炎症微环境影响牙周膜干细胞成骨分化的信号通路

牙周膜干细胞(PDLSC)应用于组织工程学是目前治疗牙周炎骨缺失最有前景的方法之一,然而目前体内应用PDLSC再生牙周组织的效果并不理想,这可能是PDLSC所处的炎症微环境影响其命运所致.因此,本文从信号通路方面,探讨炎症微环境对PDLSC成骨分化潜能的影响,为其应用于牙槽骨的再生修复提供理论依据.     

肥胖影响牙周组织再生的机制及治疗策略

肥胖是当今社会面临的重要健康问题, 可导致机体处于慢性低水平炎症状态, 是高血压、2型糖尿病、非酒精性脂肪性肝病等多种慢性疾病的诱因。牙周炎作为一种常见的口腔慢性感染性疾病, 临床上主要表现为牙龈炎症、牙周袋形成、牙槽骨吸收、牙齿松动等。牙周炎治疗的最终目的是实现缺损区域牙周组织的再生。肥胖作为牙周炎的一个重要危险因素, 可以通过多种方式影响牙周炎症微环境, 最终影响牙周组织再生的效果。因此, 本文将从肥胖与牙周组织再生的关系、肥胖影响牙周组织再生的机制、肥胖状态下牙周组织再生的治疗策略等方面进行综述, 以期为肥胖状态下牙周组织再生治疗提供新思路。     

影响牙周膜干细胞成骨分化能力的因素

牙周膜干细胞(PDLSC)是维持牙周组织动态平衡和缺损修复的关键细胞,被认为是牙周组织工程的关键种子细胞之一.近年来的研究证明其有较强的的增殖和分化能力,然而在不同因素影响下其功能差异也较大.认识并研究这些影响因素不仅有助于深入了解和发掘PDLSC的生物学功能,而且对于今后基于PDLSC的牙周修复与再生治疗具有指导意义.该文就影响PDLSC成骨分化的多种因素作一叙述,展望其在牙周缺损修复治疗中的应用前景.     

间充质干细胞在牙周组织再生中的临床转化研究及应用前景

牙周炎是发生于牙周支持组织的口腔感染性疾病, 其破坏牙齿周围软硬组织, 最终引发牙齿松动脱落。目前的临床治疗手段可有效控制牙周感染及炎症, 但对已遭到破坏的牙周组织, 由于受到牙周缺损局部状况和患者全身因素的影响, 传统牙周治疗方式尚不能达到满意且稳定的牙周组织再生。近年基于间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)的牙周组织再生治疗代表了一种很有前景的治疗策略, 在现代再生医学中发挥了不可忽略的作用。本文结合近10年MSC在牙周组织工程中的临床转化应用研究及本课题组前期研究成果, 对MSC促进牙周组织再生的机制、MSC在牙周组织再生治疗中的临床前研究、临床转化研究及MSC未来的应用前景进行总结和阐述, 以期为后续开展MSC相关研究及临床试验提供参考。     

釉基质蛋白促进牙周组织再生作用的再认识

釉基质蛋白(enamel matrix proteins, EMP)在牙骨质形成前沉积在发育中的牙根表面, 并可能在牙骨质形成中发挥作用, 釉原蛋白(amelogenins, Am)是EMP中的主要组分和活性成分。研究显示EMP在牙周组织再生治疗等领域具有重要的应用价值。EMP可通过影响生长因子和炎症因子的表达, 作用于各类牙周组织再生相关细胞, 发挥促进血管形成、抗炎抑菌和加速组织愈合等功能, 从而达到牙周组织再生的临床效果(新生牙骨质、牙槽骨并有牙周膜功能性穿通)。单独使用EMP或EMP联合植骨材料或屏障膜, 可用于骨内缺损、上颌颊侧和下颌Ⅱ度根分叉病变的再生性手术治疗;EMP还可以辅助治疗退缩类型为1或2类的牙龈退缩, 使暴露的根面重新获得真正的牙周组织再生。随着学界对EMP的牙周再生原理和当前临床应用的全面了解和认识, 可进一步展望EMP未来的发展。采用生物工程技术开发重组的人Am以替代动物来源的EMP, 研究EMP与其他胶原生物材料的联合应用, 以及探讨在重度牙周软硬组织缺损和种植体周病变中EMP的具体应用方式, 都是未来EMP相关研究的重要发展方向。     

