角膜不同保存方法与术后免疫排斥反应相关性的实验研究

目的:探讨角膜保存时间与术后免疫排斥反应的关系,检测角膜植片的细胞间黏附因子1(ICAM-1)表达及房水、血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量与角膜移植排斥反应的关系。方法:先选用Wistar大鼠15只30只眼随机分3组(每组10只眼),分别用不同方法保存,即:湿房保存12h,中期保存液保存7d,深低温长期保存12周。再选用SD大鼠30只30只眼(右眼)作为受体,分别使用上述不同保存方法的Wistar大鼠眼作为供体建立角膜移植排斥反应动物模型。将SD大鼠随机分3组每组10只眼:Ⅰ组(异体湿房保存组);Ⅱ组(异体中期保存组);Ⅲ组(异体长期保存组)。观察各组角膜移植术后排斥反应指数(RI)、植片存活时间(MST)和植片的病理变化。HE染色及免疫组化染色观察免疫排斥反应的程度及ICAM-1表达程度。采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠角膜移植术后10d时房水、血清中TNF-α含量变化。结果:Ⅲ组RI明显降低,MST明显延长,与其他两组比较均差异十分显著(P<0.01)。角膜移植术后10d时HE染色显示Ⅲ组炎性反应较Ⅰ组、Ⅱ组明显减轻,免疫组化染色显示Ⅲ组ICAM-1表达较Ⅰ组、Ⅱ组明显减少。Ⅲ组眶血清及房水中TNF-α含量明显低于Ⅱ组和Ⅰ组,差异十分显著(P<0.01)。结论:深低温保存的大鼠角膜移植术后免疫排斥反应发生率降低,发生时间延迟。ICAM-1和TNF-α是角膜移植免疫排斥反应发生的重要因素之一。     

基质细胞衍生因子-1α在颈总动脉球囊损伤后血管中的表达

目的观察基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)在颈总动脉球囊损伤后血管中的表达。方法60只雄性SD大鼠分成对照组(C组)和球囊损伤组(S组),后者又分为术后即刻组(S0组)和术后1 d、4 d、7 d组(S1、S4、S7组)。S组大鼠均行左侧颈总动脉球囊损伤术。各组大鼠分别采血,流式细胞仪检测外周血中CD34 CXCR4 细胞;取左侧颈总动脉,应用RT-PCR技术和Western blotting法分别检测SDF-1αmRNA和蛋白表达。结果S0、S1、S4组大鼠外周血中CD34 CXCR4 细胞显著增加(P<0.01),以S0组上升最明显,随后逐渐下降,S7组恢复至基础水平。S0、S1、S4、S7组大鼠颈总动脉样本均可见SDF-1αmRNA和蛋白表达,而C组颈总动脉样本则未见SDF-1αmRNA及其蛋白的表达。结论血管损伤后,SDF-1αmRNA和蛋白的表达显著增加,并伴随外周血中CD34 CXCR4 细胞数的增加。提示SDF-1α/CXCR4间的相互作用可能在血管损伤后的修复中发挥一定的作用。     

基质细胞衍生因子-1α在颈总动脉球囊损伤后血管中的表达

目的 观察基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)在颈总动脉球囊损伤后血管中的表达.方法 60只雄性SD大鼠分成对照组(C组)和球囊损伤组(S组),后者又分为术后即刻组(S0组)和术后1 d、4 d、7 d组(S1、S4、S7组).S组大鼠均行左侧颈总动脉球囊损伤术.各组大鼠分别采血,流式细胞仪检测外周血中CD34+ CXCR4+细胞;取左侧颈总动脉,应用RT-PCR技术和Western blotting法分别检测SDF-1α mRNA和蛋白表达.结果 S0、S1、S4组大鼠外周血中CD34+ CXCR4+细胞显著增加(P＜0.01),以S0组上升最明显,随后逐渐下降,S7组恢复至基础水平.S0、S1、S4、S7组大鼠颈总动脉样本均可见SDF-1α mRNA和蛋白表达,而C组颈总动脉样本则未见SDF-1α mRNA及其蛋白的表达.结论 血管损伤后,SDF-1α mRNA和蛋白的表达显著增加,并伴随外周血中CD34+ CXCR4+ 细胞数的增加.提示SDF-1α/CXCR4间的相互作用可能在血管损伤后的修复中发挥一定的作用.     

