Fas/FasL调控细胞凋亡途径与血液恶性肿瘤

Fas抗原(又称Fas受体、CD95或Apo-1)及其配基(FasL)分别隶属于肿瘤坏死因子(TNF)受体和TNF超家族成员。由Fas与FasL结合启动的凋亡信号传导是最终导致细胞凋亡和(或)细胞毒效应的重要途径。因此,对Fas/FasL途径的深入研究可为通过诱导细胞凋亡而治疗恶性肿瘤提供新的凋亡激发环节[1]。1　Fas/FasL途径的分子学特征Fas和FasL均主要以膜形式存在。Fas是富含胱氨酸的型跨膜糖蛋白,分子量约45Kd,不同程度地表达于各种组织细胞,其结构分为胞外、跨膜和胞内区。Fas胞外区与其配基特异性地以三聚体形式结合;胞内区为Fas传导凋亡信号所…     

Fas及FasL基因蛋白在非霍奇金B细胞淋巴瘤中的表达

目的通过对Fas及FasL基因蛋白在非霍奇金B细胞淋巴瘤(non-Hodgkin'sBcelllymphoma,B-NHL)及良性淋巴结反应性增生中的表达的研究,探讨Fas及FasL蛋白的表达在B细胞淋巴瘤发病中所起的作用及意义。方法对确诊为B细胞淋巴瘤的125例石蜡标本及40例良性淋巴组织石蜡标本用免疫组化方法进行Fas及FasL蛋白表达的检测。结果Fas表达在细胞膜。FasL表达在细胞浆。B细胞淋巴瘤中Fas蛋白阳性总表达率为66.40%,FasL蛋白阳性总表达率为64.80%。良性淋巴组织中Fas蛋白阳性表达率为60.00%,FasL为62.50%。淋巴瘤组与良性淋巴组织之间Fas及FasL蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。但阳性细胞在良恶之间分布部位不同。淋巴瘤组内各亚型之间蛋白表达差异有显著性(P<0.05)。高恶组表达高于低恶组。DLBL(弥漫大B细胞淋巴瘤)及FCL(滤泡细胞淋巴瘤)组表达高于SLL(小细胞淋巴瘤)组。Fas及FasL的蛋白表达与性别、年龄、部位无关。结论Fas及FasL的表达与B细胞淋巴瘤的类型及恶性程度有关。Fas及FasL蛋白表达的检测不能作为鉴别良恶性的一个指标,但Fas及FasL蛋白的检测,有助于判断B细胞淋巴瘤的恶性程度,有助于指导临床治疗淋巴瘤。     

骨髓增生异常综合征患者Fas和FasL蛋白的表达及对造血祖细胞的影响

目的　探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞Fas(CD95 )及其配体 (FasL)的蛋白表达和作用。方法　采用免疫组化方法检测患者和正常对照组骨髓细胞Fas和FasL的表达。体外培养观察Fas免疫球蛋白(Fas Ig)及TNFα抗体对患者造血祖细胞集落形成的影响 ,酶联免疫吸附试验测定培养细胞的胞质DNA片段以观察凋亡情况。结果　①MDS患者 77% (2 0 / 2 6例 )表达Fas蛋白 ,81% (2 1/ 2 6例 )表达FasL蛋白 ,正常对照组无表达。②Fas、FasL表达与FAB分型有关 :Fas蛋白表达 ,难治性贫血 (RA)显著高于RA伴有原始细胞过多(RAEB)者、转变中的RAEB(RAEB t)和继发于MDS的急性髓细胞白血病 (postMDS AML) (RA >RAEB >RAEB -t >postMDS -AML) ,但RA患者的FasL表达最低。③体外培养发现 ,加入Fas Ig或TNFα抗体以阻断其途径 ,MDS患者粒细胞 巨噬细胞集落生成单位 (CFU GM)和红细胞集落生成单位 (CFU E)的集落形成显著增加 ,培养细胞的胞质DNA片段显著下降。结论　MDS骨髓细胞Fas和FasL的表达异常 ,并具功能活性。Fas、FasL可能是MDS凋亡机制之一     

