新疆野扁桃自交不亲和SFB与S-RNase蛋白间相互作用的研究

利用酵母双杂交系统研究新疆野扁桃自交不亲和性花粉SFB蛋白与花柱S-RNase蛋白间的相互作用。以野扁桃花药为实验材料,根据实验要求和基因的结构特点,利用已克隆到的SFB和S-RNase基因,有针对性的截短,构建酵母双杂交载体。研究结果显示,成功构建了酵母双杂交重组表达载体,PtSFB17、PtS16-RNase和PtS17-RNase各蛋白之间并没有发现存在相互作用,据此推测PtS16-RNase蛋白和PtS17-RNase蛋白不在PtSFB17蛋白的识别谱中,协同非我识别模型在新疆野扁桃中同样存在。新疆野扁桃自交不亲和性PtSFB17、PtS16-RNase和PtS17-RNase各蛋白间并无相互作用。     

保鲜剂对菊花切花衰老过程中生理变化的影响

以大花菊“神马”为材料,利用不同保鲜剂配方对其在保鲜期长短和切花保鲜过程中相关生理指标进行测定,结果表明,2号保鲜剂(去离子水+ 0.03%阿斯匹林+30g/L蔗糖)中切花的花期延长至30天;不同保鲜剂对保鲜过程叶片和花瓣的各项生理指标变化不同,叶片和花瓣的可溶性糖含量较高,可溶性蛋白和SOD变化趋势一致,丙二醛含量趋势不稳定,而叶片和花瓣POD同工酶含量变化趋势相反。研究结果可为菊花切花过程各中保鲜剂的选择提供理论基础,为菊花切花的长短距离运输提供理论依据。     

油棕有害生物综合防治与生态安全问题的研究进展

本研究旨在为中国油棕产业的持续健康发展提供一些有益的启示。首先阐述了开展油棕有害生物综合防治与生态安全问题研究在中国油棕产业发展中的意义,然后对国内外油棕病虫鼠害发生情况做了概述,重点阐述了有害生物综合防治的原则及监测预警系统的构建,最后提出了油棕产业中有害生物综合治理的5项措施。     

新疆野扁桃自交不亲和花粉SFB基因的克隆及生物信息学分析

旨在克隆获得新疆野扁桃自交不亲和花粉SFB新基因,以新疆野扁桃花药为试材,应用分子同源克隆及RT-PCR等技术,并进一步采用在线软件分析SFB基因的蛋白质理化性质,实验成功克隆到了PtSFB5与PtSFB6 2个新SFB基因的cDNA全长,2个基因的cDNA全长分别为1124 bp和1072 bp,分别编码了374和348个氨基酸,2个基因都具有F-Box基因结构,属于F-Box基因家族,预测的相对分子量分别为30787.26和44037.74,等电点为5.93和5.43,均属于水溶性不稳定蛋白。     

巴西橡胶树乳管细胞中与HbMago2相互作用蛋白的筛选与分析

为探索HbMago2在乳管细胞中的作用,本研究构建了HbMago2的诱饵载体,从巴西橡胶树乳管cDNA表达文库中筛选与HbMago2相互作用的蛋白。结果显示,诱饵载体无自激活性、对酵母菌Y2HGold无毒性;通过文库筛选,获得3个与HbMago2相互作用的蛋白;点对点验证结果表明HbMago2能够与Y14、phox和HMAD在酵母中能相互作用。互作蛋白中phox是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH)的亚基,NADPH氧化酶能引起ROS,而重金属相关结构域蛋白(HMAD)能清除重金属引起的ROS,推测HbMago2通过蛋白互作协调乳管细胞中ROS的平衡。本研究结果为进一步研究HbMago2在乳管细胞中的功能提供重要的研究基础。     

草坪病害的综合防治措施

草坪病害是由生理过程、非生理过程或由不良环境因素引起的草坪草生长的失调现象.代谢因素如营养缺乏、排水不良、践踏可以引起草坪病害,但大多数病害是由病原微生物引起的.到目前为止,草坪上还未见到由细菌引起的病害,病毒引起的病害也较少见.几乎所有主要的草坪侵染性病害都是由真菌引起的.实际上草坪病害是草坪植物本身、病原微生物和环境条件三个因素共同作用的结果.其中环境因素是病害暴发的最主要因素.环境条件同时对草坪植物和病原微生物产生影响.由于草坪植物生长和病原微生物发育都有其特定的环境条件,当环境条件有利于病原微生物发育,而不适合草坪植物生长时,病害就会大发生;相反,病害就会受到抑制.因此在草坪种植过程中采取一系列的综合措施,创造一个利于草坪草生长,而不利于病原微生物发育的环境条件,从而达到防病治病的目的.其主要技术措施概述如下.     

