产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药表型和基因型分析

目的:分析临床分离大肠埃希菌耐药性、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率及耐药基因之间的关系。方法:用K-B法检测117株大肠埃希菌耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,用PCR法检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果:117株大肠埃希菌产ESBLs 49株,阳性率41.9%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率100%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率>95%,对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率<20%,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。49株产ESBLs菌株PCR均扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,未扩增到其他基因型。DNA序列分析证实为CTX-M-14亚型、CTX-M-3亚型和广谱酶TEM-1亚型基因。结论:大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著;耐药基因以CTX-M-14亚型为主,其次为CTX-M-3亚型,尚未检出其他ESBLs基因。TEM-1亚型广谱内酰胺酶基因在大肠埃希菌中普遍存在。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药基因型分析

目的了解宁夏医科大学附属医院大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的分离率、耐药性和基因型。方法收集2008年1月-2008年12月住院患者分离的标本281株,采用K-B法进行药敏试验,采用PCR技术分别检测TEM、CTX-M基因。结果在281株大肠埃希菌中,有186株大肠埃希菌产超广谱ESBLs,产酶率为66.2%。在186株ESBLs菌株中有111株为TEM型,占59.7%,有66株为CTX-M型,占35.5%。结论产ESBLs株大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性较为严重,而且存在多重耐药;本地区临床标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型。     

第三代头孢耐药大肠埃希菌表型及基因型研究

目的 检测3代头孢耐药的大肠埃希菌的表型及基因型，了解产ESBLs大肠埃希菌的最佳检测底物及耐药机制，以利于耐药性的控制与指导临床用药。方法 收集广东省中医院来自各种标本对3代头孢耐药的大肠埃希菌242株，用双纸片确诊法检测ESBLs；标准纸片扩散法(Kirby-Bauer test)检测耐药性；聚合酶链反应（PCR）对ESBLs阳性菌进行耐药基因检测并测序。结果 检测ESBLs的最佳底物是头孢噻肟。242株大肠埃希菌中，产ESBLs 146株，占60.3％ ，产酶株对头孢噻肟等16种抗生素的耐药率比不产酶株都有不同程度增加，但亚胺培南对所有产酶株都敏感。146株产ESBLs细菌中，120株产CTX-M型β-内酰胺酶，52株产TEM型β-内酰胺酶，12株产OXA型β-内酰胺酶，除66株为CTX-M单独存在外，其余均与TEM、OXA共存。结论 临床资料及药敏资料证明产ESBLs大肠埃希菌是重要的医院内感染细菌，且呈多重耐药，治疗中碳青霉烯类药物是最可靠的；含β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂耐药程度也较高，应适当增加剂量，并可与阿米卡星联合应用。表型为产ESBLs的菌株中，主要基因型为CTX-M型β-内酰胺酶，其次为TEM型。     

产ESBLs大肠埃希菌耐药基因分型研究

目的对本院分离的31株产ESBLs大肠埃希菌进行耐药基因分型研究。方法用PCR对根据CLSI标准进行产ESBLs大肠埃希菌的初筛确证实验得到的产ESBLs大肠埃希菌31株,进行耐药基因的分型研究。结果31株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM型为15株,SHV型为3株,CTX-M型为6株,TEM型对氨苄西林100%耐药,而SHV和CTX-M型主要对三代头孢类抗生素耐药,其治疗的首选药物为亚胺培能。结论本院检出的产ESBLs大肠埃希菌主要型别为TEM型,耐药基因分型研究将为临床用药和医院感染监控提供较有价值的参考。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶耐药基因型研究

目的 了解本地区血液标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分离率、耐药性和基因型.方法 收集临床血液标本分离的产ESBLs的大肠埃希菌26株,应用PCR基因扩增技术分别检测SHV、TEM、CTX-M、PER、CTX-M-2、Ampc、GES基因,DNA测序确定CTX-M、TEM基因型.结果 在26株菌株中15株为CTX-M型,占57.69%,11株为TEM型,占42.31%.结论 本地区临床血液标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药分析

[目的]了解大连市中心医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药基因型及耐药情况。[方法]收集该院2005年11月-2006年2月连续不重复产ESBLs大肠埃希菌40株,采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的表型确认方法进行筛选。在此基础上,分别用针对TEM、SHV、CTX-M-Ⅰ、CTX-M-Ⅱ、CTX-M-Ⅲ、CTX-M-Ⅳ型β-内酰胺酶基因的六对特异性引物对每株细菌进行聚合酶链反应（PCR）,毛细管电泳方法检测所有产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因。应用K-B纸片扩散法检测产ESBLs大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性。[结果]毛细管电泳结果显示,40株产ESBLs大肠埃希菌中,仅携带一种基因型的分别为SHV型1株（2.50%）,CTX-M-Ⅰ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅱ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅲ型2株（5.00%）,CTX-M-Ⅳ型4株（10.00%）。有18株（46.15%）同时携带两种或两种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在;药物敏感试验结果显示,产ESBLs大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素均表现出较高的耐药性,对碳青霉烯类药物（亚胺培南和美洛培南）的耐药率最低。[结论]该院产ESBLs大肠埃希菌近期流行的主要基因型别为CTX-M型,而且多基因携带情况常见;碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌耐药性及基因型检测