赖氨酸乙酰基转移酶2A通过经典Wnt通路影响牙周膜干细胞成骨分化

目的 探讨赖氨酸乙酰基转移酶2A（KAT2A）调控牙周膜干细胞（PDLSCs）成骨分化的机制。方法 分离培养来自健康志愿者的PDLSCs（H-PDLSCs）和牙周炎患者的PDLSCs（P-PDLSCs）,比较传代细胞中KAT2A基因的表达水平。采用KAT2A基因干扰H-PDLSCs,检测KAT2A基因干扰对H-PDLSCs成骨分化的影响;同时检测KAT2A干扰后对经典Wnt通路及其配体的影响,确定KAT2A基因与经典Wnt通路的上下游关系。结果 与H-PDLSCs相比,P-PDLSCs中KAT2A基因的表达下降,差异有统计学意义（P<0.05）。KAT2A基因被干扰后,PDLSCs成骨能力下降（P<0.05）,同时经典Wnt通路被激活,拮抗剂Dickkopf-1（DKK-1）表达下调;加入DKK-1后,被干扰的PDLSCs成骨分化功能恢复,而KAT2A的表达不受影响,仍维持较低水平。结论 牙周炎可导致PDLSCs中KAT2A基因表达下降,激活经典Wnt通路,抑制细胞的成骨分化。     

组蛋白乙酰化在慢性牙周炎来源牙周膜干细胞成骨分化中的作用

表观遗传是指基因序列不发生改变的前提下,基因表达却发生改变,且这种改变能够遗传至后代。其中,组蛋白乙酰化属于表观遗传范畴中重要的一种类型。现有的研究表明慢性牙周炎的发生与表观遗传修饰具有一定的关系。结合已有研究,本文对组蛋白乙酰化在慢性牙周炎来源牙周膜干细胞成骨分化中的作用作一综述。     

釉基质衍生物对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

目的研究釉基质衍生物对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响并探究其可能的机制。方法原代培养人牙周膜干细胞,经过流式鉴定后选取第3代细胞进行实验。采用CCK-8试剂盒检测不同浓度(0、20、50、100 mg·L^-1)的釉基质衍生物对人牙周膜干细胞增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测不同浓度(0、20、50、100 mg·L^-1)釉基质衍生物对人牙周膜干细胞成骨分化的影响;通过Trichrome染色和Von Kosa’s染色检测不同浓度(0、20、50、100 mg·L^-1)釉基质衍生物对人牙周膜干细胞胶原合成和矿化结节形成的影响;不同浓度釉基质衍生物和DDK1作用人牙周膜干细胞之后,通过Western blot和qRT-PCR检测β-连环蛋白、RunX2、CaMKⅡ及NLK表达情况。结果釉基质衍生物对人牙周膜干细胞的增殖具有明显的促进作用,并呈现剂量和时间依赖性;釉基质衍生物处理人牙周膜干细胞之后,矿化结节形成和胶原合成显著增多,骨钙素、Ⅰ型胶原、RunX2的表达明显增多;另外,釉基质衍生物处理能显著增加β-连环蛋白、RunX2、CaMKⅡ和NLK的表达,且该作用可被DDK1抑制。结论釉基质衍生物对体外培养的人牙周膜干细胞有促进增殖和成骨分化的作用,其作用可能是通过Wnt/β-连环蛋白实现的。     

牙周微创手术治疗骨下袋的临床研究进展

微创手术近年来在牙周治疗尤其是牙周再生治疗方面的应用不断发展, 其在一定程度上弥补了传统牙周再生治疗的不足。微创手术具有促进伤口愈合、缩短治疗时间、使患者的不适感最小化等优势, 治疗效果较传统方法更加明显和肯定。目前国内有关微创拔牙、微创种植等方面的研究较多, 但牙周微创手术应用的相关报道却较少, 本文通过文献回顾, 针对微创手术在治疗牙周骨下袋中的应用、优势、适用范围、所需设备及显微器械, 微创手术的龈瓣设计类型, 微创手术联合应用生物材料的治疗效果及研究进展进行综述, 为临床医师开展牙周微创手术治疗骨下袋提供参考。     

