环孢素与小檗碱合用抑制肝CYP3A1、CYP2E1、mdr1基因表达的实验研究

目的：观察环孢素(cyclosporin, CsA)单用及与小檗碱(berberine chloride,Ber)合用对小鼠和大鼠肝CYP3A1、CYP2E1基因及多药耐药基因mdr1a和mdr1b表达的影响。方法： 采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法测定小鼠和大鼠肝CYP3A1、CYP2E1、mdr1a和mdr1b基因在给药后的变化。结果：小鼠灌胃给药6 d时，Ber与CsA合用对CYP3A1和CYP2E1基因均有明显抑制作用；大鼠灌胃给药12 d时，与对照组比较，除了Ber 100 mg·kg 1组外，其余各组对大鼠肝CYP3A1、CYP2E1、mdr1a、mdr1b基因均有明显的抑制作用。结论：Ber与CsA合用可明显抑制小鼠和大鼠肝CYP3A1及mdr1a、mdr1b基因的表达，从而减少CsA在肝的代谢及消除，这可能是Ber增加CsA血药浓度的重要机制。     

盐酸小檗碱及其与环孢素A合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的影响

目的 :阐明盐酸小檗碱 (berberinechloride ,Ber)及其与环孢素A (cyclosporin ,CsA)合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的影响。方法 :实验分 7组 :溶媒对照组、15 0mg·kg-1酮康唑组、10 0mg·kg-1Ber组、2 0 0mg·kg-1Ber组、4 5mg·kg-1CsA组、10 0mg·kg-1Ber 45mg·kg-1CsA组、2 0 0mg·kg-1Ber 45mg·kg-1CsA组 ,采用RT PCR和Westernblot等方法测定大鼠肝脏和小肠CYP3A1的表达水平。结果 :RT PCR结果显示 :灌胃给药 12d后 ,除了 10 0mg·kg-1Ber组外 ,其余各用药组对大鼠肝脏CYP3A1基因表达均有明显的抑制作用。Westernblot结果显示 :给药 6d后 ,2 0 0mg·kg-1Ber 45mg·kg-1CsA组对大鼠肝脏CYP3A1的表达有明显抑制作用 ;给药 12d后 ,10 0mg·kg-1Ber 45mg·kg-1CsA ,2 0 0mg·kg-1Ber 45mg·kg-1CsA组对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的表达均有明显抑制作用。结论 :通过增强CsA对肝脏和小肠CYP3A1基因表达的抑制作用 ,从而减少CsA在肝脏和小肠的代谢及消除 ,可能是Ber增加CsA血浓度的重要机制。     

环孢素A与盐酸小檗碱合用对大鼠肝脏和小肠药物代谢酶的影响

目的:研究盐酸小檗碱(berberine chloride,Ber)与环孢素A(CsA)合用对大鼠肝脏和小肠药物代谢酶的影响.方法:采用分光光度法测定各给药组大鼠肝脏和小肠微粒体中红霉素N-脱甲基酶(ERD)、氨基比林N-脱甲基酶(ADM)和谷胱甘肽转移酶(GST)的活性.结果:Ber组和Ber CsA组能明显抑制肝微粒体中ERD、ADM和GST酶活性(P< 0.05 ),而且Ber CsA组较CsA单用组有更明显的抑制作用(P< 0.05 ).Ber CsA组还能明显抑制肠微粒体中ERD、ADM和GST酶活性(P< 0.05 ).结论:Ber与CsA合用时,能显著抑制大鼠肝脏和小肠药物代谢酶活性,这可能是Ber增加CsA血药浓度的一个重要机制.     

