血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅰ

将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫感染疾病血清无明显交叉反应。用单盲法Dot—ELISA检测3批血清,结果敏感性为86.5％～95.1％;特异性为96.9％～100.0％。检测流行区居民547份血清,Dot—ELISA阳性反应130份;粪检阳性72例。两者均为阳性者55例,相符率为76.4％。上述结果表明,Dot—ELISA检测循环抗原确实具有较好的敏感性与特异性,适于大规模应用及流行病学调查。     

单克隆抗体斑点ELISA检测血吸虫病患者循环抗原的现场应用

我们试用中国预防医科院上海寄研所提供的血吸虫单克隆抗体酶结合物试剂盒,在成都市12个区、县,25个乡、镇血吸虫病查病工作中,大面积应用7000余人,发现其重现性好,结果稳定。与粪孵阳性者符合率为64.08％(41/64),与肝吸虫感染者及其它肝病患者交叉反应为2.17％(1/46)及4％(2/50)。41例血吸虫病人正规治疗9个月后阴转率为75.6％。首次将本法用于耕牛查病,与粪孵符合率为86.6％(26/30)。本法操作简便,省工省时。经用于成都轻疫区(大部份乡已达标)血吸虫病监测取得了良好的社会效益和经济效益。     

循环抗体和循环抗原检测诊断囊虫病的价值

本文对81例囊虫病人血清同时用 ELISA 和 Dot—ELISA 检测循环抗体和单抗抑制性 ELISA检测循环抗原,并评价了三法诊断该病的价值。前两法的阳性率均为96.3%,但特异性都较差,特别是与包虫病具有明显的交叉反应。81例中血清循环抗原的阳性率为69.1%。血或脑脊液的循环抗原有一项阳性的阳性率为91.1%。此法特异性高,75例正常人、30例包虫病、79例其他寄生虫病患者、5例非寄生虫病患者血清和10例非寄生虫病患者的脑脊液中循环抗原的测定均为阴性。对19例经肠虫清治疗半年到1年的患者(均为随机到本院复诊的患者)的血清检测,前二法的阳性率仍高达84.2%,而循环抗原的值除1例为0.64μg/ml 外,其余病例均为阴性。     

抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究

为探讨抗重组血吸虫磷酸丙糖异构酶（ｒＳｊＣＴＰＩ）的单克隆抗体检测血吸虫循环酶抗原在血吸虫病免疫诊断和疗效考核中的价值。制备日本血吸虫ｒＳｊＣＴＰＩ表达蛋白,以此重组蛋白免疫小鼠,筛选出高效价的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗,建立以纯化的抗血吸虫可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的多克隆抗体（ＩｇＧ）为捕捉系统,以酶标的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗为检测系统的酶联免疫吸附试验（Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ）法检测血吸虫病人等血清。并对该法的敏感性、特异性、交叉反应以及疗效考核与常规的ＳＥＡ－ＥＬＩＳＡ比较。结果获得了一株抗ｒＳｊＣＴＰＩ的单克隆抗体,其抗体同型为ＩｇＧ１。Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ检浊急性、慢性血吸虫病人、健康人以及华枝睾吸虫病人、肺吸虫病人血清的阳性率分别为１００％、９１．７％、０、０和０。而ＳＥＡ－ＥＬＴＳＡ为１００％、９８．３％、６．     

McAb-Dot-ELISA检测牛日本血吸虫病血清循环抗原

目的 应用McAb-Dot-ELISA检测牛日本血吸虫病血清循环抗原并观察其与现场粪孵结果的符合情况。方法 用辣根过氧化物酶标记日本血吸虫单抗SSJ14；应用McAb-Dot-ELISA检测现场和实验室感染牛日本血吸虫血清循环抗原。结果 检验酶标单抗的特异性和敏感性显示该株单抗有较高的特异性和敏感性，用实验室感染血吸虫病的阳性牛血清及阴性血清检测有100％的符合率，检测现场采集血清的循环抗原的结果和粪孵结果对比，总符合率达到82．91％。结论 SSJ14单抗和由此研制的McAb-Dot-ELISA方法能应用于牛日本血吸虫病血清循环抗原的检测。     

多价单克隆抗体检测血吸虫循环抗原现场诊断血吸虫病的价值

采用多价单克隆抗体Dot-ELISA试验,检测了血吸虫病流行区居民血清219份,并以单克隆抗体Dot-ELISA、环卵沉淀试验和粪检作为对照.结果:多价单抗Dot-ELISA、单克隆Dot-ELISA、DGS-COPT和粪便孵化阳性检出率分别为20.6%、31.1%、36.1%、11.4%.多价单抗Dot-ELISA检出率明显低于DGS-COPT,两法总符合率为80.8%,25例粪阳病人3种血清学方法检出率分别为52.0%、88.0%、100.0%.提示:多价单抗Dot-ELISA阳性检出率仍处于较低水平,其敏感性并未提高.     

