微生物发酵法生产透明质酸

透明质酸(HA)是国际公认的理想的天然保湿因子,用于高档护肤品、发用制品;在医学方面可制备成眼科制剂和骨科制剂等;在日本还是美容保健食品.HA的生产方法有发酵法和提取法两种.在发酵法生产HA选择菌种时,要考虑其营养需求及所用培养基的成本问题.若以链球菌为菌种生产HA,从代谢调控的角度来说,有氧发酵有利于HA的合成.在HA的发酵过程中,pH值是一个重要的因素,一般控制在6.0～8.5的范围内.目前国内HA的发酵产率为4～6g/L,国际先进的HA发酵产率为6～7g/L.发酵法是HA生产的发展方向,但还应从提高产率、提高产品分子量和分离纯化技术方面进一步深入研究.     

微生物发酵法生产透明质酸

透明质酸(HA)是国际公认的理想的天然保湿因子,用于高档护肤品、发用制品;在医学方面可制备成眼科制剂和骨科制剂等;在日本还是美容保健食品。HA的生产方法有发酵法和提取法两种。在发酵法生产HA选择菌种时,要考虑其营养需求及所用培养基的成本问题。若以链球菌为菌种生产HA,从代谢调控的角度来说,有氧发酵有利于HA的合成。在HA的发酵过程中,pH值是一个重要的因素,一般控制在6.0-8.5的范围内。目前国内HA的发酵产率为4-6g/L,国际先进的HA发酵产率为6-7g/L。发酵法是HA生产的发展方向,但还应从提高产率、提高产品分子量和分离纯化技术方面进一步深入研究。     

透明质酸的性能及生产

叙述了生化药物透明质酸的化学结构,性质及两种不同的生产方法。     

透明质酸的性能及生产

叙述了生化药物透明质酸的化学结构、性质及两种不同的生产方法.     

发酵法生产医药用透明质酸

山东临朐华元生物工程有限公司通过对菌株的筛选培育、发酵原料配方和工艺的改进、提纯工艺和设备的优化、制粉工艺和设备的改进、生产环境的改造,利用生物工程技术发酵法研制生产出医药用透明质酸,并形成1.5t/a的生产规模。产品应用于眼科手术、滴眼液、手术防粘连等方面,改变了国内医药用透明质酸依赖进口或动物器官提取法微量生产自用的局面,为国内以透明质酸为基质的制剂产品发展打下了基础。     

提取法生产透明质酸

简要介绍了透明质酸的应用,着重介绍了它的提取法生产方法。     

兽疫链球菌NW-162发酵生产透明质酸的研究

在摇瓶中进行了兽疫链球菌诱变株NW-162发酵生产透明质酸的工艺研究,通过正交实验优化了最佳培养基组成,并考察了发酵过程中发酵温度、培养时间、pH值、装料系数等条件对该菌株发酵生产透明质酸的影响。实验表明:碳源及氮源对发酵过程影响最显著,优化所得最佳培养基组成为:葡萄糖40 g/L,复合氮源20 g/L,MgSO42g/L,钠盐3 g/L;在36℃、pH值7.0、装料系数为0.4的工艺条件下,发酵至27—30 h时达到最优发酵效果,收率可达0.464 g/L,比优化前提高2倍。     

透明质酸发酵过程控制的研究

进行了兽疫链球菌NW-162高密度发酵HA的工艺研究,通过优化了发酵过程中不同饱和度的溶解氧和不同PH调控方法对该菌株发酵生产透明质酸的影响。试验表明:采用30%饱和度的溶解氧和在发酵过程的0～30小时,调pH 7.2,发酵后期调pH 6.8的调控方法,OD660可达0.84,透明质酸产量为0.532 g/L。在此条件下,有利于细胞生长和产物表达,降低乙酸等有害代谢副产物积累。     

透明质酸发酵过程控制的研究

进行了兽疫链球菌NW-162高密度发酵HA的工艺研究,通过发酵过程中不同饱和度的溶解氧和不同pH调控方法对该菌株发酵生产透明质酸的影响进行了研究。实验表明,采用30%饱和度的溶解氧和在发酵过程的0~30 h,调pH 7.2,发酵后期调pH 6.8的调控方法,OD660可达0.84,透明质酸产量为0.532 g/L。在此条件下,有利于细胞生长和产物表达,降低乙酸等有害代谢副产物积累。     

透明质酸特性及其制备和应用概述

对透明质酸的存在范围、化学结构、理化性质、生理作用、生产方法进行了介绍,并综述在医药、化妆品以及保健食品等领域的应用。     

发酵法生产甘油的发展趋势

发酵法是继皂化法、化学合成法之后的第三种甘油(丙三醇)生产方法.耐渗透压酵母合成丙三醇的方法是国际领先的技术,与一般发酵法相比,该方法是在需氧而不是微氧或厌氧下生长;不需要加入转向剂;酵母可在较高的糖浓度生长发酵;糖的转化率可达到60%.我国近20年来甘油年产量始终在3万t左右,进口量也是3万t上下,我国是丙三醇缺口大国.大量增产的皂化甘油将对发酵法生产的甘油形成竞争,若将发酵甘油精制成医药级,利润将比较可观,竞争的形势将趋于良好.     

