抑郁大鼠脑内NMDA受体NR1、NR2B表达及中药干预作用

目的研究抑郁大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR1mRNA、NR2BmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用。方法二级雄性大鼠分为正常组、抑郁组、治疗组、对照组,后3组采用慢性应激方法结合孤养法建立抑郁模型,治疗结束后,取脑组织,采用逆转录PCR(RT-PCR)实验方法,研究NR1mRNA、NR2BmRNA在抑郁模型大鼠脑内左前额皮质、海马的表达及中药颐脑解郁方的干预作用。结果抑郁组大鼠海马、前额皮质的NR1、NR2B表达明显高于正常组,中药颐脑解郁方干预后可明显降低NR1mRNA、NR2BmRNA在脑内的表达。结论抑郁模型大鼠脑内NR1mRNA、NR2BmRNA表达升高,中药颐脑解郁方可使之明显下调,中药颐脑解郁方的抗抑郁作用可能与下调NMDA受体(NMDAR)的表达有关。     

急性脑缺血再灌注大鼠顶皮质NMDA受体亚单位NR2A/B蛋白的表达变化

目的采用免疫细胞化学技术,探讨急性脑缺血再灌注不同时间段大鼠脑顶皮质NMDA受体亚单位NR2A及NR2B蛋白的表达变化。方法雄性Wistar大鼠70只,随机分成正常对照组、假手术对照组、脑缺血再灌注对照组;以颈动脉引流法行全脑缺血7min再灌注造模,术后分6h、24h、72h三个时间段取脑,脑组织恒冷箱连续冠状切片。免疫细胞化学ABC反应。图像分析系统行顶皮质I区V层免疫阳性面积检测。结果（1）麻醉及假手术可导致顶皮质NR2A、NR2B蛋白表达短暂增多,24h内恢复正常;（2）缺血再灌注后6h前后形成表达高峰,24h回复正常,随后表达急剧减少,持续至72h以后。结论（1）脑缺血再灌注可导致顶皮质神经元NR2A、NR2B蛋白表达变化,且表达存在明显的时间依赖性;（2）缺血再灌注早期皮质NR2A、NR2B蛋白高度表达可能是导致迟发性神经元丢失的重要原因。     

人参总皂甙对大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区GABA表达及细胞凋亡的影响

目的探讨人参总皂甙对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法将40只Wis-ter大鼠随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、治疗组1、治疗组2,采用线拴法制备大鼠脑缺血再灌注模型,在72h断头取脑,石蜡切片行GABA、TUNEL染色,计算凋亡细胞数及GABA阳性反应数。结果治疗组与缺血再灌注组比较海马CA1区凋亡细胞数减少,γ-氨基丁酸(GABA)阳性反应数增多(P<0.01)。结论人参总皂甙能明显增强局灶性脑缺血再灌注大鼠海马神经元GABA的表达,抑制神经细胞凋亡,而发挥神经保护作用。     

益气活血药对脑缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸的实验研究

目的探讨益气活血药对脑缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸的影响。方法实验动物用沙土鼠，假手术组8只，缺血模型及再灌注组17只，缺血及再灌注加中药组15只(益气活血中药2．5g／kg)。按Chen法测定脑组织缺血及再灌注后谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GAB)、甘氨酸(Gly)的水平。结果预先给予益气活血药，能使沙土鼠缺血15min和再灌注48h后，脑组织Glu、Asp及CABA含量明显升高(P＜0．05)。沙土鼠死亡率由35．3％降至6．7％。结论益气活血中药能对抗沙土鼠缺血性脑损伤，其机理与提高兴奋性氨基酸有关。     

益气活血药对脑缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸的实验研究

目的探讨益气活血药对脑缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸的影响.方法实验动物用沙土鼠,假手术组8只,缺血模型及再灌注组17只,缺血及再灌注加中药组15只(益气活血中药2.5g/kg).按Chen法测定脑组织缺血及再灌注后谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GAB)、甘氨酸(Gly)的水平.结果预先给予益气活血药,能使沙土鼠缺血15 min和再灌注48 h后,脑组织Glu、Asp及CABA含量明显升高(P<0.05).沙土鼠死亡率由35.3%降至6.7%.结论益气活血中药能对抗沙土鼠缺血性脑损伤,其机理与提高兴奋性氨基酸有关.     