SDF-1/CXCR4促进骨髓基质细胞迁移的作用

目的研究骨髓基质细胞的CXCR4表达,SDF-1对BMSCs迁移、趋化作用,分析促进迁移规律和机理。为改善和提高骨髓基质细胞迁移能力寻找更有效的途径。为临床骨髓基质细胞更广泛的应用奠定基础。方法体外培养大鼠骨髓基质细胞,应用免疫组化方法对骨髓基质细胞的CXCR4受体表达水平进行检测,运用微孔隔离室穿越实验方法,研究SDF-1对骨髓基质细胞迁移、趋化作用,并用SDF-1阻断剂加以证实。结果CXCR4在各代骨髓基质细胞中表达小于5%,SDF-1可促进骨髓基质细胞迁移。结论虽然CXCR4在骨髓基质细胞中表达量很少,但是对促进骨髓基质细胞迁移起到至关重要的作用。     

细胞凋亡及相关基因bcl-2在大鼠角膜移植物的表达及其意义

目的 探讨细胞凋亡及其相关基因bcl-2与角膜移植急性免疫排斥反应的关系。方法 建立大鼠穿透性角膜移植模型。实验分为3组。A组：非手术基本对照组（Wistar）；B组：同基因角膜移植组（Wistar→Wistar）；C组：同种异体角膜移植组（Wistar→SD）。B、C组分别于术后不同时间（7、10和14d）取角膜植片。细胞凋亡原住末端标记（TUNEL法）检测各组角膜植片细胞凋亡情况，免疫组织化学方法（SABC法）检测植片bcl-2蛋白表达。并以A组正常大鼠角膜做对照。对染色结果采用全自动图像分析系统处理，计算阳性单位PU值。结果 正常角膜上皮细胞层仅有极少量凋亡细胞，基质层及内皮细胞层几乎无凋亡细胞；术后1周各移植组（B组，C组）角膜植片各层均可见散在细胞凋亡，与A组相比差异有显著性（P〈0．01），B组与C组差异无显著意义（P〉0．05）；与A组相比，急性排斥期B、C组角膜植片细胞凋亡均增高，且C组增高曼明显。正常角膜可见bcl-2蛋白表达，主要存在于上皮层；术后1周各移植组（B组，C组）角膜植片bcl～2蛋白表达轻度减低，与A组相比差异有显著意义（P〈0．01）；与B组同一时间点相比，急性排斥期C组角膜植片bcl-2蛋白表达明显减低（P〈0．01）。结论 细胞凋亡在角膜移植急性免疫排斥反应中发挥重要作用，调控基因bcl-2可作为判断急性免疫排斥反应的重要指标。     

心脏死亡大鼠供体角膜移植排斥模型建立

目的建立一种心脏死亡大鼠供体角膜移植排斥模型,观察术后排斥反应,总结手术操作技巧,提高大鼠角膜移植排斥模型的成功率。方法 50只成年雌性SD大鼠按照随机数字表随机分为供体组(10只,20眼)、实验组(同种异体角膜移植组20只,20眼)、对照组(自体角膜移植组20只,20眼)。5 m L空气注射入供体大鼠心腔内造成心脏死亡后取4.25 mm直径角膜植片。实验组大鼠采用水合氯醛腹腔麻醉后作4.0 mm直径植床,将供体植片用国产12-0缝线间断缝合于受体植床上行穿透性角膜移植术;对照组采用水合氯醛腹腔麻醉后用4.0 mm环钻取角膜,植片旋转180°原位缝合。术后两组大鼠滴妥布霉素眼膏1次/d。体式显微镜下观察并拍照,按照Larkin的标准进行排斥反应评分,计算排斥反应指数,直至术后14 d取材。统计两组排斥反应指数评分,采用SPSS软件进行t检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结果 (1)实验组大鼠中有1只死亡,19只发生排斥反应,排斥率为100%,对照组无排斥反应发生;(2)术后14 d,实验组排斥反应评分为(8.5±2.12)分,远高于对照组排斥反应评分(3.0±0.32)分,... 更多     