合用盐酸小檗碱对环孢素A人体药动学的影响

目的:研究合用盐酸小檗碱(Ber)对肾移植受者和健康受试者环孢素A(CsA)药动学的影响,以分析两药相互作用发生的部位.方法:采用自身对照的方法,12例健康受试者和6例肾移植术后1个月的患者在个体CsA剂量不变的前提下,改变给药途径、两药同时或分开服用和改变合用频率等条件,按时间点采集血样,用FPIA法测定全血CsA浓度,并计算出药动学参数.结果:肾移植受者合用Ber和CsA后,CsA的AUC平均增加(34.5±17.8)%;口服6mg·kg-1CsA和Ber 0.3g,bid,末次两药分开服用的健康受试者平均AUC没有增加;口服3mg·kg-1CsA和Ber 0.3g,bid,末次两药同时服用的健康受试者平均AUC增加(19.2±10.4)%;静注3mg·kg-1CsA和口服Ber 0.3g,bid的健康受试者平均AUC减少(16.0±7.2)%.结论:两药必须同时服用方可发生相互作用,只有两药均在肠道时,CsA的吸收才会增加,提示肠道可能是Ber影响CsA吸收的作用部位之一,Ber可能增加CsA的吸收或减少肠代谢.Ber与CsA同时口服可增加CsA的生物利用度.     

肾移植受者环孢素A与盐酸小檗碱合用的临床研究

目的研究盐酸小檗碱与环孢素A长期联合应用增加肾移植受者环抱素A血浓度的作用。方法52名服用环抱素A+盐酸小檗碱患者为试验组,52名单服环抱素A患者为对照组,以环抱素A全血浓度及肝、肾功能生化检测指标作为临床评价指标。结果合用盐酸小檗碱患者环抱素A全血浓度与合用前比较增幅达75%,与对照组比较有显著性提高（P<0.001）。盐酸小檗碱与环抱素A合用对肝、肾功能无明显影响。结论盐酸小檗碱能明显升高肾移植受者环抱素A血浓度。在升高环抱素A血浓度的同时,盐酸小檗碱并不增加环抱素A的毒性反应。盐酸小檗碱与环抱素A合用可减少环抱素A用药量,节省环抱素A费用。     

肾移植受者环孢素A与盐酸小檗碱合用的临床研究

目的:研究肾移植受者长期联合应用盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,Ber)与环孢素A(Cyclos- porin A,CsA)对CsA血浓度和肝、肾功能的影响。方法:138名服用CsA Ber患者为试验组,150名单服CsA患者为对照组,以CsA全血浓度及肝、肾功能生化检测指标作为临床评价指标。结果:试验组合用Ber 1、3、6个月后CsA浓度比合用前增加49.8%、81.4%和36.9%(P<0.01),CsA浓度/剂量的比值比合用前增加88.8%、102.0%和72.5%(P<0.01),与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Ber与CsA合用对肝、肾功能无明显影响。结论:Ber能明显升高肾移植受者CsA血浓度.且不增加CsA的毒性反应,因此可减少CsA用药量,节省费用。     

盐酸小檗碱对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶含量及活性的影响

目的考察盐酸小檗碱对大鼠肝微粒体的蛋白含量、CYP450酶总量和主要CYP450酶亚型(CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C19)活性的影响。方法以溶剂为空白对照灌胃给予盐酸小檗碱250 mg/(kg·d),连续7 d,测定其肝微粒体蛋白含量、CYP450蛋白含量以及CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C19活性。结果与空白对照组比较,盐酸小檗碱给药组大鼠肝微粒体蛋白含量及肝微粒体CYP450含量无明显差异(P>0.05)。盐酸小檗碱给药后,给药组大鼠的平均CYP3A4活性是空白对照组的1/2;而两组之间CYP1A2、CYP2D6和CYP2C19的活性相当。结论盐酸小檗碱对大鼠CYP3A4活性有一定抑制作用,对CYP1A2、CYP2D6和CYP2C19的活性没有影响。     

盐酸小檗碱与环孢素合用的药物经济学研究

目的：了解盐酸小檗碱与环孢素合用能否降低环孢素的费用。方法：采用回顾性调查方法,进行盐酸小檗碱与环孢素合用的药物经济学评估。结果：盐酸小檗碱可显著增加环孢素的血药浓度。在满足正常疗效的同时,可降低环孢素的药物费用,每个每年可节约药费6000-8000元。结论：小檗碱与环孢素合用能降低费用,减轻病人和社会的经济负担。     

