奥希替尼合成路线图解

奥希替尼是一种抗肺癌新药,用于治疗表皮生长因子受体(EGFR)突变,且对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)产生耐药性的非小细胞肺癌患者,是目前唯一的治疗EGFR T790M突变阳性的转移性非小细胞肺癌的药物。文章综述了奥希替尼及其中间体的合成,以期为奥希替尼及其中间体的合成研究及生产提供参考依据。     

可溶性重组蛋白EGF-Ang构建及体外细胞毒性检测

目的 构建人源化的免疫融合蛋白，以期获得具有较低免疫原性的靶向治疗药物。方法 利用基因工程技术将人表皮生长因子（EGF）和人血管生成素（Ang)基因连接起来，克隆高效表达载体pET20b( )中，构建重组表达质粒pET20-EA，并在大肠杆菌中表达该融合蛋白（EGF-Ang)。用MTT法检测可溶性蛋白的细胞毒辣性作用。结果 经SDS-PAGE和薄层扫描分析表明，外源蛋白表达量占菌体裂解蛋白总量的6.4%。细胞活性检测表明EGF-Ang重组蛋白在体外对过度表达EGFR的Hep2和SP2/0细胞具有明显杀伤作用。结论 人源化免疫融合蛋白EGF-Ang的构建为进一步研制具有较低免疫原性的靶向抗癌药物奠定了基础。     

蕃茄红素对气道上皮细胞黏液高分泌的作用

目的探讨蕃茄红素(lycopene)对人中性粒细胞弹性蛋白酶(human neutrophil elastae,HNE)诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的影响。方法分别用0、25、50、75、100、200、400μmol/L的番茄红素处理人支气管上皮细胞株HBE16,采用MTT法检测细胞活性,确定番茄红素试验浓度;用HNE刺激HBE16细胞构建气道黏液高分泌模型,用番茄红素及AG1478进行干预,实验共分5组:对照组(无血清培养基培养)、HNE组(加入终浓度为50 nm/L的HNE)、HNE+蕃茄红素组(加入终浓度为100μmol/L的蕃茄红素,作用24 h后,给予终浓度为50 nm/L的HNE刺激)、HNE+AG1478组(加入5μmol/L AG1478预处理30 min后,给予终浓度为50 nmol/L的HNE刺激)、HNE+蕃茄红素+AG1478组(先加入100μmol/L的蕃茄红素作用24 h,再给予5μmol/L的AGl478处理30 min后,给予终浓度为50 nmoL/L的HNE刺激)。各组均于处理后24 h取样,采用RT-PCR法检测各组黏蛋白5ac(mucin,MUC5ac)基因、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因mRNA的转录水平;Western blot法检测各组EGFR和磷酸化表皮生长因子受体(phosphorylated EGFR,P-EGFR)蛋白的表达;ELISA法检测各组MUC5ac蛋白的表达。结果番茄红素浓度低于100μmol/L时对细胞无明显损伤,以100μmol/L番茄红素作为实验浓度。与对照组比较,HNE组MUC5ac和EGFR基因mRNA转录水平均明显升高,HNE、HNE+番茄红素、HNE+AG1478组EGFR和P-EGFR蛋白的表达均明显升高(P均0.01);与HNE组比较,HNE+番茄红素、HNE+AGl478和HNE+番茄红素+AG1478组MUC5ac和EGFR基因mRNA转录水平均明显降低,EGFR和P-EGFR蛋白的表达水平均明显降低(P均0.01)。与对照组比较,HNE组MUC5ac蛋白含量明显升高(P0.01);与HNE组比较,HNE+番茄红素、HNE+AG1478和HNE+番茄红素+AG1478组MUC5ac蛋白含量均明显降低(P均0.01)。与HNE+AG1478组比较,HNE+番茄红素+AG1478组中MUC5ac、EGFR mRNA及蛋白表达水平、P-EGFR蛋白表达水平均明显降低(P均0.01)。结论蕃茄红素通过下调EGFR水平对炎性气道上皮细胞黏液高分泌有抑制作用。     

第三代EGFR抑制剂研究进展

EGFR是细胞膜表面的表皮生长因子受体,具有酪氨酸激酶(tyrosine kinase, TK)活性。随着第一代EGFR抑制剂在临床治疗中靶点出现了T790M突变,从而发展了第二代EFGR抑制剂。然而在治疗过程中出现了野生型的EGFR T790M靶点,并且对第二代TKI产生了耐药性,随之发展了第三代EFGR抑制剂。本文对近几年出现的以第三代EGFR抑制剂进行简要总结。     

