红景天苷联合顺铂对人胃癌HGC-27细胞生物学功能的抑制研究

目的：探讨红景天苷联合顺铂通过磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路对人胃癌HGC-27细胞的生物学功能的抑制作用及其机制。方法：选取人胃癌细胞株HGC-27,随机分为空白组、红景天苷组(40μmol/L红景天苷)、顺铂组(10μmol/L顺铂)、联合组(40μmol/L红景天苷+10μmol/L顺铂)。采用四甲基噻唑蓝(MTT)实验检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用划痕实验检测细胞迁移率,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用实时聚合酶链反应检测PI3K、Akt、mTOR mRNA表达情况,采用蛋白免疫印迹法检测PI3K、Akt、磷酸化Akt(phospho-Akt, p-Akt)、mTOR、磷酸化mTOR(phospho-mTOR,p-mTOR)、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子-2(B-celllymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bc...     

3-氢化松苓酸B诱导人胃癌HGC-27细胞的程序性死亡

目的研究3-氢化松苓酸B对人胃癌细胞HGC-27程序性死亡的影响。方法 MTT法测定细胞增殖。流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率。吖啶橙染色及透射电镜观察细胞自噬;Western blot法检测自噬相关蛋白的表达。结果 3-氢化松苓酸B对HGC-27细胞的增殖具有抑制作用,并呈明显的时间、剂量依赖性。10、20、40μmol/L 3-氢化松苓酸B处理HGC-27细胞24 h后,可将细胞阻滞于G0/G1期,但对细胞凋亡无明显影响。20μmol/L 3-氢化松苓酸B处理HGC-27细胞24 h后,透射电镜观察到大量自噬泡和自噬体,细胞自噬比例随浓度增加而显著提高;3-氢化松苓酸B促进I型微管相关蛋白1轻链3(LC3 I)向II型微管相关蛋白1轻链3(LC3 II)转化,上调肌球蛋白样B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)结合蛋白(Beclin-1)和细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)的表达,并抑制G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)的表达。结论 3-氢化松苓酸B可诱导HGC-27细胞发生自噬性死亡,但是对细胞凋亡无明显影响。     

新藤黄酸对HepG2裸小鼠移植瘤的抗肿瘤作用与MAPK信号转导通路的关系

目的:研究新藤黄酸(neo-gambogic acid,NGA)对Hep G2裸小鼠移植瘤的体内抗肿瘤作用及其机制.方法:采用Hep G2裸小鼠移植瘤模型,造模7d后将模型动物随机分为5组,即荷瘤对照组,阳性对照组(5-FU 10.0 mg·kg-1),NGA高、中、低剂量组(分别为8.0,4.0,2.0 mg·kg-1),隔天ip给药1次,给药7次后处死动物,分离肿瘤,测量肿瘤体积,称瘤重,计算相对肿瘤体积和抑瘤率,并将肿瘤组织切片,采用免疫组化法,检测实体瘤组织的Bax,Bcl-2,p-ERK1/2,p-MEK1/2蛋白的表达情况.结果:NGA高、中、低剂量组的平均瘤重[分别为(0.21±0.07),(0.41±0.17),(1.00±0.28)g]均明显低于荷瘤对照组(1.29±0.24)g,NGA高剂量组的抑瘤率为83.75％,高于阳性对照药5-FU的抑瘤率46.54％(P＜0.05);Bax表达量呈剂量依赖性升高,Bcl-2表达量呈剂量依赖性降低;NGA给药组p-ERK1/2和p-MEKl/2的表达量均明显低于荷瘤对照组(P＜0.05).结论:NGA对Hep G2裸小鼠移植瘤具有确切的体内抗肿瘤作用,其作用机制与上调Bax/Bcl-2比值而诱导实体瘤细胞凋亡及下调丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导通路的磷酸化水平密切相关.     

