Hedgehog信号通路效应蛋白在大肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路中效应蛋白在人大肠癌、正常大肠组织中的表达及与病理特征的相关性.方法 采用免疫组化方法检测60份大肠癌和20份正常大肠组织中Shh、Ptchl和Glil蛋白的表达,并与临床病理因素进行相关性分析.结果 Shh、Ptchl和Glil蛋白在大肠癌组织中均为高表达,Shh、Ptchl蛋白与Gli1蛋白的表达呈正相关.结论 综合检测Shh、Ptchl和Gli1 蛋白对大肠癌的诊断、治疗及预后有较明显的指导意义.     

Hedgehog信号通路在前列腺癌中的研究进展

[摘要]　Hedgehog（Hh)信号通路不仅在前列腺的胚胎发育和器官形成扮演重要的角色,而且在前列腺癌的肿瘤形成、侵袭、转移中起十分重要的作用。Hh信号通路将为前列腺癌的诊断提供重要的思路,以Hedgehog信号传导通路成员作为靶点,联合其他药物可能成为前列腺癌治疗的新策略。但Hh信号通路如何调控前列腺癌的机制尚不清楚,本文就Hh信号通路在以上方面的研究进展进行综述。     

骨肉瘤组织中 Hedgehog 信号通路的表达及意义

目的：研究Hedgehog信号通路在骨肉瘤组织中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化法分别检测31例骨肉瘤、21例骨良性肿瘤（13例骨软骨瘤、8例骨样骨瘤）组织中IHH、PTCH、SMO和Gli1蛋白的表达情况,分析此4种蛋白相关关系以及其表达水平与骨肉瘤临床特征的关系。结果骨肉瘤中IHH、PTCH、SMO和Gli1蛋白在骨肉瘤组织中的阳性率分别为70．97％、72．73％、70．97％、70．97％,与骨良性肿瘤（19．05％、14．28％、14．28％、9．5％）比较,差异均有统计学意义（ P＜0．001）。 IHH、PTCH、SMO和Gli1蛋白表达与患者年龄、性别、临床分期、肿瘤部位、肿瘤大小及是否肺转移无关;相关分析显示IHH和PTCH、SMO、Gli1蛋白在骨肉瘤组织中的表达呈正相关。结论 Hedgehog信号通路中的IHH、PTCH、SMO和Gli1蛋白异常高表达,提示Hedgehog信号通路可能在骨肉瘤的发生和发展中起重要作用。     

Hedgehog信号通路与Snail在肝癌细胞系中的表达及意义

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路在各种肝癌细胞系中的表达及其与Snail蛋白的关系.方法 用RT-PCR检测了Hh信号通路分子Shh、Ihh、Ptch-1、Smo、Gli-1、Gli-2、Gli-3 mRNA在4种肝癌细胞系HepG2、Hep3B、SMMC-7721、Huh-7和永生化肝细胞系L02中的表达情况,应用Western blot检测了Snail蛋白在SMMC-7721和L02细胞中的表达差异.结果 RT-PCR结果显示Hedgehog信号通路分子mRNA在肝癌细胞株中呈高表达,并以Shh信号为主;Gli-2在SMMC-7721细胞中表达最显著,而在正常肝细胞株L02中表达最弱,两者差异显著(P<0.01).Snail蛋白在SMMC-7721细胞中的表达显著高于L02细胞(P<0.05),且与Gli-2的表达呈正相关(P<0.05).结论 Hh信号通路可能通过Gli-2上调Snail的表达,增强肝癌细胞增殖力和侵袭力,促进肝细胞癌的发生和发展.     

阻滞Hedgehog信号通路及自噬协同抑制去势抵抗性前列腺癌细胞生长的实验研究

目的 探讨阻滞Hedgehog信号通路及抑制自噬对去势抵抗性前列腺癌细胞生长的影响及可能的机制.方法 设立对照组、GANT61(5、10、25、50μmol/L)、3-MA(0.2μmol/L)及两者联合组分别给药48～72h后采用MTT实验检测去势抵抗性前列腺癌PC-3细胞及22RV1细胞增殖能力;22RV1细胞4组...     

