艾灸疗法影响兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的效应

目的：观察艾灸疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。 方法：于2004-03／2005-04在华中科技大学同济医学院和武汉体育学院完成本课题。选取6～8月龄健康新西兰兔36只，按照组间均衡一致的原则，随机抽签法分为3组：正常对照组，骨关节炎模型组，艾灸治疗组，每组12只。骨关节炎模型组，艾灸治疗组动物于左侧或右侧兔膝关节腔内注入16以木瓜蛋白酶制备骨性关节炎模型，0．5mL／次，隔3天再注射1次，共注射3次。艾灸治疗组动物于术后6周开始进行艾灸治疗。剪除造模侧膝关节约3cm&;#215;3cm区域毛后用点燃的艾条，距后三里（相当于人足三里）、阴阳陵泉、血海四穴高2cm处各悬灸10min，2天1次，共治疗4周。正常对照组，骨关节炎模型组不予治疗。术后10周处死所有动物，切开膝关节腔，先大体观察关节软骨、滑膜的病变。然后切取胫骨平台和股骨内髁的软骨约0．5cm&;#215;0．5cm&;#215;0．5cm组织块，行苏木精-伊红、Masson三色和甲苯胺蓝染色，通过光镜观察有关的组织形态学变化。采用硝酸还原法测定关节滑液一氧化氮含量。采用原位未端原位标记法和流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡率。结果：在模型制备及饲养过程中，所有动物均无死亡，全部纳入结果分析。①大体观察结果：正常组兔膝关节软骨为淡蓝白色，表面光滑而有光泽；造模组关节软骨无光泽，为淡黄白色，软骨表面凸凹不平，出现裂隙；艾灸组关节软骨为淡白色，软骨表面粗糙。②组织形态学结果：正常组苏木精-伊红染色可见关节软骨的细胞致密而均匀，基本无破坏；Masson三色染色正常，软骨胶原蓝绿色；甲苯胺蓝染色均匀无失染。骨关节炎模型组关节软骨破坏严重，软骨表层变薄，粗糙，出现裂隙，部分软骨剥落，形成缺损区，软骨细胞数目明显减少，排列紊乱，四层结构不易分辨；Masson三色染色蓝绿色丢失严重，仅表层软骨尚可保留一些；胺蓝染色仅残存的软骨细胞及簇集的细胞核蓝染，细胞的胞浆呈紫红色。艾灸组苏木精-伊红染色可见关节软骨破坏程度较造模组明显减轻，关节软骨表面有表浅裂隙，软骨细胞排列轻度紊乱，四层结构可以分辨。Masson三色染色全层未钙化软骨保持蓝绿色着染；甲苯胺蓝染色蓝紫色着染均匀。③骨关节炎模型组关节液一氧化氮含量较正常对照组明显升高、艾灸治疗组较正常对照组明显升高，比模型组降低，差异均有显著性意义（P＜0．05）。④骨关节炎模型组、艾灸治疗组关节软骨细胞凋亡阳性表达较正常对照组明显升高；艾灸治疗组比骨关节炎模型组明显降低，差异均有显著性（P＜0．05）。⑤骨关节炎模型组软骨细胞凋亡率比正常组明显升高，艾灸治疗组比正常对照组明显升高，比模型组明显降低，差异均有显著性（P＜0．05）。 结论：艾灸疗法能减少关节液一氧化氮的含量，抑制软骨细胞的凋亡，治疗膝骨性关节炎具有有效性和可行性。     

体外冲击波对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:探讨体外冲击波(extracorporeal shock wave,ESW)对兔膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞凋亡的影响.方法:18只新西兰兔,根据是否给予前交叉韧带(ACL)离断和ESW干预分为3组(n=6):空白对照组;ACL组;ESW+ACL组.ESW干预8周后,观察膝关节大体情况,并应用DAPI、TUNEL、Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术三种方法检测对软骨细胞凋亡的影响.结果:DAPI和TUNEL法观察到凋亡软骨细胞主要集中在浅表层、中间层,而Annexin Ⅴ-FITC/PI双标法显示ACL+ ESW组有(10.240±0.760)％的软骨细胞凋亡,而ACL组有(17.465±0.621)％的软骨细胞凋亡,两组差异具有统计学意义.结论:ESW可抑制兔膝OA软骨细胞凋亡,减轻对关节软骨破坏,可作为治疗OA的新途径,为临床应用ESW治疗OA提供参考.     