猕猴桃根多糖对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及p-p38表达的影响

目的探讨猕猴桃根多糖（Actinidia chinensis Planch polysaccharid,ACPS）对人胃腺癌细胞（SGC-7901）增殖和凋亡的影响,及对SGC-7901细胞磷酸化p38（p-p38）蛋白表达的影响。方法采用CCK-8检测不同浓度ACPS对SGC-7901细胞的24、48、72h的抑制作用;流式细胞技术检测各浓度ACPS作用48h后SGC-7901细胞凋亡的发生率;Western blot法检测各浓度ACPS作用SGC-7901细胞后前体半胱氨酰天冬氨酸酶-9（pro-caspase-9）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）和p-p38蛋白量的表达,以及p38特畀性抑制剂预处理细胞后pro-caspase-9、PARP和p-p38蛋白量的表达。结果与对照组比较,1、2．5、5、10mg／mLACPS作用胃癌SGC．7901细胞后吸光度下降（P〈0．05）;同时药物剂量越高,作用时间越长,吸光度越低（P〈0．01）;24、48、72hIC50分别为7．43、3．88、1．32mg／mL;ACPS能下调SGC-7901细胞中pro-caspase-9蛋白的表达（P〈0．01）,增加PARP剪切蛋白的表达（P〈0．01）;进一步研究发现,ACPS处理SGC-7901细胞24h后,p38的磷酸化水平升高（P〈0．05）,p38特异性抑制剂处理细胞2h后能抑制p38磷酸化表达,并能抑制ACPS诱导的细胞凋亡。结论ACPS具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导其凋亡的作用;激活p38途径,进而激活caspase-9和PARP,最终导致细胞死亡,可能是其诱导胃癌细胞凋亡的分子机制之一。     

血竭石油醚提取物对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞的抗肿瘤作用

目的:研究血竭石油醚提取物(SDPEF)对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、体外迁移能力及自噬的影响,并阐明其分子作用机制.方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测SDPEF(0,20,40,60,80 mg·L-1)作用24,48,72 h时,对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞体外增殖的...     

藤黄酸对HepG2细胞的抗增殖作用及其机制研究

目的观察藤黄酸对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,探讨其作用机制。方法将体外培养的HepG2细胞按随机数字表法分为对照组及藤黄酸低、中、高剂量组,每组5个复孔。对照组以正常培养液培养,加入0.5%二甲基亚砜作为溶媒对照。藤黄酸低、中、高剂量组分别加入依藤黄酸0.1、1.0、10.0μmol/L进行干预。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,Hoechst染色法观察细胞核凋亡情况,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组比较,藤黄酸低、中、高剂量组HepG2细胞增殖率[(68.00±3.55)%、(51.93±4.36)%、(47.16±4.73)%比(99.87±4.53)%]降低(P<0.01),凋亡率[(23.00±1.22)%、(40.09±4.65)%、(70.32±4.99)%比(4.33±0.57)%]升高(P<0.01),Bcl-2[(0.73±0.10)、(0.25±0.10)、(0.19±0.08)比(0.97±0.11)]蛋白表达降低(P<0.01),Bax[(0.39±0.14)、(0.88±0.15)、(0.85±0.13)比(0.22±0.08)]蛋白表达升高(P<0.01),Bax/Bcl-2比值[(0.34±0.10)、(1.87±0.29)、(1.63±0.23)比(0.13±0.06)]升高(P<0.01);Hoechst染色结果显示,随着藤黄酸作用浓度的递增,HepG2细胞凋亡率呈剂量依赖性递增。结论藤黄酸可通过调控HepG2细胞中Bax及Bcl-2表达抑制细胞增殖。     

构树绿原酸样化合物诱导胃癌细胞凋亡的机制研究

目的研究构树绿原酸样化合物诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用及机制。方法采用MTT法检测构树绿原酸样化合物对SGC-7901细胞增殖的影响,DAPI染色法观察细胞形态,Annexin V/PI双染色法结合流式细胞术检测细胞凋亡,PI染色结合流式细胞术检测细胞周期,DCHF-DA探针荧光显微镜观察细胞内活性氧(ROS)变化,JC-1染色荧光显微镜观察细胞线粒体膜电位变化,Westernblotting检测细胞p53、Bcl-2、Bax、CytochromeC、p-p38、p-JNK、JNK、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p-ERK蛋白表达量。结果构树绿原酸样化合物能显著抑制SGC-7901细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性;给药组细胞内出现染色质浓缩和凋亡小体,细胞周期被阻滞在G2/M期,且线粒体膜电位显著下降(P0.05、0.01),ROS水平显著升高(P0.05、0.01)。构树绿原酸样化合物能显著上调SGC-7901细胞p53、Bax、Cytochrome C和p-p38蛋白表达水平(P0.05、0.01、0.001),显著下调p-ERK和Bcl-2表达水平(P0.01、0.001)。结论构树绿原酸样化合物可能通过p38-MAPK和ERK-MAPK信号通路介导线粒体氧化应激途径诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡。     