人参皂苷Rg2对脑缺血再灌注大鼠学习记忆及海马神经元Glu和NMDA受体亚单位表达的影响

目的观察全脑缺血再灌注对大鼠空间学习记忆和海马神经元Glu、N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚单位NR1、NR2B表达的影响,探讨人参皂苷Rg2的干预作用。方法SD大鼠56只,采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注模型(假手术组除外),随机分为7组(各8只):假手术组、模型组、溶酶组(注射2.5 mL/kg的1,2-丙二醇和聚乙二醇400混合液)、人参皂苷Rg2高剂量组(注射10.0 mg/kg人参皂苷Rg2)、中剂量组(注射5.0 mg/kg人参皂苷Rg2)、低剂量组(注射2.5 mg/kg人参皂苷Rg2)、尼莫地平组(注射50μg/kg尼莫地平),MORRIS水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力的改变,免疫组织化学和图像分析方法观察Glu、NR1、NR2免疫阳性神经元的表达。结果缺血再灌注模型组大鼠海马Glu、NR1、NR2B免疫阳性神经元的表达与假手术组比较明显增加,人参皂苷Rg2高剂量组Glu、NR1、NR2B神经元的表达与模型组比较明显降低,差异均有显著意义(F=155.249~268.228,q=2.934~5.259,P<0.01)。人参皂苷Rg2高剂量组大鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短(F=22.063,q=4.59,P<0.01)。结论人参皂苷Rg2能降低Glu、NR1、NR2B在脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元的表达,并改善学习记忆能力。     

通络益智散对拟血管性痴呆大鼠脑组织中Glu和GABA影响的实验研究

目的:探讨通络益智散对拟血管性痴呆大鼠海马区兴奋性和抑制性氨基酸的影响。方法:选用改良的脑缺血再灌注配合腹腔注射硝普钠降压法复制血管性痴呆模型。将实验大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、尼莫地平组、通络益智散大剂量组、通络益智散小剂量组。给药3周后,取海马匀浆检测谷氨酸(G lu)含量,并观察海马区γ-氨基丁酸(GABA)的表达。结果:通络益智散可以显著降低拟血管性痴呆模型大鼠海马区G lu的含量、增强GABA的表达(P<0.01)。结论:通络益智散能够通过调节血管性痴呆大鼠海马区G lu和GABA的含量保护脑组织,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机制之一。     

安神方的抗焦虑作用

目的观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组。采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价。行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量;用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少;地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升最明显;模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著;模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异。结论安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达。     

局灶性脑缺血后脑室下区NMDA受体亚单位NR2B的表达变化

目的 观察局灶性脑缺血后侧脑室脑室下区N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2B的表达变化.方法 44只雄性SD大鼠,随机分为正常组、假手术组和脑缺血再灌注组,线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)90 min再灌注模型,术后分3、7、14、21、28天5个时间点取脑,连续石蜡切片,免疫组化反应、图像分析系统行NR2B阳性细胞灰度值测量.结果 脑缺血后,缺血侧NR2B的表达在再灌注后3天开始增加,7天达到高峰(P<0.05),28天降至正常水平(P>0.05);缺血对侧的变化趋势同缺血侧,但表达变化的幅度明显减小.结论 局灶性脑缺血后,SVZ区NR2B表达增加,可能参与该区的神经发生.     