草坪常见病害及其综合防治技术

近年来，草坪作为城镇立体绿化和庭院、别墅美化中的地被植物而被广泛应用，是城市景观生态系统中的重要组成部分，也是衡量城市园林绿化水平和人均绿地面积的重要标准之一。然而，在草坪草的生长过程中，常常会受到各种病原菌的侵染和危害，使草坪出现变色、枯死、萎蔫、腐烂等症状，从而严重影响草坪的整体观赏价值和使用价值，降低草坪质量和可用年限。因此，掌握草坪上的主要病害症状与发生规律，可以有针对性地进行防治，从而有效控制草坪主要病害的发生与危害。     

新疆野扁桃自交不亲和基因SSK1的克隆及生物信息学分析

为了获得新疆野扁桃居群中自交不亲和花粉特异性表达的SSK1基因全长,以新疆野扁桃植物叶片及花粉为试验材料通过rt-PCR技术以及生物测序等技术,克隆得到了一个新的SSK1基因全长c DNA,Pet SSK1。Pet SSK1全长为602 bp,开放阅读框为534 bp,共编码了177个氨基酸,经生物信息学分析,Pet SSK1蛋白的分子式为C910H1421N233O295S6,相对分子质量为20538.0,理论推导半衰期为30 h,等电点为4.52,不稳定指数为41.48,平均疏水指数为-0.567,Pet SSK1蛋白属于水溶性不稳定蛋白。首次从新疆野扁桃植株中克隆得到了SSK1基因全长。通过对该基因的克隆及序列分析,为今后的表达分析以及有效利用该基因获得自交亲和植株奠定了基础。     

小麦秸秆不同部位水浸液对牛筋草的化感作用研究

通过室内生物测定法研究了小麦秸秆的不同部位（根、茎、穗）不同浓度水浸液（6.25,12.5,25,50,100mg?mL-1）对牛筋草种子萌发和幼苗生长的化感作用,结果表明：小麦秸秆根、茎、穗部水浸液对牛筋草种子的萌发均具有抑制作用,随着浓度的升高,牛筋草发芽率逐渐降低,发芽指数逐渐减少,以最高浓度100mg?mL-1水浸液抑制作用最强,不同部位水浸液处理的牛筋草发芽率依次为对照（84.5%）＞根（71.3%）＞茎（68.7%）＞穗（58.7%）,发芽指数依次为对照（18.39）＞根（12.82）＞茎（6.77）＞穗（6.07）。根部水浸液对牛筋草苗高无显著影响,茎、穗部水浸液只有在最高浓度处理下显著抑制其幼苗高度,但是对根部生长均表现出“低促高抑”作用,当根、茎、穗部水浸液浓度为6.25mg?mL-1时,牛筋草根长分别比对照增加17.1%,17.8%及6.6%,而当其浓度为100mg?mL-1时,牛筋草根长分别比对照降低25.6%、31.6%及95.6%。通过拟合剂量-效应曲线得到小麦秸秆根、茎及穗部水浸液对牛筋草根部生长的半数效应浓度EC50值分别为219.182,157.545及41.007mg?mL-1     

甘蓝自交不亲和信号转导元件ARC1与EXO70A1的相互作用

从甘蓝型油菜与羽衣甘蓝柱头中克隆出ARC1与EXO70A1基因的编码区, 序列分析显示推导的甘蓝型油菜ARC1比羽衣甘蓝ARC1少编码2个氨基酸, ARC1蛋白在羽衣甘蓝与甘蓝型油菜中存在45个氨基酸的差异, 其序列相似度与一致性分别达到95.9%和93.9%; 推导的EXO70A1在两种植物中仅有6个氨基酸的差异, 其序列相似度与一致性分别达到99.4%和98.9%; EXO70A1蛋白在种内和物种间都保持着高度的保守性, 其保守的程度高于ARC1。应用酵母双杂交系统检测两种蛋白质的相互作用, 发现: 在二倍体酵母细胞中, 全长的ARC1与EXO70A1之间存在较强的相互作用, 能激活4个报告基因(ADE2、HIS3、AUR1-C和MEL1)的表达; 去除C-端(包括臂重复区) 316个氨基酸残基后的ARC1_N与EXO70A1之间表现出较弱的相互作用, 只能激活3个报告基因(ADE2、AUR1-C和MEL1)的表达, 表明ARC1的臂重复区可能并不位于ARC1与EXO70A1的互作界面的核心区段, ARC1的N-端结构域对ARC1-EXO70A1互作起关键作用; 同时发现不同ARC1-EXO70A1组合的互作强度相当, 其可能原因是ARC1和EXO70A1在甘蓝与甘蓝型油菜中存在的这些序列差异并未影响ARC1- EXO70A1互作界面的构象。     