Hedgehog信号通路临床研究进展

Hedgehog通路是一条保守的信号通路,对胚胎发育起重要的调控作用,可促进上皮细胞向间质细胞的转化。Hedgehog基因编码一系列分泌蛋白,最初在果蝇调控胚胎过程中被发现,对胚胎发育过程中的细胞分化和增殖起重要作用。Hedgehog信号通路不恰当的激活可引起多种肿瘤及纤维化的发生。近年来,有关Hedgehog信号通路的研究取得了较大的进展,特别是在肿瘤的发病机制方面。针对Hedgehog信号通路中各靶点的治疗研究也为肿瘤治疗开辟了一条新的途径,具体疗效还需要进一步深入研究。     

Nedd4调节Hedgehog信号通路的研究

Hedgehog信号通路在胚胎发育及胎儿组织自稳中发挥重要作用。异常的Hedgehog激活可导致许多癌症的发生。为了研究Hedgehog信号通路中新的调节因子,我们利用Smoothened (Smo)的C末端作为诱饵采用酵母双杂交筛查方法,鉴定出Nedd4蛋白与Smo具有相互作用。研究显示在转染的HEK293细胞中Nedd4与Smo结合,另外,Nedd4的过表达会增加Gli 荧光酶素报告基因的活性,反之,Nedd4的失表达可以使Gli依赖的Hedgehog信号通路激活消失。总之,我们的研究显示Nedd4正性调节Hedgehog信号通路,而且为癌症的治疗中抑制Hedgehog信号通路提供了一个潜在的作用靶点。     

Hedgehog信号通路在食管癌中研究进展

Hedgehog信号通路在人类胚胎发育过程中发挥重要作用,可以调控细胞增殖和组织分化,大量研究表明,食管癌的发生、发展和异常激活的Hedgehog信号通路密切相关.本文从Hedgehog信号通路在食管癌的细胞增殖、血管形成、浸润转移等方面出发,将近年来Hedgehog信号通路和食管癌中发生、发展的研究进展进行报道.     

Sonic Hedgehog信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌中表达与意义

目的:探讨Sonic Hedgehog(SHH)信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义?方法:用RT-PCR方法检测10例HCC组织及相应癌旁组织和肝癌细胞系HepG2?Huh7中Shh?Smo mRNA的表达?采用免疫组化方法检测30例肝癌组织及10例正常肝组织中Shh?Smo蛋白的表达?结果:RT-PCR结果显示HCC组织中Shh?Smo mRNA的表达率显著高于癌旁组织(P < 0.05);Shh?Smo mRNA在Huh7中的表达强度高于HepG2,但两者间无显著性差异(P > 0.05)?免疫组化结果显示Shh?Smo蛋白在HCC组织中阳性率分别为63.3%(19/30)?76.7%(23/30);Smo蛋白的表达与肿瘤大小相关(P < 0.05)?Shh?Smo蛋白在正常肝组织中均无表达?结论:Shh和Smo在肝癌中高表达,表明SHH信号通路可能参与肝癌的发生,为肝癌防治提供新的依据?     

前列腺癌患者Hedgehog信号通路相关蛋白的表达及其临床意义

目的研究Hedgehog(Hh)信号通路相关蛋白(Shh、Ptch和Gli1)在前列腺癌患者中的表达及其与疾病预后的关系。 方法取90例手术治疗的前列腺癌患者肿瘤组织及对应的癌旁正常组织标本,采用免疫组化法测定Shh、Ptch和Gli1表达,分析其与临床病理特征的相关性,采用Cox回归模型研究前列腺癌患者术后复发转移的危险因素,并利用Kaplan-Meier生存曲线分析Shh、Ptch和Gli1与无进展生存期的关系。 结果前列腺癌组织中Shh、Ptch和Gli1蛋白表达水平显著高于癌旁正常组织(P＜0.05)。不同Shh、Ptch和Gli1蛋白表达的前列腺癌患者的临床分期、Gleason评分、合并骨转移的分布差异具有统计学意义(P＜0.05)。Cox回归分析显示,Hh信号通路相关蛋白表达阳性是术后复发转移的独立危险因素(P＜0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,Hh信号通路相关蛋白表达与前列腺癌患者无进展生存期呈负相关(P＜0.05)。 结论前列腺癌患者肿瘤组织中Hh信号通路相关蛋白表达与肿瘤分化程度密切相关,对前列腺癌患者预后评估具有一定价值。     

