展具有一定的关系。     

针刺足三里和关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶和抗氧化系统的影响

目的：观察针刺足三里、关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶、抗氧化系统中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质变化的影响。探讨针刺的抗氧化作用。方法：实验于2002—06／08在为黑龙江中医药大学实验中心完成。①选用雄性清洁级Wistar老年大鼠20只，20月龄；青年大鼠雄性10只，10月龄。将老年大鼠随机分为2组：老年针刺组和老年对照组，每组10只。设10只青年大鼠为青年对照组。老年针刺组：四肢捆绑，固定在固定架上。采用多能脉冲电疗仪每日针刺双侧足三里穴，通电留针15min，采用连续波。频率3次／s。强度以针柄颤动，但能使动物不挣扎嘶叫。保持安静为度：关元穴留针15min。②老年对照组和青年对照组：只做相同捆绑处理15min。3组连续干预28d。⑧于最后一次针刺24h后处死大鼠。迅速取出脑、心、肾组织。制成组织匀浆。按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作，通过测量各样品吸光度（A值）计算脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质各项指标含量。㈤计量资料差异比较采用t检验和方差分析。结果：Wistar老年大鼠20只和青年大鼠10只均进入结果分析。④一氧化氮合酶活性：干预28d后，各年龄组大鼠心组织中最高，其次为脑、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组（P〈0．01），老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组（P〈0．01）。②谷胱甘肽过氧化物酶活性：干预28d后，老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组（P〈0．01）；老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组（P〈0．01）。③过氧化氢酶活性活性：干预28d后，各组脑组织中最高，其次心、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组（P〈0．01）；老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组（P〈0．01）。④脂褐质含量：干预28d后，老年针刺组脑、心、肾组织明显低于老年对照组（P〈0．01）；老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织明显高于青年对照组（P〈0．01）。结论：针刺足三里和关元穴能提高脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性，降低脂褐质的含量，能起到抗氧化作用。     

针刺足三里和关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶和抗氧化系统的影响

目的:观察针刺足三里、关元穴对老年大鼠脑心肾组织中一氧化氮合酶、抗氧化系统中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质变化的影响,探讨针刺的抗氧化作用。方法:实验于2002-06/08在为黑龙江中医药大学实验中心完成。①选用雄性清洁级Wistar老年大鼠20只,20月龄;青年大鼠雄性10只,10月龄。将老年大鼠随机分为2组:老年针刺组和老年对照组,每组10只。设10只青年大鼠为青年对照组。老年针刺组:四肢捆绑,固定在固定架上。采用多能脉冲电疗仪每日针刺双侧足三里穴,通电留针15min,采用连续波,频率3次/s,强度以针柄颤动,但能使动物不挣扎嘶叫,保持安静为度。关元穴留针15min。②老年对照组和青年对照组:只做相同捆绑处理15min。3组连续干预28d。③于最后一次针刺24h后处死大鼠。迅速取出脑、心、肾组织,制成组织匀浆,按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作,通过测量各样品吸光度(A值)计算脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶以及脂褐质各项指标含量。④计量资料差异比较采用t检验和方差分析。结果:Wistar老年大鼠20只和青年大鼠10只均进入结果分析。①一氧化氮合酶活性:干预28d后,各年龄组大鼠心组织中最高,其次为脑、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01),老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。②谷胱甘肽过氧化物酶活性:干预28d后,老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。③过氧化氢酶活性活性:干预28d后,各组脑组织中最高,其次心、肾。老年针刺组脑、心、肾组织中明显高于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织中明显低于青年对照组(P<0.01)。④脂褐质含量:干预28d后,老年针刺组脑、心、肾组织明显低于老年对照组(P<0.01);老年对照组、老年针刺组脑、心、肾组织明显高于青年对照组(P<0.01)。结论:针刺足三里和关元穴能提高脑、心、肾组织中一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性,降低脂褐质的含量,能起到抗氧化作用。     

