HPLC测定还原型谷胱甘肽的血浆浓度

 目的建立测定人血浆中还原型谷胱甘肽(GSH)浓度的HPLC方法。方法采集血样,立即注入预加衍生化试剂DTNB 的真空采血管中,25min内分离血浆。以青霉胺为内标,10%高氯酸沉淀蛋白,上清液进样20μL。色谱柱为SUPELCOSIL^TM LC-18(150mm×4.6mm,5μm) 流动相为0.05mol·L^-1醋酸钠缓冲液(pH5.6)-甲醇(100:8),流速1 mL·min^-1 检测波长320nm 结果在2～200μmol·l^-1内,标准曲线线性良好,r=0.9997(n=6)。检测限为1μmol·L^-1。日内误差和日间误差均在10%以内低、中、高3个浓度的质控样品回收率均在95%～105%之间。结论该方法准确、快速、精密,可用于GSH的人体药动学研究。     

HPLC测定血浆中葛根素

 目的:建立血浆中葛根素的高效液相色谱测定方法，为含葛根素中药复方体内代谢研究提供基础。方法:血浆用0.58 mol· L^-1高氯酸沉淀蛋白质，采用Shimpack CLC-ODS柱(5μ, 150 mm x 4.6 mm )，预柱为YWG-C₁₈H₃₇,流动相为甲醇-5 . 625 mol· L^-1醋酸-水(25:3:72)，流速为1.00 ml·min^-1，检测波长为247 nm。结果:该法回收率91.0%，方法重现性RSD=0.93%(n=6)。结论:本文建立的高效液相色谱测定方法为动物体内葛根素的测定提供了一个可靠的方法。     

高效液相色谱荧光检测法测定人体内血浆中双嘧达莫的浓度

目的:建立一种简便、快速的高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定人体内血浆中双嘧达莫的浓度。方法:采用Kro-masil C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温30℃,流动相为0.02 mol.L-1磷酸二氢钾(含0.04%的三乙胺)-乙腈(39:61),流速为1.0 ml.min-1,荧光检测激发波长290 nm,发射波长485 nm。氟伐他汀为内标。结果:双嘧达莫在10～4000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9997)。日内和日间RSD%均低于10%。结论:该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于双嘧达莫的血药浓度监测及药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定瑞巴匹特血浆浓度

 目的：建立测定血浆内瑞巴匹特浓度的高效液相色谱法。方法：Kromasil C₁₈色谱柱，甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾(55∶45，pH3.0)为流动相，并由序贯单纯形法确定此为最佳配比点，流速1.0 ml·min^-1，检测波长230 nm。结果：瑞巴匹特在15～1200 μg·L^-1范围内,血浆药物浓度C与色谱峰高H呈现良好线性相关，血浆中瑞巴匹特平均相对回收率为（97.5±0.5）%(n＝5),平均绝对回收率为（90.3±1.8）%(n＝5)；平均日内和日间RSD分别为4.68%和5.66%(n＝5)；方法对血浆瑞巴匹特最低检出浓度为2 μg·L^-1。结论：本方法适于血浆中瑞巴匹特的测定。     

HPLC检测人血浆及胃液的抗坏血酸

 目的：测定人血浆及胃液的抗坏血酸。方法：采用高效液相色谱紫外检测器测定了经冷冻干燥处理的人血浆及胃液中抗坏血酸，分析柱：PE CRC₁₈(3μm,3mm×3.3cm)，流动相0.005mol·L^-1KH₂PO₄(pH=3.11)，检测波长245nm，流速0.5ml·min^-1。结果：该法回收率(95.05±3.3)%，平均日内RSD<2.7%和日间RSD<4.1%。结论：采用冷冻干燥技术处理生物样品中抗坏血酸，为临床提供了一个可靠的分析方法。     

HPLC测定人血浆中苯巴比妥、苯妥英、卡马西平浓度

目的建立测定人血浆中苯巴比妥、苯妥英、卡马西平浓度的高效液相色谱方法.方法血浆样品用二氯甲烷萃取.采用Shim-pack CLC-CN色谱柱,以正己烷-无水乙醇-甲醇(94.5:5:0.5)为流动相,紫外检测波长为220 nm,以地西泮为内标.结果苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的线性范围均为0.5～80.0μg·mL-1(r≥0.9994),方法回收率分别为100.69%,99.66%及101.01%.日内和日间RSD均不大于5.9%.结论本方法灵敏、特异性强、准确、简便易行,适用于苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的治疗药物监测.     

HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

 目的建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究。方法以氟康唑为内标,血浆样品经预处理后,选用HypersilODS₂色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(49∶51)为流动相,流速1.0mL·min^-1,室温260nm处测定。结果黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L^-1,最低定量浓度为5μg·L^-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均<12%。黄豆苷元药动学参数t_1/2为(3.863±0.983)h,ρ_max(192.261±115.077)μg·L^-1,t_max(0.900±0.409)h,AUC_0～12(490.839±162.855)μg·h·L^-1,AUC_0～∞(535.279±163.190)μg·h·L^-1。结论本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究。     

反相离子对色谱法测定人血浆中芬太尼浓度

 目的：建立测定人血浆中芬太尼(Fen)浓度的HPLC测定法，为临床Fen的药动学研究提供科学的分析技术。方法：Fen测定以μ-Bondapak-C₁₈为固定相,水(含0.005mol·L^-1.辛烷磺酸钠和0.01mol·L^-1磷酸) 乙腈(69∶31)为流动相，以阿芬太尼为内标物，紫外检测波长为220nm。结果：验证实验表明，Fen与内标物分离良好，血浆中Fen的平均回收率为99.97%，日内、日间的RSD值均小于8%。血药浓度在10ng·ml^-1～200ng·ml^-1范围内与峰面积呈线性关系，r=0.9996。本方法最低检测浓度为5ng·ml^-1。结论：本方法具有较高的准确度，方法灵敏，专一性好，适用于临床Fen血药浓度的测定。     

HPLC测定血浆中尼美舒利浓度

 目的：建立测定血浆中尼美舒利(Nim)的反相高效液相色谱法。方法：血浆样品用甲醇沉淀蛋白，经酸化后加甲苯提取，氮气挥干，加流动相溶解进样。以YWG-C₁₈柱，甲醇-0.05mol·L^-1磷酸二氢钾(55∶45)为流动相,pH5.02，甲苯磺丁脲为内标，在波长230nm处检测。结果：在0.26μg·ml^-1～10.8μg·ml^-1浓度范围内，峰面积比与浓度呈良好线性关系，r=0.9995。最低检测限为0.2μg·ml^-1，方法重现性好，方法回收率为86.0%～92.2%，萃取回收率为72.2%～88.4%。结论：用本方法测定8例单剂量po100mg Nim的血药浓度，结果满意。     

高效液相色谱法测定人血浆中依托泊苷浓度

 目的 建立人血浆中依托泊苷的HPLC测定方法。方法 取样本100 μL,以替尼泊苷为内标,二氯甲烷液液提取,有机相室温下氮气吹干,流动相复溶后加正己烷,振荡离心后取下层进样分析。色谱柱为Shim-pack CLC-ODS 柱（4.6 mm×150 mm,5 μm;流动相为甲醇-水=60∶40;流速1.0 mL·min-1;激发波长为240 nm,发射波长为326 nm。结果 在0.05~50 mg·L-1内线性良好（r=0.999 2,n=7。低（0.10 mg·L-1、中（2.00 mg·L-1、高（30.00 mg·L-13个浓度质控样品的批内变异（RSD为3.07%~6.79%,批间变异（RSD为2.19%~5.51%,方法学回收率为100.15%~103.58%。结论 本方法灵敏度高,简便快捷,为开展依托泊苷的人体药动学研究提供了基础。     