透明质酸的应用及生产

透明质酸具有特殊的生理作用、独特的流变学性质和极强的保湿能力,在化妆品工业、医学研究、临床治疗等领域有着广泛的应用.本文综述了透明质酸的制备方法及应用方面的进展.     

透明质酸的产需情况及市场分析

介绍了透明质酸的性能、生产方法、用途和市场情况。透明质酸(HA)是近年来较为热点的生化产品之一,由于具有优良的保湿、润滑和生物相容性能,被应用于日化、医药、保健食品等领域。目前,全球透明质酸的年生产能力达到20t/a,2006年国内发酵法透明质酸的生产厂家达到8家,年生产能力约8t/a,大约40%的产品出口美国、日本等地。     

过滤法分离纯化透明质酸

针对透明质酸的分离纯化,提出了用过滤法分离纯化透明质酸的工艺. 首先以20 g/L的溶解浓度将透明质酸粗品溶于去离子水中,并加入硅藻土作为吸附剂,调节溶液pH至4.6~4.8;然后采用硅藻土过滤、滤板过滤、超滤,用乙醇结晶后可得葡萄糖醛酸含量高达44.2%的透明质酸. 该工艺已成功应用于工业生产,所得产品的葡萄糖醛酸含量达47.3%,蛋白质含量为0.01%,相对分子量可达110万,收率高达90.5%.     

透明质酸精品的研制

以鸡冠为原料,在５８～６０ ℃下加入消化酶水解６～９ ｈ,４５ ℃下胰酶水解１０ ～１１ ｈ,乙醇沉淀得粗品,粗品经链霉蛋白酶水解２４ ｈ,采用二次沉淀法可得精制的透明质酸,提取率可达１－３％ 。     

己二酸二酰肼交联透明质酸薄膜的制备及性能研究

利用己二酸二酰肼(ADH)作为交联剂,对HA分子进行化学修饰,制备出HA-ADH凝胶薄膜。利用差示扫描量热仪(DSC)和红外光谱(FTIR)对交联产物HA-ADH的结构进行表征,证实了交联反应的发生。当HA与ADH质量比为1∶8时,薄膜的性能最好。通过对HA-ADH薄膜的皮肤刺激性试验进行考察,发现经交联后的HA-ADH薄膜具有良好的生物相容性。     

透明质酸在电-膜分离过程中的迁移规律

对电-膜分离技术用于透明质酸分离过程的可行性进行了初步研究. 着重研究了透明质酸在电场作用下的行为,并考察了料液中透明质酸浓度、溶液pH值、离子强度、电流强度等因素对迁移过程的影响. 结果表明,透明质酸透过膜的速度在一定范围内与料液的浓度和电流强度成正比,在pH 7~9范围内透明质酸的电迁移率基本保持恒定. 膜孔径对迁移速度没有明显影响,单位膜面积的产量也与电流密度成正比. 该方法能有效地将透明质酸与蛋白质分离.     

Directed Evolution of Hyaluronic Acid Synthase from Pasteurella multocida towards High‐Molecular‐Weight Hyaluronic Acid

Hyaluronic acid (HA), with diverse cosmetic and medical applications, is the natural glycosaminoglycan product of HA synthases. Although process and/or metabolic engineering are used for industrial HA production, the potential of protein engineering has barely been realised. Herein, knowledge‐gaining directed evolution (KnowVolution) was employed to generate an HA synthase variant from Pasteurella multocida (pmHAS) with improved chain‐length specificity and a twofold increase in mass‐based turnover number. Seven improved pmHAS variants out of 1392 generated by error‐prone PCR were identified; eight prospective positions were saturated and the most beneficial amino acid substitutions were recombined. After one round of KnowVolution, the longest HA polymer (<4.7 MDa), through an engineered pmHAS variant in a cell‐free system, was synthesised. Computational studies showed that substitutions from the best variant (T40L, V59M and T104A) are distant from the glycosyltransferase sites and increase the flexibility of the N‐terminal region of pmHAS. Taken together, these findings suggest that the N terminus may be involved in HA synthesis and demonstrate the potential of protein engineering towards improved HA synthase activity.