标本兼治的牙周组织再生策略在天然牙保存中的应用

重度牙周炎患牙往往存在创伤、局部解剖异常、膜龈异常等加重菌斑滞留或牙周破坏的因素。对于这些重症患牙, 本文提出标本兼治的牙周组织再生策略, 即通过分析病因并在解除根本性致病因素的基础上对患牙实施牙周组织再生手术治疗。本文通过回顾文献, 对上述加重牙周破坏的因素进行详细阐述, 同时结合病例展示, 进一步论述了标本兼治策略对重度牙周炎患牙的治疗效果, 以期为临床工作提供参考。     

经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化

牙周炎是口腔最常见的疾病之一,累及牙周支持组织,随着疾病的进展将引起附着丧失、牙周袋形成、牙槽骨吸收,最终导致牙齿松动脱落。因被牙周炎破坏吸收的牙槽骨自愈能力十分有限,所以牙周炎的治疗目标是在彻底清除菌斑生物膜的基础上,争取获得较多的牙周组织再生。牙周膜干细胞作为最适宜进行牙周组织再生的细胞,被广泛研究。Wnt信号通路分为经典Wnt通路和非经典Wnt信号通路,为十分复杂而高度保守的通路传导途径。该通路与牙周膜干细胞成骨分化的关系十分密切,牙周膜干细胞的成骨分化又对牙周组织再生有重要意义。该文对经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化的研究概况作一综述。     

牙周组织再生——当前治疗策略和未来研究方向的思考

牙周炎所致的牙周组织慢性进行性破坏是成人牙齿缺失的主要原因。传统牙周治疗虽可控制牙周炎症、延缓或阻止疾病进程, 却不能使缺失的牙周组织获得良好的再生。以引导性牙周组织再生、牙周骨移植技术为代表的再生治疗策略, 虽可有效减小牙周骨下袋深度, 一定程度上恢复患牙牙周稳态, 却面临再生能力有限、可预见性差的困境, 特别是在恢复牙周组织的生理结构和功能上, 远未达到临床所期望的目标。利用组织工程的原理、技术和方法促进牙周组织再生的尝试, 在动物实验中已取得令人振奋的结果, 但临床转化中却面临巨大的困难和挑战。诱导机体自身干细胞归巢, 实现牙周组织内源性再生, 可避免细胞培养和移植等复杂程序, 有望加速牙周组织再生新技术、新方法临床转化的进程。由于口腔微环境和牙周局部条件的影响, 牙周组织再生的生物学基础差, 探索切实有效的再生策略, 挽救、守护天然牙, 在今后很长一段时间里, 都将是牙周病学基础和临床研究领域关注的难题, 任重而道远。     

炎症牙源性组织中的干细胞在牙周骨组织再生中的研究进展及应用前景

通过组织工程实现牙周骨组织再生是近年的研究热点。通常, 牙周组织工程的种子细胞来源于健康的牙源性组织, 但由于获得来源和拔牙适应证的限制, 健康牙源性干细胞的数量无法满足临床需求。炎症牙源性组织中的干细胞主要提取自炎症牙髓、根尖周及牙周组织, 具有较健康牙源性组织中的干细胞来源丰富、保留干细胞的部分基本特征等优点, 因而其有望应用于牙周骨组织再生领域。本文通过对炎症牙源性组织中的干细胞在牙周骨组织再生方面的应用现状及前景进行综述, 探讨该类细胞作为种子细胞的可行性, 以期为炎症牙源性组织中的干细胞研究及应用提供参考。     

姜黄素通过调控Wnt通路改善牙周膜干细胞成骨分化能力

目的:探讨姜黄素对人牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的影响。方法:取第4~6代的PDLCs进行实验,用CCK-8实验检测姜黄素对PDLCs增殖活性影响,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节染色以及ALP、OCN和Runx2等成骨相关基因的表达水平来探讨姜黄素对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响,同时检测姜黄素对经典Wnt通路及其配体的影响。结果:姜黄素对PDLSCs的增殖能力无影响。与对照组相比较,姜黄素能增加PDLSCs的ALP活性、上调ALP、OCN和Runx2等成骨相关基因的表达、增加矿化结节数量(P<0.05)。姜黄素能阻断Wnt信号通路,但加入Wnt信号通路激动剂(氯化锂)后,PDLSCs的成骨分化能力显著下降。结论:姜黄素能通过抑制Wnt信号通路,增强牙周膜干细胞成骨分化能力。     