表皮生长因子受体在胸腔积液鉴别诊断中的价值

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)检测在良恶性胸腔积液性质鉴别诊断中的应用价值。方法用ELISA法对81例胸水进行EGFR定量检测,并对结果进行统计学分析。结果恶性胸水组EGFR水平明显高于良性胸水组(P<0.01),结核性胸水组EGFR水平与非结核性胸水EGFR水平没有显著性差异(P>0.05)。结论胸水中的EGFR定量检测,对鉴别胸腔积液性质和肺癌的诊断有一定价值,尤其对缺少病理证据的肺癌患者有初诊价值。     

p21活化激酶4及其抑制剂研究进展

p21活化激酶4(p21-activated kinase 4,PAK4)为小G蛋白Rho家族的关键下游效应器,通过多种机制影响肿瘤细胞的侵袭转移、增殖、存活及凋亡,对肿瘤的发生发展起着重要作用。PAK4在多种肿瘤细胞中过度表达,并成为极具研究前景的药物靶点。近年来,已经陆续发现了多种类型的PAK4抑制剂,主要对PAK4的结构特征、在肿瘤的发生发展中PAK4的作用机制以及PAK4抑制剂的研究进展等做总结和阐述。     

人表皮生长因子及其在化妆品中的应用

通过文献调研，综述了新型生物功能性化妆品添加剂－人表皮生长因子（human Epidermal Growth Factor,简称：hEGF)的发现史、来源、结构与生物活性，以及hEGF与EGFR的作用机理；还综述了hEGF的3种生产方法，重点介绍了物美价廉的基因重组hEGF的生产和表达特点。同时，引入从细胞层次营养肌肤的生物美容理念，展望了hEGF在化妆品中的广阔应用前景和含hEGF化妆品独特的生物美肤功能。旨在进一步指导实践，开发系列hEGF功能性化妆品。     

[VEGF]hTERT复合调控序列介导HSV-tk自杀基因诱导肿瘤细胞的凋亡

目的构建人端粒酶催化亚单位(hTERT)核心启动子及血管内皮生长因子(VEGF)增强子复合调控序列的真核表达载体,并检测在复合调控序列调控下HSV-tk自杀基因对肺癌细胞A549和肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响。方法构建复合调控序列[VEGF]hTERT和胸苷激酶(tk)基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-[VEGF]hTERT-tk和PCMV启动子的真核对照表达载体pcDNA3.1(+)-tk,转染肺癌细胞A549和肝癌细胞SMMC-7721,G418筛选抗性克隆,给入前药丙氧鸟苷(GCV),MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果质粒pcDNA3.1(+)-[VEGF]hTERT-tk和pcDNA3.1(+)-tk经双酶切及PCR鉴定,证明构建正确。转染了带有不同启动子的真核表达载体的肿瘤细胞,在给入前药GCV后均能表现出对细胞生长的抑制作用,GCV对A549细胞的抑制率大于SMMC-7721细胞,并能引起肿瘤细胞凋亡。[VEGF]hTERT在A549细胞中的活性较在SMMC-7721中高。结论HSV-tk自杀基因在肿瘤细胞内瞬时表达即能引起靶细胞凋亡,且复合调控序列在肿瘤细胞中的活性较通用真核细胞转录启动子PCMV高,为深入进行自杀基因治疗的研究提供了一定理论依据。     

重组靶向毒素IL-6(23)-PE40_(KDEL)在毕赤酵母中的表达及其活性

目的利用毕赤酵母表达系统表达IL-6(23)-PE40KDEL重组靶向毒素,并检测其杀伤肿瘤细胞的活性。方法采用PCR技术,将目的基因IL-6(23)-PE40KDEL插入到pPIC9载体中SnaBⅠ与NotⅠ位点,电转化至巴斯德毕赤酵母GS115中,筛选Mut-型重组酵母;甲醇诱导表达,体外细胞试验检测其细胞毒性。结果获得12株Mut-重组酵母,其中8株具有细胞毒性,表达产物占上清液蛋白的9%～12.7%;15"l以上的表达产物在体外对SP2/0、HL-60、HepG2、BGC-832和HCT-116细胞具有高度杀伤活性,对CK、HeLa和NIH/3T3细胞无明显影响。结论IL-6(23)-PE40KDEL重组靶向毒素在毕赤酵母GS115中获得表达,并具有选择杀伤肿瘤细胞的活性。     