软骨细胞凋亡与骨性关节炎

骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是人类最常见的一种关节疾病,是以关节软骨退行性变和关节周围继发性骨质增生为病理特征的慢性进行性骨关节病。多见于中老年人,女性多于男性。患者主要表现疼痛、僵硬等,给患者带来较大的痛苦,严重影响患者的生活质量。随着人口老龄化进程的加速,这一问题日益突出。但是,由于OA的病因和发病机制尚未完全阐明,目前还缺乏特异性的治疗手段。     

氙光低频结合运动疗法对膝骨性关节炎的近远期影响

目的探讨氙光低频结合运动疗法对膝骨性关节炎的近远期疗效。方法将94例膝关节骨性关节炎患者随机分为实验组和对照组。实验组采用氙光低频结合运动疗法,对照组应用综合物理治疗。对患者治疗前和治疗后2周、3个月、6个月进行视觉模拟评分并记录疼痛对患者工作生活影响程度。结果实验组在视觉模拟评分及对患者工作生活影响程度方面优于对照组（P〈0.05）。结论氙光低频结合运动疗法治疗膝骨性关节炎近远期疗效满意。     

治疗型关节炎护膝对兔膝骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨OA护膝对兔膝骨性关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:6月龄兔54只,采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,随机分为6组,正常组常规饲养,模型组造模后常规饲养,对照组微波仪治疗,实验1组电(疏密波)治疗,实验2组热(热软膜),实验3组电热(OA护膝),治疗30 min,1次/d,连续治疗16周时处死,采用免疫组化检测软骨细胞增殖、凋亡。结果:16周时,关节软骨细胞凋亡率,各试验组明显高于正常组(P0.01,P0.05),对照组、实验1组和实验2组、实验3组明显低于模型组(P0.01,P0.05),实验3组明显低于对照组、实验1组和实验2组(P0.05);关节软骨细胞增殖率,各试验组明显低于正常组(P0.01,P0.05),对照组、实验1组和实验2组、实验3组明显高于模型组(P0.01,P0.05),实验3组高于对照组、实验1组和实验2组(P0.05)。结论:OA护膝能有效促进关节软骨细胞增殖,抑制软骨细胞凋亡。     

膝骨性关节炎非手术治疗122例分析

目的：通过对122例膝骨性关节炎（OA）非手术治疗进行分析，探讨膝OA的防治方案。方法：对122例膝OA患者进行研究，评价治疗方式和疗效。结果：膝OA非手术治疗理想治疗方案应包括非药物和药物治疗的联合应用；膝OA非药物治疗包括患者教育、控制体重、功能锻炼和物理疗法；药物治疗中，首选乙酰氨基酚，其他非甾体抗炎药（NSAIDs）口服制剂和外用擦剂疗效有效且安全。结论；增强对该病的认识是提高疗效的前提，完善具体治疗方法，综合治疗是最有效的方式。     

针刀松解疗法治疗膝骨性关节炎的临床研究

对60例经X线片确诊为膝骨性关节炎(OA)的患者,给予关节周围痛点阻滞麻醉,4#针刀纵行切割剥离手法做关节周围局部松解治疗。采用视觉类比测试法(VAS)及关节活动功能评分法进行评分。除1例效果不明显外,59例膝关节疼痛症状明显好转,发现明显副反应。     