间歇低氧对幼鼠纹状体边缘区p38MAPK和超微结构的影响及芹菜素的干预作用

目的:研究间歇低氧对幼鼠纹状体边缘区p38MAPK及超微结构的影响及芹菜素的干预作用。方法:SPF级健康雄性SD幼鼠(3~4周龄)40只,随机分为4组:间歇低氧2周组(IH组)、对照组(C组)、芹菜素 二甲基亚砜组(Q组)和二甲基亚砜组(R组)。建立间歇低氧幼鼠模型,以RT-PCR法和Westernblot法分别测幼鼠纹状体内侧边缘区p38MAPK mRNA和磷酸化p38MAPK(p-p38)蛋白的表达,并电镜观察超微结构的改变。结果:IH组幼鼠纹状体边缘区的p38MAPK mRNA及p-p38蛋白均明显高于C组(P均<0.01),Q组的表达则明显低于R组(P均<0.01),电镜下IH组和R组纹状体边缘区组织细胞核膜模糊不清晰,染色质浓缩、边聚,线粒体肿胀空泡化,Q组和C组无明显变化。结论:间歇低氧可激活幼鼠脑区p38MAPK,进而引起超微结构的改变,而芹菜素可至少部分抑制这种激活,这可能对减轻间歇低氧后纹状体边缘区等脑区损伤具有积极意义。     

蛇葡萄素诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的:研究蛇葡萄素对人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的影响。方法:MTT比色法测定细胞的增殖抑制率,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI双染检测蛇葡萄素33.3,50,75 mg.L-1作用下SGC-7901细胞的凋亡及各细胞周期。结果:蛇葡萄素作用于SGC-7901 48 h后,可明显促进细胞早期凋亡,50,75 mg.L-1细胞凋亡率为(29.03±6.21)%,(43.43±1.00)%,明显高于空白组(11.83±4.67)%(P<0.05,P<0.01)且呈剂量依赖关系。蛇葡萄素33.3,50,75 mg.L-1作用于SGC-7901细胞48 h后,G1期细胞分别为(52.07±4.41)%,(57.07±2.70)%,(58.43±2.66)%明显高于空白对照组(42.00±3.04)%(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论:蛇葡萄素能诱导SGC-7901细胞凋亡并使细胞周期阻滞在G1期。     

鱼藤素诱导人胃癌SGC7901/VCR细胞程序性坏死的作用研究

目的：研究鱼藤素诱导人胃癌SGC7901/VCR细胞程序性坏死的作用。方法：应用Hoechst33342/碘化丙锭（PI）染色荧光显微镜、Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测鱼藤素作用前后人胃癌SGC7901/VCR细胞凋亡与坏死的变化;应用透射电镜观察鱼藤素作用前后人胃癌SGC7901/VCR细胞超微结构的变化;用Western blot检测RIP1和RIP3蛋白表达情况。结果：与对照组比较,鱼藤素组可见大量坏死细胞,细胞凋亡率无明显差异,但坏死率显著升高（P＜0.05）;透射电镜检测发现,鱼藤素组细胞可见细胞核肿胀外突,染色质凝聚成块,核膜周边聚集形成大量坏死小体;Western blot检测结果显示,鱼藤素组细胞RIP1和RIP3蛋白表达显著升高,且随时间延长逐渐增加。结论：鱼藤素作用于人胃癌SGC7901/VCR细胞后,诱导其出现细胞程序性坏死,其机制有待进一步研究。     

山竹的化学成分及其呫吨酮类化合物的药理作用研究进展

山竹是一种味美、营养和药用价值极高的水果.近年来,对山竹的主要化学成分进行了系统研究,发现其富含结构多样的多酚类化合物,其中呫吨酮类化合物具有抗肿瘤、抗细菌、抗真菌、抗疟疾、抗病毒、酶抑制、清除自由基等多种药理活性.对山竹化学成分及其药理作用的研究进展进行了系统地综述.     

