广西吸毒成瘾者丙型肝炎病毒的感染及其分子生物学研究

选择２８３名静脉吸毒者（ＩＶＤＡｓ）和１２１名献血员（ＢＤｓ）进行Ａｎｔｉ－ＨＣＶ、ＨＣＶ血清基因型、ＨＣＶ基因型和ＨＣＶｃＤＮＡ序列的检测。结果表明，ＩＶＤＡｓ和ＢＤｓ的Ａｎｔｉ－ＨＣＶ检出率分别为９１．１７％和０．８３％；ＩＶＤＡｓ的ＨＣＶ血清基因型为１型８１．８５％（２２１／２７０），２型１．４８％（４／２７０），ｌ＋２型０．３７％（１／２７０），不能定为１和／或２型１６．３０％（４４／２７０）；ＨＣＶ基因型为１ａ型：２８．６％（３４／１１９）；ｌｂ型：３８．７％（４６／１１９）；２ａ型１０．９％（１３／ｌ１９）；２ｂ型１４．３％（１７／ｌ１９）；３ａ型２６．９％（３２／１１９）；３ｂ型４０．３％（４８／１１９）；６ａ型８．４％（１０／１１９）；６ｂ型２６．７％（３１／１１９）；其中１４．３％的病例有４～５种不同基因亚型的混合感染现象。     

用RT—PCR法分析合肥地区HCV基因型

应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对合肥地区的１９５例病人的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ检测及基因型分析。结果显示，８０例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中，７０例（８７．５％）为Ⅱ／１ｂ型ＨＣＶ感染，７例（８．８％）为Ⅲ／２ａ型，３例（３．７％）为Ⅱ和Ⅲ型混合感染，未发现Ⅰ／１ａ和Ⅳ／２ｂ型ＨＣＶ感染。     

世界银行贷款中国疾病预防(卫生Ⅶ)项目省免疫接种率基线调查报告

在世界银行贷款中国疾病预防（卫生Ⅶ）项目１０个省（自治区，下同），采用世界卫生组织（ＷＨＯ）推荐的分层多阶段按容量比例概率抽样的方法（ＰＰＳ），共抽取了８５４个县（区、市，下同）１１９７个初级抽样单位，调查城区和高、中、低收入农村１９９４年７月１日～１９９５年６月３０日出生的儿童８４１４人，在１２月龄内完成卡介苗（ＢＣＧ）、口服脊髓灰质炎（脊灰）疫苗（ＯＰＶ）、百白破混合制剂（ＤＰＴ）、麻疹疫苗（ＭＶ）、乙型肝炎疫苗（ＨＢＶ）的接种情况。结果显示，建证率８１．０％，建卡率９６．８％，ＢＣＧ、ＯＰＶ、ＤＰＴ、ＭＶ接种率分别为９４．９％、８９．３％、８７．４％、８８．９％，四种疫苗全程接种率７９．６％，ＨＢＶ接种率３９．９％，调查时在场儿童卡疤率８４．１％。按照我国现行的儿童免疫程序，本次抽样调查的ＢＣＧ、ＯＰＶ１、ＤＰＴ１、ＭＶ及时接种率分别为３８．８％、４５．７％、５５．３％、５０．４％，接种ＯＰＶ１、ＤＰＴ１后有７２．４％～７５．６％的儿童能及时接种第２、３针。城区和高、中、低收入农村４个层次儿童的四种疫苗接种率和全程接种率、及时接种率、ＨＢＶ接种率、卡疤率、建证率、建卡率等指标均逐层下降     

三种危险因素的协同致肝癌作用

为分析黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在致人原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法、嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，检出率分别为６７．７％（２１／３１）、８８．２％（６０／６８）和１３．２％（９／６８）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为５８．１％（１８／３１），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％（６／６８），由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组，３种危险因素全部阴性。结果表明，３种危险因素均与人类肝癌直接相关，并且存在着协同致癌效应     

河南省某农村丙型肝炎病毒感染的随访研究

于１９９４年１月对河南省某农村进行了ＨＣＶ感染的横断面调查，并于其后第８和第１４个月进行了２次随访调查。结果表明，１９９４年１月该人群抗－ＨＣＶ阳性率为２６．６％（１６４／６９２），其中，有献浆史者抗－ＨＣＶ阳性率（８６．６％）显著高于无献浆史者（３．２％，Ｐ＜０．０１）；献浆次数、年限与抗－ＨＣＶ阳性率之间存在正效应剂量，反应关系（Ｐ＜０．０１）。随访期间，有献浆史者ＨＣＶ的新感染率（２２．６％）显著高于无献浆史者（０．２％，ＲＲ＝９５．０，Ｐ＜０．０１）；一方为抗，ＨＣＶ阳性的配偶的ＨＣＶ新感染率（１１．１％）较双方均为抗－ＨＣＶ阴性的配偶（３．５％）高３倍以上（ＲＲ＝３２２，Ｐ＞０．０５）；３名新感染者与其配偶（原为ＨＣＶＲＮＡ阳性）的ＨＣＶ基因型一致，且其中１名新感染者无经血暴露史，提示经性传播的可能性。该人群抗－ＨＣＶ年阴转率为１．０％，年阳转率为１．６％；２７．５％￣４１．６％的ＨＣＶ感染者伴有ＡＬＴ异常。结论：献血浆是当地人群ＨＣＶ感染的主要危险因素，并可能存在性传播。     

HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

应用非放射性探针检测HCMV感染的研究

应用地高辛配基标记ＨＣＭＶＤＮＡＪ片断为探针,采用斑点杂交试验检测唾液及尿液中ＨＣＭＶＤＮＡ。此方法的最低检测阈值为０．５ｐｇ,与ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、ＲｕＶ、ＤＮＡ无交叉反应。检测１７例患儿的唾液和尿液ＨＣＭＶＤＮＡ,其阳性率分别为５０％和１７．６％,唾液中ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率显著高于尿液;检测１３６对正常母婴配对唾液标本,ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率分别为４６．３％和９．６％,其相应血清用ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体,阳性率分别为２．２％和０％。此结果提示,同时检测唾液中病毒ＤＮＡ及血清中ＩｇＭ抗体,对临床及流行病学筛检试验判断是否有激活感染及感染的早、晚期有重要意义。     

河北省献血员HCV感染状况调查及筛查效果分析

６个献血村献浆血员抗－ＨＣＶ平均阳性率为 ４５．８２％（２０３／４４３），献全血血员为２．９７％（３１／１０４５）；３个省市级血站和 ４个县医院献浆血员抗－ＨＣＶ平均阳性率为 １７． ４５％（１８６／１０６６），献全血血员为１．１７％（１０／８５６），义务献血员为０．４９％（６／１２２３），抗－ＨＣＶ筛除率为２３．１％～９０．９％，平均７８．４％（１０９／１３９），抗－ＨＣＶ年阳转率７．２３％（６８／９４０）。本文结果表明，无论是开展抗－ＨＣＶ筛查前还是现在，献血（浆）交叉污染造成的ＨＣＶ感染都很严重，故应继续加强采供血管理和抗－ＨＣＶ筛查，大力提倡义务献血制度。     

柳州市急性散发性戊型肝炎病毒（HEV）部分核苷酸序列分析

应用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）法检测柳州市７例散发性戊型肝炎病人急性期血清,６例ＨＥＶＲＮＡ阳性（８５．８％）。对其中２份阳性ＰＣＲ产物纯化后,直接测定其核苷酸序列,并与ＨＥＶ墨西哥株（Ｍ）、缅甸株（Ｂ）、中国流行株ＣＨ１．１进行比较。该２株ＨＥＶ散发株与ＨＥＶ（Ｍ）、ＨＥＶ（Ｂ）、ＨＥＶＣＨ１．１的核苷酸同源性分别为８０．８％、９２．４％～９２．７％、９７．５％～９７．７％。结论,该２株ＨＥＶ散发株与ＨＥＶ（Ｂ）和ＣＨ１．１为同一亚型。     

河北省某农村人群乙型和丙型肝炎病毒感染的调查

报告河北省某农村人群ＨＢＶ与ＨＣＶ感染的调查结果。该人群ＨＢＶ总感染率为５５．２％，以１０￣１９岁组最高，为６７．１％；抗－ＨＣＶ阳性率为７．１％，以４０￣４９岁组最高，为２１．１％，１０岁以下和６０岁以上组无１例抗－ＨＣＶ阳性。ＨＢＶ感染具有明显家庭聚集性，ＨＣＶ感染无家庭聚集性。父母ＨＢｓＡｇ均阳性的子女，其ＨＢｓＡｇ阳性率（３２．６％）明显高于父母均阴性者（１５．６％），但父母抗－ＨＣＶ阳性     

Delivery methods to increase cellular uptake and immunogenicity of DNA vaccines

DNA vaccines are ideal candidates for global vaccination purposes because they are inexpensive and easy to manufacture on a large scale such that even people living in low-income countries can benefit from vaccination. However, the potential of DNA vaccines has not been realized owing mainly to the poor cellular uptake of DNA in vivo resulting in the poor immunogenicity of DNA vaccines. In this review, we discuss the benefits and shortcomings of several promising and innovative non-biological methods of DNA delivery that can be used to increase cellular delivery and efficacy of DNA vaccines.     