高效液相色谱法同时测定双嘧达莫和阿司匹林的血药浓度

 目的建立高效液相色谱法测定血浆中双嘧达莫及阿司匹林的浓度。方法 色谱柱:Hypersil BDS(200 mm×4.6 mm5μm,大连依利特);流动相:乙腈-甲醇-水-磷酸-二乙胺(50:250:200:0.3:0.1):流速:0.9 mL·min^-1;检测波长:288 nm。结果阿司匹林、双嘧达莫在0.1～16μg·mL^-1浓度内进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系。阿司匹林r=0.994 2,双嘧达莫,r=0.9947,回收率分别为101.21％,100.35％,精密度测定RSD小于1.78％。阿司匹林及双嘧达莫的t_max分别为1.75和3.33h,c_max分别为7.71,3.68μg·mL^-1,t_1/2分别为2.71,3.13 h。结论该方法灵敏、准确、经济。用此法测定了家犬口服复方双嘧达莫缓释胶囊的血药浓度并计算了药动学参数。     

高效液相色谱法分析小鼠血浆中贝母乙素及其药代动力学研究

 目的 研究小鼠腹腔注射贝母乙素的药代动力学。方法 反相液相色谱法定量分析。血浆样品经乙醚提取后,柱前用2,4-二硝基苯肼衍生,分析色谱柱：Hypersil C₁₈,流动相：乙腈-乙酸铵(0.1 mol·L^-1,pH=5)(39∶61),UV375 nm检测。结果 在0.114～1.26 μg·ml^-1区间,标准曲线线性方程为Y=0.126X-0.0013,相关系数r=0.9923,平均日间、日内精密度 RSD 分别为5.85%和5.30%。平均相对回收率为96.5%。结论 小鼠注射贝母乙素(1.5 mg·kg^-1)的血药浓度-时间曲线符合一室开放模型,t_1/2为0.84 h,c_max为0.87 μg·ml^-1,t_max为0.15 h。     

高效液相色谱法和生物测定法用于测定血清中环丙氟哌酸浓度的比较

 采用HPLC测定血清中环丙氟哌酸的浓度。流动相为14％甲醇，8％乙腈，78％磷酸盐缓冲液（其中含0．3％氢氧化四丁基铵，0．02mol／L磷酯二氢钾，pH＝3．0±0．02）。采用反相色谱柱，277nm紫外检测。二氯甲烷提取，以二氟沙星为内标物，血样中药物检测限是10ng／ml，回收率98．8％，日内相对标准偏差是3．5％，日间相对标准偏差是1．38％。通过兼用HPLC和生物检定法测定健康受试者的血清药物浓度，对两种分析方法进行比较，将用两种方法测定的结果（n＝80）进行线性回归，直线的斜率是0．91，相关系数是0．959（P＜0．01）。     

高效液相色谱法和生物测定法用于测定血清中环丙氟哌酸浓度的比较

采用ＨＰＬＣ测定血清中环丙氟哌酸的浓度。流动相为１４％甲醇，８％乙腈，７８％磷酸盐缓冲液（其中含０．３％氢氧化四丁基铵，０．０２ｍｏｌ／Ｌ磷酯二氢钾，ｐＨ＝３．０±０．０２）。采用反相色谱柱，２７７ｎｍ紫外检测。二氯甲烷提取，以二氟沙星为内标物，血样中药物检测限是１０ｎｇ／ｍｌ，回收率９８．８％，日内相对标准偏差是３．５％，日间相对标准偏差是１．３８％。通过兼用ＨＰＬＣ和生物检定法测定健康受试者的血清药物浓度，对两种分析方法进行比较，将用两种方法测定的结果（ｎ＝８０）进行线性回归，直线的斜率是０．９１，相关系数是０．９５９（Ｐ＜０．０１）。     