雌性大鼠去势后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元的表达

目的:观察雌性大鼠行卵巢切除术后下丘脑视上区反映动物功能状态的一氧化氮合酶阳性神经元形态和数量的变化。方法:实验于2003-07/2004-01在山西医科大学神经解剖学科研室进行。将20只Wistar雌性大鼠随机分为两组:对照组和卵巢切除术后组,每组10只。将大鼠麻醉后取完整脑组织,制备冰冻切片,在光学显微镜下对两组大鼠下丘脑视上核的一氧化氮合酶阳性神经元进行形态观察和细胞计数,采用图像分析系统测定一氧化氮合酶阳性神经元免疫反应产物的平均灰度值。结果:20只大鼠均进入结果分析。①大鼠下丘脑视上区的一氧化氮合酶阳性神经元分布和形态观察:对照组分布广泛,以视上核的一氧化氮合酶阳性神经元表达较强,大量胞体呈椭圆形,密集成簇。卵巢切除术后组视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目显著增多,胞体的截面积显著增大,轮廓很清晰;胞体上发出的突起粗且长,有个别纤维可见到明显的髓鞘。②下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目:卵巢切除术后组明显多于对照组犤(18.00±4.09)个/视野,(9.00±3.15)个/视野,t=5.514,P<0.0001犦。③下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性产物的平均灰度值:卵巢切除术后组与对照组基本接近犤82.00±10.48,90.00±3.15,(t=0.985,P>0.5)犦。结论:雌性大鼠卵巢切除术后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目反应性增多。     

雌性大鼠去势后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元的表达

目的：观察雌性大鼠行卵巢切除术后下丘脑视上区反映动物功能状态的一氧化氮合酶阳性神经元形态和数量的变化。方法：实验于2003-07／2004-01在山西医科大学神经解剖学科研室进行。将20只Wistar雌性大鼠随机分为两组：对照组和卵巢切除术后组，每组10只。将大鼠麻醉后取完整脑组织，制备冰冻切片，在光学显微镜下对两组大鼠下丘脑视上核的一氧化氮合酶阳性神经元进行形态观察和细胞计数，采用图像分析系统测定一氧化氮合酶阳性神经元免疫反应产物的平均灰度值。结果：20只大鼠均进入结果分析。①大鼠下丘脑视上区的一氧化氮合酶阳性神经元分布和形态观察：对照组分布广泛，以视上核的一氧化氮合酶阳性神经元表达较强，大量胞体呈椭圆形，密集成簇。卵巢切除术后组视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目显著增多，胞体的截面积显著增大，轮廓很清晰；胞体上发出的突起粗且长，有个别纤维可见到明显的髓鞘。②下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目：卵巢切除术后组明显多于对照组[（18．00&;#177;4．09）个／视野，（9．00&;#177;3．15）个／视野。t=5．514，P〈0．0001]。③下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性产物的平均灰度值：卵巢切除术后组与对照组基本接近[82．00&;#177;10．48，90．00&;#177;3．15，（t=0．985，P〉0．5）]。结论：雌性大鼠卵巢切除术后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目反应性增多。     

Loss of high affinity cardiac beta adrenergic receptors in dogs with heart failure.

We studied the alterations in myocardial beta-adrenergic receptor-adenylate cyclase activity and muscarinic receptor density in a canine model of left ventricular (LV) failure. LV failure was characterized by a doubling of LV weight/body weight ratio (3.3 +/- 0.1 to 6.9 +/- 0.4 g/kg) and an elevation of LV end-diastolic pressure, 32 +/- 4.5 mmHg, compared with 7.7 +/- 0.6 mmHg in normal dogs. Despite a 44% increase in receptor density as measured by antagonist binding studies with [3H]dihydroalprenolol, there was a twofold decrease in receptor affinity, i.e., an increase in the dissociation constant (Kd) (5.6 +/- 0.7 to 12 +/- 1.6 nM) in heart failure. Agonist displacement of [3H]dihydroalprenolol binding with isoproterenol in the presence and absence of 5'-guanylylimidodiphosphate [Gpp(NH)p] demonstrated a striking loss of high affinity binding sites in heart failure (51 +/- 16 to 11 +/- 5%). Beta-Adrenergic receptor-mediated stimulation of adenylate cyclase and maximal stimulation with Gpp(NH)p or sodium fluoride was reduced in heart failure. There was a concomitant marked, P less than 0.01, reduction in muscarinic receptor density (242 +/- 19 vs. 111 +/- 20 fmol/mg). Thus, while muscarinic receptor density fell, beta-adrenergic receptor density actually increased in LV failure. However, a larger portion of the beta-adrenergic receptors are not functionally coupled to the GTP-stimulatory protein (Ns), as evidenced by a decrease in the fraction of receptors that bind agonist with high affinity.     

