水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞HSC-T6增殖和胶原合成的影响

目的：观察水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞ＨＳＣ－Ｔ６增殖和胶原合成的影响,探讨其保护肝脏及抗硬化机制。方法：采用结晶紫染色法测定细胞增殖,＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果：水飞蓟宾（６．２５～５０μｇ／ｍｌ）以浓度依赖方式抑制血清、巨噬细胞条件培养液以及血小板源生长因子或转化生长因子β１诱导的细胞增殖和胶原合成。结论：抑制贮脂细胞增殖和胶原合成可能是水飞蓟宾保护肝脏抗硬化机制之一。     

钙调素拮抗对贮脂细胞胶原合成的影响

为探讨ＣａＭ在ＦＳＣ胶原合成和基因表达过程中的作用，并导找防治肝纤维化的新方法，本文应用＾Ｈ３－Ｐｒｏｌｉｎｅ掺入法观察了ＣＡ（Ｗ－７和ＡＣＮＳ２５μｍｏｌ／Ｌ）对ＦＳＣ细胞胶原代谢的影响；进一步应用斑点杂交结合图象分析的方法，对ＣＡ在胶原基因表达中的作用进行了半定量分析。实验发现，ＣＡ可以抑制ＦＳＣ胶原的合成和胶原基因的表达（方差分析，Ｐ〈０．０５）。结果表明ＣａＭ参与ＦＳＣ胶原代谢的调节，应用     

秋水仙素对大鼠肝细胞,贮脂细胞DNA及胶原合成的影响

秋水仙素对大鼠肝细胞、贮脂细胞ＤＮＡ及胶原合成的影响第二军医大学长征医院实验科范列英，孔宪涛，高春芳肝硬化动物模型研究表明秋水仙素能降低大鼠纤维化肝脏内胶原含量。［１］临床研究提示秋水仙素能减轻肝硬化患者肝脏病理损害程度、改善肝功能、延长患者寿命［２...     

实验化学性肝纤维化中贮脂细胞,Ⅳ型胶原的变化

通过皮下注射四氯化碳复制化学性肝纤维化大鼠模型，分别于注射后４、８、１２周处死动物，电电镜下观察贮脂细胞的变化，免疫组化法检测Ⅳ型胶原在肝内分布的变化。结果表明，贮脂细胞在肝纤维化过程中经历了一个动态的变化，逐渐拉长，变形，成为肌成纤维样细胞，并分泌大量胶原，Ⅳ型胶原是肝纤维化中形成毛细血管化的主要胶原，它在肝内的沉积构成肝硬化门脉高压的病理学基础。     

贮脂细胞对肝纤维化影响的研究进展

肝纤维化是各种慢性肝病后产生的一种共同反应。其主要特征是 :细胞外基质异常增生 ,形成瘢痕。贮脂细胞是产生基质的主要基地 ,在肝纤维化的形成中起关键作用。干预贮脂细胞增殖及胶原等细胞外基质的合成 ,已成为肝纤维化基础研究的热点 ,并已取得了很大的进展 ,现就贮脂细胞影响因素 ,综述如下。1　细胞因子细胞因子又称免疫介质 ,是一类单核巨噬细胞、淋巴细胞等分泌的多肽物质 ,这些多肽物质调节着淋巴细胞的免疫应答反应 ,并对其他细胞有重要影响。近年来 ,细胞因子对贮脂细胞影响的报道较多。1 1　转化生长因子 β(ＴＧＦ β)　ＴＧ…     

贮脂细胞在大鼠实验性肝纤维化中的作用及机理研究

在用电镜、免疫组化对CCl_4诱发大鼠肝纤维化过程中的贮脂细胞、纤维粘连蛋白和Ⅲ型胶原的变化作了动态观察.结果表明,实验早期在坏死灶周围即有贮脂细胞增生,中期贮脂细胞增生达到高峰并形成主要由贮脂细胞的过渡型细胞和成纤维细胞组成的早期纤维间隔.晚期贮脂细胞数目基本降至正常,形成主要由成纤维细胞组成的纤维间隔,结合电镜观察结果,提示在肝纤维化过程中,贮脂细胞可向成纤维细胞分化,并具有合成胶原蛋白的能力.而纤维粘连蛋白则可能在趋化贮脂细胞和成纤维细胞,促进胶原合成等过程中具有一定的作用.     