酒精性肝损伤大鼠细胞色素P450 CYP2E1和细胞色素P450 CYP3A的代谢活性

目的观察酒精性肝损伤对大鼠细胞色素P450CYP3A(CYP3A)和细胞色素P450CYP2E1(CYP2E1)代谢活性的影响。方法采用ig给予白酒制备大鼠酒精性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,采用HE染色法光镜下观测酒精对肝脏损伤程度。大鼠ip给予CYP3A探针药物咪达唑仑10mg·kg-1或ig给予CYP2E1探针药物氯唑沙宗50mg·kg-1后,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中咪达唑仑和氯唑沙宗的血药浓度,并应用3P87软件计算其药代动力学参数,以考察CYP2E1和CYP3A的代谢活性的变化。大鼠ig给予氯唑沙宗80mg·kg-1后,热板方法测定大鼠添足次数和添足反射潜伏期。结果酒精性肝损伤可致大鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞体积增大,呈弥漫性中度水变性,肝窦受压,大部分肝细胞胞浆内见大小不等的脂肪空泡;与正常对照组相比,酒精性肝损伤组大鼠GPT和GOT活性分别增加了16.0%和20.0%(P<0.05,P<0.01)。酒精性肝损伤致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了38.0%,30.5%和35.0%(P<0.05);酒精肝损伤组大鼠氯唑沙宗镇痛效果明显降低;酒精性肝损伤致大鼠CYP3A对探针药物咪达唑仑的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了122.6%,54.9%和56.9%(P<0.01,P<0.05)。结论酒精性肝损伤可使大鼠CYP2E1和CYP3A代谢活性增强。     

慢性间断性低氧对大鼠肝脏细胞色素P450的影响

目的观察慢性间断性低氧对大鼠肝脏P450同工酶的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组分别低氧3、7、14、28d。采用酶法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,分光光度法测定大鼠肝微粒体红霉素N-脱甲基酶(ERD)、苯胺羟化酶(ANH)活性,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠肝脏细胞色素P4503A2、2E1的mRNA表达水平。结果慢性间断性低氧对血清ALT和AST活性无明显影响;低氧7d后,大鼠肝脏ERD和ANH活性明显升高,28d时诱导率分别为155·5%和42·2%;同时CYP3A2和CYP2E1mR-NA的表达水平,也分别增加了220·5%和102·8%。结论慢性间断性低氧能明显增加大鼠肝脏ERD(CYP3A2)和ANH(CYP2E1)活性,其机制可能与其在转录水平上提高肝脏CYP3A2和CYP2E1的基因表达水平有关。     

灯盏细辛注射液对小鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的:研究灯盏细辛注射液对小鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响。方法:小鼠分为空白对照组、阳性对照组(苯巴比妥钠80mg/kg,i.p.,共7d)、灯盏细辛注射液正常剂量组、高剂量组(10、30mg/kg,i.p.,共14d)。用紫外分光光度法测定细胞色素P450及其同工酶的活性。结果:灯盏细辛注射液两剂量组小鼠肝微粒体的蛋白含量和细胞色素P450含量较空白对照组增高,对肝重指数基本无影响;可抑制红霉素-N-脱甲基酶(ERD)的活性(P<0.01),而对氨基比林-N-脱甲基酶(AMD)基本无影响(P>0.05);苯巴比妥钠组肝重指数、蛋白含量和细胞色素P450含量与其他各组比较均升高(P<0.05),对氨基比林-N-脱甲基酶、红霉素-N-脱甲基酶活性均有诱导作用(P<0.01)。结论:灯盏细辛注射液对小鼠肝微粒体蛋白、细胞色素P450含量有一定影响,对CYP3A可能有抑制作用,对氨基比林-N-脱甲基酶活性基本无影响。     