三七总皂苷干预脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的变化

目的:观察三七总皂苷注射液对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的作用机制。方法:实验于2005-06/11在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。将64只SD大鼠数字表法随机分为损伤组和三七总皂苷组(n=32),2组按存活时间分为1,3,7,14d4个时间点,每个时间点8只。所有大鼠采用Allen’s法制备脊髓中度损伤模型(致伤能量为40g·cm),三七总皂苷组伤后30min腹腔注射50mg/L三七总皂苷100mg/kg,伤后2h及4h再次给予50mg/kg,以后1次/d,剂量200mg/kg,连用12d。损伤组相同时间点腹腔注射等体积生理盐水。2组均于预定时间点处死大鼠,取出伤段脊髓(以损伤处为中心,长约10mm),用苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞率。结果:64只大鼠全部进入结果分析。①苏木精-伊红染色光镜下发现脊髓组织病理学改变三七总皂苷组明显轻于损伤组。②诱导型一氧化氮合酶阳性细胞率:三七总皂苷组在伤后1,3,7,14d均低于损伤组[(21.38±3.69)%,(36.24±3.27)%,(30.56±2.89)%,(21.64±5.31)%;(39.48±3.78)%,(58.69±5.67)%,(68.97±5.34)%,(40.35±4.36)%,t=9.692,9.701,17.893,3.171,P<0.05]。③半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞率:三七总皂苷组在伤后1,3,7,14d均低于损伤组[(26.29±3.21)%,(35.42±2.25)%,(48.58±2.64)%,(23.72±3.26)%;(32.43±2.69)%,(46.18±3.07)%,(60.31±5.35)%,(31.98±4.80)%,t=4.147,7.996,5.561,11.231,P<0.05]。结论:三七总皂苷注射液能抑制脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达,从而减轻细胞损伤和凋亡。     

电针对癫痫大鼠脑组织及肝脏的一氧化氮和一氧化氮合酶含量的影响

目的:探讨电针对癫痫大鼠脑组织和肝组织中一氧化氮,一氧化氮合酶(nitricoxidesyntheses,NOS)的影响,以及电针治疗癫痫的可能机制。方法∶实验于2004-03/10在南京中医药大学第二临床医学院实验室完成。选择SD大鼠40只,随机分成为正常组、模型组、电针组、假针刺组,每组10只。采用比色法测定对癫痫造模大鼠的一氧化氮,NOS和一氧化氮/NOS比值进行随机对照分析性研究。结果∶模型组脑一氧化氮犤(19.76±2.66)μmol/L犦,NOS犤(498.8±94.7)nkat/g犦和一氧化氮/NOS比值(1.38±0.46)明显高于正常组(P<0.05),电针组脑一氧化氮犤(6.04±3.52)μmol/L犦,NOS犤(203.9±102.2)nkat/g犦和一氧化氮/NOS比值(1.00±0.57)明显低于模型组(P<0.05),假针刺组一氧化氮,NOS和一氧化氮/NOS含量不明显变化。肝组织中各项因子变化与脑组织中变化一致。结论∶电针对癫痫大鼠的一氧化氮,NOS和一氧化氮/NOS有显著的抑制调节作用。这可能是电针治疗癫痫临床取得疗效的重要机制之一。     

三七总皂苷干预脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的变化

目的：观察三七总皂苷注射液对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的作用机制。方法：实验于2005—06／1l在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。将64只SD大鼠数字表法随机分为损伤组和三七总皂苷组（n=32），2组按存活时间分为1，3，7，14d4个时间点，每个时问点8只。所有大鼠采用Allen’s法制备脊髓中度损伤模型（致伤能量为40g&;#183;cm），三七总皂苷组伤后30min腹腔注射50mg／L三七总皂苷100mg／kg，伤后2h及4h再次给予50mg／kg，以后1次／d，剂量200mg／kg，连用12d。损伤组相同时间点腹腔注射等体积生理盐水。2组均于预定对间点处死大鼠，取出伤段脊髓（以损伤处为中心，长约10mm），用苏术精-伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化，免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞率。结果：64只大鼠全部进入结果分析。①苏木精-伊红染色光镜下发现脊髓组织病理学改变三七总皂苷组明显轻于损伤组。②诱导型一氧化氮合酶阳性细胞率：三七总皂苷组在伤后1，3，7，14d均低于损伤组[（21．38&;#177;3．69）％。（36．24&;#177;3．27）％，（30．56&;#177;2．89）％．（21．64&;#177;5.31）％；（39．48&;#177;3．78）％。（58，69&;#177;5．67）％。（68．97&;#177;5．34）％，（40．35&;#177;4．36）％。t=9．692，9．701，17．893，3．171，P〈0．05]。⑧半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞率：三七总皂苷组在伤后1，3，7，14d均低于损伤组[（26．29&;#177;3．21）％，（35，42&;#177;2．25）％，（48．58&;#177;2．64）％。（23．72&;#177;3．26）％：（32．43&;#177;2，69）％，（46、18&;#177;3．07）％，（60．31&;#177;5．35）％，（31，98&;#177;4、80）％，t=4．147。7．996，5．561，11．231，P〈0．05]。结论：三七总皂苷注射液能抑制脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达，从而减轻细胞损伤和凋亡。