转化生长因子β1对不同阶段支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞外信号调节激酶通道的影响

目的本文旨在探讨转化生长因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）对不同阶段（急性和慢性）支气管哮喘（简称哮喘）大鼠气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells,ASMC）上细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）1／2 mRNA、磷酸化ERK1／2（p-ERK1／2）表达水平的影响。方法建立2周、6周哮喘大鼠模型,用TGF-β1和ERK的特异性抑制剂PD98059干预哮喘大鼠ASMC的培养。用RT-PCR检测不同阶段哮喘大鼠模型ASMC上ERK 1／2mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测P—ERK1／2蛋白的表达及定位。结果与正常对照组ASMC比较,2周、6周哮喘组ERKmRNA、ERK1／2蛋白、p-ERK 1／2蛋白的表达量以及ERK活化率显著增高。经PD98059干预之后,2周、6周哮喘组ASMC的ERKmRNA、p-ERK 1／2蛋白的表达量以及ERK活化率均显著降低。经TGF-β1,干预后,2周、6周哮喘组ASMC的ERK mRNA、p-ERK 1／2蛋白的表达量较各自哮喘组显著增高,而这一作用可以被PD98059部分抑制。但以上结果2周和6周哮喘模型组之间差异无统计学意义。结论TGF-β1可上调不同阶段哮喘大鼠ASMC上ERK1／2mRNA及p-ERK1／2表达。在哮喘的不同阶段,TGF-β1可能持续通过促进ERK信号转导通道的活性对ASMC的增殖进行调控。     

细胞外信号调节激酶通路对气道平滑肌的功能调节

细胞外信号调节激酶(ERK)通路是一种重要的细胞内信号转导通路,ERK是该通路的关键酶,气道平滑肌中有ERK1/2分布,ERK参与气道平滑肌表型改变、内膜下迁移、细胞的增殖与凋亡等多种功能。     

转化生长因子β1基因和细胞外信号调节激酶在胃癌中的表达和意义

目的：研究胃癌组织中TGF-β1、ERK-1及ERK-2的表达特点和意义。方法：选取67例胃癌标本，常规石蜡包埋行TGF-β1、ERK-1及ERK-2免疫组织化学染色。结果：TGF-β1、ERK-1、ERK-2在胃腺癌、粘液癌和印戒细胞癌中过表达率无明显差异；Ⅲ∕Ⅳ期、低分化、癌细胞浸润至深肌层或浆膜层和淋巴结转移的组织TGF-β1、ERK-1、ERK-2过表达率明显高于Ⅰ∕Ⅱ期、高分化、癌细胞未浸润至深肌层和淋巴结未转移组织，差异均有显著性意义。TGF-β1、ERK-1、ERK-2在胃癌中的表达密切相关。结论：TGF-β1、ERK-1和ERK-2三者的表达与胃癌发生发展的生物学行为和预后可能有关，可作为重要的生物学标记物。     

转化生长因子β1和磷酸化细胞外信号调节激酶在胃癌中的表达

转化生长因子β1（TGF-β1）是一种具有多种生物活性的多肽，与肿瘤的发生及发展密切相关。细胞外信号调节激酶是丝裂素活化蛋白激酶家族的一个亚族，磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）是其活化形式。我们应用免疫组化技术检测TGF-β1和p-ERK蛋白在胃癌中的表达情况，旨在探讨它们与胃癌发生及发展的关系。     

慢性支气管哮喘模型大鼠气道中细胞外信号调节激酶1/2表达及活性变化的研究

细胞外信号调节激酶（ERK）属于有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族，它是细胞内重要的信号传递分子，并有多种亚型，在平滑肌中主要有ERK1、ERK2（ERK1/2）两种，该通道在支气管哮喘（简称哮喘）病理生理发生和发展过程中的作用得到越来越多的关注。     

血小板衍生生长因子β受体和细胞外信号调节激酶1/2在大鼠肝纤维化中的表达

血小板衍生生长因子（platelet-derived growth factor．PDGF）对多种细胞均有促增殖和趋化作用，它是HSC最强的有丝分裂原。PDGF受体由两种亚单位α及β构成，静止的HSC只表达α亚单位，激活的HSC才表达β亚单位，PDGFl5受体在肝纤维化过程中的作用尤为突出。[第一段]     