川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖的抑制作用

目的观察活血化瘀中药的有效成份川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖的作用。方法经传代培养,绘制肝星状细胞HSC-T6的细胞生长曲线,并计算其细胞群体倍增时间和克隆形成率等基本的细胞生物学参数;应用MTT比色法测定HSC-T6细胞增殖及评价药物对细胞增殖的作用。结果HSC-T6细胞成活率较高,细胞在指数增殖期的细胞群体倍增时间为10.57h,克隆形成率为82.4%。川芎嗪在10-9～10-4mol/L浓度范围之内,抑制HSC细胞增殖作用呈剂量依赖性,与对照组相比均具有显著性差异(P<0.05)。苦参碱在10-8～10-4mol/L浓度范围之内,抑制HSC细胞增殖作用呈剂量依赖性,与对照组相比均具有显著性差异(P<0.05)。结论川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖具有抑制作用,呈剂量依赖性。     

核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响

目的：探讨核心蛋白聚糖（ｄｅｃｏｒｉｎ）在肝纤维化形成机制中的作用。方法：在正常人肝细胞株Ｌ－０２及大鼠肝星形细胞株ＨＳＣ－Ｔ６体外培养体系中,分别加入不同质量浓度（０．０１,５,１０μｇ／ｍｌ）ｄｅｃｏｒｉｎ共培养不同时间后,进行细胞计数以及＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入量测定。结果：实验组经０．０１μｇ／ｍｌ ｄｅｃｏｒｉｎ作用４ｄ或６ｄ后,ＨＳＣ－Ｔ６和Ｌ－０２细胞增殖数量以及＾３Ｈ－Ｔ     

阿魏酸钠对大鼠缺血心肌tTG表达的影响

目的：探讨组织型转谷氨酰胺酶（tTG）在大鼠缺血心肌的表达及阿魏酸钠（SF）对其表达治疗的影响。方法：60只大鼠随机分为12 组,每组5只：正常对照组;模型组包括注射盐酸异丙肾上腺素（Iso）2 h、4 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、1周及3周组;贝那普利（Bena）阳性对照组;SF治疗组。除正常对照组外,其他各组大鼠均皮下注射 Iso (15 mg·kg^-1);阳性对照组同步注射贝那普利;SF治疗组同步注射SF。并于给药后对应时间取大鼠心脏,采用免疫组织化学法及RT-PCR方法检测各组大鼠心肌组织中tTG的表达。结果：注射Iso 2 h后,大鼠心肌组织中tTG表达较正常对照组增加,但差异无显著性（P>0.05）;随着注射Iso时间的延长,3周达到高峰,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.01）。tTG mRNA表达量在24 h达到高峰,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.01）;自48 h后其表达逐渐下降,但与正常对照组比较差异仍有显著性（P<0.05）。SF治疗组tTG的表达量降低,其基因表达亦明显减少,与Iso组比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）。结论：在大鼠心肌缺血模型中,心肌组织tTG表达增加,加速了心肌缺血的进程;SF抑制tTG的表达,可降低心肌缺血的进程。     

黄颜木素对HSC-T6细胞增殖和胶原合成的影响

目的：研究黄颜木素对激活的永生型大鼠肝储脂细胞--HSC-T6细胞增殖和胶原合成的影响。方法：细胞增殖采用结晶紫染色法检测,胶原合成采用3H-脯氨酸掺入法分析。结果：黄颜木素（6.25-50.00μmol/L）以剂量依赖方式显著抑制血小板源生长因子(PDGF)刺激的HSC-T6细胞增殖,并抑制转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的细胞内胶原合成。结论：黄颜木素具有抑制激活的肝储脂细胞增殖和胶原合成的作用。     

阿魏酸钠对肾大部切除大鼠肾脏保护作用的研究

目的探讨阿魏酸钠对5/6肾切除大鼠肾脏病变的保护作用.方法大鼠随机分为4组,假手术组(Sham组),肾切除组(NX组),NX+阿魏酸钠组(SF组),NX+依那普利(E组).8周后检测大鼠血压、24h尿蛋白定量、血肌酐、BUN,肾皮质内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)等,观察肾组织病理改变,并应用RT-PCR的方法检测肾皮质内TGF-β1 mRNA的表达;Western蛋白印迹方法检测TGF-β1蛋白质的表达.结果术后大鼠出现明显的尿蛋白[(201.2±4.1)mg/24h,肾皮质ET-1含量显著升高,且有明显的肾小球硬化,而阿魏酸钠和依那普利均能减少尿蛋白[阿魏酸钠(78.1±3.1)mg/24h,依那普利(65.9±6.3)mg/24h,与假手术组比,P＜0.01],减少肾皮质ET-1含量和肾小球硬化指数.肾大部切除后肾皮质TGF-β1mRNA及其蛋白的表达明显升高,用药组上述指标明显降低(SF组和E组与NX组相比,P＜0.01).结论在5/6肾大部切除模型中,阿魏酸钠对5/6肾大部切除大鼠肾脏有明显的保护作用,其机制可能其减少肾脏ET-1的生成,抑制TGF-β1的表达有关.     

