端粒酶逆转录酶基因在口腔癌前病变及鳞癌的表达

目的：观察端粒酶催化蛋白基因（hTRT）在口腔癌前病变及鳞癌中的表达，探讨其与口腔鳞癌（OSCC）发生发展及临床病理特征之间的关系。方法：用原位杂交技术检测54例标本，其中正常口腔粘膜6例、上皮非典型增生15例、口腔粘膜鳞癌33例。结果：正常口腔粘膜组织中hTRT的mRNA表达较弱，阳性信号仅局限于上皮基底层及副基底层间，阳性率16.67％（1/6）；上皮非典型增生中hTRT的mRNA阳性表达见于多层上皮细胞，并随细胞异形性增高而表达增强，阳性率60％（9/15）；口腔粘膜鳞癌组织中hTRT的mRNA有较强阳性表达，阳性率87.88％（29/33）；OSCC组织中hTRTmRNA的表达与肿瘤临床病理分化无关，与淋巴结转移密切相关。结论：端粒酶hTRT基因的表达在OSCC的发生发展和转移过程中起着重要作用。     

端粒酶逆转录酶mRNA在舌鳞癌和癌前病变中的表达

目的：探讨端粒酶活性在正常舌黏膜、上皮单纯性增生、上皮异常增生和舌鳞癌中的表达。方法：用原位杂交法检测8例正常舌黏膜，8例上皮单纯性增生，27例上皮异常增生和52例舌鳞癌中端粒酶逆转录酶(TERT)mRNA的表达。结果：TERTmRNA阳性率在正常舌黏膜和上皮良性增生中为0。在上皮异常增生中为48．1％(13／27)；在舌鳞癌中为84．6％(44／52)。TERTmRNA阳性率与舌癌患者局部淋巴结转移相关(P-0．042)，与TNM分期和组织学分级无关(P=0．091和P=0．671)。TERTmRNA阳性表达患者生存率低于阴性表达患者(P=0．023)。结论：端粒酶活性可能在舌鳞癌的发生上起了关键作用。TERTmRNA表达有助于评价舌鳞癌的生物学行为和预后。     

端粒酶逆转录酶mRNA在口腔鳞癌中的表达

口腔鳞癌发病机理及致病因素一直不清楚,深入研究其发生的相关因素对早期诊断、预防及治疗有着重要的意义。目前,随着分子生物学和遗传学的发展,人们已经可以从DNA、RNA及蛋白质水平对疾病的相关因素进行研究,从而揭示基因与疾病发生的关系,并为进一步的基因治疗奠定基础。本实     

人端粒酶逆转录酶、B细胞淋巴瘤-2基因在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨人端粒酶逆转录酶（hTERT）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测87例宫颈鳞癌和20例正常宫颈组织中hTERT、Bcl-2的表达。结果在正常宫颈组织和宫颈鳞癌中,hTERT表达的阳性率分别为20．0％和77．0％,其差异有高度统计学意义（P〈0．01）;Bcl-2的表达阳性率分别为35．0％和80．5％,差异也有高度统计学意义（P〈0．01）;且在宫颈鳞癌中hTERT的阳性表达与Bcl-2的阳性表达显著相关（P〈0．05）。结论hTERT和Bcl-2在宫颈鳞癌中表达显著升高,二者的表达密切相关,提示二者共同参与,并协同促进宫颈鳞癌的发生。     

Stat3及Bcl-2在口腔黏膜癌前病变癌变中mRNA表达的相关性研究

目的:检测Stat3及Bcl-2在口腔黏膜癌前病变及癌变组织中mRNA的表达及其相关性?方法:用RT-PCR技术分别检测正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜和口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中Stat3和Bcl-2的 mRNA表达水平和相对含量?结果:在正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜和OSCC中Stat3和Bcl-2 mRNA的阳性率和半定量(Stat3/GAPDH,Bcl-2/GAPDH)测定值均逐渐上升,且Stat3和Bcl-2 mRNA的相对表达量呈线性正相关?结论:Stat3和Bcl-2与口腔黏膜癌变的发生发展过程有一定的联系?     

胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶、p53蛋白的表达与幽门螺杆菌的关系

目的：探讨胃癌前病变组织中人端粒酶逆转录酶（hTERT）和p53蛋白的表达状况及其与幽门螺杆菌（Hp）根除前后的关系。方法：采用实时定量荧光RT-PCR方法检测胃粘膜中hTERT,将hTERT与GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）拷贝数之比的100倍作为标准化hTERT（NhTERT）,用快速尿素酶法和Warthin-Starry银染色法检测Hp,同时用免疫组化检测p53蛋白的表达。结果：Hp阳性组hTERTmRNA和p53蛋白的表达率均显著高于Hp阴性亚组的表达率（均P〈0.05）。Hp根除组hTERTmRNA的表达率显著低于未根除组（P〈0.05）,未根除组与阴性对照组之间无显著性差异。结论：在胃癌前病变阶段,Hp感染与端粒酶表达水平及p53蛋白之间有直接关系,提示端粒酶、Hp感染、p53蛋白在胃癌的发生、发展中起重要作用及Hp根除的必要性。     

端粒酶逆转录酶mRNA在胃癌中的表达及其意义

目的研究人类端粒酶逆转录酶(hTERT)在胃癌组织中的表达及其在胃癌发生发展中的作用.方法应用实时荧光定量PCR技术检测22例胃癌组织及癌旁正常黏膜组织中hTERT mRNA的表达水平,分析其与肿瘤恶性程度的关系.结果胃癌组织hTERT mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织(P＜0.01),但不同胃癌TNM分期、组织分化程度之间的hTERT mRNA表达水平差别均无显著性意义(均P＞0.05).结论在胃癌组织中hTERT mRNA表达明显高于正常组织,可作为胃癌诊断的特异性指标之一.     

Survivin和Bcl-2在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究分析Survivin蛋白和Bcl-2蛋白在食管鳞癌组织中的表达情况与食管鳞癌分化程度及有无淋巴结转移的相关性,进一步分析二者之间的相关性。方法:免疫组化SP法检测正常食管黏膜,癌旁组织及食管鳞癌组织中Survivin和Bcl-2蛋白的染色情况。使用SPSS13.0统计软件进行分析。结果:在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织以及正常食管黏膜组织中Survivin蛋白阳性表达率分别为73.3%、53.3%和6.67%;三组间两两比较结果有统计学意义。高、中、低分化鳞癌组织的Survivin蛋白阳性表达率分别为53.8%、75.0%、87.5%,两两比较无统计学意义。无淋巴结转移组的食管鳞癌组织中Survivin蛋白阳性表达率为52.4%,有淋巴结转移组的食管鳞癌组织中Survivin的阳性表达率为91.7%,分析显示两组间比较有显著性差异(P<0.05)。在食管鳞癌组织中,Bcl-2的阳性表达率71.1%;癌旁组织中Bcl-2的阳性表达率37.8%。两组间比较差别显著(P<0.05)。在正常食管黏膜组织中Bcl-2零表达。高、中、低分化鳞癌组织中Bcl-2阳性表达率分别为61.5%、68.7%、81.3%,两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。有淋巴结转移的食管鳞癌组织中Bcl-2的阳性表达率为83.3%,无淋巴结转移的食管鳞癌组织中Bcl-2的阳性表达率为57.1%,两组间比较差别显著(P<0.05)。在研究中发现,Survivin蛋白与Bcl-2蛋白同时阳性表达者占60.0%,分析显示食管鳞癌组织中,Survivin与Bcl-2蛋白表达情况有显著相关性(P=0.008)。结论:Survivin和Bcl-2蛋白可能与食管癌的发生与发展相关并对判断食管鳞癌的恶性程度有参考价值。同时两种蛋白可能协同作用抑制肿瘤细胞凋亡,进而参与食管癌的发生与发展。     

hTERT在肾癌中的表达及临床意义

目的 检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)在肾癌中的表达及其临床意义.方法 采用RT-PCR及Western blot方法检测45例肾癌组织、45例配对的癌旁肾组织及786-0细胞系中hTERT mRNA及蛋白的表达情况,观察其表达与肿瘤大小、临床分期、病理组织分型、分级之间的关系.结果 hTERT mRNA及蛋白在肾癌组织中呈高表达(P=0.000),其表达与肾癌的肿瘤大小、临床分期、病理组织分型、分级之间无关(P＞0.05).结论 肾癌组织中hTERT表达较高,可尝试用于肾癌的诊断和预测,并为基因治疗提供了思路.     