低浓度臭氧治疗膝骨性关节炎疗效观察

观察医用臭氧治疗膝骨性关节炎的疗效。方法：将2006-01/2007-05 60例膝骨性关节炎患者随机分为A组（对照组）和B组（治疗组）,每组30例。A组关节腔内注射透明质酸钠注射液,每周1次,5次为一疗程;B组膝关节腔内注射臭氧（浓度30μg/ml）,比较两组治疗效果。结果：两组患者治疗后视觉模拟评分均明显降低,治疗后3、6个月治疗组与对照组比较差异有显著性。结论：医用臭氧能有效治疗早、中期膝骨性关节炎,并具有损伤小、并发症少的特点,并且可明显缓解疼痛和改善关节功能,疗效满意。     

关节镜下膝骨性关节炎手术要素分析

从2002-01～2003-01我们共进行关节镜下膝关节清理术40例,随访6～12个月,现总结如下.     

中西医结合治疗膝骨性关节炎疗效观察

目的 观察中西医结合治疗膝骨性关节炎临床疗效,寻找对膝骨性关节有效的治疗方法.方法 将296例膝骨性关节炎门诊患者随机分为两组:治疗组为146 例,用自制中药外熏洗并且口服氨糖美辛肠溶片治疗;对照组150 例,口服氨糖美辛肠溶片治疗.结果 治疗组治愈率优于对照组(P<0.05).结论 中西医结合治疗膝骨性关节炎具有良好疗效.     

透明质酸钠不同给药途径干预早期骨关节炎兔软骨细胞的凋亡

目的:观察前交叉韧带横断造成兔早期骨关节炎软骨细胞凋亡的变化,以及应用关节内和静脉注射透明质酸钠对软骨细胞凋亡的影响。方法:实验于2006-04/09在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。共选取36只新西兰兔,随机数字表法分成正常组、骨关节炎组、关节内注射透明质酸钠组、静脉注射透明质酸钠组,每组9只。正常组不做任何处理,作为对照;骨关节炎组仅行前交叉韧带横断术;关节内注射透明质酸钠组行前交叉韧带横断术后给予关节腔内注射透明质酸钠;静脉注射透明质酸钠组行前交叉韧带横断术后给予静脉内注射透明质酸钠。所有实验动物在术后8周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化,原位末端标记法标记凋亡细胞,在前交叉韧带横断术前、术后6,8周分别进行血液检测。观察各组动物的组织学检查、Mankin评分、凋亡指数和血液检测结果。结果:纳入新西兰兔36只,均进入结果分析。①所有动物的血液检查包括红细胞、白细胞、血小板计数以及血尿素氮、肌酐、电解质,结果均在正常范围内。②应用透明质酸钠干预的关节内注射透明质酸钠组和静脉注射透明质酸钠组与未用透明质酸钠干预的骨关节炎组相比较,前者组织病理学改变明显轻于后者。③骨关节炎组的Mankin评分与其他三组差异有显著性[(8.97±1.02),(0.00±0.00),(5.62±0.86),(6.13±0.64)分,P<0.05]。④各组均发现软骨细胞凋亡,并且骨关节炎组的凋亡指数显著高于其他三组[(27.38±3.46)%,(5.17±1.06)%,(12.47±2.13)%,(14.51±2.87)%,P<0.05],正常组的凋亡指数与其他三组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:前交叉韧带横断所致兔早期骨关节炎的软骨细胞凋亡明显增加,关节内和静脉内注射透明质酸钠均能有效抑制其软骨细胞凋亡。     

骨关节炎软骨细胞凋亡及其信号通路的研究进展

骨关节炎是一种退行性变疾病,严重影响着患者的健康和生活质量。研究表明,软骨细胞凋亡在骨关节炎发病过程中起重要作用,本文就骨关节炎中软骨细胞凋亡相关的信号转导通路做如下综述,阐明骨关节炎发病过程凋亡相关的靶分子,为骨关节炎的靶向药物筛选提供理论依据。     