乙型肝炎病毒载量与Fas、FasL表达强度的关系

慢性乙型肝炎的发病机制以往认为与机体的细胞免疫有关，新的研究表明与Fas／FasL介导的凋亡关系亦密切。机体可以通过凋亡方式清除感染、变异及衰老细胞而维持自身生理状态。Fas／FasL被认为是介导细胞凋亡的一对跨膜蛋白，FasL被称为死亡因子，Fas是它的受体，Fas与FasL结合时可引起表达Fas细胞凋亡。本实验旨在研究慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒复制水平与肝组织及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达的关系。进一步探讨Fas、FasL介导的凋亡与慢性乙型肝炎发病机制的关系。     

Fas、FasL的表达与感染性早产胎盘滋养细胞凋亡的关系

目的　探讨胎盘Fas、FasL的表达及滋养细胞凋亡在感染性早产中的作用。方法　采用dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)、免疫组化技术分别对四组 (感染性早产组 2 5例、早产无感染组 2 5例、足月感染组 3 1例及足月无感染组 3 1例 )胎盘组织 112例进行检测细胞凋亡和Fas、FasL基因的表达。结果　感染性早产组胎盘滋养细胞、羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞的凋亡指数较其它三组显著升高 (P <0 0 0 5 )。感染性早产组Fas阳性率最高 ,与其余三组比较有显著性差异 (P <0 0 0 5 ) ;感染性早产组FasL表达高于早产无感染组及足月无感染组 (P <0 0 0 5 )。感染性早产组 ,足月感染组胎盘、胎膜细胞凋亡指数 ,Fas、FasL表达均较其对应无感染组升高 ,但感染性早产组较早产无感染组FasL的升高幅度( 7 2 9% )显著低于Fas表达的升高幅度 ( 13 5 % ) (P <0 0 0 5 )。各组中胎盘胎膜细胞凋亡指数与Fas表达呈正相关 (P <0 0 0 1)。结论　在感染性早产中胎盘滋养细胞凋亡指数增加 ,同时Fas、FasL表达上调 ,可能Fas、FasL通过自分泌和旁分泌作用介导了胎盘滋养细胞的凋亡 ;但是FasL表达上调程度相对较低 ,可能导致母胎间免疫耐受失调 ,与感染性早产的发病有关。     

Fas和FasL在人绒癌细胞中的表达及其生物学意义

目的 观察Fas/FasL在绒毛膜癌细胞JEG-3、BeWo和Jurkat中的表达情况,探讨Fas/FasL与人绒癌细胞免疫逃逸的机制.方法 免疫荧光染色法、RT-PCR、免疫印迹检测fas/fasl的表达.台盼蓝细胞拒染、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测、流式细胞计数法检测绒癌细胞与Jurkat细胞共培养后对Jurkat细胞的抑制情况.结果 ①发现绒癌细胞上均有Fas及FasL表达;②与Jurkat细胞相比,在基因和蛋白水平,绒癌细胞中Fas表达低下,而FasL表达升高.③绒癌细胞与Jurkat细胞共培养可诱导Jurkat细胞存活率下降(P＜0.05),随共培养时间延长Jurkat细胞凋亡率升高(P＜0.05);④用中和抗体NOK-2封闭细胞表面FasL后,Jurkat细胞的凋亡率从(17.86±5.59)%下降到(6.88±1.05)%.结论 与Jurkat细胞相比绒癌细胞Fas表达下调而FasL的表达升高,证实Fas/FasL系统表达异常后可以使绒癌细胞逃离免疫监视.     

丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注后海马区AI及Fas／FasL、TNF-α表达的影响

目的探讨丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注海马区细胞凋亡指数（AI）、MasL、TNF-α表达的影响。方法运用大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型。将动物随机分为假手术组、模型组、丹龙醒脑片组、尼莫地平组,采用原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡神经细胞。采用免疫组织化学法,观察海马区Fas／FasL、TNF-α的表达。结果丹龙醒脑片能显著减轻神经细胞的损伤;假手术组有一定量的Fas,FasL、TNF—α表达,缺血后Fas／FasL、TNF—α迅速增加．丹龙醒脑片组显著抑制Fas／FasL、TNF—α的表达,模型组和丹龙醒脑片组、尼莫地平组比较,差异均具有统计学意义（p〈0．05）。结论抑制由缺血再灌注损伤诱导的Fas,FasL、TNF-α表达可能是丹龙醒脑片具有脑保护作用的机制之一。     