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠埃希菌的分子流行病学及对常用抗菌药物的耐药情况.方法 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的初筛试验采用纸片法,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其ESBLs基因片段;用K-B琼脂扩散法进行菌株的药敏试验.结果 124株大肠埃希菌中共检出54株产ESBLs (43.5%).在耐药性检测中,其对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率分别为3.7%、0.0%和5.6%,PCR扩增基因型阳性结果为TEM型23株、SHV型13株、CTX-M型41株、OXA型8株,其基因型以CTX-M型为主.结论 本院大肠埃希菌产ESBLs率显著升高,应引起重视;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带两种或两种以上耐药基因;其治疗首选药物建议使用亚胺培南、头孢哌酮/ 舒巴坦和哌拉西林/ 他唑巴坦.     

临床大肠埃希氏菌耐药性检测及超广谱β-内酰胺酶流行病学调查

目的了解广州地区临床大肠埃希氏菌耐药及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况。方法对临床分离鉴定的57株大肠埃希氏菌进行5大类15种抗菌药物的耐药性检测。通过表型确认试验筛选出产ESBLs菌株,采用PCR法检测15种临床重要且常见的耐药基因。结果 57株大肠埃希氏菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性。其中有23株产ESBLs,ESBLs产生率为40.4%;24株产TEM,13株产CTX-M(其中,8株产CTX-M-55、4株产CTX-M-14、1株产CTX-M-27),2株产OXA-1。结论广州地区大肠埃希氏菌耐药情况依然严峻。同时,ESBLs流行趋势发生了变化:以前以流行CTX-M-9型为主,现在以CTX-M-1型和CTX-M-9型同时流行为主要特征。     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性

目的了解超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性、耐药特点,指导临床用药。方法采用纸片确证法检测65株产ESBLs菌并对其体外抗生素耐药性作初步研究。结果ESBLs总阳性率为37．4％,大肠埃希菌的ESBLs的阳性率为44．1％,肺炎克雷伯菌的ESBLs的阳性率为31．1％。产ESBLs菌株对三代头孢的耐药率明显高于不产酶株。大肠埃希菌对阿米卡星的耐药率较肺炎克雷伯菌低,肺炎克雷伯菌对头孢西丁、头孢吡肟的耐药率较大肠埃希菌低。结论治疗ESBLs菌引起感染,应用亚胺培南、含β-内酶胺酶抑制剂类抗生素及其药敏试验显示敏感的有效药物。     

肠杆菌属细菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的表达状况研究

目的 研究超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和高产AmpC酶在肠杆菌属细菌的表达状况以及ESBLs的基因型,了解肠杆菌属细菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制。方法 采用酶提取物三维及抑制试验检测121株肠杆菌属细菌高产AmpC酶和产ESBLs的情况;采用聚合酶链反应检测产ESBLs菌株的基因型。结果 在121株肠杆菌属细菌中,酶提取物三维及抑制试验共检出产ESBLs菌株29株（24.0%）,高产AmpC酶并产ESBLs菌株14株（11.5%）,高产AmpC酶并产ESBLs的菌株占总高产AmpC酶菌株的43.8%（14/32）。在25株PCR扩增阳性菌株中,TEM型为7株,SHV型10株,CTX-M-1组6株,CTX-M-13组7株,OXA组为阴性,其中有5株同时检测出两种ESBLs基因型。结论 除高产AmpC酶外,产ESBLs也是肠杆菌属细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要因素之一。肠杆菌属细菌产ESBLs的基因型包括TEM、SHV、CTX-M型,以CTX-M型为主。     