Shh、Glil和p-Akt在食管癌中的表达及临床意义

目的观测SHh信号通路关键因子Shh、Glil和P13K／Akt信号通路的父键因子p-Akt在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达情况,探讨上述因子的表达与ESCC各临床病理特征的关系和意义。方法采用免疫组织化学EnVision法检测108例手术治疗的ESCC组织及相应的癌旁正常食管黏膜标本Shh、Glil和p-Akt的表达情况。结果存108例ESCC组织中Shh、Glil和p-Akt的阳性表达率分别为70．1％（76／108）、76．9％（83／108）和65．7％（71／108）。108例癌旁正常食管黏膜中Shh、Glil和p-Akt的阳性表达率分别为13．9％（15／108）、13％（14／108）和15．7％（17／108）。ESCC组织中Shh、Glil锄p-Akt的阳性表达率显著高于相应的癌旁正常食管黏膜的表达（P〈0．05）;Shh、Glil和p-Akt表达与肿瘤是否有淋巴结转移密切相关（P〈0．05）,ESCC中Shh的表达与Glil的表达成正相关（r1=0．750,P〈0．01）,Glil表达与p-Akt表达呈正相关（r2=0．621,P〈0．01）。结论ESCC中SHh通路和P13K／Akt通路是普遍激活的,Glil与p-Akt可作为预测转移潜能和预后状况的有价值的指标,联合抑制SHh通路和P13K／Akt通路对于治疗食管癌可能更有效。     

Hedgehog信号通路在肝癌发生中的作用

Hedgehog信号通路对于哺乳动物胚胎的正常发育起着极为重要的作用,在人体组织中的异常激活可导致肿瘤的发生。研究表明Hedgehog信号通路的异常激活是肝癌发生的重要机制,尤其与肝癌的早期发生、恶性程度及转移关系密切,这为肝癌的早期诊断诊断与有效治疗提供了新的思路。     

Hedgehog信号通路基因启动子区多态性与广西地区人群肝细胞癌易感性的关系

目的:探讨Hedgehog(Hh)信号通路基因启动子区多态性与广西地区人群肝细胞癌遗传易感性的关系?方法:采用以医院为基础的病例对照研究,以1 041例肝细胞癌患者和1 074例非肿瘤对照者为研究对象,应用Sequenom Mass Array基因分型技术检测Hh信号通路基因启动子区的9个潜在功能性多态性位点的基因型,并分析各多态性位点与肝细胞癌易感性的关系?结果:在调整年龄?性别?吸烟?饮酒以及HBV感染等因素后,携带STK36 基因rs34237608 AG基因型者罹患肝细胞癌的风险降低(OR=0.67,95%CI=0.47~0.95;P=0.025);GG基因型与肝细胞癌易感性之间的关系无统计学意义(P > 0.05);在显性模型下,rs34237608位点AG/GG基因型可降低罹患肝细胞癌的风险(OR=0.67,95%CI=0.48~0.95;P=0.025)?本研究未发现其他候选位点多态性与肝细胞癌易感性有统计学意义?结论:STK36 基因rs34237608位点多态性可能与广西人群肝细胞癌易感性有关联?     

Hedgehog信号通路在骨性关节炎中的研究进展

近来研究表明,骨性关节炎(OA)关节软骨中印度刺猬蛋白(Ihh)表达上调,而这种上调与OA的进展,软骨细胞的形态变化密切相关.小鼠的遗传研究进一步表明,在软骨细胞有条件缺失Ihh信号可以延缓OA的进展,表明阻断Ihh信号用来作为OA潜在治疗方法的可能,以防止软骨变性.因此,基于Hh在软骨内成骨和骨关节炎的发生发展中发挥的重要作用,本文就Hedgehog信号通路在OA软骨细胞中的作用以及作为潜在治疗靶点的研究作一综述.     

雌激素受体α在乳腺癌细胞中对Gli1转录活性和表达的影响

目的:在先前研究发现Hedgehog信号通路的下游转录因子Gli1能够抑制乳腺癌细胞中的雌激素信号通路活性的基础上,观察雌激素受体ERα在乳腺癌细胞MCF-7中对转录因子Gli1的转录活性和表达的影响,以探讨两条信号通路之间是否存在着交互作用。方法:应用荧光素酶报告基因转录活性分析的方法,将Gli1的表达质粒和Gli的报告基因质粒pGli-BS-luc以及ERα的表达质粒或者空载体共同瞬时转染到乳腺癌细胞MCF-7中,观察Gli1转录活性的变化。然后分别用实时定量PCR和蛋白质印迹的方法检测乳腺癌细胞中ERα的过表达对Gli1 mRNA和蛋白表达的影响。结果:荧光素酶的活性随着ERα过表达剂量的增加而增加,ERα的质粒量在500 ng/孔时可将荧光素酶的活性升高到对照细胞的3.5倍(P<0.001)。雌激素处理后,荧光素酶的活性无显著变化。过表达ERα后可将Gli1 mRNA的表达水平提高为原来的2倍(P<0.01),也可明显增加Gli1蛋白的表达水平。结论:ERα在MCF-7细胞中的过表达能够明显增强Gli1的转录活性,增加Gli1的表达。这表明乳腺癌细胞中,转录因子ERα和Gli1之间存在着交互作用。     