酮康唑对大鼠肝脏CYP450酶系的影响*

目的:观察酮康唑对大鼠肝细胞色素P450及其主要亚型的影响。方法:Sprague-Dawley大鼠用140,280,420μmol.kg-1.d-1酮康唑连续灌胃7 d,测定肝脏微粒体中总CYP450含量和CYP1A1,1A2,1B1,2B1/2,2E1和3A亚型活性。结果:不同剂量酮康唑给药后大鼠肝脏脏器系数、CYP1A1和1B1亚型活性明显增高(P<0.05,P<0.01);总CYP450含量和CYP3A活性显著降低(P<0.01);低剂量的酮康唑抑制CYP1A2和CYP2B1/2亚型的活性,高剂量却出现了诱导作用(P<0.05,P<0.01)。各剂量组对CYP2E1均无明显影响。结论:酮康唑对大鼠肝脏CYP450及主要药物代谢亚型CYP1A1,1A2,1B1,2B1/2和3A有影响,临床长期用药或与经肝脏CYP450代谢的药物联合应用时要注意监测血药浓度和肝脏功能,防止药物代谢减缓出现蓄积中毒或药物代谢加快而降低药效。     

葛根素对小鼠和大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

葛根素(puerarin)是豆科植物葛根的主要有效成分,具有扩血管、抗血小板、降血压、降血糖、改善微循环等作用,广泛用于心脑血管疾病的防治[1].因联合用药日益普遍,使药物间的相互作用倍受重视.肝微粒体细胞色素P450(cytochrome P450, CYP)是参与药物代谢的重要酶系,药物对CYP活性的影响是药物间相互作用的重要机制之一.本研究探讨了葛根素腹腔注射对小鼠和大鼠肝微粒体CYP活性的影响.     

淫羊藿苷对不同月龄大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的 揭示淫羊藿苷(Ica)对大鼠肝微粒体细胞色素P450的含量及部分亚型的影响,并比较月龄的差异.方法 ig给予6月龄和18月龄的♂SD大鼠Ica( 60 mg· kg -1),4周后取肝脏,用钙沉淀法提取肝微粒体,BCA法测定微粒体蛋白浓度;用一氧化碳还原差示光谱法测定CYP450的含量;用ELISA法测定CYP1 A1、CYPb5的含量;用比色法测定苯胺羟化酶(反映CYP2E1活性)和红霉素-N-脱甲基酶(反映CYP3A活性)的活性;用real - time RT - PCR检测CYP1 A1、CYP2A3、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2和CYP4B1 mRNA的表达.结果 60 mg· kg-1 Ica明显增加了CYP450的总酶和CYP1 A1的含量、CYP3A的活性及CYP1 A1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA的表达,降低了CYP2E1的活性及其mRNA的表达;但Ica对上述各指标的诱导或抑制作用在大鼠月龄方面差异不明显;Ica对CYPb5的含量及CYP2A3、CYP4B1 mRNA的表达未见明显影响.结论 Ica对大鼠肝微粒体CYP450总酶、CYPI A1和CYP3A具有诱导作用,对CYP2E1具有抑制作用,该作用未见明显月龄差异.     

六种大鼠肝微粒体细胞色素P450重组酶系对33种外来化合物的代谢

多氯联苯诱导的六种鼠肝微粒体细胞色素P450重组酶系A_1,A_2,B,C_1,C_2和D对33种外来化合物代谢的催化速率不同,其中以C_1酶系和C_2酶系催化活力最强,其次为A_1酶系,B酶系催化活力最弱,外来化合物的种类不同,经重组酶系催化的途径也不同,如卤代烷烃,卤代烯烃,苯及其同系物,亚硝胺类等化合物主要经P450C_1酶系代谢,而大多数有机磷酸酯,氨基甲酸酯类化合物及多环芳烃类致癌物则以P450 C_2酶系代谢为主。