在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱法同时定性定量检测全血和尿液中7种抗凝血杀鼠药

建立了同时测定全血和尿液样品中7种抗凝血杀鼠药的在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱(on-line SPE/LC-LIT/MS)分析方法。用乙腈沉淀样品中的蛋白质,于稀释、离心、过滤后直接进样。经在线固相萃取柱富集纯化;以C18柱为分析柱,甲醇-乙酸铵水溶液(0.02 mol/L)为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾电离(ESI)负离子模式下,记录目标母离子在锁定保留时间窗口内的二级全扫描信号,通过自建数据库进行定性确证,挑选高灵敏度与专属性的二级子离子进行定量,从而实现7种杀鼠药的同时定性和定量分析。7种杀鼠药在各自质量浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9946~0.9997,检出限和定量限分别为0.02~1.00 ng/mL和0.10~4.00 ng/mL, 3个添加水平的回收率为81.0%~113.9%,相对标准偏差为0.1%~6.2% (n=6)。该方法简单方便,灵敏度高,能够满足全血和尿液样品中7种抗凝血杀鼠药的快速筛查和准确定量。     

在线固相萃取/液相色谱-串联质谱法快速检测全血及尿液中15种杀鼠药

建立了同时测定血液和尿液样品中15种杀鼠药的在线固相萃取/液相色谱-三重四极杆串联质谱(On-line SPE/LC-MS/MS)分析方法。用乙腈沉淀样品中的蛋白质,经稀释、离心、过滤后直接进样。通过在线固相萃取柱HLB富集纯化,以ZORBAX Eclipse Plus C18柱为分析柱,乙腈-0.01 mol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾电离(ESI+/ESI-)快速正负切换模式,动态多反应监测模式(DMRM)扫描,外标法定量。结果表明,15种杀鼠药采用二次方程拟合时线性关系良好,血液中r~2≥0.997 8,尿液r~2≥0.996 5,方法的检出限和定量下限分别为0.10~5.00μg/L和0.50~10.0μg/L,3个添加水平下的回收率为81.8%~109.6%,日内相对标准偏差(RSD)为0.3%~3.6%,日间RSD为0.3%~3.8%(n=6)。该方法简单方便,灵敏度高,能够用以血液和尿液样品中15种杀鼠药的快速筛查和准确定量。     

在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱法同时检测生物样品中18种氨基甲酸酯类农药

建立了同时测定全血、尿液和肝组织等生物样品中18种氨基甲酸酯类农药的在线固相萃取/液相色谱-线性离子阱质谱(On-line SPE/LC-LIT/MS)分析方法。样品经乙腈处理,稀释和离心后直接进样。经Waters OasisHLB在线SPE柱富集纯化,以BETASIL C18柱为分析柱,甲醇-水(均含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱;使用电喷雾电离(ESI)正离子模式测定,扫描方式为选择反应监测(SRM)和连续反应监测(CRM)。18种农药在考察的质量浓度范围内线性关系良好(权重因子1/X),相关系数为0.994 3~0.999 4;在全血和尿液中的检出限为0.1~5 ng/m L,在肝组织中的检出限为0.1~5 ng/g;3个加标水平的回收率为90.2%~114.5%,相对标准偏差(n=4)为0.5%~7.5%。该方法简单准确,灵敏度高,能够满足生物样品中18种氨基甲酸酯类农药的快速分析要求。     