细胞外信号调节激酶信号通道在哮喘发病机制中的作用

细胞外信号调节激酶信号通道是一条重要的细胞内传导通道。它参与了细胞的生长、发育、增殖、分化及恶性转化等多个生理和病理生理过程,近年来有关该通道在支气管哮喘发病机制中的作用成为研究的热点。本文就该通道的生物学特征、研究方法及其在哮喘发病机制中的作用进行简要综述。     

转化生长因子β在支气管哮喘气道平滑肌重塑中的作用

支气管哮喘(简称哮喘)是一种气道慢性炎症,持续的气道炎症导致气道重塑、不完全可逆的气流受限和进行性的肺功能受损.平滑肌细胞的增殖(包括增生和肥大)是哮喘气道重塑的特征性改变,是哮喘气道反应性和严重程度相关的重要因素之一.转化生长因子β(TGF-β)能够诱导分化、炎症、增生以及凋亡等多种细胞反应,促进平滑肌细胞的增生、肥大和迁移,在气道重塑中发挥重要作用.减少TGF-β的产生以及控制TGF-β的效应有利于对慢性哮喘气道重塑的干预治疗.     

转化生长因子β在支气管哮喘气道平滑肌重塑中的作用

支气管哮喘（简称哮喘）是一种气道慢性炎症,持续的气道炎症导致气道重塑、不完全可逆的气流受限和进行性的肺功能受损。平滑肌细胞的增殖（包括增生和肥大）是哮喘气道重塑的特征性改变,是哮喘气道反应性和严重程度相关的重要因素之一。转化生长因子β（TGF-β）能够诱导分化、炎症、增生以及凋亡等多种细胞反应,促进平滑肌细胞的增生、肥大和迁移,在气道重塑中发挥重要作用。减少TGF-β的产生以及控制TGF-β的效应有利于对慢性哮喘气道重塑的干预治疗。     

KATP通道与人肺动脉平滑肌细胞外信号调节激酶磷酸化的关系

目的 研究三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾(KATP)通道与人肺动脉平滑肌细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)磷酸化的关系.方法 原代培养人肺动脉平滑肌细胞,用Western-blot方法 检测磷酸化细胞外信号调节激酶1和2(p-ERK1/2).对照组不予干预,实验组分别加入内皮素-1(ET-1)、ET-1+埃他卡林、吡那地尔或格列本脲等孵育.结果 ①在2～30 min,ET-1呈时间依赖性促进人肺动脉平滑肌细胞ERK1/2磷酸化,10 min时最明显.②埃他卡林和吡那地尔可拮抗ET-1对ERK1/2磷酸化的影响.③特异性KATP通道阻断剂格列本脲可逆转埃他卡林和吡那地尔的作用.结论 KATP通道开放剂可能通过激活KATP通道,抑制ET-1诱导的原代培养人肺动脉平滑肌细胞ERK1/2磷酸化,KATP通道可能是研发新型治疗肺动脉高压药物的重要靶分子.     

胰岛素对血管平滑肌细胞转化生长因子β1及其受体表达的影响

流行病学调查的资料显示 ,5 0 %以上的 2型糖尿病患者并发高血压 ,这将加重患者的大血管粥样硬化的形成。近年来研究发现 :高血糖是血管损伤的重要因素 ,却不是此并发症的唯一因素〔1〕;胰岛素抵抗所导致的高胰岛素血症是血管硬化的独立高危因子 ,胰岛素能直接加强血管平滑肌细胞(ＶＳＭＣ)增生 ,参与血管硬化的病理过程。为此 ,本研究观察胰岛素对血管平滑肌细胞ＴＧＦβ1和Ⅰ、Ⅱ型ＴＧＦβ受体表达的影响。一、材料和方法1.材料 :实验动物 :ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠 (购自上海第二医科大学附属瑞金医院上海市高血压研究所 ) ,雄性 ,7～ 10周龄…     

ERK反义寡核苷酸对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

许多研究提示，气道平滑肌细胞（AMSC）增殖与凋亡的异常在支气管哮喘（以下简称哮喘）气道高反应性、气道重建、不可逆气流阻塞等方面起重要作用，但有关其细胞内信号调控机制目前尚未阐明。细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated kinase, ERK）通道是一种重要的细胞内信号转导通道，在AMSC中，     

转化生长因子β与支气管哮喘气道重塑

转化生长因子β(TGFB)具有强烈的致纤维化作用,支气管哮喘发病过程中,TGFB表达增高,气道TGFB/EGF(表皮生长因子)失衡,引起成纤维细胞、肌成纤维细胞增生,细胞外基质合成增加、降解减少,导致气道重塑。     