人胰腺癌Hedgehog信号转导途径中PTCH基因表达载体的构建

目的:克隆人胰腺癌Hedgehog信号通路中PTCH基因,构建PTCH基因表达载体.方法:从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经RT-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的基因PTCH,将其插入表达载体PET22b,转化E.coli BL21,构建重组质粒PTCH/PET22b.结果:从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出789 bp的PTCH目的片段,成功构建重组质粒PTCH/PET22b.结论:成功构建重组质粒PTCH/PET22b,为PTCH蛋白表达奠定基础.     

Hedgehog信号通路参与肿瘤耐药机制研究的最新进展

Hedgehog信号通路调控肿瘤增殖、周期调控、侵袭转移等生理过程,维持着肿瘤的发生与发展。研究发现Hedgehog信号通路在多种耐药肿瘤的异常激活,进一步研究证实该通路通过激活靶基因以及与其他通路相互作用等方式介导了肿瘤耐药。因此,Hedgehog信号通路已然成为逆转肿瘤耐药的重要靶点。本文就Hedgehog信号通路传导途径及近年来在肿瘤耐药机制研究中的现状作一综述。     

Sufu的突变位点对Sonic Hedgehog信号通路调控机制的研究

目的：研究髓母细胞瘤患者中发现的Supressor of Fused（Sufu）的突变位点与Sonic Hedgehog（Shh）信号通路异常激活之间的联系,从而揭示其与肿瘤生长发展之间的关系。方法：构建Sufu突变位点的表达质粒,通过定量PCR、蛋白免疫印迹实验检测Sufu突变体对Sufu-/-细胞内源性Gli1表达水平的影响;通过免疫共沉淀检测Sufu突变体蛋白与Gli1的结合情况;通过MTT实验检测Sufu突变体对人髓母细胞瘤细胞（DAOY）生长增殖的影响。结果：定量PCR和蛋白免疫印迹实验发现,过表达Sufu的错义突变体（突变位点H87R）的Sufu-/-细胞中内源性Gli1表达水平接近于过表达野生型Sufu的Sufu-/-细胞,而过表达3个截短突变体（突变位点R146X、R299X、W430X）Sufu-/-细胞中内源性Gli1表达水平相比于野生型明显增高。正常情况下野生型Sufu可以和Gli1蛋白结合,免疫共沉淀实验发现Sufu的突变体都不同程度地破坏了与Gli1蛋白的结合;蛋白周转速率实验发现Sufu的突变体可以通过蛋白酶体途径降解;MTT实验发现Sufu突变体失去了抑制DAOY细胞生长增殖的能力。结论：髓母细胞瘤患者身上观测到的Sufu突变位点可以驱动肿瘤的形成和生长,并通过细胞功能实验证实了Sufu通过结合Gli蛋白从而抑制其功能。     

Hedgehog通路阻滞剂GANT61对胰腺癌细胞株的抑制作用

目的：探讨Hedgehog信号通路特异性阻滞剂GANT61抑制本通路在胰腺癌细胞株中的表达,观察胰腺癌细胞株增殖、迁移等能力的改变,为胰腺癌的治疗提供基础实验数据。方法：采用多株胰腺癌细胞,半定量RT-PCR法从中检测出Hedgehog通路表达相对活跃的细胞株,采用不同浓度的GANT61处理细胞株后,MTT法检测细胞株增殖活力改变,细胞划痕实验检测细胞迁移能力改变。结果：采用GANT61处理后,随着浓度的增加,胰腺癌细胞株增殖活力下降,迁移能力降低。结论：GANT61可通过抑制Hedgehog信号通路的表达,有效抑制胰腺癌细胞株的增殖、迁移等,为GNAT61药物在临床治疗胰腺癌提供扎实的理论基础。