益气养阴活血中药改善2型糖尿病胰岛素抵抗研究

目的：探讨益气养阴活血中药改善气阴两虚血瘀型2型糖尿病患者胰岛素抵抗的机制。方法：将70例2型糖尿病胰岛素抵抗患者随机分为对照组和治疗组各35例。基础治疗均为口服格列吡嗪或达美康,治疗组在此基础上加用益气养阴活血中药。3个月为1个疗程。观察两组患者治疗前后空腹血糖（fastingbloodglucose,FBG）、餐后2h血糖（postprandial2hoursbloodgin—cose,P2BG）、空腹血胰岛素（fastinginsulin,FINS）、糖化血红蛋白（glycosylatedhemoglobinA1c,GHbAlc）、血脂、凝血功能等指标的变化,并计算稳态模型评估胰岛素抵抗（homeostasismodeIassessmentinsulinresistance,Homa—IR）指数。结果：两组患者治疗3个月后,FBG、P2BG、FINS、GHbAlc、Homa-1R及血脂、凝血指标均显著改善（P〈0．05,P〈0．01）,治疗组改善程度显著优于对照组（P〈0．05,P〈0．01）。治疗组降糖疗效和中医证候疗效显著优于对照组（P〈0．01）。结论：益气养阴活血中药在防治和改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗及血脂紊乱、血液高凝状态方面具有一定的疗效。     

益气活血方对气虚血瘀证脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响

目的：探讨益气活血方对气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响。方法：采用气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉复制局部脑缺血再灌注模型,缺血2h后再灌注l,3,7d。用免疫组化染色法分别检测缺血皮质Fas、FasL蛋白表达。结果：与模型组比较。益气活血方组Fas、FasL蛋白表达显降低。结论：益气活血方可能通过抑制Fas、FasL蛋白表达,减轻气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注损伤。     

米诺环素对脑缺血/再灌注大鼠脑梗死体积及谷氨酸水平的影响

目的观察大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型在给予米诺环素(MC)后脑梗死体积及不同时间点谷氨酸水平的变化情况,探讨MC的神经保护机制。方法将144只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、MC高剂量干预组、MC低剂量干预组,各36只。每组内随机将6只用于脑梗死体积测定。每组剩余30只大鼠按再灌注不同时点(2、6、12、24、48 h)随机分为5个亚组,每亚组6只。造模后根据不同时间点取脑缺血半暗带利用高效液相色谱法检测谷氨酸水平。结果①脑梗死体积测定:与缺血/再灌注组相比,MC治疗后脑梗死体积减少,差异有统计学意义(P<0.05)。②谷氨酸水平测定:缺血2 h再灌注2 h后谷氨酸开始升高,24 h谷氨酸水平达到最高点,MC干预组谷氨酸水平在不同时间点均较对应时间点缺血/再灌注组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MC可缩小缺血/再灌注大鼠的脑梗死体积,降低谷氨酸水平,有神经保护作用。     

线栓法致大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制作及思考

目的建立一种可靠、稳定的大鼠大脑中动脉闭塞脑缺血/再灌注模型(MCAO/R)的制备方法。方法 32只SD大鼠随机分为手术组(20只)和假手术组(12只),模型制作后检测神经功能缺失评分,氯化苯四氮唑染色观察大鼠脑梗死面积。结果改良后的大鼠MCAO/R制作成功率为75%,神经功能评分以及脑梗死面积均较稳定。结论改良的大鼠MCAO/R是一种稳定性好、可重复率高的大鼠脑缺血/再灌注模型。     

米诺环素对局灶性脑缺血大鼠脑可塑性的影响

目的 观察米诺环素对大鼠脑缺血再灌注（I/R）损伤后皮质神经元结构及突触素（synaptophysin, SYN）蛋白表达的影响。 方法 将36只大鼠随机分为假手术组（Sham组）、I/R模型组（I/R组）及米诺环素组（Min组）,每组12只。Sham组不进行I/R处理,不给药。I/R组及Min组均采用线栓法阻塞大脑中动脉制作大鼠MCAO模型,再尾静脉注射PBS或米诺环素（3 mg/kg,2次/d）14 d后,采用Montoya楼梯实验评估3组大鼠前肢运动功能,HE染色观察皮质神经元的形态结构,免疫荧光法观察缺血灶周围神经突的生长,Western blot法检测缺血脑组织内SYN蛋白的表达。结果 假手术组大鼠无明显神经功能缺损,皮层神经元细胞形态正常,微管相关蛋白-2（microtubule-associated protein-2, MAP-2）阳性神经元排列整齐,神经突较长;同模型组相比,米诺环素组大鼠的前肢运动功能改善,MAP-2及SYN蛋白表达增加,两组差异有统计学意义（P<0.05）。结论 米诺环素能促进大鼠缺血皮层神经元神经突的生长、突触素的表达及神经功能的恢复,发挥对脑组织可塑性的调节作用。     