Fas/Fas配体在结直肠腺癌发生和免疫逃避中的作用

目的:探讨Fas、FasL(Fas 配体)在结直肠腺癌发生和免疫逃避中的作用.方法:采用Fas、FasL免疫组织化学染色和TUNEL法细胞凋亡染色双重标记法.对50例结直肠腺癌、44例大肠腺瘤、9例正常结肠组织及24例结直肠腺癌伴淋巴结转移癌进行Fas和FasL的检测.对50例结肠癌再用TUNEL法,检测不同FasL表达区结直肠癌细胞的凋亡情况.结果:①Fas在不同结肠组织中的表达规律是:结直肠腺癌中表达最低,其次是结肠腺瘤,表达水平最高的是正常结肠组织.FasL在不同结肠组织中的表达规律与Fas正好相反,结直肠腺癌组织中表达最高,其次是结肠腺瘤,正常结肠组织中几乎不表达FasL.②Fas、FasL的表达与结直肠腺癌患者的年龄、性别无关(P＞0.05),与Duke's分期、分化程度、有无淋巴结转移有关(P＜0.05).③在同一结直肠腺癌组织切片中,FasL表达不均匀:FasL表达阳性区(n=45)结直肠癌细胞的凋亡率(5.013%))比FasL阴性区(n=5)(2.815%)高(P＜0.05).④在24例结直肠腺癌淋巴结转移癌组织中,FasL均强阳性表达.结论:Fas/FasL系统在结直肠腺癌发生和免疫逃避中起重要的作用.     

Fas／FasL的表达与星型细胞瘤分化关系的探讨

目的 探讨Fas／FasL在人脑星形细胞瘤中的作用与意义。方法应用免疫组化法(S-P法)检测Fas和FasL在不同病理分级的人脑星形细胞瘤中的表达。结果Fas和FasL在41例星形细胞瘤中阳性细胞的表达率分剐为68．3％(28／41)和75．6％(3l／41)。Fas和FasL的表达水平在Ⅰ～Ⅱ级星形细胞瘤中表达为一或 的分剐占95．0％和75．0％，而Ⅲ～Ⅳ级星型细胞瘤中表达为 和 的分别占71．4％和66．7％。切片观察发现Fas和FasL表达阳性区集中多在缺血坏死灶周围，分别占67．8％和67．7％。Fas／FasL比值随着肿瘤的分级增高而更接近于1．0。结论正常脑组织不表达Fas和FasL，在星形细胞瘤中可见Fas和FasL的表达。在星形细胞瘤中Fas／FasL的表达情况可反映神经胶质细胞问变程度及星形细胞瘤恶性变时瘤细胞增殖的程度。     

三氧化二砷启动人食管癌细胞凋亡机制研究

目的探讨三氧化二砷诱导白血病及实体瘤细胞凋亡的机制。方法以三氧化二砷敏感和不敏感人食管癌细胞株为模型,运用RT-PCR和流式细胞术检测三氧化二砷处理的这两类细胞Fas／FasL表达的改变;同时利用荧光探针检测线粒体功能变化。结果两类细胞有同等水平Fas表达,但均未检测出FasL;三氧化二砷既不能上调Fas也不能诱导FasL表达,但破坏线粒体跨膜电势和氧化-还原系统。结论三氧化二砷诱导人食管癌细胞凋亡不依赖Fas／FasL的启动,而直接作用于线粒体,活化Caspase-3导致凋亡。     

三氧化二砷启动人食管癌细胞凋亡机制研究

目的探讨三氧化二砷诱导白血病及实体瘤细胞凋亡的机制.方法以三氧化二砷敏感和不敏感人食管癌细胞株为模型,运用RT-PCR和流式细胞术检测三氧化二砷处理的这两类细胞Fas/FasL表达的改变;同时利用荧光探针检测线粒体功能变化.结果两类细胞有同等水平Fas表达,但均未检测出FasL;三氧化二砷既不能上调Fas也不能诱导FasL表达,但破坏线粒体跨膜电势和氧化-还原系统.结论三氧化二砷诱导人食管癌细胞凋亡不依赖Fas/FasL的启动,而直接作用于线粒体,活化Caspase-3导致凋亡.     