在线固相萃取结合液相色谱-线性离子阱多级质谱法同时检测生物样品中7种乌头类生物碱

建立了在线固相萃取(on-line SPE)结合液相色谱-线性离子阱多级质谱(LC-LIT/MSⁿ)同时测定全血、尿液和肝组织样品中7种乌头类生物碱的分析方法,并根据7种乌头类生物碱的多级质谱碎片对裂解规律进行了推测和总结。用乙腈沉淀样品中的蛋白质,于稀释和离心后直接进样。经Waters Oasis^® HLB在线SPE柱富集纯化,以0.1%(v/v)甲酸/乙酸铵溶液-0.1%(v/v)甲酸/甲醇溶液为流动相,以Accucore C18为分析柱进行梯度洗脱;在电喷雾电离(ESI)正离子模式下测定;扫描方式为连续反应监测(CRM)。在考察的质量浓度范围内,7种乌头类生物碱的标准曲线符合二阶方程(权重因子1/x),相关系数为0.9991~0.9999;在全血和尿液中的方法检出限为0.02~0.60 ng/mL,在肝组织中的方法检出限为0.02~0.40 ng/g;加标回收率为91.1%~104.7%,日内精密度和日间精密度分别为0.2%~10.7%、1.0%~13.7%(n=6)。该方法简单准确,灵敏度高,能够满足生物样品中7种乌头类生物碱的快速分析。     

在线固相萃取-超高效液相色谱-线性离子阱串联质谱法直接测定水中10种藻类毒素

建立了全自动在线固相萃取-超高效液相色谱-线性离子阱串联质谱法直接测定水中10种藻类毒素的方法.利用程序实现多次进样,通过在线固相萃取对藻类毒素进行富集,然后切换六通阀,将富集的目标物冲洗至分析柱进行分离后,进入线性离子阱质谱检测.10种藻类毒素在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限在0.0015~0.0050μg/L之间,3个浓度水平(0.02、0.10和1.00μg/L)的加标回收率为83.7%~98.5%.结果表明,在线固相萃取极大简化了前处理过程,线性离子阱串联质谱法提高了痕量藻类毒素测定的灵敏度,增强子离子扫描(EPI)谱库的建立为藻类毒素的确证提供保障.本方法适用于水体中多种藻类毒素的快速确证和定量测定.     

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定飞燕草中7种生物碱北大核心CSCD

建立了固相萃取技术(SPE)结合超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定飞燕草中7种生物碱的方法。采用单因素实验考察了固相萃取中各因素对飞燕草中7种生物碱萃取率的影响。最佳萃取条件为:乙醇作为提取溶剂,稀HCl调节pH值为6.0,PCX固相萃取柱净化,3%氨水甲醇溶剂洗脱。洗脱液采用ACQUITY UPLC BHEC_(18)柱(50 mm×2.1 mm×1.7μm),以乙腈-0.2%NH_(4)Ac为流动相进行UPLC-MS/MS分析,7种生物碱在1~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.982,检出限为0.02~0.45 mg/L,定量限在0.08~1.23 mg/L之间。样品中3个添加浓度水平(1、5、10 mg/L)回收率为95.9%~98.1%,相对标准偏差(RSD)不大于2.5%。采用该方法对6个产地的飞燕草进行了检测,样品中7种生物碱的含量在0.08~0.94 mg/g之间。结果表明,本文所建立方法准确性好,灵敏度高,操作简单快速,可满足飞燕草中生物碱检测的要求。     

固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定废水中12种抗生素的含量北大核心CSCD

取500 mL废水样品,用6 mol·L^(-1)盐酸溶液调节溶液酸度至pH 2.0~4.0后,再加入150 mg抗坏血酸和250 mg乙二胺四乙酸二钠。采用HLB固相萃取柱富集净化,用10 mL甲醇分两次洗脱。将洗脱液氮吹至近干,加入25μL内标溶液,用初始比例流动相定容至1.0 mL,经0.22μm有机滤膜过滤,得待测液。以ZARBAX Eclipse Plus C_(18)色谱柱为固定相,以不同体积比的甲酸-甲醇-乙腈-水的混合液为流动相进行梯度洗脱。质谱分析采用电喷雾正离子(ESI^(+))源和多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量。结果显示:12种抗生素标准曲线的线性范围均为2.00~200μg·L^(-1),检出限(3.143s)为0.001~0.007μg·L^(-1);对空白样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为60.1%~125%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.8%~13%。方法用于实际水样分析,结果显示5个不同来源的水样中均不同程度地检出抗生素。     