健膝强骨丸对膝骨关节炎家兔模型关节软骨病理改变的影响

背景：膝骨关节炎的病理学改变不可逆转,属中医“痹证”范畴,治疗目的是缓解或解除症状,延缓关节退变。健膝强骨丸方是武汉大学基础医学院荆州市第三人民医院的经验方,可补益肝肾,祛风散寒,除湿通络,强骨健膝。目的：观察健膝强骨丸对膝骨关节炎兔模型膝骨关节软骨的保护作用,及其对软骨细胞骨形态发生蛋白7表达的影响。方法：36只新西兰兔随机分为3组,每组12只,分别运用改良Hulth术制备兔膝骨关节炎模型。造模后第6周,给药组予健膝强骨丸0.1 g/kg 灌胃,模型组和正常对照组予等量生理盐水灌胃。给药4周后通过软骨Mankin’s 评分方法行兔膝关节软骨评分,电镜下观察软骨形态,免疫组化法检测膝关节软骨细胞骨形态发生蛋白7表达情况。结果与结论：给药组兔膝关节软骨病理退变程度较其他2组轻,膝关节软骨细胞骨形态发生蛋白7的表达量较其他2组高,差异有显著性意义（P＜0.05）。提示健膝强骨丸可增强膝骨关节炎模型兔关节软骨细胞骨形态发生蛋白7的表达,从而促进膝关节软骨再生,减少软骨变形坏死,达到治疗关节炎的目的。     

骨关节炎Ⅰ号方预防氢化可的松对兔软骨细胞的损伤作用

背景骨关节炎Ⅰ号方中的补肾活血祛风湿中药具有治疗骨关节炎、预防糖皮质激素副作用的作用.目的建立体外兔关节软骨细胞培养体系,观察骨关节炎Ⅰ号方预防氢化可的松对软骨细胞的损伤作用.设计完全随机设计,对照实验.单位福建省第二人民医院风湿免疫科.材料实验于2003-11/2004-03在福建中医学院骨伤系分子实验室完成.关节炎Ⅰ号方由仙灵脾、巴戟天、川芎、三七、祖师麻组成.用胶原酶Ⅱ消化兔关节软骨,建立软骨细胞体外培养体系,在软骨细胞培养体系中分别加入不同浓度的骨关节炎Ⅰ号方与氢化可的松的混合液,根据加入的药物浓度不同随机分成2组,一组加入1.25g/L氢化可的松和/或150g/L骨关节炎Ⅰ号方,另一组加入2.50 g/L氢化可的松和/或300 g/L骨关节炎Ⅰ号方.每组再分为4个亚组,各组再分别分为对照组、氢化可的松组、氢化可的松+关节炎Ⅰ号方组、关节炎Ⅰ号方组,每组5孔.方法①1.25g/L氢化可的松+150g/L关节炎J号方组每孔分别加入1.25 g/L氢化可的松和150g/L骨关节炎Ⅰ号方混合液0.1 mL.②1.25g/L氢化可的松组每孔分别加入磷酸盐缓冲液和1.25 g/L氢化可的松的混合液0.1 mL.③150g/L骨关节炎Ⅰ号方组每孔分别加入150g/L骨关节炎Ⅰ号方药液0.1 mL.④对照组1每孔分别加入磷酸盐缓冲液0.1 mL.⑤2.50g/L氢化可的松+300g/L骨关节炎Ⅰ号方组每孔分别加入2.50g/L氢化可的松和300 g/L骨关节炎Ⅰ号方的混合液0.1 mL.⑥2.50g/L氢化可的松组每孔分别加入磷酸盐缓冲液和2.50g/L氢化可的松的混合液0.1 mL.⑦300 g/L骨关节炎Ⅰ号方组每孔分别加入300g/L骨关节炎Ⅰ号方药液0.1 mL.⑧对照组2每孔分别加入磷酸盐缓冲液0.1 mL.⑨上述各组加药培养24h后,用倒置显微镜观察各组软骨细胞形态变化.④采用四氮唑蓝比色法检测各孔软骨细胞的A值,以反映软骨细胞增殖情况.主要观察指标骨关节炎Ⅰ号方与氢化可的松联合用药对兔软骨细胞增殖的影响.结果①软骨细胞形态倒置显微镜观察见对照组软骨细胞呈多角形或梭形贴壁生长,1.25和2.50 g/L氢化可的松浓度培养24 h的软骨细胞呈固缩或漂浮状态,各浓度氢化可的松+骨关节炎Ⅰ号方组、骨关节炎Ⅰ号方组的软骨细胞呈多角形或梭形贴壁生长与对照组无差异.②软骨细胞A值1.25 g/L氢化可的松组明显低于对照组1(0.007 6±0.001 8,0.015 2±0.002 6,t=5.374 0,P＜0.01);1.25 g/L氢化可的松+150 g/L关节炎Ⅰ号方组和150g/L关节炎Ⅰ号方组明显高于1.25g/L氢化可的松组(0.065 6±0.016 9,0.086 6±0.019 0,t=7.630 9,9.255 9,P＜0.01);2.50 g/L氢化可的松组明显低于对照组2(0.0053±0.0014,0.0153±0.0023,t=8.304 5,P＜0.01);2.50 g/L氢化可的松+300 g/L关节炎Ⅰ号方组和300 g/L关节炎Ⅰ号方组明显高于2.50 g/L氢化可的松组(0.0858±0.015 0,0.092 6±0.016 8,t=11.948 3,11.579 4,＜0.01).结论高浓度氢化可的松可导致软骨细胞已严重损伤或死亡,而氢化可的松加中药培养的软骨细胞生长良好,骨关节炎Ⅰ号方有预防氢化可的松对软骨细胞的损伤作用.     