DNA聚合酶β对苯并[a]芘致DNA损伤修复的影响

目的揭示聚合酶β(polβ)的表达水平与苯并[a]芘(BaP)诱导的DNA损伤效应的关系。方法采用3种具有相同遗传背景的小鼠胚胎成纤维细胞polβ野生型(polβ+/+)、polβ缺陷型(polβ-/-)和野生型polβ高表达型(polβoe)作为模型细胞。首先用RT-PCR和Western blot鉴定3种细胞中polβ在mRNA和蛋白质水平的表达情况,然后通过MTT试验和单细胞凝胶电泳(彗星试验)观察BaP作用下3种细胞的存活率及DNA损伤和修复效应。结果3种细胞在polβmRNA和蛋白表达水平上存在明显差异,polβ-/-细胞中polβ基因缺失,而polβoe细胞中polβ基因则较野生型polβ+/+细胞高出2倍以上;BaP能诱导3种细胞DNA的损伤以及细胞存活率的降低;与polβ+/+细胞相比,polβ-/-细胞的IC50更低,DNA损伤更严重且更加不易修复;反之,polβoe细胞的IC50更高,DNA损伤效应更弱,DNA修复速率加快。结论polβ在修复外源性致癌物BaP导致的DNA损伤中发挥着重要的作用,polβ基因缺陷使细胞DNA修复能力降低,而polβ基因的高表达则能帮助细胞应对DNA损伤,在一定程度上对细胞的存活起到了保护作用。     

Vitamin C in Cultured Human (HeLa) Cells: Lack of Effect on DNA Protection and Repair

Aims: Dietary antioxidants, including vitamin C, may be in part responsible for the cancer-preventive effects of fruits and vegetables. Human intervention trials with clinical endpoints have failed to confirm their protective effects, and mechanistic studies have given inconsistent results. Our aim was to investigate antioxidant/ pro-oxidant effects of vitamin C at the cellular level. Experimental approach: We have used the comet assay to investigate effects of vitamin C on DNA damage, antioxidant status, and DNA repair, in HeLa (human tumor) cells, and HPLC to measure uptake of vitamin C into cells. Results: Even at concentrations in the medium as high as 200 μM, vitamin C did not increase the background level of strand breaks or of oxidized purines in nuclear DNA. Vitamin C is taken up by HeLa cells and accumulates to mM levels. Preincubation of cells with vitamin C did not render them resistant to strand breakage induced by H₂O₂ or to purine oxidation by photosensitizer plus light. Vitamin C had no effect on the rate of repair of strand breaks or oxidized bases by HeLa cells. However, vitamin C at a concentration of less than 1 μM, or extract from cells preincubated for 6 h with vitamin C, was able to induce damage (strand breaks) in lysed, histone-depleted nuclei (nucleoids). Conclusion: In these cultured human cells, vitamin C displays neither antioxidant nor pro-oxidant properties; nor does it affect DNA strand break or base excision repair.     

地高辛标记布氏杆菌544ADNA探针的制备及其应用

作者应用自构键的ｐＢＣ_４重组质粒，经Ｋｐｎｌ和ＢａｍＨ_１双酶切回收０．２２ｋｂ的Ｂｒ．ａｂｏｒｔｕｓ５４４ＡＤＮＡ片段，将此片段纯化后采用地高辛标记方法制备探针。点杂交结果表明：此探针检测布氏杆菌ＤＮＡ的灵敏度达５ｐｇ，对中国１９型布氏杆菌ＤＮＡ杂交出现强的杂交信号而对５种革兰氏阴性菌ＤＮＡ以及人白细胞ＤＮＡ没有产生杂交反应，具有特异性强、敏感性高、简便易行等特点。为进一步用于实验室诊断人、畜布氏杆菌病和流行病学的调查提供了有效的手段。     

对苯二酚与杂交中DNA的相互作用

目的 探讨在pH为7．42磷酸盐缓冲溶液中对苯二酚与DNA的相互作用。方法用循环伏安法、荧光光谱法、紫外光谱法、DNA分子杂交技术和量子化学方法进行检测。结果在DNA杂交过程中，对苯二酚与其作用后的荧光光谱。紫外光谱的吸收峰峰形以及强度改变较大，循环伏安法氧化峰正向移动，量化计算结果表明，对苯二酚位于磷酸基团和碱基近侧。结论在DNA杂交过程中对苯二酚与其以Ⅱ-Ⅱ化学键和静电结合为主。     