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿液中的4种巯基尿酸

建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)同时检测人体尿液中N-乙酰基-S-(3,4-二羟基丁基)-L-半胱氨酸(DHBMA)、N-乙酰基-S-(3-羟基丙基)半胱氨酸(3-HPMA)、N-乙酰基-S-(2-氰乙基)-L-2-氨基-3-巯基羧酸(CEMA)和苯巯基尿酸(SPMA)的检测方法。冰冻的人体24 h尿液在室温下解冻,混合均匀后离心过滤,经C18固相萃取小柱净化富集后在多反应监测模式下采用HPLC-MS/MS进行定量分析。在3个添加水平下,尿液中DHBMA、3-HPMA、CEMA和SPMA的加标回收率分别为105.6%～124.4%、102.7%～106.5%、103.2%～103.9%和101.7%～104.3%,相对标准偏差为2.6%～7.7%。以不低于3倍的信噪比估算DHBMA、3-HPMA、CEMA和SPMA的检出限分别为0.062、0.031、0.020和0.003 μg/L。应用该方法检测了37例吸烟和非吸烟者的24 h尿液样本,结果发现吸烟者尿液中3-HPMA、SPMA和CEMA的平均含量比非吸烟者高3到6倍。     

固相支持液-液萃取/液相色谱-串联质谱法测定人全血中环孢素A

采用固相支持液-液萃取/液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术建立了人全血中环孢素A的分析方法。全血样品经蛋白沉淀后,上样至固相支持液-液萃取柱,经甲基叔丁基醚洗脱,Shim-pack XR-ODS色谱柱(75 mm×3. 0 mm i. d.,2. 2μm)分离,电喷雾电离源、正离子模式和多反应监测模式下采集数据,以环孢素D为内标物定量。结果表明,环孢素A在1. 5～500μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)为0. 998,检出限和定量下限分别为0. 5μg/L和1. 5μg/L,在50、100、400μg/L 3个加标浓度下的平均回收率为78. 6%～83. 5%,日内和日间相对标准偏差(n=3)分别为3. 1%～5. 6%和4. 5%～8. 3%。该方法操作简便、灵敏度高,可用于全血中环孢素A的分析。     

在线固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定血液和尿液中31种有毒植物化学组分的含量

取血液或尿液样品0.20mL,加入乙腈0.60mL,涡旋振荡1min,并离心10min,取上清液0.40mL,加入10mol·L~(-1)乙酸铵溶液(pH 7.0)1.1mL,振荡1min,用0.22μm滤膜过滤后,溶液经HLB在线固相萃取柱富集纯化,所用流动相A为水,B为甲醇,C为乙腈。所得淋出液经Poroshell 120EC-C18色谱柱并用流动相A 10mol·L~(-1)乙酸铵溶液和流动相B乙腈(上述二流动相中均含φ0.1%甲酸)进行梯度洗脱,使所测定的31种有毒植物的化学组分达到分离,并进行质谱测定。所测定的31种目标物的质量浓度在一定范围内与其峰面积之间呈线性关系,其检出限(3S/N)在0.01～5.00μg·L~(-1)之间。分别以上述两种样品为基体,用标准加入法进行回收试验,测得31种化合物在血液样品中的回收率在90.4%～107%之间,在尿液样品中的回收率在90.0%～103%之间。测定值的相对标准偏差(n=6)依次在0.2%～2.6%,0.3%～2.9%之间。     

全自动在线固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时检测水稻中6种内源性植物激素

建立了同时检测水稻中6种内源性植物激素脱落酸( Abscisic acid,ABA)、吲哚-3-乙酸( Indole-3-acetic acid, IAA)、水杨酸( Salicylic acid,SA)、茉莉酸( Jasmonic acid,JA)、吲哚-3-丙酸( Indole-3-propionic acid, IPA)和吲哚-3-丁酸( Indole-3-butyric acid,IBA)的全自动在线固相萃取-液相色谱-串联质谱方法。植物样品经过甲醇提取,采用C18固相萃取柱富集净化,流动相将待测物洗脱至C18分析色谱柱进行分离,最终使用串联四极杆质谱进行检测。方法的线性范围为8~320μg/L,相关系数为R2≥0.99;方法的检出限(S/N=3)范围为0.1~0.8μg/kg;实际样品中方法回收率范围为71.2%~126%,RSD<13%。应用本方法快速、准确地检测了水稻幼穗中多种内源性植物激素的含量,并与目前植物学领域内常用的检测方法进行了比较。同时,本方法对水稻受伤叶片的内源植物激素含量变化进行了定量分析,其含量随受伤时间的变化趋势与其生物背景的实验结果相吻合。     