绒癌中Fas/FasL的表达及其介导的细胞凋亡的意义

目的 研究Fas/FasL在绒毛膜癌细胞中的表达,及绒癌细胞与Jurkat细胞共培养诱导T细胞凋亡的机制.方法 用免疫荧光染色法检测绒癌细胞系Fas/FasL的阳性表达情况,MTT法检测随时间变化绒癌细胞对Jurkat细胞的抑制情况,流式细胞仪检测Jurkat细胞与绒癌细胞共培养24 h、中和抗体NOK-2封闭FasL 24 h Jurkat细胞的凋亡情况,透射电镜观察细胞的凋亡形态.结果 绒癌细胞上均有Fas及FasL的表达,在绒癌细胞上Fas的阳性表达较低,而FasL表达较多(P<0 05).绒癌细胞与Jurkat 细胞共培养可诱导Jurkat 细胞凋亡,绒癌细胞与Jurkat细胞共培养后随着时间的延长Jurkat细胞的凋亡率增加(P<0 05),出现特征性凋亡形态特征.用中和抗体NOK-2 封闭细胞表面FasL 后, Jurkat细胞的凋亡率下降.结论 两种绒癌细胞上均有Fas及Fasl的表达,绒癌细胞能抵抗Fas介导的凋亡,其表面的FasL可抑制T 细胞的免疫功能,Fas/FasL途径是绒癌细胞免疫逃逸的重要机制之一.     

口腔鳞癌细胞Fas/FasL的表达及对癌细胞凋亡的影响

目的:研究凋亡相关蛋白Fas、FasL在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及对癌细胞凋亡的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测10例正常口腔黏膜、38例不同分化程度口腔鳞癌组织Fas、FasL的表达;脱氧核糖核酸末端转移酶介导的原位末端标记(TUNEL)技术,检测鳞癌细胞的凋亡。结果:Fas在正常口腔黏膜中广泛表达,鳞癌组织表达明显下调(P<0.05);FasL在正常口腔黏膜不表达,鳞癌组织表达明显上调(P<0.01);Fas、FasL表达与口腔鳞癌分化程度无关;口腔鳞癌细胞Fas表达阴性组癌细胞凋亡指数(Apop-toticIndex,AI)明显低于Fas表达阳性组(P<0.01),Fas表达阳性组中,随Fas表达的下降,癌细胞AI逐步降低,各组间AI差异有显著性(P<0.01);口腔鳞癌细胞FasL表达阳性组癌细胞AI明显低于FasL表达阴性组(P<0.01);不同程度FasL表达间的癌细胞凋亡指数有差异。结论:口腔鳞癌细胞Fas、FasL的表达与癌细胞的凋亡及肿瘤的形成有密切关系。     

细胞凋亡相关基因Fas和FasL在大鼠苯巴比妥促肝癌过程中的表达研究

肿瘤发生是机体自稳态破坏,细胞异常过度增生,逃避免疫监视的结果。通过Fas(Apo-1)受体和Fas配体(FasL)介导的细胞凋亡,被认为是机体保持自稳态的重要机制之一。近年来的研究发现,Fas/FasL系统与肝癌的发生、发展和预后有密切关系。本实验研究了Fas及FasL在实验性大鼠肝癌促癌过程中的表达及作用。     

妊高征患者胎盘滋养细胞Fas及FasL表达的研究

目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘滋养细胞Fas及FasL的表达及意义.方法采用免疫组织化学法观察25例妊高征患者(妊高征组)胎盘Fas及FasL的表达及其与妊高征病情及新生儿出生体重的关系,并与25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)比较.结果Fas及FasL主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞膜及胞浆内.与正常妊娠组比较,妊高征组胎盘FasL表达显著降低(P＜0.05),轻度,中度,重度妊高征患者胎盘FasL表达,差异有显著性,而妊高征组滋养细胞表达Fas的水平却显著增加(P＜0.05)且轻度与中度及重度比较,差异有显著性.妊高征组胎盘Fas及FasL的表达与新生儿出生体重均无明显相关性.结论妊高征患者胎盘滋养细胞Fas及FasL表达失衡,通过免疫途径诱导滋养细胞发生级联凋亡反应,可能与妊高征的病因及病理过程有关.     