缺血再灌流股骨头骺影响关节软骨细胞的凋亡☆

背景：缺血再灌注后可以引起关节软骨的退行性变化,但其中具体机制尚无公识。目的：观察发育期髋关节股骨头骺关节软骨及缺血再灌注后关节软骨的退行性变化及其细胞凋亡现象。方法：80只 SD 大鼠随机分为2组,缺血再灌注组建立髋关节缺血再灌注实验动物模型,假手术组开腹暴露腹主动脉5 min 常规关腹。于模型建立后6 h,12 h,24 h,48 h,5 d,2周,4周不同时点对股骨头骺关节软骨进行光镜病理形态学观察,同时对标本进行 TUNEL 法检测股骨头骺关节软骨细胞凋亡现象。结果与结论：缺血再灌注组术后光镜观察到软骨细胞变性、减少、基质可见局限性纤维化等关节软骨退行变化,两组 TUNEL 法检测均观察到关节软骨细胞的凋亡现象,假手术组偶见有散在分布5个以下的软骨细胞凋亡,缺血再灌注组观察到48 h 可见10-30个软骨细胞发生凋亡。结果提示,缺血再灌注对髋关节股骨头骺关节软骨可引起退行性改变,发育期髋关节缺血再灌注后关节软骨的细胞凋亡可能参与关节软骨的损害,抑制关节软骨的细胞凋亡可能有助于防治早发的骨关节炎。     

针灸结合股四头肌训练治疗膝关节骨性关节炎

目的探讨针灸结合股四头肌强化训练治疗膝关节骨性关节炎的疗效。方法 82例膝关节骨性关节炎患者随机分为针灸结合股四头肌强化训练治疗组 (针灸组 )和常规治疗组各 41例 ,对患者治疗前与治疗 3 0天后的下肢日常活动能力及患膝疼痛程度进行评定。结果治疗后 ,两组患者的症状均有减轻 ,但针灸组在缓解疼痛、改善下肢功能方面明显优于常规治疗组 (P <0 .0 1)。结论针灸结合股四头肌强化训练治疗膝关节骨性关节炎可获得满意而稳定的疗效。     