固相萃取-液相色谱-串联质谱法检测食品中的三聚氰胺

样品经均质,1%三氯乙酸溶液提取,用OASIS MCX固相萃取小柱净化,减压浓缩后以甲醇溶解定容,用Waters BEH-C8柱分离,乙腈和水为流动相,经液相色谱-串联质谱法检测.三聚氰胺线性范围为0.1～10.0mg/kg,相关系数r为0.9999,平均回收率为71%～95%,相对标准偏差为4.56%～9.82%(n=6),方法的栓出限为0.5 mg/kg.     

在线固相萃取净化-液相色谱-串联质谱法测定猪肉中10种大环内酯类抗生素

建立了在线固相萃取净化-液相色谱-串联质谱检测猪肉中10种大环内酯类抗生素残留的方法。样品经过乙腈提取,提取液40℃旋蒸至干后,分析物用2 mL磷酸盐缓冲液溶解,溶解液经在线固相萃取柱(HLB柱)富集净化,甲醇洗脱,然后转移至XBridge BEH C18色谱柱上,以10 mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈溶液为流动相进行分离,最后用串联四极杆质谱检测。结果表明,10种大环内酯类抗生素在0.1~200μg/L范围内呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.990。方法的检出限范围为0.05~0.30μg/kg,定量限范围为0.10~1.00μg/kg;添加水平为0.10~10.0μg/kg时,方法回收率为69.6%~115.2%,相对标准偏差(RSD)10%。该方法可以作为猪肉中大环内酯类抗生素的检测方法。     

在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中芬太尼及其代谢物的含量

建立了在线固相萃取(on-line SPE)-超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定尿液中芬太尼及其代谢物去甲芬太尼的方法,并将该方法运用于大鼠尿液中芬太尼及其代谢物的检测时限研究.将尿液用pH 9.2的2 mmol·L-1甲酸铵溶液稀释,离心后直接进样.采用Oasis HLB固相萃取小柱通过在线固相...     

固相萃取-气相色谱-质谱法同时测定植物油中7种邻苯二甲酸酯

采用气相色谱-质谱法测定植物油中7种邻苯二甲酸酯类增塑剂的含量。样品用正己烷溶解后,经Cleanert PAE固相萃取柱净化,采用正己烷-乙酸乙酯(1+1)混合溶液洗脱,洗脱液用氮气吹至近干,乙腈定容后,在DB-5毛细管色谱柱上分离,质谱中选择电子轰击离子源-选择离子监测模式。7种邻苯二甲酸酯的质量浓度在0.1~5.0 mg·L-1范围内呈线性,检出限(3S/N)为0.02 mg·kg-1。加标回收率在80.0%~120%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%~5.4%之间。     

临床干血斑样本中12种抗凝血鼠药的液相色谱-串联质谱法同时定量检测

为应对临床中毒快检的需求,建立了干血斑样本中12种抗凝血鼠药的液相色谱-串联质谱定性定量方法。针对全打孔的干血斑样本,考察了滤纸卡种类、润湿步骤、提取溶剂种类对提取效果的影响。采用C18色谱柱进行分离,以乙酸铵(5 mmol/L)水溶液-乙酸铵(5 mmol/L)甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾负离子电离方式下使用三重四极多反应监测模式检测。结果表明,采用Whatman903滤纸卡为基底,以水为溶剂充分润湿,再以含内标的甲醇溶液提取5 min,各鼠药的提取率为66%~115%,且结果稳定(日内RSD小于15%)。除杀鼠酮的线性范围为20~500 ng/m L(r2=0.998 7)外,其它11种鼠药的线性范围为5~500 ng/m L(r2=0.998 8~0.999 6);12种鼠药的回收率为61%~105%,基质效应为71%~193%(日内RSD小于15%)。该方法准确、灵敏、快速且操作简便,成功应用于3例临床鼠药中毒病人样本的快速检测,为临床毒物检测和法医毒物分析的快速筛查和准确定量提供了新的技术方法。     