版纳藤黄化学成分的研究

目的：研究版纳藤黄Garcinia xipshuanbannaensis枝叶的化学成分。方法：利用正相硅胶、反相RP-18柱色谱及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等手段进行分离纯化,根据波谱数据鉴定化合物的结构。结果：分离鉴定了15个化合物,分别为bannaxanthone E(1),大叶藤黄醇(xanthochymol,2),异大叶藤黄醇(isoxanthochymol,3),环大叶藤黄醇(cycloxanthochymol,4),osajaxanthone(5),gentisein(6),mangostinone(7),山柰酚(8),槲皮素(9),牡荆素(10),2″-O-acetylvitexin(11),3-乙酰齐墩果酸(12),(-)-表儿茶素［(-)-epicatechin,13］,β-谷甾醇(14),胡萝卜苷(15)。结论：化合物4～9,11～13为首次从该种植物分离得到,化合物11～13为首次从该属植物分离得到。     

版纳藤黄化学成分的研究

目的:研究版纳藤黄Garcinia xipshuanbannaensis枝叶的化学成分.方法:利用正相硅胶、反相RP-18柱色谱及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等手段进行分离纯化,根据波谱数据鉴定化合物的结构.结果:分离鉴定了15个化合物,分别为bannaxanthone E(1),大叶藤黄醇(xanthochymol,2),异大叶藤黄醇(isoxanthochymol,3),环大叶藤黄醇(cycloxanthochymol,4),osajaxanthone(5),gentisein(6),mangostinone(7),山柰酚(8),槲皮素(9),牡荆素(10),2"-O-acetylvitexin(11),3-乙酰齐墩果酸(12),(-)-表儿茶素[(-)-epicatechin,13],β-谷甾醇(14),胡萝卜苷(15).结论:化合物4～9,11～13为首次从该种植物分离得到,化合物11～13为首次从该属植物分离得到.     

大苞藤黄中的一个新黄酮及其抗烟草花叶病毒活性

采用现代分离方法对产自西双版纳的大苞藤黄进行了化学成分研究,从中分离鉴定了1个新的黄酮类化合物(1)。通过高分辨质谱、红外、紫外、1D和2D NMR等波谱数据分析,最终将该化合物鉴定为7-methoxy-4',6-dihydroxy-8-isobutyryl-flavone。测定了该新黄酮的抗烟草花叶病毒活性,结果显示其具有显著的抑制烟草花叶病毒作用,对烟草花叶病毒的相对抑制率为28.2%。     

常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用及基于生物信息学的机制探讨

目的 研究常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用及机制。方法 通过噻唑蓝（MTT）比色法、苏木素-伊红（HE）染色、4'',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色、平板克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期等,从不同角度研究了常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用,进一步利用Pharm Mapper、UniProt、Swissdock、STRING和Metascape等在线平台,进行靶点筛选、基因注释、分子对接验证、蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络构建、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析,探讨其作用机制。结果 与空白组比较,常春藤皂苷B（15、30、60、120 μmol·L^-1）可显著降低HGC-27胃癌细胞存活率（P<0.01）,呈浓度和时间依赖性,常春藤皂苷B低于120 μmol·L^-1时对正常细胞GES-1无增殖抑制作用;与空白组比较,常春藤皂苷B（30、60、120 μmol·L^-1）可诱导HGC-27胃癌细胞胞质空泡的形成和细胞核变形固缩,抑制其迁移能力（P<0.01）,诱导HGC-27胃癌细胞凋亡和细胞周期阻滞（P<0.05,P<0.01）;当常春藤皂苷B 10、20、30 μmol·L^-1时,对HGC-27胃癌细胞独立生存能力和增殖能力有抑制作用（P<0.01）。其作用靶点可能与驱动蛋白样蛋白KIF11、3'',5''-环磷酸鸟苷特异性磷酸二酯酶、胱天蛋白酶-3、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Chk1）、原癌基因酪氨酸蛋白激酶、表皮细胞生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）8等相关,机制可能与癌症通路中的MAPK信号通路和幽门螺旋杆菌感染的上皮细胞信号通路中的黏附连接、局部连接、癌症中的蛋白聚糖通路等相关。结论 常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞具有抑制作用,可能是多靶点多通路协同作用的结果。     