单克隆抗体Dot-ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

作者用活化生物素标记抗细粒棘球蚴抗原单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｄ８，以聚氯乙烯（ＰＶＣ）白色薄膜凹孔板为载体，建立了ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ检测包虫病人循环抗原的方法。测定人源包虫囊液抗原的灵敏度为６ｎｇ／３μｌ样品．９２例确诊包虫病人血清循环抗原检出率为７６．１％（７０／９２），在抗体阳性者中循环抗原检出率为８１．６％（６２／７６），抗体阴性者中检出率为５０％（８／１６）。１００份正常人和１２２份羹虫病等其它寄生虫病人血清，仅１份囊虫病人血清出现交叉反应．测定循环抗原对包虫病人，尤其是血清抗体阴性者的免疫诊断有重要价值．本法简便、快速，适于推广．     

血吸虫病患者血清中循环25kD表膜抗原的检测

采用细胞杂交瘤技术获得一株血吸虫成虫抗原的单克隆抗体SM 38-3。其靶抗原为成虫表膜,免疫球蛋白型为1gG 2a,能识别血吸虫分子量为25k D的表膜蛋白抗原表位。该单克隆抗体纯化后标记过氧化物酶,用于Dot-ELISA测定慢性血吸虫病人血清115份,阳性反应103份,阳性率为89.6％;测定急性病人血清89份,阳性反应85份,阳性率为95.5％;测定141份正常人血清,阳性反应2份,假阳性率为1.4％。与血吸虫肠相关抗原的检测比较,结果阳性率与抗原滴度均无明显差别。     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值的研究

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体ⅢＤ１０建立的Ｄｅｔ－ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原（ＣＡｇ），ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出车间差异有显著性（Ｐ＜０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别为６．８５％和１０．５１％，两者联合检测能提高检出率。     

血吸虫循环抗原检测及疗效考核价值

采用单克隆抗体(McAb)S31/32双夹心ELISA法检测感染不同寄生虫病人血清中循环抗原(CAg)427份,其中慢性血吸虫病188例,阳性检出率为95.2%,晚期血吸虫病阳性率4.5%(2/44),正常53人假阳性率5.7%.测定其他寄生虫感染患者及肝炎病人,除发现肺吸虫病、旋毛虫病和华枝睾吸虫病有交叉反应外,其它均呈阴性反应.同时,检测血吸虫病治疗前、后CAg,计495 份血清,慢性血吸虫病治疗前188例,阳性率95.2%,吡喹酮治疗后3、6、12和36个月,其阴转率分别为20.4%、31.9%、96.2%和87.7%.比较双夹心ELISA法和一步法ELISA检查CAg,无显著差异.测试结果提示,采用单抗S31/32建立的双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原有很高的敏感性和良好的特异性,病人在治疗后一年其阴转率高,有很好的疗效考核价值.     

双抗体夹心ELISA检测循环抗原在血吸虫病控制流行地区应用的研究

对血吸虫病已控制流行地区1099名10岁以上的人群,应用抗血吸虫成虫抗原多克隆抗体(PcAb)为捕捉抗体,抗血吸虫虫卵抗原单克隆抗体(McAb)MG_2-HRP为覆盖抗体的双抗体夹心ELISA,检测血吸虫循环抗原(CAg),并以ELISA检测抗体(CAb)作平行对照.结果CAg和CAb的阳性检出率分别为4.55%和4.64%,两者的差异无显著意义(P>0.05).在50例CAg阳性者中,无血吸虫病治疗史者31例,而51例CAb阳性者中,无血吸虫病治疗史者仅6例.CAg和CAb联合检测能提高检出率.     

基本消灭日本血吸虫病地区人群循环抗原的检测

探讨在基本消灭日本血吸虫病地区检测循环抗原的应用价值。用夹心ＥＬＩＳＡ和ＥＬＩＳＡ检测抗原，用ＩＨＡ检测抗体，抗原阳性者进一步测ＣＯＰＴ。结果：在１１００份样本中，夹心ＥＬＩＳＡ的阳性率为５．１％，斑点ＥＬＩＳＡ的阳性率为６．５％，两者均阳性者４６例，两者阴性者１０１９例，两者符合率为９６．８％。ＩＨＡ检测抗体的阳性率为２５．３％，有治疗史人群中抗体的阳性率明显高于无治疗史者。结论：抗体的阳性率显     

斑点-ELISA和独特型/抗独特型抑制试验检测日本血吸虫病患者循环表膜抗原

将血吸虫成虫表膜机原的单克隆抗体8SE4联接辣根过氧化物酶制成结合物,用于直接法斑点-ELISA检测循环抗原。结果48例血吸虫病患者的阳性率为81.3％(39例),24例正常人未出现假阳性反应。检测华支睾吸虫及并殖吸虫病患者各18例,均无交叉反应。本结果证实日本血吸虫病患者血清中有循环表膜抗原存在。直接法斑点-ELISA方法简便,具有较高的敏感性和特异性,可作为诊断日本血吸虫病的补充方法。本文还报告了独特型/抗独特型(8SE_4/抗8SE_4)抑制试验检测循环表膜抗原的初步结果。