葡萄病害综合防治技术

农六师目前葡萄定植总面积1626．6hm^2，其中鲜食葡萄1060hm^2，品种主要有红提、克瑞森、八月皇家、莫莉莎和无核早红等；酿酒葡萄566．6hm^2，品种主要有赤霞珠、梅露辄等。2005年，葡萄虫害未有发生，病害以霜霉病、日灼病为主，其次为白粉病、毛毡病、病毒病等。     

植物性杀虫剂辣根素对天牛的防治研究

为明确辣根素对天牛的熏蒸致死作用,在田间研究了辣根素不同剂量对天牛幼虫的熏蒸作用、对天牛熏蒸的致死时间、天牛蛀道以及封口的处理方式。结果表明,利用辣根素熏蒸防治天牛,将蛀道口处清理干净,以0.5~1.0 mL/孔的使用剂量进行处理,蛀道口及排粪孔用高岭土饱和盐水泥进行封闭,外用地膜包扎,在处理1天后对天牛可以达到96.7%以上的防治效果。辣根素是一种非常有效的防治天牛的植物性杀虫剂。     

木薯MeSAUR1互作蛋白的筛选及鉴定

木薯MeAGPS1a基因编码的小亚基是淀粉合成关键酶AGPase的催化中心,前期研究发现MeSAUR1转录因子可结合MeAGPS1a基因启动子并调控该基因表达。采用酵母双杂交技术筛选MeSAUR1转录因子的互作蛋白,可进一步解析MeAGPS1a基因表达的分子调控网络。本研究构建了MeSAUR1的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-MeSAUR1,采用酵母双杂交技术从木薯cDNA文库中筛选MeSAUR1的候选互作蛋白,结果共筛选出31个阳性克隆。通过酵母双杂交点对点实验验证了候选互作蛋白MePP2C与MeSAUR1的互作关系,本研究结果有助于揭示Me SAUR1蛋白调控木薯淀粉合成的互作网络。     

结球甘蓝雌蕊调控因子SPT与HEC1的克隆及相互作用分析

为研究SPT和HECs及其相互作用对甘蓝雌蕊发育的影响, 以结球甘蓝自交不亲和系E1为材料, 提取雌蕊总RNA, 根据拟南芥中SPT和HEC1基因设计引物, 采用同源克隆的方法克隆SPT基因, 其序列1085 bp, 开放阅读框(ORF) 1062 bp; HEC1基因ORF 696 bp。通过cDNA推导得到的氨基酸序列表明, SPT编码353个氨基酸残基, 预测分子量为37.67 kD, pI为6.83; HEC1编码231个氨基酸残基, 预测分子量为25.26 kD, pI为10.2。分析表明, 两基因在各器官中均表达, 但SPT在果实和雌蕊中表达量最高, 而HEC1在根和花蕾中的表达量最高。为检测两者的相互作用, 构建原核表达质粒pCold I-SPT和pGEX-HEC1, Pull-down试验表明两蛋白能够在体外相互作用。同时构建pGBKT7-SPT、pGADT7-HEC1及互换载体pGBKT7-HEC1和pGADT7-SPT酵母表达载体, 分别转化酵母Y2HGold和Y187感受态细胞后均未出现自激活和毒性现象, 融合后的二倍体酵母均能在SD/–Trp–Leu–Ade–His/X-α-gal/AbA板上长出蓝色菌斑, 表明SPT和HEC1能够相互作用激活下游的HIS3、AUR1-C、MEL1和ADE2报告基因, 酵母双杂交试验结果与Pull-down检测一致, 说明SPT和HEC1能够相互作用以调控雌蕊的发育。     