转化生长因子β1对血管平滑肌细胞行为的影响

血管平滑肌细胞是参与高血压,动脉粥样硬化,冠状动脉介入术后再狭窄,及移植相关的血管病变发生发展的主要细胞成分之一,因此对其增殖、分化、迁移、分泌细胞外基质等生物学行为的调控显得尤为重要,实验研究显示转化生长因子β1是其最重要的调节因子之一,本文将以转化生长因子β1对血管平滑肌细胞这些生物学行为的调控作一综述。     

吸烟对支气管哮喘大鼠气道转化生长因子β1 mRNA和Ⅲ型胶原表达的影响

目的 探讨吸烟对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道壁厚度及转化生长因子β1 mRNA(TGF-β1 mRNA)和Ⅲ型胶原表达的影响及作用机制.方法 健康雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为对照组、哮喘组和吸烟组,每组10只.用卵白蛋白致敏并吸入激发制备哮喘模型.吸烟组定量吸入香烟烟雾.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测量TGF-β1 mRNA和免疫组化法测量Ⅲ型胶原表达.采用SPSS 11.0软件,所有数据以-x±s表示,组间比较采用单因素方差分析,组间差异比较采用LSD方差分析法,采用Pearson相关分析.结果 (1)吸烟组TGF-β1 mRNA、Ⅲ型胶原表达的吸光度(A)值分别为0.42±0.04、25.8±2.3,哮喘组分别为0.39±0.04、22.9±3.1,对照组分别为0.26±0.04、16.3±2.3,3组间比较差异有统计学意义(F值分别为55.97,35.61,P均＜0.05);(2)Pearson相关分析结果表明TGF-β1 mRNA与Ⅲ型胶原的表达呈正相关(r=0.71,P＜0.05);(3)气道壁厚度吸烟组为(23.3±2.4)μm2/μm,哮喘组为(20.1±2.9)μm2/μm,对照组为(11.6±2.4)μm2/μm,3组间比较差异有统计学意义(F=53.68,P＜0.05).结论 吸烟通过促进哮喘大鼠气道TGF-β1 mRNA的过度表达,增加气道Ⅲ型胶原表达,加重气道重塑的发生.     

转化生长因子β1Ⅰ型受体拮抗剂对支气管哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)Ⅰ型受体拮抗剂SB 431542对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠模型气道炎症及气道重塑的影响,为哮喘的治疗提供新思路.方法 将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组及SB 431542组,每组10只;卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;布地奈德组和SB 431542组分别给予布地奈德雾化吸入和SB 431542滴鼻,每周3次.HE和Masson染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;AB-PAS染色观察杯状细胞增生情况;免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平及血清总IgE水平;免疫印迹法(Western blot)测定各组小鼠肺组织中Smad3、p-Smad3及Smad7蛋白表达.结果 哮喘组与正常组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生;布地奈德组上述改变均较哮喘组轻;SB 431542组嗜酸粒细胞浸润较哮喘组减轻,但仍高于正常组及布地奈德组,平滑肌层增厚、胶原纤维增生较哮喘组明显减轻(P ＜0.05),与布地奈德组比较差异无统计学意义(P＞0.05).与正常组比较,哮喘组小鼠支气管AB-PAS及a-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组小鼠支气管AB-PAS及α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组(P＜0.05).哮喘组气道炎症指标(血清总IgE、IL-4、IL-5及TGF-β1)显著高于正常组(P＜0.05),布地奈德组上述指标低于哮喘组(P ＜0.05),SB 431542组与哮喘组比较差异无统计学意义(P＞0.05).MMP-9、TIMP-1在哮喘组的表达明显高于正常组(P＜0.05),在布地奈德组及SB 43542组的表达低于哮喘组(P＜0.05),两治疗组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot检测显示,各组小鼠肺组织Smad3的表达差异无统计学意义(P＞0.05);哮喘组p-Smad3表达明显高于正常组(P＜0.05),布地奈德组及SB431542组p-Smad3表达低于哮喘组(P＜0.05);与正常组比较,哮喘组Smad7表达降低(P＜0.05),布地奈德组及SB 431542组Smad7表达高于哮喘组(P＜0.05),且这两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SB 431542能显著减轻哮喘小鼠细胞外基质沉积及平滑肌增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其调节MMP-9、TIMP-1的表达有关.SB 431542对哮喘小鼠气道炎症浸润无明显改善,说明哮喘气道炎症可能不依赖于TGF-β1/Smads通路.     