白细胞介素-1受体拮抗剂抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的 观察白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)抑制大鼠高危角膜移植后免疫排斥反应、促进植片存活的作用。方法 对40只SD大鼠(40眼)用缝线法诱导角膜新生血管增生,选取其中的30只大鼠(30眼)并随机分为实验Ⅰ、Ⅱ组及对照组Ⅲ组,每组均接受同种异系(Wistar大鼠)供体角膜,行穿透性角膜移植术。实验组于术后第1日起分别滴用50 μg/ml的IL-1ra滴眼液(Ⅰ组)和1%的CsA滴眼液(Ⅱ组),每日3次。受试动物术后均每日滴用典必殊滴眼液及托品卡胺滴眼液3次,连续14 d。术后比较各组大鼠免疫排斥反应发生的时间,对角膜植片存活情况进行评分,观察其效果。结果 两实验组角膜植片平均存活时间分别为(12.00±1.50) d和(10.44±1.13) d,明显高于对照组(8.00±1.25) d,差异有显著性(P<0 01);两实验组间比较,差异亦有显著性(P<0 01)。结论 IL-1ra可抑制高危角膜移植后的免疫排斥反应,减少新生血管的生成,减轻免疫性炎性反应,延长角膜植片的存活时间。     

SDF-1/CXCR 4在槲皮素抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成过程中的作用

目的：探讨槲皮素对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成及基质细胞衍生因子-1（stromal derived factor-1,SDF-1）及其特异性受体CXCR 4表达的影响,为槲皮素抗动脉粥样硬化提供实验依据。方法：40只6周龄的ApoE-/-小鼠随机分为：正常对照组、模型对照组和实验组（槲皮素低、中、高剂量组）,于给药后第10、20周取材,HE染色观察动脉粥样硬化病变情况;ELISA法、免疫组织化学技术及real-time PCR检测SDF-1和CXCR 4的蛋白和基因表达情况。结果：（1）HE染色发现正常对照组无粥样斑块形成;实验组与模型对照组相比动脉粥样斑块病变明显减轻。（2）免疫组化结果显示相同时间点比较,正常对照组：SDF-1主要表达于内皮细胞和平滑肌细胞,CXCR 4主要表达于内皮细胞,但细胞着色浅,表达量少;模型对照组：平滑肌细胞以及泡沫细胞呈深棕黄色,显示SDF-1和CXCR 4有大量表达;槲皮素组：高中低剂量的3个实验组与模型对照组比较,细胞着色较浅,表达量均有减少（P=0.010）;与正常对照组比较,低剂量组、中剂量组有统计学差异（P=0.000）。不同时间点比较,SDF-1在模型对照组的表达量随时间延长而增加（P=0.000）。（3）ELISA检测血清中SDF-1和CXCR 4水平,real-time PCR检测SDF-1和CXCR 4的 mRNA基因表达结果：在相同时间点比较,SDF-1及CXCR 4在模型对照组中表达最高（与其余各组比较P=0.000）,正常对照组表达最低,槲皮素组介于两者之间,且随着药物剂量的增加SDF-1和CXCR 4表达量进行性下降,尤其是CXCR 4在高剂量组与正常对照组比较无统计学差异（P >0.05）;不同时间点相同组比较,模型对照组的SDF-1和CXCR 4均随时间延长而增加（P=0.00）,槲皮素组和正常对照组无明显的时间依赖性。结论：（1）SDF-1/CXCR 4可能促进血管平滑肌细胞增殖以及迁移至内膜,从而使内膜增厚和泡沫细胞形成,导致粥样斑块形成。（2）槲皮素可能通过抑制SDF-1与CXCR 4的表达从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成。     

大鼠穿透性角膜移植角膜中转化生长因子βⅡ型受体的变化

目的:观察大鼠穿透性角膜移植角膜中转化生长因子βⅡ型受体(Ⅱ型受体)的变化。方法:异体角膜移植:30只SD大鼠与30只Wistar大鼠相互进行右眼角膜移植。自体角膜移植:10只SD大鼠与10只Wistar大鼠进行右眼自体角膜移植。记录排斥反应指数。免疫组化染色后研究角膜Ⅱ型受体的表达强度。结果:在异体角膜移植初期,Ⅱ型受体表达迅速增多,而当排斥反应发生时,则迅速减少甚至消失;而在自体角膜移植中,Ⅱ型受体迅速增多并维持在一个相当高的水平。结论:排斥反应发生时,Ⅱ型受体减少甚至消失,从而使转化生长因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)无法发挥其免疫抑制的作用。     