麦芽醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响

目的观察麦芽醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马神经元内Caspase-3和神经元凋亡的影响。方法大脑中动脉线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型,应用免疫印迹法和流式细胞计数法分别检测Caspase-3和细胞凋亡。结果再灌注72h后海马Caspase-3表达升高,凋亡细胞增多,麦芽醇组Caspase-3表达和凋亡细胞明显减少。结论麦芽醇对脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

新型查尔酮FMC对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究新型查尔酮（FMC）（3''-甲酰基-4'',6''-二羟基-2''-甲氧基-5''-甲基查尔酮）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 建立重复性好、梗死部位恒定、成功率高的局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以水溶性的FMC溶液腹腔注射,观察FMC对脑缺血大鼠神经行为、脑梗死范围以及脑组织的含水量、超氧化歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响。结果 术后出现追尾征及特殊体态,于2h后大脑中动脉供血区出现缺血。脑组织TTC染色均匀,出现梗死的脑组织面积相对于全脑百分比为27.96%±9.45%,动物模型成功率为78.6%。FMC组的脑含水量、MDA显著降低,SOD显著升高,梗死率降低。结论 本方法构成局灶性缺血再灌注模型,操作简单,重复性好,大鼠体重和年龄、麻醉剂应用、栓线直径和插入深度、控制出血和术后护理等是模型制作成功的关键因素。FMC可能通过降低脑组织水含量、MDA水平,升高SOD水平,减少梗死体积,对缺血再灌注损伤的脑组织起到一定的保护作用。     

血栓心脉宁对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察血栓心脉宁对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组。线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,实验组于造模前每日灌胃给药1次（800 mg/kg ）,连续6 d。于缺血1 h再灌注24 h后断头取脑,免疫组织化学法和半定量PCR法检测缺血区脑组织中VEGF的表达。结果与模型组比较,实验组大鼠脑组织中VEGF的表达水平明显增高,差别有统计学意义（P＜0．05）。结论血栓心脉宁的脑保护作用机制可能与促进VEGF的表达有关。     

益气养阴方对糖尿病大鼠血清瘦素和结缔组织生长因子的影响

目的观察益气养阴方对糖尿病大鼠血清瘦素和结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF） 的影响。方法采用大剂量单次腹腔注射链脲佐菌素方法复制糖尿病大鼠模型,将模型大鼠随机分为模型对照组,益气养阴方低、高剂量组,卡托普利组,分别给予等量蒸馏水,益气养阴方0．75,1．50g／kg,卡托普利1mg／kg预防糖尿病肾病。8周末,测定肾质量与体质量比值、血清瘦素和CTGF含量等改善情况。结果益气养阴方可显著改善模型大鼠的整体状态和一般情况,降低肾质量与体质量比值（P〈0．05）,显著降低血清瘦素和CTGF水平（P〈0．01）。结论益气养阴方能显著调节血清瘦素和CTGF的表达,从而发挥其对肾脏的保护作用。     

益气活血法对脑缺血再灌注损伤大鼠行为学及脑组织内NGF水平改变的影响

目的:探讨益气活血法对脑缺血再灌注大鼠行为学及脑组织内NGF水平改变的影响。方法:采用中动脉阻塞法制备动物模型,检测脑组织内生化指标及行为学指标。结果:缺血再灌注模型组较空白组对照,脑组织NGF含量减少;治疗组较模型组NGF含量有所增高,神经功能也有一定的提高。结论:益气活血法对脑缺血再灌注损伤有一定防治作用。