阿魏酸钠治疗慢性肾小球肾炎30例临床观察

目的: 观察阿魏酸钠治疗慢性肾小球肾炎的疗效。方法: 将56例慢性肾小球肾炎患者随机分为治疗组30例,应用阿魏酸钠治疗,对照组26例应用肌苷及维生素B₆。21天后评价疗效。结果: 两组疗效、症状消失时间(除血尿外)、血浆比黏度、24 h尿蛋白定量、内生肌酐清除率(Ccr)和血肌酐(Scr)差异均有显著性(P<0.05~P<0.01)。结论: 阿魏酸钠可改善血液高凝状态,减少蛋白尿,降低血压,减少血管内皮损伤,改善慢性肾小球肾炎预后,对肾功能有一定保护作用。     

阿魏酸钠干预对Rho/Rock信号通路的影响及其对肝脏的保护作用

［摘 要］ 目的：探讨阿魏酸钠(SF)干预后对Rho/Rock信号通路相关蛋白表达及肝脏的影响,阐明其对脏器的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠20只,分为正常对照组、模型组、阳性药组及SF干预组。除正常对照组外,其余组大鼠注射盐酸异丙肾上腺素（Iso）15 mg/kg诱发大鼠心肌纤维化模型;稳定2 d后,除模型组外,其余2组给予SF和贝那普利。利用Masson染色分析给予SF后心肌胶原的含量变化;RT-PCR法分析Rho A和Rock mRNA表达;采用免疫组织化学染色分析心肌Rock蛋白表达;拉曼光谱分析肝脏的损伤。结果：与正常对照组比较,注射Iso后3周,Rho A和Rock mRNA表达即有所增加 (P<0.01);给予SF和贝那普利后,Rho A和Rock基因和蛋白表达水平较模型组明显降低(P<0.01);拉曼光谱分析结果显示,给予SF后大鼠肝脏组织的峰位较模型组向右移动1个单位,趋近正常对照组峰位。结论：SF可能通过阻断Rho/Rock信号通路进而起到抑制纤维化的作用,同时又起到肝脏保护作用。     

青蒿琥酯对人源肝星状细胞LX-2增殖、胶原产生以及KLF6表达的影响

目的：探讨青蒿琥酯（Art）对人源肝星状细胞（HSCs）LX-2增殖的影响以及其抗肝纤维化的作用机制。方法：将肝星状细胞LX-2分为对照组和实验组,对照组为细胞培养液,实验组为不同浓度的青蒿琥酯。应用MTT法检测青蒿琥酯对细胞增殖的影响,比色法检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）活性,酶消化法测定羟脯氨酸（Hyp）含量,Westeinblotting法测定青蒿琥酯对HSCs内KLF-6蛋白表达的影响。结果：与对照组相比,青蒿琥酯能抑制肝星状细胞LX-2的增殖（P〈0．01）,且呈剂量-效应和时间-效应关系;青蒿琥酯各浓度组LDH活性与对照组比较,无显著性差异（P〉0．05）;青蒿琥酯能降低肝星状细胞LX-2中Hyp含量（P〈0．01）,且呈剂量-效应关系,并能降低KLF6蛋白的表达（P〈0．01）。结论：青蒿琥酯对人源肝星状细胞LX-2有明显的抑制作用,其作用机制是降低胶原的生成以及KLF6蛋白的表达减少,进而抑制肝纤维化的发生。     

川芎嗪对内毒素刺激肝星状细胞增殖和胶原表达的影响

目的 观察川芎嗪对内毒素刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和胶原表达的影响,探讨川芎嗪抗肝纤维化的作用机制.方法 于内毒素中刺激大鼠HSC的基础上加川芎嗪分组培养;并采用MTT法检测川芎嗪对HSC生长增殖的抑制作用,免疫细胞化学染色法观察HSC α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,同时采用ELISA法检测其上清液Ⅰ、Ⅲ型胶原水平.结果 川芎嗪对内毒素刺激的HSC增殖有抑制作用,能下调活化HSC α-SMA的表达,对HSC Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌也有明显抑制作用,并呈剂量依赖性.结论 川芎嗪能抑制内毒素刺激的HSC活化增殖和分泌胶原,为探索川芎嗪抗肝纤维化的分子机制提供了实验依据.     

阿魏酸钠对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:探讨阿魏酸钠对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法:SD大鼠45只,分为正常对照组、糖尿病对照组及糖尿病治疗组。各糖尿病组以四氧嘧啶腹腔内注射制成糖尿病模型。治疗组大鼠给予给予阿魏酸钠110mg/(kg·d)灌胃,1次/d,共12周。实验结束后经股动脉放血处死大鼠,取肾脏行光镜和电镜检查,并进行图像分析,同时行血糖、血脂、肾功能、24h尿蛋白排泄量、肾质量/体质量、肾组织糖基化产物测定。结果:与糖尿病对照组比较,治疗组大鼠血甘油三酯、总胆固醇、肾质量/体质量、24h尿蛋白排泄量以及肾脏组织蛋白糖基化产物水平均有不同程度的降低(P<0.05)。与正常对照组比较,光镜检查显示糖尿病对照组大鼠肾小球截面积明显增大(P<0.01),系膜区基质增生扩大;肾小球硬化明显,平均肾小球硬化指数明显增加(P<0.01);电镜显示糖尿病对照组大鼠肾小球基底膜不均匀增厚,并伴有广泛的肾小管上皮细胞的髓样变性及胞浆空泡化变性。治疗组上述病变明显减轻(P<0.01)。结论:阿魏酸钠可改善糖尿病大鼠肾脏结构,防止系膜区扩大和基底膜增厚,有显著抗肾小球纤维化的作用。