膝骨关节炎脂肪垫对关节软骨细胞的影响

目的:观察人膝骨关节炎(OA)脂肪垫对正常及OA关节软骨细胞的影响。方法:24例人膝脂肪垫和膝关节软骨均由骨科手术室提供,12例为膝关节急性外伤手术患者,12例为膝OA患者行关节置换术后。切取正常及OA膝脂肪垫行苏木精-伊红染色(HE)及瘦素免疫组织化学染色;用OA膝脂肪垫制作脂肪垫培养液(FCM);于急性膝外伤手术标本的表面完整处提取正常软骨细胞,于膝OA关节置换术标本提取OA软骨细胞,分别进行体外培养并鉴定,随机分成正常组、OA组、正常+FCM组及OA+FCM组,其中正常组和OA组均加入完全高糖培养基,正常+FCM组和OA+FCM组均加入FCM,对各组细胞进行形态学观察,于第14天将各组软骨细胞予Ⅱ型胶原(COL2)免疫组化染色及油红O染色,同时应用Western blot技术检测各组软骨细胞中COL2、聚蛋白多糖(Acan)和基质金属蛋白酶(MMP-13)的表达情况。结果:(1)COL2免疫组化染色:OA组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度比正常组显著降低(P0.05)。与OA组相比,正常+FCM组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度无明显差异,而OA+FCM组显著降低(P0.05)。与正常+FCM组相比,OA+FCM组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度显著降低(P0.05)。(2)油红O染色:OA组软骨细胞内的油红O染色平均吸光度与正常组相比差异无统计学意义。与OA组相比,正常+FCM组和OA+FCM组软骨细胞内的油红O染色平均吸光度均有增高(P0.05),但OA+FCM组增高更为显著(P0.05)。(3)Western blot结果:OA组COL2、Acan的表达水平低于正常组(P0.05),而MMP-13的表达高于正常组(P0.05)。与OA组相比,正常+FCM组COL2、Acan和MMP-13的表达水平无明显差异;相较于正常组及正常+FCM组,OA+FCM组COL2、Acan的表达水平降低(P0.05),而MMP-13的表达水平增高(P0.05)。结论:OA膝FCM能使正常及OA软骨细胞形态上发生脂肪样变,并通过代谢途径提高软骨细胞MMP-13的表达,加速软骨细胞COL2、Acan的降解,且对OA软骨细胞的破坏更为显著。     

骨关节炎兔软骨细胞凋亡与八味柔肝散的抑制效应

背景:传统中药对骨关节炎具有镇痛等治疗作用,但对关节软骨是否有保护作用及其通过何种机制起作用少有报道.目的:观察八味柔肝散对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响.方法:将新西兰大白兔随机分为正常组、模型组和治疗组,模型组和治疗组行Hurth法骨关节炎造模.建模后1周,正常组和模型组每天生理盐水灌胃,治疗组行八味柔肝散水提液灌胃.建模后8周行组织学观察Mankin's评分,硝酸还原酶法测定关节液一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶活性,原位末端转移酶标记技术检测软骨细胞的凋亡指数.结果与结论:结果显示,治疗组关节软骨Mankin's评分,关节液一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶活性,关节软骨细胞凋亡指数均低于模型组(P < 0.05).证实八味柔肝散对兔骨关节炎软骨细胞凋亡有抑制作用.     

骨关节炎兔软骨细胞凋亡与八味柔肝散的抑制效应

背景：传统中药对骨关节炎具有镇痛等治疗作用,但对关节软骨是否有保护作用及其通过何种机制起作用少有报道。目的：观察八味柔肝散对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法：将新西兰大白兔随机分为正常组、模型组和治疗组,模型组和治疗组行Hurth法骨关节炎造模。建模后1周,正常组和模型组每天生理盐水灌胃,治疗组行八味柔肝散水提液灌胃。建模后8周行组织学观察Mankin＇s评分,硝酸还原酶法测定关节液一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶活性,原位末端转移酶标记技术检测软骨细胞的凋亡指数。结果与结论：结果显示,治疗组关节软骨Mankin＇s评分,关节液一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶活性,关节软骨细胞凋亡指数均低于模型组（P〈0.05）。证实八味柔肝散对兔骨关节炎软骨细胞凋亡有抑制作用。