转化生长因子-β1治疗免疫性角膜病的初步探讨

目的 观察TGF-β1局部应用治疗同种异体角膜移植术后免疫排斥反应等免疫性角膜病的临床效果,为免疫性角膜病的预防和治疗寻找有效的防治手段.方法 局部应用TGF-β1治疗免疫性角膜病患者35例(35眼).其中穿透性角膜移植术后免疫排斥反应12例,蚕蚀性角膜溃疡8例,单疱病毒性角膜基质炎晚期病变15例.全部患者均局部应用TGF-β1滴眼液,3次/日.结果 穿透性角膜移植术后免疫排斥反应组,12例植片全部透明.治疗前后外周血T淋巴细胞亚群检测均在正常范围;蚕蚀性角膜溃疡8例全部治愈;单疱病毒性角膜基质炎晚期病变15例全部治愈,治疗前后外周血T淋巴细胞亚群检测均在正常范围.结论 TGF-β1具有抑制同种异体角膜移植免疫排斥反应、延长角膜植片存活的作用;能够阻止蚕蚀性角膜溃疡的破坏过程,改善角膜表面的愈合和再上皮化;可明显提高单疱病毒性角膜基质炎晚期病变的治愈率,缩短病程.     

熊果酸对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用

目的探讨熊果酸对大鼠角膜移植排斥反应的治疗效果。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,将48只Wistar大鼠
随机分为4组。A组为正常角膜对照组,B组为Wistar鼠自体原位角膜移植,C、D 组为SD-Wistar大鼠之间进行同种异体角膜移
植。术后当天腹腔给药,A、B、C三组分别给予生理盐水作为空白对照,D组给予熊果酸（UA）（20 mg·kg-1·d-1）,连续给药12 d。
根据Larkin等角膜排斥反应评分系统,判断术后植片排斥情况。比较角膜植片的存活时间和植片存活率。术后14 d检测各组
中IL-2、IFN-γ、NF-κBp65、VEGF及ICAM-1的表达含量,并对角膜植片进行组织学检查与Western blot分析。结果D组角膜
植片的存括时间为29.12±9.58 d,与C组9.67±2.16 d 相比,两组间差异有显著性意义（P<0.01）。术后14 d D组角膜植片中的
IL-2、IFN-γ、NF-κBp65、ICAM-1及VEGF的相对含量明显下降,而IκB-α蛋白含量较高。未见明显淋巴细胞浸润和新生血管形
成。结论熊果酸作为NF-κB的核因子抑制剂,可以抑制角膜新生血管的形成与排斥反应,从而显著延长大鼠角膜植片的存活
时间。
     