Fas/FasL介导的细胞调亡与肿瘤免疫逃逸

<正> 细胞凋亡与肿瘤的发生、发展及转移、复发密切相关,Fas(CD95)及其配体FasL是细胞膜表面表达的糖蛋白。近几年国内外研究资料显示,Fas及其配体FasL结合可以引起多种细胞凋亡,其中FasL在多种肿瘤细胞的表面和细胞质中表达,肿瘤     

子痫前期患者胎盘及底蜕膜中Fas/FasL表达及意义

目的 检测子痫前期患者胎盘滋养细胞及底蜕膜细胞的Fas/FasL表达水平,探讨妊娠期高血压疾病-子痫前期的发病机制.方法 采用免疫组织化学方法 ,半定量分析34例子痫前期组与16例正常妊娠组胎盘及底蜕膜的Fas/FasL表达.结果 Fas蛋白主要表达部位为细胞膜及细胞浆.与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘滋养细胞Fas着色较正常孕足月组增强并随病情加重更为明显;在底蜕膜细胞中,重度子痫前期组Fas着色较正常妊娠足月增强.FasL主要表达部位是细胞浆及细胞膜.与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘滋养细胞上FasL着色较正常妊娠组减弱,随病情加重更为明显;在底蜕膜细胞中,随子痫前期病情的加重FasL着色与正常孕足月相比减弱,并随病情加重逐渐减弱.结论 子痫前期患者胎盘滋养细胞及重度子痫前期底蜕膜细胞中Fas的升高、FasL下降及Fas/FasL的比例失调与子痫前期的发病具有相关性.胎盘滋养层细胞及底蜕膜上Fas/FasL系统的异常表达可能在子痫前期的发病中起着重要的作用,从而为临床治疗妊娠期高血压疾病提供新的方向.     

Effect of oxymatrine on murine fulminant hepatitis and hepatocyte apoptosis

目的　观察氧化苦参碱 (oxymatrine ,OM)对实验性小鼠暴发型肝炎 (fulminanthepatitis,FH)及其早期肝细胞凋亡的保护作用 ,并研究其药理机制。方法　腹腔注射 (ip)脂多糖 (LPS) +氨基半乳糖 (GalN)造成小鼠FH模型。两次实验均设生理盐水对照组、暴发型肝炎组和OM预保护组 (5 0mg/kg ,ip ,bid× 3d)。分别于注射GalN/LPS后 5h、7 5h取血清检测肿瘤坏死因子(TNFα) ,同时在 5h点取肝组织作原位凋亡细胞检测 ,并于电镜下观察凋亡细胞超微结构 ;在 7 5h点取肝组织作HE染色及Fas及其配体 (FasL)的免疫组化检测。结果　与模型组相比 ,OM治疗组 5h、7 5h点TNFα水平明显减低 (P <0 0 5和 0 0 1) ,5h点肝细胞凋亡亦明显减少 (P <0 0 1)。OM组 7 5h点肝组织损伤及Fas、FasL表达程度均较模型组减轻 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。结论　OM对GalN/LPS诱导的小鼠FH有保护作用 ,其机制可能为抑制TNFα释放及Fas、FasL表达 ,从而阻断肝细胞凋亡及坏死。     

干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及机制

目的研究干扰素-γ、于扰素-α2b联合应用对MCF-7乳腺癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法流式细胞仪(FCM)检测处理后细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达情况。结果处理后凋亡细胞百分率及FasL的表达增加,随着处理时间的延长,表达有增加趋势,差异有统计学意义(P0.05);Fas的表达无明显变化。结论干扰素-γ、干扰素-α2b联合应用可诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,机制可能与上调FasL的表达,加强Fas/FasL之间的交联及使Fas/FasL通路敏感性增加有关。     

早孕期蜕膜组织细胞凋亡异常对妊娠的影响

目的探讨早孕期蜕膜组织细胞凋亡异常与妊娠维持的关系。方法应用TUNEL法检测凋亡的发生,原位杂交和免疫组化法检测Fas、FasL的表达。结果(1)正常早孕41d蜕膜组织细胞大量凋亡,Fas、FasL的mRNA及蛋白表达较强;(2)正常早孕54d凋亡细胞明显减少,Fas、FasL的表达明显减弱;(3)早孕55d自然流产组,蜕膜组织大量凋亡,且Fas、FasL的表达较正常早孕54d显著增强(P<0.05)。结论早孕期蜕膜组织凋亡异常可能是自然流产的机制之一,Fas途径可能是诱导异常凋亡的重要因素。