大苞藤黄叶化学成分研究

目的 研究大苞藤黄Garcinia bracteata叶化学成分。方法 采用正、反相硅胶柱色谱及高效液相色谱等多种技术进行分离纯化,并通过NMR、HR-ESI-MS以及量子化学计算鉴定化合物结构。通过CCK-8方法,评价了所有化合物对人非小细胞肺癌细胞A549体外抗增殖活性。结果 从大苞藤黄叶醋酸乙酯提取物中分离得到了12个化合物,分别鉴定为1,3,5-三羟基-5,6,7,8-四氢(口山)酮（1）、1,3-二羟基-5-羰基-5,6,7,8-四氢(口山)酮（2）、1,3,5,6-四羟基-8-异戊烯基缩酚酸环醚（3）、松脂醇（4）、对羟基苯丙烯酸（5）、3-甲氧基-4,4'',5-三羟基联苯（6）、(2S)-2,9-巨豆二羟基-6-烯-1-酮（7）、(2R)-2,9-巨豆二羟基-6-烯-1-酮（8）、(5Z)-9-羟基-1,5-巨豆二烯-2-酮（9）、2-氧代-a-紫罗兰醇（10）、黑麦草内酯（11）、gardeterpenone A（12）。结论 化合物1、2为新的(口山)酮类化合物,化合物3为新的缩酚酸类化合物,分别命名为大苞藤黄甲素、大苞藤黄乙素和大苞藤黄丙素（garbractinones A−C）;化合物7～10为降倍半萜类化合物,化合物11、12为单萜类化合物,均是首次从大苞藤黄叶中分离得到。所有化合物（50 mmol/L）对A549细胞没有表现明显的抗增殖活性,其抑制率小于50%。     

对叶榕茎皮的化学成分

目的:研究桑科榕属植物对叶榕茎皮部位的化学成分。方法:采用硅胶、反相、凝胶等多种色谱手段分离纯化化合物,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:从对叶榕提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为香草酸(1),豆甾醇(2),乌苏酸(3),齐墩果酸(4),丁香酸(5),槲皮素(6),芦丁(7),豆甾-5,22-二烯-3β-羟基-7-酮(8),豆甾-5-烯-3β-羟基-7-酮(9),3β-香树素乙酸酯(10),3β-acetoxy~(-1)2-oleanen~(-1)1-one(11),oleanonic acid(12),3β-acetoxy~(-2)5-methoxylanosta-8,23-diene(13)。结论:化合物5~13均为首次从该植物中分离得到。     

多花山竹子茎叶中1个新的缩酚酸环醚化合物

目的研究多花山竹子Garcinia multiflora茎叶的化学成分。方法运用硅胶、HPLC等多种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从多花山竹子茎叶中分离鉴定了1个缩酚酸环醚类化合物,命名为多花山竹子缩酚酸环醚A(1);以及4个酮类化合物,分别鉴定为异巴西红厚壳素(2)、巴西红厚壳素(3)、异爪哇柘酮B(4)、2-二甲基烯丙基-1,3,5-三羟基酮(5)。结论化合物1为新化合物。化合物2~4为已知化合物,化合物2、5为首次从该植物中分离得到。     

大果藤黄中2个新的香豆素类化学成分

目的 研究大果藤黄Garcinia pedunculata果实的化学成分,以期发现新的活性化合物.方法 运用硅胶、Sephadex LH-20、Chromatorex C18、Diol silica gel、MCI gel CHP-20P以及反相半制备型高效液相等各种现代色谱分离技术进行系统的分离纯化,根据化合物的光谱...