临沂市小麦病害综合防治技术

通过调查研究,摸清了临沂市小麦主要病害种类,研究了主要病害的发生规律和影响因素,总结出了选用抗病品种、种子处理、加强栽培管理、科学进行药剂防治的综合防治技术。     

酵母双杂交系统筛选马铃薯StMAPKK1互作蛋白及其生物信息学分析

促丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)级联反应是参与植物生长发育、激素及胁迫的响应信号通路中重要而复杂的信号网络之一。促分裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase kinase, MAPKK)是其主要成员之一,是该级联反应中位于通路中间、对信号传递起着收集和发散的关键作用的激酶。已有研究表明马铃薯(Solanum tuberosum L.) StMAPKK1基因响应干旱胁迫。本研究采用同源重组的克隆方式构建了StMAPKK1的诱饵载体pGBKT7-StMAPKK1,通过酵母(Saccharomyces cerevisiae)双杂交系统筛选马铃薯c DNA文库,共得到5种StMAPKK1互作蛋白,并利用小规模杂交回转验证对互作真实性进行了验证。通过生物信息学分析鉴定这5种StMAPKK1互作蛋白分别为水解酶(水解O-糖基化合物)、RING-H2亚家族RHE蛋白、氰酸酯酶、ARF GTPase活化因子以及一个含有C2结构域的蛋白。本研究结果为进一步研究马铃薯St MAPKK1所参与信号通路及其生物功能提供理论依据。     

拟南芥LBD15互作蛋白的筛选和鉴定

为了进一步挖掘拟南芥LBD逆境胁迫响应基因在植物非生物逆境胁迫应答中的作用,探究拟南芥逆境胁迫响应机理,将前期筛选到的LBD15基因构建到pGBKT7酵母表达载体上,筛选与LBD15互作的蛋白。利用酵母双杂交技术筛选了拟南芥全长均一化的酵母文库,在本次筛库试验中,146个样有107个测出序列,通过NCBI Blast分析,其中有96个获得了基因号,占总数的87.9%。根据基因号进行分类,得到了48个蛋白,在筛选到的48个蛋白中有59%的蛋白都是有重复的。然后把基因号通过网站TAIR(www.arabidopsis.org/index.jsp)查找其蛋白序列,通过亚细胞定位预测网站(http://cello.life.nctu.edu.tw/)分析其亚细胞定位,定位分析结果表明,这些蛋白主要定位于叶绿体、细胞质和细胞核。利用Blast2GO进行Gene Ontology注释显示互作蛋白共参与了14个生物过程,包括细胞过程、代谢过程、刺激响应、生物过程的调控、单组织和多组织过程及发育进程调控等。对得到的可能互作蛋白随机挑选了5个进行了互作蛋白的分离和回复验证,结果发现,AP19蛋白及其他一些蛋白的菌落能够在营养缺陷型的平板上正常生长,进一步证实了其为互作蛋白。酵母双杂交文库的成功筛选为进一步研究拟南芥LBD15的分子作用机制奠定了基础。     

小麦病虫害防治存在的问题与综合防治技术分析

通过大量的调查发现,新疆地区小麦病虫害防治工作开展力度严重不足,对小麦种植产量和品质产生严重的影响。因此,需要针对病虫害防治中存在的问题加以全面分析,采取建设监测点、合理布局、药剂拌种、田间管理等措施对病虫害加以有效地防治,提升小麦产量。通过调查研究,新疆地区病虫害诱发主要原因为种植品种比较单一、更换周期比较长、麦田残留以及资金投入不足,出现条锈病、叶锈病、全蚀病等病害。在小麦种植的不同时期需要针对实际情况采取行之有效的方式防治病虫害,确保小麦产量和品质。     

新疆野扁桃自交不亲和基因Cullin1的克隆及生物信息学分析

旨在为今后研究新疆野扁桃的分子调控奠定良好基础。通过利用Rt-PCR技术及生物测序等方法,从新疆野扁桃的幼嫩叶片中,克隆得到了一个全新的新疆野扁桃Cullin1基因全长c DNA,命名为Pet Cullin1。并进一步的利用在线软件分析发现:Petcullin1基因全长为2677 bp,其开放阅读框2217 bp,该基因的氨基酸共有738个编码,预测得出Petcullin1蛋白的分子式为C3887H6064N1028O1133S34,原子总数为12096,相对分子质量为85814.61,理论推导出其半衰期为30 h,带正负电荷的残留的总数分别是108和113,不稳定指数和平均疏水指数分别为40.19、-0.452,该蛋白属于水溶性不稳定蛋白。