大气压常温等离子体对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

目的:探究大气压常温等离子体(atmospheric room temperature plasma, ARTP)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)成骨分化的影响。方法:原代培养人牙周膜细胞,采用免疫磁珠法从中分选出hPDLSCs,通过成骨和成脂诱导培养检测其分化潜能;利用不同时长ARTP处理hPDLSCs,行成骨诱导培养,测定细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性,茜素红染色(alizarin red staining, ARS)及半定量分析法观察细胞矿化结节形成状况,RT-qPCR测定细胞成骨相关基因的表达状况,测定细胞内活性氧粒子(reactive oxygen species, ROS)含量变化。结果:采用免疫磁珠法分选出的hPDLSCs呈长梭形、多角形,表现出良好的成骨和成脂分化潜能;ARTP处理时长1 min可提高hPDLSCs的ALP活性,增加细胞内矿化结节形成量;能够提升hPDLSCs成骨相关基因ALP、COL-I、RUNX2的表达水平;ARTP提高了hPDL...     

ERK/MAPK信号通路在牙周膜干细胞成骨分化过程中的时空效应性变化

目的探讨牙周膜干细胞成骨分化进程中ERK/MAPK信号通路表达水平的变化,以及它对牙周膜干细胞成骨分化的调控作用。方法通过单克隆法获得人源性的牙周膜干细胞,分别用DMEM培养基、成骨诱导培养液处理牙周膜干细胞7、14、21d后收集细胞,提取总蛋白,通过Western Blot的方法检测ERK/MAPK通路的变化;分别用DMEM培养基、成骨诱导液、成骨诱导液+ERK抑制剂U0126处理牙周膜干细胞21d,通过茜素红染色的方法检测PDLSCs的成骨分化能力的改变;并通过分光光度计对茜素红染色结果进行定量分析。结果 DMEM组和成骨诱导组中,牙周膜干细胞胞内磷酸化ERK(P-ERK)的表达水平呈现先上升后下降的趋势,在诱导第14d达到峰值,在21d表达水平下降。在诱导第7d和第14d,成骨诱导组牙周膜干细胞胞内P-ERK/ERK的表达水平比值均高于DMEM组,具有显著统计学差异(P<0.05)。在第21d时,DMEM组牙周膜干细胞胞内P-ERK/ERK的表达水平比值略高于成骨诱导组,但无统计学差异(P>0.05)。ERK的抑制剂U0126的加入抑制牙周膜干细胞的成骨向分化过程中矿化结节的产生。结论 ERK/MAPK信号通路参与牙周膜干细胞的成骨向分化调控,它在牙周膜干细胞成骨分化过程中的表达随着时间的发展呈非线性变化。     

数字化骨块在骨增量中的应用

牙槽嵴骨增量是解决种植治疗骨量不足的常见手段, 但存在术中骨粉塑形困难、空间维持和稳定性差等问题。数字化骨块是指利用数字化手段制作的针对缺损区形态的个性化骨增量植入材料。随着数字化技术的进步和材料学的发展, 数字化骨块的实现手段也经历了一系列更新。本文总结以往相关研究, 系统介绍了数字化骨块的工作流程、实现手段、发展历程及未来展望, 为临床医师利用数字化手段提高骨增量效果的可预期性提供建议和参考。     

影响牙周再生手术临床效果的相关因素剖析

牙周炎可致牙周组织破坏、牙齿松动和脱落, 严重影响患者生活质量。牙周再生手术是修复牙周组织缺损的重要治疗手段, 也是目前牙周临床和基础研究的重点。全面了解影响牙周再生手术疗效的相关因素能增强临床医师的牙周治疗理念, 增加治疗效果的可预期性, 提升临床综合诊疗水平。本文阐述牙周再生的基本原则和牙周创面愈合的要点, 从患者因素、局部因素、手术因素以及再生材料选择方面全方位剖析影响牙周再生手术临床效果的各项要素, 以期对临床医师有所帮助。