外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA实时定量PCR检测与体征及血细胞计数的相关性

目的 定量检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA含量，研究其与体征及皿细胞计数之间的相关性，并比较不同检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异。方法 以实时定量PCR（RQ-PCR）定量检测40份健康人静脉血标本，确定临床阳性检测限。31例发热患者共72份血标本同时进行常规细菌培养及大肠埃希菌DNA定量检测，比较两种检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异，两个取血时间点间大肠埃希菌DNA含量的变化，并计算大肠埃希菌DNA含量与体温、心率、白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间的相关性。结果 RQ-PCR定量检测大肠埃希菌DNA阳性率为52．78％（38／72），显著高于细菌培养阳性率2．78％（2／72）（P=0．000）。同一患者两个时间点血标本检测结果显示，静脉血中大肠埃希菌DNA在2～6小时内的升降变化达10～20倍。血中大肠埃希菌DNA含量与体温和心率之间均显著相关（P=0．000），相关程度中度密切（，值分别为0．565和0．546），与白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间无显著相关关系。结论 RQ-PCR检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌阳性率远高于血培养。血中大肠埃希菌DNA拷贝数变化速度较快。血细胞计数不能很好反映血中大肠埃希菌的含量，而体温心率的影响因素较多，因此RQ-PCR能更及时准确反映大肠埃希菌血症的严重程度，有助于对肠屏障损伤导致肠道细菌移位的动态程度或后果进行评估。     

哺乳动物体细胞核移植后核重编程研究进展

通过体细胞核移植技术获得重构胚胎,在卵母细胞内多种重编程因子的作用下,供体细胞核抹去分化状态,恢复全能性,这就是核重新编程的过程.在这个过程中供体核必须被正确激活与胚胎发育密切相关的基因,同时抑制与分化有关的基因.到目前为止,通过这项技术已获得多种哺乳动物的克隆后代,但克隆成功率低且存活个体大多表型异常.核重编程的不准确性可能是克隆后代存在高死亡率和发育异常的主要原因之一.综述了重编程中DNA甲基化、组蛋白乙酰化、X染色体失活以及基因印迹等的近期研究.     

蒽醌类抗肿瘤抗生素与DNA相互作用探究

目的探究蒽醌类抗肿瘤抗生素与DNA的相互作用以及研究的方法。方法采用光谱法,包括吸收光谱、荧光光谱、电化学法等考察蒽醌类抗肿瘤抗生素与DNA的相互作用后引起的光谱行为的改变。结果在紫外、可见光的测定中发现嵌插结合通常引起减色效应,使最大吸收波长向长波方向移动;在（牛血清白蛋白）BSA浓度一定的条件下,随着盐酸表柔比星浓度的增加,BSA的内源荧光强度有规律的降低（发射峰的峰位λem=344nm和峰形不变）;多柔比星的最大激发波长λex=478 nm,最大发射波长λem=596 nm,pH=3.0时激发光谱和发射光谱的荧光强度达到最大值。结论多柔比星与DNA的相互作用最明显,现在临床上使用最广泛。     

对氯苯酚与DNA的相互作用的研究

目的探讨对氯苯酚与DNA的相互作用。方法在0.05mol/LNa2HPO4-0.05mol/LNaH2PO4-0.10mol/LNaCl缓冲体系中(pH=7.30),研究对氯苯酚在核苷三磷酸修饰电极及DNA修饰电极上的电化学行为。结果双链DNA(dsDNA)可对氯苯酚的氧化峰正移0.032V,峰电流减小;但单链DNA(ssDNA)对对氯苯酚的峰电位改变较小,峰电流增大;对氯苯酚在三磷酸鸟苷(dGTP)、三磷酸胸苷(dTTP)和三磷酸胞苷(dCTP)修饰电极的氧化过程中于0.78V左右产生了新的氧化峰。结论dsDNA与对氯苯酚形成的∏∏共轭体系,但ssDNA的这种作用力较小;对氯苯酚在dGTP、dTTP和dCTP修饰电极的氧化过程中产生了新的加合物。     

肝豆状核变性基因8号外显子突变DNA分析方法的研究

目的对肝豆状核变性(又称Wilson病,WD)基因的突变热点外显子8进行MspⅠ酶切、DNA测序,进而对实验中的方法进行研究.方法对102 例病人和20例对照正常人提取基因组DNA,PCR扩增ATP7B第8号外显子,扩增产物进行MspⅠ酶切反应,并进行双向 DNA直接测序;讨论分析PCR扩增、MspⅠ酶切方法学上的改进,并对测序结果与临床表型做相关研究.结果102例WD病人,在反复多次改进实验方法后,发现35例存在MspⅠ酶切异常,测序示8号外显子Arg778Leu纯合突变,占所有WD病人的34.31%,其中 1例伴Leu770Leu多态性;对照组未检出突变.结论改进实验方法后发现WD突变热点8号外显子中Arg778Leu为主要突变形式,PCR-MspⅠ酶切反应可作为WD病人ATP7B8号外显子突变的筛选方法,直接测序是确定8号外显子突变位点的可靠方法.