CD25单克隆抗体对大鼠角膜移植术后房水中细胞因子表达的影响

目的 研究CD25单克隆抗体对大鼠角膜的毒性以及对同种异体大鼠角膜移植后房水中细胞因子的影响.探讨其对大鼠角膜移植免疫排斥反应的防治效果.方法 ①将12只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、50μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、100μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、200μg CD25单克隆抗体结膜下注射组,每组3只.各组大鼠均右眼用药.分别于0、2、4、6、8d结膜下注射生理盐水及不同剂量的CD25单克隆抗体,共5次.每日行裂隙灯显微镜检查.观察角膜有无水肿、混浊发生.并于第9天取右眼角膜行病理及透射电镜观察角膜各层的变化.②以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体建立角膜移植实验模型.将93只SD大鼠随机分为五组,A组:正常组;B组:角膜移植对照组;C组:CD25单克隆抗体治疗组;D组:CD25单克隆抗体联合地塞米松治疗组;E组:地塞米松治疗组.B组术后给予生理盐水;C组术后给予CD25单克隆抗体100 μg;D组术后给予CD25单克隆抗体100μg联合地塞米松50 μg治疗;E组术后给予地塞米松100μg;各共用5次,分别于术后0、2、4、6、8 d经球结膜下注射给药.用裂隙灯观察移植排斥情况.利用逆转录-多聚酶链反应检测植片内IFN-γmRNA的表达,酶联免疫吸附法检测房水中IFN-γ和IL-4的浓度.结果 ①50μgCD25单克隆抗体和100μgCD25单克隆抗体对角膜基本无影响;200μg的CD25单克隆抗体组透射电镜检查发现角膜基质细胞及内皮细胞有不同程度的肿胀.②C、D、E组发生排斥反应时间分别为(13.167±1.169),(17.333±2.160),(16.417±1.379)d较B组发生排斥反应时间(10.583±1.084)a明显延迟,差异有统计学意义(p＜0.05).正常角膜无IFN-γmRNA的表达,术后11天.B组移植角膜植片内IFN-γmRNA的表达较C、D、E组明显增强(p＜0.05).C、D、E组术后6 d及11 d房水巧N叫的含量明显低于同期的B组(p＜0.05);同C组相比,术后11d D、E组房水IFN-γ的含量明显降低(P＜0.05).术后6 d和11 d,与B组相比,同期C组IL-4含量明显升高(P＜0.05),而同期D、E组IL-4含量明显降低(P＜0.05);术后6 d和11 d,与C组相比,同期D、E组IL-4含量明显降低(P＜0.05).结论 50μg CD25单克隆抗体和100 μgCD25单克隆抗体对角膜基本无影响.IFN-γ和IL-4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用.CD25单克隆抗体通过抑制Th1因子(IFN-γ)、促进Th2因子(IL-4)表达降低角膜移植免疫排斥反应的发生率,从而延长角膜植片存活时间;而CD25单克隆抗体联合地塞米松治疗通过同时抑制Th1因子(IFN-γ)、Th2因子(IL-4)表达,却更能延长角膜植片的存活时间,具有重要的临床应用价值.     

TLR2在大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应中的作用

目的 通过采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)动态检测大鼠角膜组织TLR2 mRNA的表达,研究TLR2在穿透性角膜移植术后免疫排斥反应中的作用.方法 实验分四组:正常对照组(N)、同种同体角膜移植组(A)、同种异体角膜移植组03)和同种异体角膜移植激素抗排斥组(C),A、B、C三组大鼠给予穿透性角膜移植术,术后裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管并用排斥反应指数评分;分别于术后第5、7、9天取材,行组织病理学检查和荧光实时定量PCR检测,动态观察角膜组织TLR2 mRNA的表达.结果 术后随时间变化角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊、新生血管生长.B组大鼠角膜排斥反应指数平均在术后第7天符合排斥反应的诊断并获病理学支持:A组和C组大鼠角膜的排斥反应指数计分未达到诊断标准.正常的角膜组织可见TLR2 mRNA表达;三个手术干预组TLR2 mRNA表达差异倍数均明显高于正常对照组,同种异体角膜移植组角膜TLR2 mRNA的表达较同种同体角膜移植组显著增加,激素抗排斥组角膜TLR2 mRNA表达较同种异体角膜移植组显著降低(P<0.05).结论 TLR2可能作为天然免疫识别受体识别移植抗原,参与角膜移植术后免疫排斥反应.

Abstract：

Objective To gain insight into the role of Toll-like receptor 2 (TLR2) in graft rejection following penetrating keratoplasty, and investigate the expression of TLR2 mRNA in the corneal graft. Methods Penetrating keratoplasty was performed in 3 groups of rats for orthotopic autologous corneal transplantation (group A), allograft corneal transplantation (group B), or allograft corneal transplantation with hormone treatment (C). The transparency and neovascularization of the cornea were observed using a slit-lamp microscope and scored according to the rejection index, with normal cornea serving as the control. The corneal tissues were sampled at 5, 7, and 9 days after the transplantation for histopathological examination and detection of TLR2 mRNA expression using RT-PCR. Results With the passage of time, edema, opacities and neovascularization of the comeal graft occurred after the operation in all the groups. Seven days after the operation, the rejection index of group B, but not that of groups A and C, met the diagnostic criteria for graft rejection with also support by histopathological evidence. The expression of TLR2 mRNA was detected in normal corneas and augmented in the corneal grafts in the 3 transplantation groups. TLR2 mRNA expression in group B was significantly higher than that of group A, and the expression in group C decreased significantly in comparison with that in group B (P<0.05). Conclusion As the recognition receptors of native immune system, TLR2 in the rejected corneal grafts may recognize the allograft antigen and play a role in acute graft rejection after penetrating keratoplasty.     