在线固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时检测大豆不同部位的4种植物激素

采用双三元液相色谱(Dual gradient liquid chromatography,DGLC)建立了在线固相萃取技术与电喷雾串联质谱联用方法(Online SPE DGLC-ESI MS/MS),并成功应用于实际样品检测。本方法同时检测大豆不同部位中的4种酸碱性植物激素(赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)和脱落酸(ABA))。通过考察固相萃取富集柱、分析色谱柱、流动相对植物激素的保留和选择性的影响,获得较高的灵敏度、回收率、稳定性及精密度。大豆样品经液氮低温研磨,以80%甲醇溶液提取,再经离心稀释过滤后,进样分析。进样后样品经在线固相萃取Hypersep Retain AX柱洗脱保留,目标分析物依次转移至分析柱Acclaim PA2色谱柱,并以0.1%甲酸和甲醇溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用选择反应监测离子模式(SRM)同时采集正负离子通道进行定性分析,基质标准曲线外标法进行定量分析,GA3,IAA,ZT在0.1~50μg/L范围内线性良好,检出限为0.0002μg/g;ABA在0.5~50μg/L的范围内线性良好,其检出限为0.0010μg/g。以0.8,4.0和40μg/L分别为低、中、高浓度考察4种植物激素的回收率为76.1%~93.5%,RSD为0.8%~6.0%。结果表明,籽粒中含有的ABA浓度明显高于其它部位。本研究为快速准确地分离和测定大豆不同部位内源激素提供了有效方法。     

阳离子交换在线固相萃取/液相色谱-串联质谱法检测牛奶中14种磺胺药物残留

建立了阳离子交换模式在线固相萃取-液相色谱串联质谱法检测牛奶中14种磺胺药物方法。取5 g样品用15 mL乙腈提取和除蛋白,提取液于50℃氮气吹干后,用1.00 mL 0.2％甲酸溶解,溶解液通过双三元液相色谱用阳离子在线固相萃取柱在线富集净化,2％氨水甲醇/0.2％甲酸(50：50,V/V)洗脱。然后转移至C18色谱柱上进行分离,再用串联四级杆质谱检测。结果表明,14种磺胺类药物在0.1~10μg/kg含量范围内线性良好(r≥0.999);方法的检出限为0.05μg/kg,定量限为0.1μg/kg;方法回收率在60％~90％范围内,批内和批间相对标准偏差都小于10％。本方法较传统固相萃取柱净化法更简捷、经济和稳定。     

在线固相萃取-同位素稀释/超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中26种喹诺酮类化合物

建立了在线固相萃取/超高效液相色谱－串联质谱（SPE/UPLC－MS/MS）同时测定蜂蜜中26种喹诺酮类化合物的方法。样品用1%甲酸溶液－甲醇（10∶90）提取,经Oasis PRiME HLB固相萃取柱快速净化后,采用Agilent Eclipse Plus RRHD C18柱（2.1 mm × 50 mm,1.8 μm）分离,以0.1%甲酸溶液－乙腈为流动相梯度洗脱。在电喷雾离子源正离子模式下,采用动态多反应监测（dMRM）模式,内标法定量。结果表明,26种喹诺酮类化合物在各自的质量浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数（r2）均大于0.997,定量下限（LOQ）为0.5～2.0 μg/kg;在低、中、高3个加标水平下,平均回收率为79.5%～110%,相对标准偏差（RSD）为2.0%～12%。该方法简便、快捷、高效,适用于蜂蜜中喹诺酮类化合物的筛查及定量测定。