hTERT及c-myc蛋白在宫颈癌中的表达

目的探讨宫颈癌及癌前病变中端粒酶逆转录酶（hTERT）和c-myc蛋白的表达及相互关系。方法以44例宫颈癌、18例宫颈上皮内瘤变（CIN）和6例正常宫颈组织为研究对象，采用免疫组化SP方法检测c-myc蛋白、hTERT蛋白，并对各指标阳性表达率和相关性进行比较分析。结果正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈癌组织中，c-myc蛋白的阳性率分别为0，38．9％，72．7％；hTERT蛋白为0，33．3％，77．3％。二者在CIN、宫颈癌中分别与正常组织相比差异有显著性（P〈0．05）。宫颈癌组织中的表达较CIN高，差别有显著性（P〈0．05）。宫颈癌中，c—myc蛋白和hTERT蛋白的表达在有周围组织浸润、有淋巴结转移和远处转移时显著增高，其阳性表达随期别的增加而增高（P〈0．05）。二者的表达呈正相关。结论hTERT基因的过度表达在宫颈癌的发生发展过程中具有重要作用；c-myc蛋白和hTERT的过表达是宫颈癌发生中的早期事件，其表达水平随着宫颈癌恶性程度的增加而增加; c-myc在转录水平上激活hTERT的表达，可能是宫颈癌发生发展的重要阶段。     

hTERT蛋白在胃腺癌组织中定量表达的研究

目的 探讨hTERT蛋白在胃腺癌组织中表达情况及其与胃癌进展的关系.方法 对68例胃腺癌和10例正常组织采用流式细胞术定量检测hTERT蛋白的表达.结果 hTERT蛋白流式细胞术测定在进展期胃癌、早期胃癌和正常胃黏膜荧光指数FI值分别为1.92±0.17、1.60±0.18和0.98±0.15,进展期胃癌hTERT含量高于早期胃癌(P＜0.01)、早期胃癌高于正常胃黏膜(P＜0.01);中、低分化腺癌hTERT蛋白FI值分别为1.89±0.20和1.92±0.19显著高于高分化腺癌1.71±0.19(P＜0.01);有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P＜0.05);T1-T2级胃癌TERT蛋白FI值高于T3-T4级胃癌(P＜0.05).结论 hTERT高表达与胃腺癌进展相关,可作为胃癌进展的生物学标志之一.     

含hTERT基因片段重组逆转录病毒的构建

目的构建含hTERT基因片段的重组逆转录病毒。方法采用RT-PCR法从人白血病细胞株K-562中扩增hTERT基因片段(1590~2540bp),亚克隆至逆转录病毒表达载体pLXSN,构建重组质粒pLXSN-hTERT;用脂质体转染的方法将从重组质粒转入PT67细胞,G-418压力筛选获得含hTERT基因片段的重组逆转录病毒细胞克隆;0.22μm微孔过滤抗性克隆上清获得含表达hTERT基因的重组逆转录病毒;WesternBlot检测G-418抗性克隆的hTERT产物的表达。结果PCR扩增的hTERT基因片段与GenBank公布的序列相比仅有2个核苷酸差异,氨基酸序列完全一致;重组病毒的滴度为2.85×105PFU/ml;WesternBlot检测到含hTERT基因片段的重组病毒能够表达出一分子量为37kD的多肽。结论成功构建了表达hTERT基因片段的重组逆转录病毒,为进一步探讨内源性表达hTERT基因产物的树突状细胞能否激发特异性CTL的产生奠定了坚实的基础。     

Stat3?Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性研究

目的:研究口腔黏膜癌前病变癌变过程中Stat3?Bcl-2及cyclinD1的表达及其相关性?方法:采用免疫组化的方法分别检测正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中Stat3?Bcl-2及cyclinD1的表达?结果:正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜和OSCC中Stat3和Bcl-2?cyclinD1的积分光密度值(intergrated optical density,IOD)均逐步升高;Stat3?Bcl-2?cyclinD1三者的IOD值除单纯性增生黏膜与口腔正常黏膜无统计学意义外,其余各组间均有统计学意义?Stat3与Bcl-2 IOD值呈线形正相关;Stat3与cyclinD1 IOD值呈线形正相关;Bcl-2与cyclinD1 IOD值无相关性?结论:Stat3?Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性提示,口腔黏膜癌前病变癌变是由多种基因共同参与的过程?