Immunological studies on the cellular phenotype involved in corneal allograft rejection

ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｅｌｕｌａｒｐｈｅｎｏｔｙｐｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｃｏｒｎｅａｌａｌｏｇｒａｆｔｒｅｊｅｃｔｉｏｎｕｓｉｎｇｗｈｏｌｅｍｏｕｎｔｓａｎａｌｙｓｉｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＣｏｒｎｅａｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔ...     

雷帕霉素抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的：研究雷帕霉素对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法：建立大鼠高危穿透性角膜移植动物模型，以角膜新生血管化sD大鼠为受体。Wistar大鼠为供体，分别腹腔注射0．5％羧甲基纤维素（对照组）、雷帕霉素、环孢霉素A、雷帕霉素＋环孢霉素A，共12d。用裂隙灯显微镜对角膜植片进行临床观察，记录角膜植片存活时间，并进行组织学检查。结果：用药组角膜植片的存活时间显著增加（P〈0．01）；组织学发现联合用药组的角膜炎性细胞浸润、新生血管形成度水肿程度均明显好于其他各组。结论：雷帕霉素能显著延长角膜植片的存活时间，对大鼠高危穿透性角膜移植排斥反应具有抑削作用，与环孢霉素A联合用药具有协同作用，优于各单药物治疗组。     

Effect of a cyclosporine A delivery system in corneal transplantation

目的　探讨前房内植入含环孢素A的缓释系统 (CsADDS)抑制高危角膜移植术后免疫排斥反应的有效性和可行性。方法　角膜新生血管化的近交系Wistar大鼠作为受体 ,供体取自SD大鼠 ,行穿透性角膜移植的大鼠随机分为 4组 :(1)对照组 ;(2 )CsADDS前房植入组 ;(3)CsADDS结膜下植入组 ;(4) 1%CsA橄榄油滴眼组。植片每 3天行裂隙灯显微镜检查并加以评估。分别于术后 1、2、4周行房水中CsA浓度的检测。移植后的 1、2、4周取眼球行组织病理学检查。结果　角膜植片平均存活时间分别为 :对照组 8 2± 1 4 8天 ;CsADDS结膜下植入组 11 4± 2 5 0天 ;前房植入CsADDS组 17 0± 2 0 0天。前房植入组与其它各组相比 ,有显著统计学差异 (P <0 0 5 )。相对于其它治疗组前房植入组的眼内CsA浓度明显增高 ,并且发现CsA聚合物的植入体在前房中只引起轻微而短暂的炎症反应。结论　前房植入CsA聚合物可明显延长高危角膜移植术后的植片存活时间 ,这一眼内缓释系统对于抑制高危角膜移植术后的免疫排斥反应不失为一种有效方法。     

Interleukin-1 receptor antagonist eye drops promoting high-risk corneal allografts survival in rats