白蛋白结合蛋白在肿瘤细胞中功能及抗肿瘤药物中应用的研究进展

肿瘤细胞代谢活跃,需消耗大量的能量和营养以支持细胞的快速生长,肿瘤细胞和肿瘤血管上皮细胞中高度表达各种转运蛋白以增加营养的吸收。在恶性肿瘤细胞中,白蛋白结合蛋白（albumin-binding proteins,ABPs）负责白蛋白的摄取、转运、累积或再利用,与肿瘤形成、浸润和转移密切相关,有望作为肿瘤治疗或药物开发的新靶点。目前,在各种组织细胞中已陆续发现了7种ABPs,ABPs在肿瘤细胞中的功能和作用机制也逐渐成为研究热点。因此,本文就ABPs在肿瘤细胞中功能及抗肿瘤药物中应用的研究进展作一综述。     

佛山市顺德新城区降水中污染物的监测和分析

为掌握佛山市顺德新城区降水中污染物的情况,2015年7月至8月,文章作者分别在雨天进行了降水取样,对降水中的pH、电导率、常见阴离子(F-、Cl~-、NO_3~(2-)、SO_4~(2-))及部分重金属(铅和镉)进行监测分析。选择有相关数据的珠江三角洲和石家庄、厦门等地的降水中污染物的情况进行对比。结果表明,顺德新城区降水中的p H和部分阴离子浓度优于珠江三角洲平均值,酸雨类型属于硫酸和硝酸混合型;其水体洁净程度略差于石家庄;铅和镉的浓度也高于厦门,甚至部分超出了人体能直接接触的安全范围。     

Metabolism of trideuterated iso-lignoceric acid in rats in Vivo and in human fibroblasts in culture

Saturated very long chain fatty acids (fatty acids with greater than 22 carbon atoms; VLCFA) accumulate in peroxisomal disorders, but there is little information on their turnover in patients. To determine the suitability of using stable isotope-labeled VLCFA in patients with these disorders, the metabolism of 22-methyl[23,23,23-²H₃]tricosanoic (iso-lignoceric) acid was studied in rats in vivo and in human skin fibroblasts in culture. The deuterated iso-VLCFA was degraded to the corresponding 16- and 18-carbon iso-fatty acids by rats in vivo and by normal human skin fibroblasts in culture, but there was little or no degradation in peroxisome-deficient (Zellweger’s syndrome) fibroblasts, indicating that its oxidation was peroxisomal. Neither the 14-, 20-, and 22-carbon iso-fatty acids nor the corresponding odd-chain metabolites could be detected. In the rat, the organ containing most of the iso-lignoceric acid, and its breakdown products, was the liver, whereas negligible amounts were detected in the brain, suggesting that little of the fatty acid crossed the blood-brain barrier. Our data indicate that VLCFA labeled with deuterium at the ω-position of the carbon chain are suitable derivatives for the in vivo investigation of patients with defects in peroxisomal β-oxidation because they are metabolized by the same pathways as the corresponding n-VLCFA. Moreover, as iso-VLCFA and their β-oxidation products are readily separated from the corresponding n-fatty acids by normal chromatographic procedures, the turnover of VLCFA can be more precisely measured. A preliminary report of part of this work (Reference 18) was presented at the 5th International Symposium on the Synthesis and Applications of Isotopes and Isotopically Labelled Compounds, Strasbourg, France, June 20–24, 1994.     

中国粉末涂料行业发展现状之2014

根据国家统计局以及国内外相关机构的数据统计资料,按照自2004年以来的相同数据统计口径,以原材料消耗为基础,编制出我国粉末涂料行业年度数据统计报告,以期为政府制定相关产业政策,企业制定发展规划提供翔实的数据支撑。     

Phospholipid metabolism in cells in culture

The proportions of the different lecithin fractions have been determined in HeLa and KB tissue culture cells and Ehrlich Ascites tumor. 82.8% of the total phosphatidyl choline phosphorus is found in fraction 3 of HeLa cells. The major phosphatidyl cholines found in KB cells and Ehrlich Ascites tumor are in fractions 3 and 4 and representing 66.6% and 88.7% of the total phosphatidyl choline P, respectively. The incorporation of 1,2-¹⁴C-choline and 1,2-¹⁴C-ethanolamine into the various phosphatidyl choline fractions has been assayed to determine their biosynthesis in Ehrlich Ascites tumor. The incorporation of 1,2-¹⁴C-choline into fractions 3 and 4 is 100 times the 1,2-¹⁴C-ethanolamine. This evidence indicates that the methylation pathway of phosphatidyl choline synthesis is very low in HeLa, KB and Ehrlich Ascites cells. One of 13 papers presented at the symposium “Lipid Metabolism in Cells in Culture,” AOCS Meeting, Houston, May 1971. Part of a thesis submitted to the Graduate School of the University of North Dakota in partial fulfillment of the Degree of Master of Science.