苏州地区临床产超广谱 β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因分型

目的分析苏州地区临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因型分布情况。方法收集苏州地区5家医院2006年至2009年间自临床标本中分离的肺炎克雷伯菌512株,按CLSI规定的ESBLs初筛和确证试验检测ESBLs,以K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,用PCR方法对分离的产ESBLs菌株进行TEM、SHV和CTX-M基因型检测。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为35.7%（183株）,其中62.8%（115株）携带TEM型基因,36.1%（66株）携带SHV型基因,78.7%（144株）携带CTX-M基因。另外,有41.5%（76株）同时携带两种以上的基因。产酶株的耐药率均明显高于非产酶株（均P〈0.05）。产酶株除对第4代头孢菌素和对加克拉维酸或他唑巴坦等第3代头孢菌素耐药率相对较低外,对其他抗生素均有相当高的耐药率。但无论是产酶株还是非产酶株对亚胺培南的耐药率均为0。结论苏州地区临床产ESBLs肺炎克雷伯菌已达到了较高的比例,并具有多重耐药的特点,其中CTX-M型是最主要的流行基因型。临床上严格控制和合理使用第3代头孢菌素已刻不容缓。     

近6年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药变迁

目的了解我院自2005年以来,近6年产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌的耐药变化情况,从而为临床合理使用抗生素提供指导。方法对2005～2010年,6年间临床分离的大肠埃希菌共计619株菌进行药敏分析,采用K-B法进行药敏试验,ESBLs筛选试验及确认试验按照美国CLSI相关标准进行,结果用WHONET 5.4软件进行数据统计分析。结果 6年来,大肠埃希菌产ESBLs阳性率从45.5%上升至68.4%。6年分离的大肠埃希菌合计产ESBLs率为56.1%。产ESBLs株对头孢菌素类、氟喹诺酮类等常用抗生素药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,对碳青霉烯类抗菌药物敏感,氨基糖苷类抗生素在所有大肠埃希菌中耐药率呈增长趋势。结论 6年来,大肠埃希菌中ESBLs阳性率逐年升高,并呈现出多重耐药性,对产ESBLs菌株的治疗应首选碳青霉烯类抗生素药物。虽然这次监测没有发现耐碳青霉烯类的菌株,但是也应引起重视。氨基糖苷类抗生素在所有大肠埃希菌中耐药率呈增长趋势,这需要我们进一步研究是否有新的耐药机制存在。     

产ESBLs大肠埃希菌基因型分析

目的分析大肠埃希菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的主要基因型。方法用表型确定的临床分离产ESBLs的大肠埃希菌47株，分别用TEM、SHV、CTX—M-1、CTX—M-2和CTX—M-9扩增引物进行聚合酶链反应（PCR）扩增，并对PCR产物进行序列分析。结果PCR扩增结果显示TEM、SHV、CTX—M-1、CTX—M-2和CTX—M-9的阳性率分别为59.57％、4.26％、17．02％、19.15％和82．98％，CTX—M型总阳性率为93.62％，序列分析证实扩增为目的产物。结论47株ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX—M型和TEM型，且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的63．83％，需引起临床的高度重视。     

变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药现状

目的检测变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)并了解其耐药情况。方法对54株本院分离的变形杆菌进行耐药性分析、转移接合实验、ESBLs的初筛及确证实验、ESBLs的基因型检测。结果表型筛选出8株ESBLs阳性株,PCR扩增出4株阳性(3株为TEM型,1株为CTX-M-13型)。所有菌株对亚胺培南均敏感(100%),其次为阿米卡星(89.5%)和氧哌嗪青霉素/他唑巴坦(84.8%)。结论及时准确检测产ESBLs变形杆菌对指导临床合理用药、避免此类变形杆菌引起的暴发流行感染有重要意义。     

外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的:了解外科监护室产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram β-lactamases,ESBLs)的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性和基因型.方法:琼脂稀释法测定临床分离株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值,分别用TEM、SHV和CTX-M的特异性引物扩增临床菌株和接合子的超广谱β-内酰胺酶基因.接合试验提取接合子质粒进行聚合酶链反应(polymerase chin reaction,PCR),产物测序,确定基因类型.结果:93.5%的菌株含CTX-M基因,38.7%的菌株含SHV基因,87.1%的菌株含TEM基因.测序明确了TEM-1,CTX-M-1,3,14,22等基因类型.结论:外科监护室大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因以CTX-M为主.     

大肠埃希菌临床分离株耐药性变化

目的:探讨近3a我院大肠埃希菌临床分离株的耐药性变化。方法:收集2004年至2006年大肠埃希菌886株,用VITEK-32鉴定仪鉴定,药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果:在21种抗菌药物中,除亚胺培南、阿米卡星、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸、呋喃妥因耐药率均低于16.0%外,喹诺酮类、大部分头孢菌素类对大肠埃希菌的耐药性呈明显上升趋势,接近或超过50.0%;产ESBLs菌株3a发生率为27.3%～35.5%,平均为30.3%;产ESBLS菌株对多种抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLS菌株(P<0.05)。结论:大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药性逐年上升,尤其是产ESBLS菌株的高耐药率及多重耐药性更为明显。     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。