Background Immune rejection is the main reason of grafts failure after corneal transplantation. This study was to determine whether interlerkin-1 receptor antagonist (IL-1ra) eye drops could prolong corneal allografts survival in high-risk corneal orthotopic allotransplantation in rat model and to study the effect of IL-1ra on the expression of CD1-positive cells in the grafts. Methods For all experiments, the Sprague-Dawley (SD) rats’ corneas were transplanted into Wistar rats’ eyes. High-risk transplants included those that had been sutured into Wistar recipient beds with corneal neovascularization induced by placement of three interrupted sutures in the host cornea 7 days earlier. All the animals were divided, in a masked fashion, into three treatment groups and one control group. Each treatment group received IL-1ra eye drops of different concentrations (1 mg/ml, 3 mg/ml, or 5 mg/ml, respectively) four times a day for 30 days. The control group received 0.9% normal saline (NS) eye drops in the same way as the treatment groups. All allografts were evaluated for signs of rejection from the first day after surgery. Ten days later, corneal specimens were processed to examine the expression of CD1-positive cells and histopathological changes. Results The survival time of the transplants was 5.80±0.79, 5.89±1.05, 6.78±0.83, and 9.00±2.36 days respectively in the control or three treatment groups. Compared with the control group, 1 mg/ml IL-1ra eye drop did not prolong the survival time of the allografts (t=0.210, P&gt;0.05). However, 3 mg/ml and 5 mg/ml IL-1ra eye drop did prolong the survival time of the grafts (t≥2.627, P&lt;0.05), with the latter showing more obvious effect. Immunohistochemical examinations showed a significant decrease in inflammatory cell and CD1-positive cell infiltration in IL-1ra treated groups compared with the control group. Conclusions IL-1ra can promote corneal allograft survival in a dose-dependant manner by reducing the infiltration of CD1-positive cells in high-risk corneal transplantation.     

CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义

目的 观察大鼠角膜组织中共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达,以了解共刺激分子在大鼠角膜移植排斥反应中的作用和意义。方法 制作大鼠角膜移植模型,观察角膜透明度、新生血管。采用免疫组化法检测CD86在角膜、脾脏组织中的表达。结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管,角膜水肿、混浊,基质增厚。CD86在正常的角膜组织中无阳性表达;在移植后出现急性排斥反应的角膜上皮层中有大量阳性细胞表达。在脾脏的阳性细胞表达与文献报道的一致。结论 共刺激分子CD86在移植后发生排斥的角膜组织中的阳性表达,可能与免疫排斥反应有关。     

CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义

目的 观察大鼠角膜组织中共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达，以了解共刺激分子在大鼠角膜移植排斥反应中的作用和意义。方法 制作大鼠角膜移植模型，观察角膜透明度、新生血管。采用免疫组化法检测CD86在角膜、脾脏组织中的表达。结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管，角膜水肿、混浊，基质增厚。CD86在正常的角膜组织中无阳性表达；在移植后出现急性排斥反应的角膜上皮层中有大量阳性细胞表达。在脾脏的阳性细胞表达与文献报道的一致。结论 共刺激分子CD86在移植后发生排斥的角膜组织中的阳性表达，可能与免疫排斥反应有关。     

Anti-CD25 monoclonal antibody modulates cytokine expression and prolongs allografts survival in rats cardiac transplantation

Objective To investigate the role of anti- interleukin-2 receptor（CD25) monoclonal antibody in the regulation of cytokine mRNA expression of IL-1β, IL-2, CD25, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, tumour necrosis factor-α (TNFα), and interferon-γ (IFNγ) in cardiac allografts to elucidate its immunological mechanism and role in rats that have undergone cardiac transplantation. Methods These in vivo studies were conducted using a rat MHC mismatch SD to Wistar heterotopic cardiac transplant model. Simulect, an anti-CD25 antibody, was used to prevent allograft rejection. An increase in the rate of allograft survival was observed. Rats were sacrificed on day 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14 post-transplantation and hearts were harvested for furgher study. Cytokine mRNA expression was determined by semiquantitative RT-PCR. Results In the control group, cardiac allografts were rejected at 8.3±1.7 days after transplantation (mean±s).The rats who received CsA rejected the cardiac allograft at 26.4±5.7 days post-transplant. Allograft survival of Simulect-treated rats was 29.2±7.1 days (P&lt;0.05 vs controls). Rats treated with simulect and CsA had the longest survival of 55.0±11.6 days (P&lt;0.001 vs controls). CD25 mRNA expression in the heart tissue samples of treated rats was undetectable or very weak. However, the untreated group, CD25 expression increased, although anti-CD25 decreased this CD25 expression in the heart graft. Furthermore, in untreated allografts, IL-2, TNFα and IFN-γ were strongly expressed, an effect that markedly decreased after simulect treatment. Finally, IL-4, IL-5, IL-6 and IL-10 expression was strong in anti-CD25-treated allografts. Conclusions These results suggest that anti-CD25 antibody treatment may not only neutralize CD25 activity but also play a role in altering cytokine mRNA expression and prolong the survival of allografts.