转化生长因子α对小鼠气道平滑肌细胞的促增殖作用

目的 探讨转化生长因子α(transforming growth factog alphg,TGF-α)对小鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMC)促增殖作用及其机制.方法 用四唑盐(MTT)比色法和3H-TdR掺人法测定加入TGF-α后小鼠ASMC的增殖情况.本实验采用3H-TdR掺入法和MTT比色法观察选择性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(AG1478)、EGFR中和抗体225(225mAb)、MEK抑制剂(U0126)、PI-3K抑制剂(Wonmannin)对加入TGF-α后促ASMC增殖的影响.通过Western Blot方法测定加入TGF-α及加用AG1478、225mAb后ASMC磷酸化EGFR蛋白表达.结果 用MTT比色法和3H-TdR掺入法测定ASMC培养液中加入TGF-α后ASMC增殖情况比对照组明显增加.加入AG1478、225mAb、U0126、Wortmannin可抑制TGF-α促ASMC增殖作用(P＜0.01).经Western Blot检测,TGF-α引起ASMC磷酸化EGFR蛋白表达增高.AG1478、225mAb抑制TGF-α所致ASMC磷酸化EGFR蛋白表达的增加(P＜0.01).结论 TGF-α激活EGFR为磷酸化EGFR,从而通过:①ras-raf-MEK-erk/MAPK途径;②PI3K-PKC-IKK途径;促进体外培养的小鼠ASMC的增殖.     

肝素对糖尿病大鼠肾小球转化生长因子β1及细胞外基质表达的影响

糖尿病性肾小球硬化的实质是肾小球细胞外基质(ECM)的过度聚积。转化生长因子 β(TGF- β)对 ECM代谢起着重要的调节作用。有研究表明 ,肝素能抑制 ECM的生成 [1 ] 。为此我们运用免疫组化方法观察了糖尿病大鼠肾小球两种 ECM成分 ,层粘蛋白 (L N)、纤连蛋白 (FN )的表达与TGF- β1的关系 ,以及肝素对其表达的调控 ,以进一步了解糖尿病肾病的发生机制及肝素是否对糖尿病肾病具有一定的防治作用。一、对象和方法1.对象 :2月龄 Wistar雄性大鼠 (同济医学院实验动物中心提供 ) 30只 ,体重 15 0～ 2 0 0 g,随机分为正常对照组、糖尿病…     

布地奈德吸入对慢性支气管哮喘小鼠转化生长因子β1/Smad信号通路的影响

目的 观察布地奈德对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号通路的影响.方法 30只小鼠按随机数字表法分成哮喘组、布地奈德组、正常对照组,每组10只.哮喘组小鼠于第0天和第14天以卵白蛋白(OVA)致敏,第24天开始雾化吸入1%OVA激发并持续28 d,建立哮喘气道重塑模型;布地奈德组在吸入OVA前2 h雾化吸入布地奈德30 min;正常对照组以生理盐水代替OVA.于最后一次雾化结束后24 h对肺组织行苏木精-伊红染色观察病理学改变;运用医学图像分析软件测定管腔内周长(Pi)、管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm)、支气管平滑肌细胞核数(N),将WAt、WAm、N用Pi标准化;用免疫组织化学方法检测肺组织TGF-β1蛋白表达;用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织TGF-β1、Smad 2、Smad 3、Smad 7 mRNA表达.结果 哮喘组WAt/Pi、WAm /Pi、N /Pi与对照组比较差异有统计学意义(P值均<0.05),布地奈德组与哮喘组比较差异也具有统计学意义(P值均<0.05);哮喘组TGF-β1蛋白和TGF-β1、Smad 2、Smad 3 mRNA的表达较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05),布地奈德组TGF-β1蛋白和TGF-β1、Smad 2、Smad 3 mRNA的表达下降,与哮喘组比较差异均有统计学意义(P<0.05);布地奈德组可显著上调Smad 7 mRNA的表达,与哮喘组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期雾化吸入布地奈德通过抑制慢性哮喘小鼠肺组织TGF-β1、Smad 2、Smad 3的过度表达,上调Smad 7的表达,从而阻断TGF-β1/Smad信号通路,明显减轻哮喘小鼠的气道重塑.