应用高效液相色谱法对兔玻璃体中盐酸川芎嗪含量的测定

目的　了解高效液相色谱 (highperformanceliquidchromatography,HPLC)技术在兔直流电盐酸川芎嗪注射液离子导入后在测定玻璃体盐酸川芎嗪含量方面的应用。方法　色谱条件是色谱柱为ODSC1 8不锈钢柱 (1 50mm× 4 6mm ,5μm) ;流动相为甲醇∶水 =40∶60 ,1 0 0 0ml中含十二烷基磺酸钠 (SDS) 1g ,磷酸二氢钾 0 6g,冰醋酸 1ml;流速为 1 0ml·min- 1 ;检测波长为2 80nm ;室温操作。结果　在 0 54～ 1 7 2 8μg·ml- 1 范围内 ,峰面积与浓度呈良好线性关系 ,r =0 9994;最低检测浓度为 0 0 8μg·ml- 1 ;平均回收率为 92 542 % ;日内和日间精密度均小于 1 0 %。结论　建立专属、简单、快速和精确的高效液相色谱法可用于对盐酸川芎嗪在兔玻璃体内药代动力学的研究。     

HPLC法测定洁肤液中大黄素的含量

目的：建立洁肤液中大黄素的含量测定方法。方法：采用RP-HPLC法进行测定,色谱柱为SHIMADZU C18（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇-0.1%磷酸（85∶15）;检测波长为254nm;柱温为25℃。结果：洁肤液中大黄素的线性范围为3.30~33.0μg/mL,r=0.9999,平均回收率为99.05%,RSD值为0.95%。结论：该方法简便,结果准确,重现性好,可作为洁肤液的质量控制方法。     

对测定饱和脂肪酸含量的高效液相色谱－化学发光系统的探讨

目的：探讨测定脂肪酸含量的高效液相色谱－化学发光系统及其最佳化的条件。方法：将用荧光试剂衍生化后的脂肪酸用高效液相色谱－化学发光检测法分析。结果：在ＴＣＰＯ－Ｈ２Ｏ２－咪唑化学发光系统的最佳化条件下，测得脂肪酸Ｃ１６，Ｃ１８，Ｃ２０的检测限分别为１２，１８，４４ｆｍｏｌ（１０－１５ｍｏｌ）。结论：建立的测定脂肪酸含量的高效液相色谱－化学发光检测法的灵敏度极高，已达ｆｍｏｌ级     

兔眼房水及玻璃体中川芎嗪含量的高效液相色谱法测定

目的用高效液相色谱法测定兔眼房水、玻璃体中川芎嗪的含量,了解川芎嗪注射液直流电离子导入后的有效成分在兔眼房水和玻璃体中的吸收、分布、代谢及排泄情况。方法色谱柱为Waters公司symmetryC18(5μm,4.6×150 mm),流动相:甲醇∶水=40∶60,1000 ml中含SDS0.9130 g,磷酸二氢钾0.6770 g,冰醋酸1 ml;检测波长:294 nm,流速:1 ml/min,室温操作。结果在1.25~36μg/ml范围内,房水中川芎嗪平均回收率均在80%左右,日内精密度在5%左右,日间精密度在10%左右;在0.3125~10μg/ml范围内,玻璃体中川芎嗪平均回收率均在80%左右,日内精密度及日间精密度均在10%左右。结论当川芎嗪浓度在一定范围内时,兔眼房水和玻璃体中川芎嗪峰面积与浓度呈良好线性关系。     

高效液相色谱法对胆宁片中金钱草含量的测定

目的:完善胆宁片质量标准。方法:采用高效液相色谱法对胆宁片中主药金钱草的成分槲皮素、山柰素进行含量测定。结果:槲皮素进样量在6～80μg范围内与峰面积呈良好线性关系:(r=0.9999)(n=6),平均回收率为97.37%,RSD=0.62%(n=6);山柰素在10.8～154.4μg范围内与峰面积呈良好线性关系:(r=0.9994)(n=6),平均回收率为97.94%,RSD=0.80%(n=6)。结论:完善了胆宁片的质量标准。该方法精确,重现性好,操作简便,可以作为胆宁片质量控制标准。